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两种甲胎蛋白血清学检测方法比较
目的:对甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)与甲胎蛋白(AFP)化学发光法检测方法的敏感性和特异性进行对比,评价两种方法在甲胎蛋白检测中的应用效果.方法:用甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)与甲胎蛋白(AFP)化学发光法检测法同时对100份肝硬化患者血清标本进行AFP检测.结果:在甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)检测出37例阳性标本中,甲胎蛋白(AFP)化学发光法检测方法同样检出阳性38例,敏感性为94.29%;酶联法检出阳性20例,敏感性为57.14%.(AFP)检测试纸(胶体金法)检出的37例阳性中,有1例确证为阴性,特异性为99.9%;酶联法检出的22例阳性中,2例确证为阴性,特异性为99.32%.两种方法同为阳性的38例标本,经确证均为阳性.有1例经确证为阳性的标本为甲胎蛋白(AFP)化学发光法检出而甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)法未能检,结论:甲胎蛋白(AFP)化学发光法方法的敏感性远远大于甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)法,而特异性差别不大,甲胎蛋白(AFP)检测试纸(胶体金法)方法更适合于血液的甲胎蛋白(AFP)筛查.
关键词： 甲胎蛋白 检测试纸(胶体金法) 酶联免疫吸附试验 化学发光法 -
对国产化学发光法孕酮检测试剂的评价
目的:对国产化学发光法孕酮检测试剂进行评价.方法:选取标本40份,检测国产试剂的灵敏度、标准曲线线线性、特异性、重复性、稀释回收率及与进口化学发光孕酮检测试剂的进行比较并综合分析.结果:国产试剂检测的灵敏度0.09ng/ml,标准曲线线性0.9990,与孕酮类似物睾酮(20ng/ml)、雌二醇(1000pg/ml)无交叉反应性,3次测定标本的变异＜10%,稀释高值标本的回收率85%～110%,与进口化学发光试剂的相关性良好,相关系数r2=0.9790,P＜0.001.结论:被评价化学发光孕酮检测试剂结果准确、可靠.
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早产儿游离甲状腺素检测的临床意义
目的 探讨早产儿游离甲状腺素检测的临床意义.方法 应用化学发光法检测114例早产儿游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)及游离甲状腺素(FT4)和促甲状腺素(TSH)水平,选择60例正常足月儿作为对照.结果 早产儿组FT3低于足月儿组,两组FT4、TSH比较,差异无统计学意义.45例孕周＜34周患儿FT3明显低于69例孕周≥34周患儿.不同孕周组的早产儿FT4和TSH差异无统计学意义.两组低FT3发生比例比较,差异有统计学意义.结论 早产儿出生后易发生低T3综合征,且与胎龄密切相关.早期测定早产儿的FT3,对促进早产儿的健康成长和提高生命质量具有重要的意义.
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化学发光检测方法学在丙型肝炎病毒的临床诊断价值
目的 探讨化学发光发在丙型肝炎病毒(HCV)检测中的临床诊断应用价值.方法 采用化学发光法(HCV-CLIA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法、胶体金法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法,分别对50例疑似丙型肝炎病毒感染的血液标本进行检测,并对结果进行统计分析.结果 HCV-CLIA检测阳性为46例,阳性率为92％.ELISA法阳性37例,阳性率为74％.胶体金法阳性32例,阳性率为64％.FQ-PCR法42例,阳性率为84％.其中FQ-PCR法和ELISA法、胶体金法比较符合率分别为88.09％和76.19％,HCV-CLIA法和FQ-PCR法比较符合率为91.30％.当化学发光发的S/CO值低于2.00时,HCV-CLIA法和FQ-PCR法比较符合率为33.33％.结论 在丙型肝炎病毒(HCV)实验室的检测方法学中,CLIA法检出灵敏性和特异性显著高于ELISA法、胶体金法,有统计学意义.当CLIA法S/CO低于2.00时,假阳性率显著增高,有统计学意义.在感染早期使用CLIA法做临床筛查HCV病毒时,建议结合临床表现和作进一步FQ-PCR法确诊.
