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家蝇相关序列扩增多态性扩增体系的建立与优化
目的:建立和优化家蝇的相关序列扩增多态性(SRAP-PCR)扩增体系.方法:以驯养家蝇为材料,通过单因子实验分别研究了模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物浓度及Taq DNA聚合酶用量对家蝇SRAP分子标记扩增体系的影响,并对扩增体系进行了优化.结果:优化后的反应体系总体积为30 μl,含50 ng模板DNA、1.5mmol/L Mg2+、0.20 mmol/L dNTPs、0.15 μmol/L引物和0.50 U Taq DNA聚合酶.结论:家蝇SRAP-PCR扩增优化系统的建立,为今后利用SRAP技术进行家蝇遗传多样性分析、基因定位奠定了基础.
关键词: 蝇科 随机扩增多态DNA技术 遗传标记 -
HRP标记DNA探针的制备及杂交条件探讨
目的:用辣根过氧化物酶(HRP)直接标记DNA探针,并对其斑点杂交条件进行探讨。方法:以对苯醌(PBQ)氧化HRP使其产生活化位点,并与聚乙烯亚胺PEI缩合形成HRP-PBQ-PEI复合物,再以戊二醛连接DNA,共价结合构建直接酶标探针进行斑点杂交,利用HRP可与底物发生颜色反应的特点观察结果,并对不同杂交条件进行研究。结果:成功构建了HRP标记的DNA探针,并进行了斑点杂交反应,归纳出较好的杂交条件。结论:直接酶标DNA探针有较高的特异性及敏感性,操作简便快速,经济可行。
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1776名学生ABO血型调查
血型是一种遗传标记,具有多态性,不同人种、不同民族,不同地区、不同群体血型分布有所不同[1].为了解黔南医专学生ABO血型的分布特征,笔者于2008年11-12月对2008级1776名学生AB0血型进行调查,现将结果报告如下.
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吸入性变应原对特应性皮炎的影响
特应性皮炎(AD)是常见的变态反应性皮肤病,其病因和发病机制非常复杂,遗传标记造成的皮肤屏障功能缺陷增加皮肤对环境的高敏感是患病的根本,而各种变应原和微生物的激惹是症状加重和迁延不愈的基础.
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短串联重复序列在医学中的应用
目的:介绍短串联重复序列在医学中的应用.方法:查阅国内外有关文献加以综述.结果:短串联重复序列已广泛应用于医学临床和研究.结论:短串联重复序列是目前医学中应用的主要遗传标记.
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ABO、MN、P、Rh和HLA 5种血型系统在亲子鉴定中的应用
血型是人类的一种遗传性状,它遵循孟德尔遗传学定律,常表现为简单的显性或隐性遗传.在一个家庭中,孩子的血型基因必定来自父母.因此,血型可以作为一种遗传标记用于亲子鉴定[1].据文献报道,中国汉族人群利用ABO、MN、P、Rh和HLA 5种血型系统进行亲子鉴定是可行的[2].笔者在1999年5月~2001年12月间,采用ABO、MN、P、Rh和HLA 5 种血型系统对深圳市(主要是宝安、南山二区)112例亲子鉴定案例进行了分析,现报告如下.
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乙肝患者血清外膜蛋白对判定HBV复制的意义
目的:探讨HBV感染者血清中PreSl-Ag、PreS2-Ag、大蛋白(LP)的检测意义及其对判定HBV复制的意义.方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA) 检测201例HBV感染血清的PreSl-Ag、PreS2-Ag、HBV-LP及HBV M,同时应用荧光定量PCR方法检测HBV DNA.结果:PreSl-Ag、PreS2-Ag、LP、HBsAg阳性率差异有统计学意义,PreS2-Ag、LP检出阳性率均高于HBeAg;LP的检出阳性率与HBV DNA的检出阳性率相关性有统计学意义,且HBV DNA 拷贝数的对数值与HBV-LP表达呈正相关.结论:PreSl-Ag、PreS2-Ag、LP较准确的反映乙肝病毒的复制情况,是HBV M有益的必要补充;血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数具有较好的相关性.
