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平行检测血清和尿液中循环抗原诊断日本血吸虫病的研究
应用McAb-Dot-ELISA平行检测血吸虫病人的血清和尿样(浓缩20倍)中日本血吸虫肠相关趋阴极循环抗原(CCA).81例急性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性率分别为96.30%和66.67%,而血清和尿样组合检测的阳性检出率提高至100%.109例慢性血吸虫病患者的血清和尿样的阳性检出率分别为77.06%和10.09%,组合检测的阳性检出率没有提高.100份健康人的血清和尿样的假阳性率均为0%.54例华支睾吸虫病患者的血清和尿样的交叉反应率分别为9.43%和0%.48例钩虫病患者的血清和尿样的交叉反应率均为0%.
关键词： 平行检测 循环抗原 日本血吸虫病 McAb-Dot-ELISA -
血清、尿中日本血吸虫循环抗原水平动态的实验研究
本研究采用McAb-Dot-ELISA的方法,平行地对日本血吸虫病家兔血清和尿液中的日本血吸虫肠相关趋阴极抗原的水平动态进行检测.结果显示,家兔在感染血吸虫第4周后尿液中有28.6%(2/7)可检出CAg,10至12周达到高峰71.4%(5/7);血清中CAg于感染后第2周可检出,8至10周达到高峰,以后缓慢下降.提示家兔在感染10周左右可能是尿液中CAg检出的理想时期.
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日本血吸虫病免疫诊断的研究进展
传统诊断血吸虫病为可靠、经典的病原学方法,由于费工、费时、费力及疫区人群依从性逐年下降,收集粪便困难增加,同时随着防治规划的实施,疫区病人的感染度和人群感染率的明显下降,病原学方法的敏感性愈来愈低.粪检查出病原难度增大,为了寻找更敏感和较简便的方法来代替或补充病原学诊断方面的不足,自50年代起,国内外学者就开始进行了免疫诊断的研究,经过半个多世纪的努力取得了显著的进展.已形成了皮试、尾蚴膜试验、环卵沉淀试验、间接血凝试验和多种酶联免疫吸附试验等方法;鉴定出10余种有较好诊断价值的抗原(包括同源和异源抗原),创立了多个检测系统(如循环抗体、循环抗原和循环免疫复合物的检测),探索了皮内、血、尿等多个测试途径.这些成果在血吸虫病防治实践中都曾发挥了非常重要的作用[1].现将近年来国内外免疫诊断的主要研究进展与探索情况综述如下.
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应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原的研究
为探讨应用胶体金免疫层析法检测囊虫病患者血清循环抗原(CAg)诊断囊虫病的价值,应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人及非囊虫病人血清中的CAg,并将该方法与ELISA作了比较.检测78份囊虫病患者血清,56例显示为阳性,阳性率为71.79%.其中52份活动型脑囊虫病人血清的阳性率为80.77%;20份非活动型脑囊虫病人血清的阳性率为55%;6份单纯皮肌型囊虫病血清的阳性率为50%.检测40份健康人血清,阴性符合率为87.5%.检测10份包虫病患者血清、10份吸虫病患者血清的交叉反应率分别为20.00%和10%.10份华支睾吸虫病人血清均为阴性反应.23例其他脑疾患(脑肿瘤、脑脓肿、脑结核、脑外伤)患者血清的交叉反应率为11.32%.本方法的敏感性和特异性与ELISA相似.应用胶体金免疫层析法检测囊虫病人血清CAg具有较高的敏感性和特异性,操作简便快速,无需特殊仪器设备,具有较好的应用前景,值得进一步研究.
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金标免疫渗滤法在脑囊虫病诊断中的应用
为寻找简便可行的脑囊虫病诊断方法,将2株抗猪囊尾蚴囊液抗原McAb,一个滴于硝酸纤维素膜上,另一与胶体金结合,建立了检测脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中循环抗原(CA)的金标免疫渗滤法(DIGFA).本法中抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应,10分钟内即可用肉眼观察结果.以该法检测48例脑囊虫病患者CSF、26份健康人CSF及23例非囊虫病患者CSF.对检测样本作了沸浴处理,处理前后的48例脑囊虫病患者CSF阳性检出率分别是77.08%和93.75%,处理前后的对照CSF阴性符合率均未改变.26例健康人CSF,阴性符合率为96.15%;23例非囊虫病患者CSF,1例出现阳性反应,交叉反应率为4.35%.该方法可检出小抗原量为0.5μg/L沸浴处理可提高脑囊虫病人CSF的CA阳性检出率.DIGFA敏感、特异、重复性好,操作简便,无需特殊设备,可用于囊虫病的诊断.
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应用单克隆抗体检测脑囊虫病患者的循环抗原
目的:评价单克隆抗体检测循环抗原(CAg)诊断脑囊虫病的价值.方法:用猪囊尾蚴囊液抗原制备单克隆抗体4B6,ELISA法检测患者和对照者血清和/或脑脊液中的猪囊虫抗原.结果:82例脑囊虫病患者血清CAg阳性率为79.2%(65/82),脑脊液CAg阳性率为100%(26/26),治疗一个疗程后血清CAg转阴率为85%(17/20).对照者标本中未检出猪囊虫CAg.4B6和包虫抗原有轻微交叉反应.结论:脑脊液CAg检测有助于脑囊虫病的诊断,而血清CAg检测有助于疗效考核.
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急慢性血吸虫病循环抗原的检测
目的:探讨急性和慢性血吸虫病患者体内成虫的存活率.方法:采用双抗体夹心法检测血吸虫病患者血清中循环抗原,并与乳胶凝集试验(LAT)及间接血球凝集试验(IHA)进行比较.结果:急性期和慢性期循环抗原阳性率分别为89.56%及27.40%.明显高于同期LAT及IHA法.结论:循环抗原具有较强的特异性和敏感性,弥补了LAT及IHA法不能区别血吸虫病患者体内是否存在活的成虫缺陷,并可作为考核疗效指标之一.