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三种方法检测丙型肝炎病毒抗体结果一致性比较
目的 探讨采用不同方法检测丙型肝炎病毒抗体结果的一致性.方法 随机留取临床患者ELISA法检测丙型肝炎病毒抗体值为1≤S/C.O.＜4和S/C.O.＞4的标本各100份.随机留取内镜患者胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体阴性、阳性标本各100份.采用胶体金法、ELISA、化学发光法三种方法对标本进行复检.结果 临床患者ELISA检测结果为1＜S/C.O.＜4时,胶体金法的阳性检出率仅为38％;当ELISA法检测结果S/C.O＞4时,三种方法检测的阳性率均为100％.对内镜检查患者胶体金法检测留取的阴、阳性标本各100份,胶体金法复检全部符合,ELISA、化学发光法检测有4～6份标本的结果不符合.结论 胶体金法作为丙型肝炎病毒抗体检测方法敏感性低,应谨慎采用此方法用于内镜检查患者的检测.
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浙江省温州地区住院患儿人巨细胞病毒感染状况分析
目的 分析温州地区住院患儿人巨细胞病毒(HCMV)感染状况及血清标志物的分布特点.方法 收集2010年3月至2011年2月期间5215例温州地区住院患儿,按年龄将患儿分为＜28 d、28～d、6～月龄、1～岁、3～岁、7～14岁6个组,采用化学发光法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)定量检测血清HCMV IgM/IgG抗体浓度,并对各年龄段HCMV IgM/IgG的阳性检出率及抗体水平进行分析.结果 5215例住院患儿HCMV IgM阳性检出率为14.38％ (750 /5215),HCMV IgG阳性检出率为82.45％(4300/5215),HCMV IgM和HCMV IgG同时为阳性12.98％ (677/5215); HCMV IgM阳性检出率以＜28 d组低(1.06％,P＜ 0.01),28～d组高(21.48％,P＜ 0.01)；HCMV IgG阳性检出率以＜28 d和7～14岁两组高(分别为98.77％和86.54％,P均＜0.01)；HCMV IgM阳性浓度在6个组间分布差异无统计学意义(P=0.52),但随着年龄的增长有降低趋势(P=0.02); HCMV IgG阳性浓度以28～d组低(P＜0.05),且随着年龄的增长有升高趋势(P＜0.01).750例HCMV IgM阳性的患儿中,以呼吸道感染多占34.80％ (261/750),其中肺炎占16.93％ (127/750).结论 温州地区住院患儿HCMV感染率高,以呼吸道感染为主,不同年龄组间患儿HCMV感染率及抗体浓度不同.
关键词： 人巨细胞病毒(HCMV) 化学发光法 温州地区 儿童 -
雅培Architect i2000化学发光分析仪检测乙型肝炎病毒标志物的应用
目的:研究探讨雅培Architect i2000化学发光分析仪检测乙肝病毒标志物,并且与传统ELISA法检测效果进步对比分析.方法:对2587例患者的血样血清分别采用ELISA法和化学发光法检测五种乙肝病毒标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAg)水平.结果:化学发光分析法检测五种乙肝病毒标志物符合率分别为:92.2％、95.0％、91.1％、96.1％、94.4％,其中乙肝病毒阳性检出率为6.92％;而ELISA法检测五种乙肝病毒标志物符合率分别为:81.0％、84.9％、83.2％、86.6％、83.8％,阳性检出率则为:5.72％.结论:相比于传统的ELISA法,化学发光法具有更高的精确性、稳定性、重复性以及较低的环境因素影响等,是临床上检测乙肝病毒的重要方法之一,其中使用雅培Architect i2000化学发光分析仪使得检测数据更准确、可靠.
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化学发光法测定葡多酚对羟和超氧阴离子自由基的清除
葡多酚,国外多称原花青素(grape procyanidins,GPC),据国外研究报道GPC具有抗氧化、抗自由基损伤等多种生物学功效.我们采用化学发光技术,检测了GPC对羟自由基(*OH)和超氧阴离子自由基(O@2)的直接消除作用.一、材料与方法1.葡多酚:取新鲜葡萄籽晾干粉碎,经石油醚脱脂后,用乙醇浸提并纯化干燥所得,纯度>99.9%.标准品由日本岛田株式会社提供.2.GPC对羟自由基(*OH)的清除试验: 采用Fenton羟自由基产生体系和依赖鲁米诺的化学发光技术进行.在反应体系中加入0.1 mmol/L鲁米诺0.8 ml、GPC样品0.02 ml、3%H2O2溶液和0.2 mmol/L FeSO4溶液各0.02 ml立即混匀测定发光强度值.共设7个剂量组,每个剂量做5个平行管,各管自由基含量以其化学发光强度值表示,计算GPC对*OH的清除率和50%清除浓度.