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良性家族性婴儿惊厥疾病基因与染色体8q24的连锁分析
目的:对5例中国良性家族性婴儿惊厥(BFIC)家系进行基因定位研究.方法:选择D8S502、D8S537等STR作为DNA标记,应用聚合酶链反应(PCR),变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染技术,采用LINKAGE软件包中的MLINK程序进行连锁分析.结果:在常染色体显性(AD)模式下,在标记位点D8S502处,5个家系在重组率为0.050,外显率为70%时,获得两点对数优势计分(LOD)值总和为0.337;在标记位点D8S537处,5个家系在外显率为70%,重组率从0.000到0.400之间,获得两点LOD值总和均为负值.结论:不能认为位点D8S502和D8S537与BFIC痰病基因存在连锁关系.
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胚胎干细胞的研究现状及运用前景
胚胎干细胞是一大类未分化的全能干细胞,具有无限增殖、自我更新和多向分化的潜能.在过去的20年中,由于培养技术、分离技术的提高,以及对干细胞特征如细胞表面抗原、遗传标记认识的加深,鼠和人的干细胞己建系上百株.
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遗传标记和免疫学方法在实验动物质量控制中的应用
生命科学发展迅速,实验动物级别逐渐提高,在保证生物制品实验结果可靠性前提下,完善动物由低级别向高级别过渡显得十分必要,终目的达到实验动物标准化和动物实验规范化.对实验动物质量控制中的遗传标记和免疫学方法进行了综述.
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单体型分析:复杂疾病基因定位的新希望
对复杂疾病如2型糖尿病、精神分裂症和原发性高血压进行基因定位是后基因组学的主要挑战之一.单核苷酸多态(single nucleotide polymerphisms, SNPs)作为遗传标记(SNP少见等位基因频率>0.1在基因组内大约每600 Kb出现一次)[1],因为其在人类基因内分布更为广泛和密集、低突变率和更加便于高通量检测,因而在关联研究较微卫星(Microsatellite)应用更加广泛.
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DNA多态性的研究进展
1 DNA多态性研究的三大阶段 1.1 第一代基因组遗传标记一限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)RFLP是70年代中后期建立起来的遗传标记系统。RFLP在发生上可以分为单碱基突变型和顺序重排型两种类型。所谓单碱基突变型是由于在某一限制性内切酶识别位点上,因发生单碱基替换而……
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新疆几个民族ABO和Rh血型分布的初探
血型是一种十分稳定的遗传性状,具有盂德尔式的遗传特点,各民族血型分布各有其特点,血型可作为一种遗传标记,对研究人类起源,进化和种族间的差异有一定意义.新疆是个多民族聚居地区,共有47个民族,其中居住历史悠久的主要民族有13个.对少数民族进行多指标的群体遗传学研究,可探讨他们的族源,融合及迁移,研究中华民族的起源[1,2].为了探讨新疆民族群体的族源,民族迁移与融合的影响,我们对在新疆分布比较广泛,人口数量相对较多的维吾尔、汉、哈萨克、回的ABO、Rh血型的分布进行了调查研究.
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人脐血CD34+内皮祖细胞的体外分化
目的:研究人脐血CD34+细胞群体中内皮祖细胞在体外分化为内皮细胞的过程中,干细胞标志以及内皮细胞表型随时间的变化.方法:将免疫磁珠细胞分选法(MACS)得到的CD34+细胞体外培养于纤连蛋白和无纤连蛋白处理的培养皿中,以免疫细胞化学鉴定贴壁细胞的内皮标志Flk-l和vWF,并以流式细胞仪分析其干细胞标志ACl33.结果:贴壁细胞的内皮标志Flk-1和vWF是逐步出现的,d 3时有27.0%贴壁细胞表达Flk-1,vWF不表达,d 7时已100%表达vWF和Flk-1.纤连蛋白促进贴壁细胞内皮标志Flk-1和vWF的表达,d 3时的表达百分率分别为34.0%和47.0%,d 7时Flk-1和vWF的表达均为100%.在培养过程中,AC133阳性细胞的比例迅速下降,但纤连蛋白对AC 1 3 3的表达无显著影响.结论:在内皮祖细胞分化的过程中,干细胞标志迅速消失,向内皮细胞分化,内皮细胞的表型是逐步出现的.纤连蛋白促进内皮祖细胞的分化.
