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广州市2004年流感病毒监测分析
为进一步掌握广州市流感流行特征,及时做好预防控制工作,现将2004年流感病毒病原学及血清学监测结果分析如下.1.材料与方法:(1)病原学监测:参照全国流感监测方案,每周在各监测医院对发病3天内的流感样病例(体温≥38℃,伴有咳嗽,或咽疼痛、全身疼痛等症状的急性呼吸道感染病例)采集鼻咽拭子或含漱液等标本5~10份;疫情监测标本采自每次流感样疾病暴发疫点现患病例.采用MDCK细胞微量培养法进行流感病毒分离[1],并用豚鼠红细胞凝集试验进行初步鉴定[2],HA阳性标本再接种于MDCK细胞瓶,HA滴度≥1:8者送广东省疾病预防控制中心鉴定分型.监测医院阴性标本盲传一代,疫情阴性标本盲传两代.
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天津市2002年冬至2003年春流行性感冒病原学检测分析
为了解天津市流行性感冒(流感)流行情况,自2002年10月至2003年3月对天津市四家医院和两所学校采集流感样患者咽拭子标本,用MDCK细胞和鸡胚两种接种方法分离流感病毒.结果共采集流感样患者咽拭子标本305份,分离到流感病毒123株,其中B型90株占73.2%,A(H3N2)亚型33株占26.8%,A(H1N1)亚型未被分离到.总分离率为40.3%,如将2002年12月医院门诊(55/99)与学校采样(9/13)的两组数据汇总,该月的病毒分离率达57.1%(64/112),形成峰顶.所分离的90株B型流感病毒,其中4株为Yamagata系,占4.4%(4/90);其余的95.6%均为Victoria系.123株流感病毒均首先分自MDCK细胞,将对应的标本液直接接种鸡胚,仅收获到3株阳性尿囊液,阳性率2.4%(3/123),且均为B型毒株;阳性细胞液转种,有96.7%的B型毒株能适应生长,而33株A(H3N2)亚型毒株虽经反复转种却无一株转变为鸡胚生长适应株(0%).红细胞凝集试验中96.7%(87/90)的B型毒株的第一代细胞培养液具有D相特征(即与人O型红细胞及鸡红细胞均凝集良好),其余3株(3.3%)B型毒株及全部33株A(H3N2)亚型毒株均具只凝集人O型红细胞的O相特征,将A(H3N2)毒株在MDCK细胞上反复传代,但仍持续保持O相特征.
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流感病毒H1N1在MDCK细胞的培养及纯化条件的优化
目的 优化流感病毒H1N1在狗肾细胞(MDCK)上的培养条件,高效扩增流感病毒.方法 对MDCK细胞培养流感病毒时添加的胰酶(TPCK-Trypsin)浓度和培养基的种类进行筛选;比较不同细胞代次的MDCK对流感病毒的易感性;按MOI值0.001、0.01、0.1接种H1N1于MDCK细胞,CPE>75%时收获病毒上清,并按MOI值0.001接种H1N1后连续培养,分别于1、2、3、4、5d收获病毒上清,HA试验检测上清病毒滴度,浓缩纯化后行TCID30检测,分别选取佳接种MOI值和收毒时间;对浓缩纯化病毒的红细胞吸附方法进行检验.结果 通过对比,确定TPCK-Trypsin的佳使用浓度是0.25 μg/ml,MEM为培养病毒的佳培养介质;代次低的MDCK对流感病毒的易感性强于代次高的MDCK细胞;按MOI值0.001接种H1N1于MDCK细胞,第3d收获的上清病毒滴度高,为1∶1 024;用红细胞吸附法浓缩纯化流感病毒的Log 1/TCID50为8.5.结论 选用MEM,添加0.25 μg/ml TPCK-Trypsin,使用低代次MDCK,病毒接种含量MOI=0.001为H1N1佳培养条件,红细胞吸附法能高效浓缩纯化培养上清中的H1N1.
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精神分裂症患者弓形虫感染的血清学调查
我国正常人群弓形虫血清抗体阳性率为5.89%[1],精神病患者感染率高于正常人[2].为了解本地区精神分裂症患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神分裂症之间的关系,作者于1999年10月~2000年7月,采用间接红细胞凝集试验(IHA)对222例住院精神分裂症患者和78例健康体检者进行了弓形虫抗体检测.
