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双抗体夹心法检测血吸虫病患者血清中循环抗原
为探讨检测急性和慢性血吸虫病患者体内成虫的存活率的方法.采用双抗体夹心法检测血吸虫病患者血清中循环抗原,并与乳胶凝集试验(LAT)及间接血球凝集试验(IHA)进行比较,结果急性期和慢性期血吸虫病患者循环抗原阳性率分别为88.23%及27.39%.明显高于同期LAT及IHA法的检出率.结论,循环抗原具有较强的特异性和敏感性,双抗体夹心法弥补了LAT及IHA法不能区别血吸虫病患者体内是否存在活的成虫缺陷.
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日本血吸虫循环抗体及循环抗原研究概况
血吸虫病免疫学诊断技术经过不断改进和发展,具有较高的敏感性、特异性及可行性而成为当今研究和应用的热点.检测循环抗体成本低、操作简单、受宿主免疫状态影响小、可行性强,但治疗后抗体可多年维持较高水平,疗效考核价值不高.目前的研究方向是寻找治疗后消失较快的抗体,即短程抗体,以提高检测循环抗体的疗效考核价值.检测循环抗原可评估虫负荷数和活动性感染,具有较好的病原检测意义和疗效考核价值.但检测循环抗原敏感性低、特异性不理想,且受到诸多因素的影响,使用不同方法对同一样本检测的结果可能出现某些差异,因此抗原抗体联合检测有可能提高免疫检测的特异性和敏感性.
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自拟弓形虫汤抗急性弓形虫感染小鼠的实验研究
目的 探讨自拟弓形虫汤对弓形虫RH株急性感染小鼠的作用机理及疗效.方法 将KM小鼠分成自拟弓形虫汤组、复方新诺明(SMZ)组、模型(感染不治疗)组、正常组.用RH株弓形虫建立小鼠急性感染模型,感染2 h后,给中药(0.5 ml、1:4),复方SMZ(300 mg/kg.d)灌胃治疗,连续14 d,观察小鼠发病情况,存活时间.第3,6,30天,分别检测小鼠血浆、心、肺、肝中SOD活性,第6,30天检测小鼠血浆内循环抗原(Cag).结果 中药组小鼠平均存活时间19.5 d,与模型组7.9 d相比有显著差异性(P＜0.05),中药组与复方SMZ组22.6 d相比也有显著差异性(P＜0.05).各组小鼠血浆、心脏、肺脏、肝脏组织中SOD活性值比较:中药组与模型组有显著差异性(P＜0.05).循环抗原:第6天时,中药组、复方SMZ组、模型组阳性率100%.第30天时,中药组阴性率50%,复方SMZ组阴性率85.7%.结论 自拟弓形虫汤有明显抗弓形虫疗效,在机体抗氧化损伤方面起到重要作用.
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脑囊虫病患者血清循环抗原、IgG4与神经影像学关系研究
目的 探讨脑囊虫病血清循环抗原(CAg)、特异性IgG4与神经影像学(CT、MRI)的关系.方法 对根据Del Brutto等于2001年提出的诊断脑囊虫病的四个标准确诊的36例脑囊虫病患者分别行CAg定量测定、IgG4定性测定及神经影像学检查.结果 按照神经影像学变化,脑囊虫可分为活虫期、变性死亡早期、变性死亡后期及钙化期,其各期之间的患者血清CAg水平有显著差异(P<0.05).血清中CAg的含量及血清特异性IgG4阳性强度与脑囊虫病的神经影像学分期呈显著正相关(r=0.871,0.602,P<0.01).结论 ①脑囊虫病人血清CAg、IgG4水平与神经影像学(CT、MRI)表现具有相关性;②血清CAg和特异性IgG4的检查可用于脑囊虫病的早期诊断和指导其临床治疗.
关键词： 脑囊虫 循环抗原 IgG4 神经影像学(CT、MRI) -
大连市心血管疾病患者弓形虫抗体IgG、IgM和循环抗原的检测
目的探讨心血管疾病与弓形虫感染的关系,为临床提供一定的参考价值.方法采用3种ELSIA法检测弓形虫抗体IgG、IgM和循环抗原(CAg).结果共检测心血管疾病患者血清93份,健康人血清87份.结果表明心血管疾病患者弓形虫抗体IgG和循环抗原的阳性率分别为21.51%和11.93%;健康人弓形虫抗体IgG和循环抗原阳性率分别为10.34%和3.48%.结论心血管疾病患者弓形虫感染与健康人群有显著差异.建议心血管疾病患者应作弓形虫血清学检测.