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混合斑的研究进展
混合斑组成复杂,长期以来是法医物证研究的难题之一.混合斑主要分为两类:一是性侵害案件中大量女性阴道上皮细胞混合少量精子;二是普通来源的生物检材之间的混合,如血-血、唾液-血液混合等.近些年来,对混合斑的研究日渐深入,技术层面或理论分析都更加客观和多元化.针对第一类混合斑,出现了荧光/磁性激活、显微操纵、声波差异分离法等分离精子的新技术;第二类混合斑是研究的难点,近年来大规模平行测序、液滴微流控技术、乳液PCR(ePCR)、全基因组扩增等技术的出现,提高了次要成分的检出机率.此外,遗传标记也有相应的发展,传统遗传标记常染色体STR、Y-STR、SNP等检测位点越来越丰富,新兴遗传标记DIP、DIP-STR、SNP-STR、mtDNA-SNP、微单倍型等在混合斑研究中发挥的作用初步显露出来.文章后涉及混合斑分析理论和计算软件的新发展.
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二代测序技术在法医遗传学中的应用研究进展(2011~2016)
对生物检材进行DNA分型是解决法医遗传学实践中个体识别和亲权鉴定问题的重要步骤,法医学实践中复杂生物检材和复杂亲缘关系鉴定等一直是现有的检测分析技术的难点和挑战.随着DNA技术的发展,新的检测分析技术不断引入到法医遗传学领域,以期提高检测效能.二代测序技术具有测序通量高、成本低等特点,能够获得样本DNA详细序列和相对含量等信息,有助于生物检材的检测和案件的分析.二代测序技术在法医遗传学领域的应用受到广泛关注,相关的应用研究逐渐增多.本文就目前法医遗传学领域借助二代测序技术对遗传标记分析的研究进展进行总结,希望能为相关研究和应用提供参考.
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遗传标记微单倍型在法医学中的研究进展
微单倍型作为一种新型的法医学遗传标记,在国际法医学界已经引起了越来越多的关注.微单倍型是在较短片段内(例如200bp),包含2个或以上个SNP,具有单倍型多态性的序列.相较于STR,微单倍型突变率低,在混合斑鉴定中具有一定优势;与SNP相比较,微单倍型的多态性更高.选择含有祖先信息特征的微单倍型,在种群分析鉴定中具有应用价值.本文就微单倍型的演变,分型方法,命名及群体特征等方面作一综述.
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法医学混合斑研究进展
混合斑是性侵案件中常见生物检材,对其分析结果的解释是法医学检验中的难点之一.混合斑的种类较多,多个个体或多种体液、分泌液形成混合斑的提取、分离方法比较复杂.目前,法医学用于对混合斑量化评估主要应用杂合型均衡比和混合比例两个参数,而其分析受多种因素的影响.分析常用的遗传标记包括:常染色体和Y染色体STR,SNP,mtDNA,INDEls等.统计分析方法主要有似然率法(LR)以及随机男子不能被排除率法(RMNE).混合斑分析软件的出现,有助于对检验结果的分析和判断.本文对相关文献进行综述,意在为混合斑的研究和鉴定提供参考和借鉴.
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SNPs在个体识别与表型预测中的研究进展
单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)作为第三代遗传标记,具有分布广泛、突变率低、遗传稳定及易于自动化高通量快速检测分析的特点.同时,因其扩增片段长度短、不存在复制滑动,所以利于腐败降解、痕量检材的检测.随着研究的深入,SNPs在法医学领域受到了广泛重视,与表型(ABO血型、色素沉积及颅面形态)相关的SNPs有望用于预测嫌疑人的基本特征,为案件侦破提供新的思路.本文对近年来SNPs在个体识别和表型预测的研究进行总结,介绍该领域的研究进展,为法医学工作者提供参考.
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SNPs多态性及其法医学应用
人类在不断利用自然,改造自然的同时,也在对自身生命密码进行着不断的解读.随着人类基因组研究的深入,一代又一代遗传标记相继开发,法医物证检验技术也掀起一次又一次的革命.