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免疫亲和-液相色谱法测定功能性饮料中VB12
VB12,别名氰钴胺素、抗恶性贫血维生素等,摄取不足可能引起恶性贫血、精神不振等后遗症[1].目前VB12的测定方法主要有微生物法、化学发光法[2]、间接测定法[3]、高效液相色谱法(HPLC)[4-5].
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地黄提取工艺的优化
目的:研究地黄中有效成分梓醇以及地黄抗氧化能力的佳提取条件.方法:以HPLC为含量测定方法,采用重复-正交实验法,以乙醇浓度(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)4个因素,每个因素选取3个水平进行实验,同时利用化学发光法进行体外抗氧化能力研究,后确定提取工艺.结果:因素A、B、C、D对梓醇的含量均有显著影响.其抗氧化能力以醇提2次为佳.结论:60%乙醇8倍量,回流提取2次,每次1.5h为梓醇及地黄抗氧化能力的较佳提取条件.
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壹期煤工尘肺患者血清KL-6水平测定及意义
目的 探讨壹期煤工尘肺(CWP)患者血清涎液化糖链抗原(KL-6)水平变化及其意义.方法 采用化学发光法检测72例壹期CWP患者(CWP组),37例与CWP组相同接尘条件的井下接尘矿工(接尘组)及43例非接尘井上健康查体人员(正常组)血清KL-6水平.结果 血清KL-6水平在正常组、接尘组及CWP组3组间依次呈升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);在不同接尘年限、不同接尘性质、不同肺功能及是否并发症等临床相关指标间比较,差异也均无统计学意义(P>0.05);KL-6与1 s用力呼气量(FEV1％)、用力肺活量(FVC％)、用力呼气1 s率(FEV1/FVC％)均无相关关系(r=0.119、0.107、-0.006,P>0.05).结论 血清KL-6水平检测可能不适于壹期CWP肺纤维化早期诊断和预测.
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血清胃蛋白酶原检测对健康体检的价值
目的 检测健康体检人群中的血清胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)含量,以明确其人群分布特征,同时观察分析PG在胃癌低发区表观健康人群中的分布特征.方法 利用化学发光法对苏州地区2993名健康体检人群进行血清PGⅠ、PGⅡ含量测定,并计算PG Ⅰ/PGⅡ比值(PGR).采用乳胶法检测血清幽门螺旋杆菌(HP)抗体的阳性率.结果 该人群血清PGⅠ和PGR水平男性显著高于女性,而PG阳性率男女之间无差别;随着年龄的增长,PGⅠ、Ⅱ水平逐渐上升,而PGR在60岁之前随年龄的增长呈下降趋势,60岁以后进入平台期;HP阳性组的PGⅠ、PGⅡ水平显著高于HP阴性组,但PGR显著低于HP阴性组.另,随着年龄的增长,PG阳性率逐渐增高,而HP阳性率变化不明显.结论 苏州地区体检人群的血清PG水平呈明显偏态分布,受性别、年龄、HP感染等因素的影响,且PG阳性率随年龄的增长而增长.
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压力型抑郁症的患者血清rT3和Cortisol的变化研究
目的 研究探讨反-三碘甲状腺原氨酸(rT3)和皮质醇(Cortisol)在由于压力引发抑郁症患者中的临床应用.方法 本研究纳入39例由于压力引发的抑郁症患者(研究组),以及40例正常体检者(对照组),使用化学发光免疫分析法检测甲状腺功能以及肾上腺功能激素,包括促甲状腺素(TSH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、反-三碘甲状腺原氨酸(rT3)以及皮质醇(Cortisol)含量,并进行比较分析;同时根据病程对研究组进行分组比较.结果 研究组血清rT3以及Cortisol水平显著高于正常对照组(P＜0.01),而根据病程的不同,其T3、rT3水平也存在显著差异(P＜0.05).结论 压力型抑郁症会导致患者甲状腺以及肾上腺功能异常.