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血吸虫尿循环抗原免疫诊断研究进展
血吸虫病的免疫诊断研究,多年来国内外学者主要致力于血清循环抗原(CAg)、循环抗体(CAb)及循环免疫复合物(CIC)的水平检测.对尿液中CAg水平检测的研究报道甚少.尿液检测标本易得,且对人体无损伤性,因此,近年来,不少学者把目标转向研究检测血吸虫病人尿CAg,试图建立新的免疫诊断方法.现就检测尿CAg的研究进展综述如下.
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具有保护性及诊断价值的弓形虫单克隆抗体的研制
目的:寻找具有保护性的弓形虫功能性表位,为疫苗制备和免疫诊断提供科学依据.方法:通过杂交瘤技术建立了抗弓形虫单克隆抗体的细胞株,观察了体内、外单克隆抗体的保护性效果;用夹心ELISA法检测了感染兔血清中的CAg,并观察了其与日本血吸虫抗原和弓形虫ME49株抗原的交叉反应.结果:建立了7个分泌弓形虫McAb的细胞株,Western-blot显示7个McAb可识别4种不同分子量的抗原,体外保护性实验证明这些单抗均可明显抑制弓形虫对细胞的侵袭及在细胞内的繁殖.在感染后第3 d即可检测到CAg,未发现其与日本血吸虫抗原间的交叉反应,但是与弓形虫ME49株出现了交叉反应带.结论:7个McAb对弓形虫感染具有一定的保护力,有潜在的诊断价值.
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应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原
目的评价单克隆抗体检测循环抗原 (Cag)诊断脑囊虫病的价值.方法用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体 4B6,以 ELISA方法检测患者和对照者血清和 /或脑脊液中的猪囊虫抗原. 结果 82例脑囊虫病患者血清 Cag阳性率为 79.2% (65/82),脑脊液 Cag阳性率为 100%( 26/26),治疗一个疗程后血清 Cag转阴率为 85%( 17/20).从对照者标本中未检出猪囊虫 Cag. 4B6和包虫抗原有轻微交叉反应.结论 Cag检测,尤其是脑脊液 Cag检测有助于脑囊虫病的诊断,而血清 Cag检测则有助于疗效考核.
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日本血吸虫患者尿液中32kD循环抗原的免疫生物学特征
目的研究日本血吸虫感染者尿液中特异性的诊断抗原,以尿液为样本诊断日本血吸虫病. 方法用IgG的亲和层析柱分离和纯化抗日本血吸虫循环抗原抗体并用生物素标记分离纯化的IgG抗体;Western blot检测日本血吸虫虫卵可溶性抗原和日本血吸虫感染者尿液中存在的日本血吸虫主要的循环抗原分子. 结果日本血吸虫患者尿液中存在日本血吸虫的特异性循环抗原,Westernblot显示其尿液中主要循环抗原分子与虫卵可溶性32kD抗原分子相同. 结论日本血吸虫感染者尿液中的32kD循环抗原分子可能来自日本血吸虫虫卵可溶性抗原,可作为血吸虫感染的诊断.
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小儿脑瘫与弓形虫感染关系的研究
目的探讨海南小儿不明原因脑瘫与弓形虫感染的关系,为诊治小儿脑瘫提供依据.方法以住院确诊不明原因脑瘫患儿为研究组,体检正常的小儿为对照组,比较两组弓形虫抗体IgG和IgM、循环抗原(CAg)、DNA的四项检测,分析弓形虫感染与脑瘫的关系.结果研究组检测79例脑瘫患儿中,弓形虫阳性33例,感染率为41.8%,对照组检测269例中,弓形虫阳性23例,感染率为8.6%,两组对比差别非常显著(P<0.001).结论弓形虫感染是海南不明原因脑瘫患儿的主要原因之一,对于孕妇、新生儿和婴幼儿的弓形虫感染检测,是防治脑瘫发生的手段之一.