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血清同型半胱氨酸及叶酸、维生素B12与脑血管病的关系
为了探讨血清同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、叶酸、维生素B12水平与脑血管疾病发病及其并发症之间的关系,采用荧光偏振免疫分析法和化学发光法分析比较了148例脑血管病患者和32名对照组血清Hcy、叶酸、维生素B12水平.结果显示:血清Hcy含量在脑梗死组、脑出血组及椎-基底动脉供血不足组中均明显高于对照组(P＜0.001,P＜0.001,P＜0.01);叶酸和维生素B12的浓度明显低于对照组(P＜0.05);存在高血压、糖尿病、冠心病等并发症患者血清Hcy、叶酸、维生素B12水平与无并发症患者间无显著差异(P＞0.05);脑血管病患者中血清Hcy水平升高与否在不同并发症及无并发症患者间无显著性差异(P＞0.05).表明高Hcy血症是脑血管病发病的独立危险因素之一,与叶酸和维生素B12水平下降有关,与高血压、糖尿病和冠心病等并发症无明显关联.
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AFP、uE3、freeβ-HCG联检对孕中期妇女胎儿缺陷筛查有效性及影响因素分析
目的 探讨孕中期妇女检查AFP、uE3、freeβ-HCG三项对筛查胎儿缺陷的意义,并探讨影响风险值的相关因素.方法 用化学发光法,采用美国Beckman Coulter Access2全自动化学发光仪测定1633例在我院建卡产检的35周岁以下孕中期(16 ～20周+5天)孕妇血清中AFP、uE3、freeβ-HCG的浓度,并使用厂家提供的风险计算软件评估风险.结果 唐氏综合症、18-三体综合症和神经管缺陷高风险发生率分别为:1.7％、0.5％、3.5％；重度溶血标本与孕周差异对高风险筛查有一定影响.结论 产前筛查应该作为孕妇产科常规检查之一[1],重度溶血,有可能对风险预测值有影响,建议工作中采用新鲜无溶血标本及时检测.
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BNP、MYO、cTnI三项联合测定对AMI早期诊断的临床意义
通过采用化学免疫发光法定量检测47例急性心肌梗死(AMI)患者的BNP、MYO、cTnI并进行对照分析,探讨AMI患者的血浆脑钠肽(BNP)、肌红蛋白(MYO)、肌钙蛋白cTnI的浓度变化和三者间的相关性,进一步揭示三者联合检测对AMI诊断的临床意义.结果表明,AMI组血浆BNP、MYO、cTnl的检测结果与健康对照组相比较均有明显差异(P＜0.05),AMI两组中KI组与KⅡ-Ⅳ组比较均有明显差异(P ＜0.05)；AMI患者的血浆BNP与MYO及cTnl之间具有较好的正相关；AMI组BNP、MYO、cTnI单项及三项联合测定的敏感性分别为93.6％、80.8％、91.5％、97.8％；特异性分别为95.2％、64.3％、95.2％、71.4％.因此,血浆BNP可作为临床预测冠心病患者发生AMI危险性的指标；BNP、MYO及cTnI联合检测可提高AMI早期诊断的敏感性.
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老年患者梅毒螺旋体特异性抗体生物学假阳性结果分析
目的 分析我院老年患者梅毒螺旋体特异性抗体筛查情况,同时探讨其生物学假阳性的原因及临床意义.方法选取2016年1月至2016年12月我院8741例60岁以上老年患者,利用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)检测梅毒螺旋体特异性抗体,梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测梅毒螺旋体非特异性抗体,同时采用免疫印迹法(Western Blot)进行梅毒确证.根据老年患者年龄将其分为60～69岁、70～79岁和80岁以上三个年龄组进行统计学分析.结果8741例60岁以上老年患者中有354例患者梅毒螺旋体特异性抗体阳性,60～69岁、70～79岁和80岁以上三个年龄组的梅毒螺旋体特异性抗体阳性率分别为3.42%、6.30%和6.02%,差异具有统计学意义(x2=31.236,P<0.001);同时,60~69岁与70~79岁年龄组比较,差异具有统计学意义(x2=28.932,P<0.001).240例老年患者CMIA筛查梅毒抗体阳性标本经TRUST和Western Blot检测都为阴性,且无临床症状和体征、无相关病史,结果判为假阳性.老年患者梅毒抗体假阳性人群主要分布在60~69岁.但随着老年患者年龄的增加,梅毒螺旋体抗体假阳性率也呈上升趋势,60~69岁、70~79岁和80岁以上三个年龄组的梅毒抗体假阳性率分别64.81%、71.43%和87.50%.老年患者梅毒螺旋体抗体生物学假阳性伴有的其他临床症状及指标异常主要包括癌症(55.36%)、溶栓剂或抗凝剂治疗(35.71%)、糖尿病(28.57%)、肝硬化(25.00%)、严重感染(25.00%)、肾病(17.86%)、自身抗体阳性(16.07%)、手术(14.29%)、肝炎(12.50%)和代谢紊乱(8.93%),各类原因相互影响,梅毒抗体检测假阳性S/CO值高可达10.29.而梅毒螺旋体特异性抗体真阳性老年患者伴有的其他临床症状及指标异常百分比情况明显低于生物学假阳性患者.结论 对于CMIA梅毒筛查阳性而TRUST检测阴性的老年患者,需进行Western Blot检测并结合临床症状、体征和病史,作出后诊断.老年患者随着年龄的增高,梅毒抗体的假阳性率也呈上升趋势,需注意癌症、自身免疫病、严重感染、代谢紊乱等可能会导致老年患者梅毒抗体检测生物学假阳性的因素,有助于临床医生分析检测结果并向患者作出合理解释.
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CMIA法在输血前感染性指标检测中的应用研究
目的 对化学发光微粒子免疫测定(CMIA)技术定量检测输血前感染性指标的临床应用进行评价.方法 用CMIA技术对22235例患者进行输血前乙肝表面抗原(HBsAg)、抗丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)、抗梅毒螺旋体特异性抗体(Anti-TP)及抗人类免疫缺陷病毒抗体(Anti-HIV)定量检测,所有阳性标本用相应的酶联免疫吸附法(ELISA)进行定性检测,Anti-TP阳性标本用梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验(TPPA)进行确诊,Anti-HIV阳性标本送市疾控中心进行抗体确认,并对几种方法的检测结果进行分析.结果 HBsAg、Anti-HCV、Anti-TP、Anti-HIV定量检测阳性例数分别为3028、336、684、63；定量阳性标本经ELISA检测,定性阳性例数分别为2472,269,668,58；684例Anti-TP定量阳性样本中,用TPPA确认,阳性603例；63例Anti-HIV定量阳性样本送南充市疾控中心进行确认,48例确定为阳性,5例不确定,10例为阴性.结论 CMIA法定量检测输血前感染性指标可及早发现感染“窗口期”患者,降低漏检率,有利于患者的早期诊断和治疗,有利于医护人员自我防护及减少医疗纠纷.
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甘胆酸化学发光定量免疫分析方法的建立
目的 建立甘胆酸(CG)化学发光免疫检测方法.方法 采用竞争法,固相微孔L板包被技术,通过与参比试剂盒临床结果相关性的比较,保证其具有同等的临床诊断价值.结果 本试剂盒的线性范围为0.25～ 40 μg/mL,灵敏度为0.05μg/mL,批内精密度分别为7.1％和7.4％;批间精密度为11.3％和15.74％;样品的回收率在85％～115％之间.与透明质酸、Ⅳ型胶原、Ⅲ型前胶原氨端肽、层粘连蛋白、胆酸以及鹅脱氧胆酸的交叉反应率在0.010％～1.480％之间,均不会对CG的正常测定构成干扰.通过临床样品正常值的测定确定了正常值范围,与有关文献报道基本一致.同时,与北京北方生物技术研究所的放免药盒临床结果进行科学比较,两组结果的相关系数r为0.947.结论 该试剂盒与参比试剂盒的测定结果具有较高的符合率,应用于临床,可为慢性肝炎复发、轻度肝硬变、肝癌、肝胆胃肠消化系统疾病的研究诊断提供可靠的指标.同时,肝胆酸与血清Ⅳ型胶原、透明质酸和前白蛋白(PA)动态联检对于肝硬化的诊断、疗效及预后判断具有重要的临床意义.
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糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫分析方法的建立
目的 建立糖类抗原CA72-4化学发光定量免疫测定方法.方法 一株抗CA72-4单克隆抗体经微孔板固相包被与另一株酶标单克隆抗体建立双夹心反应体系,检测样品中CA72-4抗原的含量.通过与国外权威试剂盒血样测值的对比,分析该方法临床应用的可行性.结果 该分析方法线性范围为0～ 160 U/mL,灵敏度为0.55U/mL.批内CV值为:5.49％,4.53％;批间CV值为:8.12％,7.81％;回收率为:99.74％ ～ 104.11％;与CEA,CA125,CA19-9无交叉反应;与法国Cisbio analysis公司所生产的CA72-4免放药盒血清测值对比分析后,发现两者相关性较高,并确定了本分析方法的正常范围.结论 该分析方法的测定结果与参比试剂盒结果有较高符合率,可用于临床血清中CA72-4的检测.