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胶体金免疫层析法在脑囊虫病诊断中的应用
目的探讨胶体金免疫层析法在脑囊虫病诊断中的价值.方法应用胶体金免疫层析法检测脑囊虫病患者脑脊液(CSF)及血清中的循环抗原(CA),并与 ELISA比较.结果检测脑囊虫病人CSF和血清各48份,阳性检出率分别为81.25%和70.83%.检测健康人CSF和血清各26份,阴性符合率分别为92.31%和90.00%.检测23份非囊虫病(脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤)患者CSF和血清的交叉率分别为8.70%和11.32%.检测包虫病患者、血吸虫病患者和华支睾吸虫患者的血清各10份,交叉率分别为20.00%、10.00%和0.敏感性和特异性与ELISA相近.结论胶体金免疫层析法用于脑囊虫病诊断具有较高的敏感性和特异性,操作简便、快速,无需特殊仪器设备,有较好的应用价值.
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1213名献血员弓形虫循环抗原(CAg)的血清学调查分析
弓形虫病是全球分布的人兽共患病之一,为了解目前我国献血员队伍中弓形虫感染的情况, 提高血源质量,对1213名献血员进行了弓形虫循环抗原(CAg)的血清学调查,现将检测结果报告如下:
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血吸虫病控制后检测循环抗原和抗体比较研究
目的 在已达到国家血吸虫病传播控制标准后,选择一种更有效的、准确的诊断方法用于血吸虫病传染源的监测,巩固已取得的防治成果.方法 用检测血吸虫循环抗原(ScAg)和检测血吸虫抗体(ScAb)的几种常用方法,对历史疫情较重,现已达到传播控制的流行村作平行检测,与历史检测结果作比较研究,并以病原学检查的毛蚴孵化法和Kato-Katz法检查对照.结果 应用皮内反应试验(SK)检测皮肤型IgE抗体阳性率为22.6%和20年前(1985)检测阳性率23.5%比较,差异无统计学意义(P＞0.05),用间接血凝法(IHA)检测SK试验阳性者为25.5%与过去(1985)检出阳性率29.1%相比,降低较少,酶免疫试验(ELISA)检测抗体仍有28.6%的阳性;采用一步酶免疫法(EIA)检测血吸虫循环抗原(ScAg),对粪检阳性的血吸虫病患者和正常健康人血清的有效诊断率达96.0%,平行检测上述血清阳性率为6.5%,与控制前(1998)的22.2%相比下降15.7%(P＜0.01),而经粪检查出阳性的3例均在ScAg检出阳性者之内.结论 检测血吸虫皮肤型IgE的SK只能反映历史的流行状况,检测血吸虫ScAb的IHA、ELISA,在反复化疗取得防治成效的流行区只能反映既往感染情况,特异性低,粪便检查受排卵因素影响漏检率高,检测血吸虫ScAg准确性高又能反映治疗后的效果,适合血吸虫病传播控制后用于疫情监测及传染源控制的有效查病方法.
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检测ScAg在血吸虫病传播控制中的应用
目的总结血吸虫循环抗原(ScAg)检测在血吸虫病传播控制中的应用价值.方法比较几种免疫学方法用于化疗后的诊断效果,应用ScAg检测作为选择性化疗普查血吸虫病,提高化疗依从性的手段;用于儿童感染血吸虫疫情监测并统计分析历年来人群感染率与感染度变化.结果检测ScAg和ScAb对粪检血吸虫阳性的敏感性比较差异无统计学意义(P＞0.05),对健康人的特异性检测ScAg优于ScAb,ScAg对治后半年的阴转率为76.92%(120/156),ScAb的转阴率仅为7.05%(11/156).通过现场ScAg和粪便平行检查应用显示,粪检与ScAg的阳性符合率为92.23%(522/566);经多年用ScAg作选择性化疗的综合防治结果显示,人群感染率由32.73%降至粪检无阳性,经抽样考核检测ScAg阳性率降至0.88%(11/1243).结论检测ScAg用于全民化疗后选择性化疗的筛查方法优于ScAb及粪便检查,适用于防治效果考核,儿童感染的监测及确定重复治疗对象,经多年应用ScAg筛查血吸虫病对达到传播控制起到重要作用.
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血吸虫循环抗原检测与病原学诊断方法的比较研究
目的观察比较血吸虫循环抗原与病原学诊断方法的应用效果,为经过周期性群体化疗后的血防工作提供有价值的诊断方法.方法用检测血吸虫循环抗原(ScAg)标准化试剂、尼龙绢集卵孵化法、Kato-Katz法平行检测血吸虫病流行区居民感染情况.结果以粪便检查阳性的血吸虫病患者例数为金标准,ScAg的阳性检出率为95.2%(119/125),集卵孵化法阳性率为81.6%(102/125),Kato-Katz法阳性率为65.6%,(82/125).粪检总阳性中集卵孵化法漏检率为18.4%(23/125),Kato-Katz法漏检率为34.4%(43/125).ScAg检测与Kato-Katz法检测结果比较差异有统计学意义(χ2=34.750,P＜0.01),与集卵孵化法检测结果比较差异有统计学意义(χ2=11.273,P＜0.01).Kato-Katz法中单片阳性占41.5%,二片以上为阳性者占58.5%.ScAg检测分别采用20μl,50μl,100μl三种不同血清样本量进行比较,检出率分别为84.8%(106/125),95.2%(119/125),96.0%(120/125).结论三种方法中Kato-Katz法检出率低,虫卵片数分布有很大的机缘性,只适宜研究时作定量用.集卵孵化法中有较多的未成熟虫卵不能孵化,但适宜与镜检虫卵配合应用.ScAg检测符合率高,简便快速,可将46.6%(109/234)粪检漏检者查出,有利于及时治疗,并切断传染源.
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双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核
目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原(CAg)以诊断本病和考核药物疗效.方法双抗体夹心-ELISA法.结果 94只实验感染旋毛虫小鼠,受染3d后,即有7%的小鼠显示阳性反应,受染30d,无论受染幼虫数目多寡(50、150及300条幼虫/只),全部受染鼠(100%)均显示阳性反应.给予丙硫咪唑治疗后的第1周,CAg的阳性率仍为100%,但在治疗后第2、3及4周,则分别降为60%、20%及10%.检测61头感染旋毛虫猪血清中CAg,40头(65.6%±6.1%)呈阳性反应.100头正常猪均为阴性,30头感染囊尾蚴和30头感染弓形虫的猪,仅1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应.检测36例旋毛虫病人血清中CAg,26例(72.2%)呈阳性反应.50例正常人皆为阴性.142例其他9种寄生虫病人,仅1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应.结论旋毛虫CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值.
关键词： 旋毛虫 循环抗原 双抗体夹心-ELISA法 诊断 疗效考核 -
四川省丹棱县飞龙、严沟村血吸虫病流行现状调查
目的了解飞龙、严沟两个村血吸虫病的流行现状.方法 4～65 岁村民均采用粪孵法和EIA检测血吸虫循环抗原及ELISA检测血吸虫抗体三种方法检查,在两个村的钉螺易孳生场所进行了钉螺调查.结果粪孵共计1 312人,阳性率8.92%,飞龙感染率15.45%明显高于严沟.EIA检测血吸虫循环抗原,共计1 526人,阳性率37.09%,ELI SA检测共计1 523人,阳性率39.66%.压检17 416只钉螺,未查到阳性钉螺.结论该地区血吸虫人群感染率仍然较高.
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黄石地区2 845例孕妇弓形虫感染的血清学检测
弓形虫病是一种全球性人畜共患的寄生虫病,分为先天性和获得性两种.前者在母体内感染,发病者死亡率较高,存活者常见先天性畸形与智力不全等;后者是受弓形虫感染而引起,临床表现复杂,可造成全身多脏器损害,甚至坏死;此病还可引起孕妇流产、早产或死胎[1].为了解本地区弓形虫在孕妇中的感染情况,我们对2 845例孕妇进行了弓形虫循环抗原(Toxo-CAg)和特异性抗体(Toxo-IgM、Toxo-IgG)的检测,现将结果报告如下.
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一种新的血吸虫卵定量检查方法与KatoKa tz法的比较
近年来血吸虫病的诊断技术取得了很大的进展 ,推广应用了一些新技术如循环抗原、短程抗体检测;同时也统一了超声诊断的标准,规范了 B超诊断血吸虫病的方法[1].然而病原学检查在血吸虫病诊断和流行病学调查中的重要作用和意义,是其它方法不可替代的.因此,国内外一些学者改进和发明了新的血吸虫病粪便检查方法[2,3].我们和日本学者在国际合作项目中,使用一种新的血吸虫卵定量检查方法进行现场实验,并和Kato-Katz法进行了比较.该新方法由日本产业和环境卫生大学的真喜屋清和仲本增久教授创立,本文暂称新法,现将实验报道如下:
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血吸虫病肝纤维化与感染度关系分析
感染度是反映人体虫负荷数量的指标,它和血吸虫病肝纤维化的关系,近年来的报告不太一致[1,2].我们以克粪虫卵数(EPG)和循环抗原(CAg)反应强度表示感染度,分析其与血吸虫病肝纤维化的关系,结果如下.