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抗HBsAg/RBC双特异噬菌体抗体的构建
目的通过不同外壳蛋白的展示,构建抗HBsAg/RBC双特异噬菌体抗体. 方法通过DNA重组技术,将抗HBsAg Fab与噬菌体基因8融合,抗RBC ScFv与噬菌体基因3融合,这2种融合基因以不同的启动子驱动,并克隆于同一噬菌体表达载体上,得到双特异噬菌体抗体表达载体,转化大肠杆菌后获取噬菌体抗体上清,用ELISA和红细胞凝集试验检测其双特异活性. 结果 ELISA和RBC凝集实验证明,本方法可形成双特异噬菌体抗体,可使含有HBsAg的RBC悬液产生凝集.用展示性能得到提高的蛋白8变种取代野生型蛋白8可提高双特异噬菌体抗体的活性. 结论 HBsAb和RBC两种抗体分子能够通过不同噬菌体外壳蛋白同时展示于同一噬菌体表面,形成双特异噬菌体抗体.可用于人外周血HBsAg的快速血凝法检测.
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妊娠期梅毒患者围产结局的临床分析妊娠期梅毒患者围产结局的临床分析
妊娠期梅毒的发生呈上升趋势,已引起世界卫生组织的关注[1]。梅毒在我国本已基本消灭,但近年来随着性传播疾病的流行,梅毒又有蔓延的趋势。国内散在的妊娠期梅毒病例在各地均有报道,为进一步了解妊娠期梅毒在上海地区的流行情况以及对围产结局的影响,我们从1998年9月开始,开展了有关妊娠期梅毒的产前筛查工作,现报道如下。 一、临床资料 1.病例选择及方法:选取1998年9月至2000年1月在我院行产科检查并分娩的孕妇共2 052例,首次检查时抽取其静脉血作快速血浆反应试验(RPR)的血清学筛选,并对RPR阳性病例进行梅毒螺旋体红细胞凝集试验(TPHA),两项均为阳性者即为妊娠期梅毒病例(梅毒组)。同时抽取同一天分娩的第2例正常孕妇作为对照(死胎和中期妊娠引产不设对照)(对照组)。另外,对梅毒组中的2例双胎妊娠,再抽取距双胎妊娠期梅毒分娩时刻近的两例正常双胎妊娠孕妇作为对照,以此进行两组孕妇围产结局的病例对照分析。
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半乳糖凝集素-1的表达纯化与生物活性分析
目的:获得重组人半乳糖凝集素-1(galectin-1)蛋白,并分析其生物学活性.方法:PCR方法扩增目的基因,将其克隆到原核表达载体pET21a(+),获得重组质粒pET-galectin;将其转化至表达宿主菌BL21(DE3)中,用IPTG进行诱导,获得目的蛋白的表达;采用Ni-NTA亲和层析柱对目的蛋白进行纯化,用红细胞凝集试验分析其生物学活性.结果与结论:成功构建重组原核表达质粒pET-galectin,目的蛋白在大肠杆菌中获得高效表达,经Ni-NTA亲和层析柱一步纯化后,得到的蛋白纯度可达80%以上.红细胞凝集试验结果表明获得的重组蛋白具有较好的生物学活性,可进一步用于半乳糖凝集素-1功能研究.
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儿茶提取物抗甲型流感病毒作用的实验研究
目的研究从中药儿茶中提取的药物成分抗甲型流感病毒的作用.方法用狗肾传代MDCK细胞培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用;用鸡胚培养法观察儿茶提取物抑制甲型流感病毒增生的作用;用红细胞凝集试验观察儿茶提取物体外直接抑制甲型流感病毒的作用.结果 1)儿茶提取物的细胞毒性较低,可有效抑制甲型流感病毒感染细胞(P<0.05);2)儿茶提取物在一定范围内可明显抑制甲型流感病毒在鸡胚内的增生,经红细胞凝集试验测定抑制病毒效价为8倍或8倍以上;3)儿茶提取物直接与甲型流感病毒作用后可抑制病毒血凝效价达16倍以上.结论儿茶提取物具有很好的抗甲型流感病毒的作用.
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超大囊型脑囊虫病1例报告
1病历资料患者,男,50岁.因阵发性头痛1年,近期加重入院.每次头痛发作持续约2小时,间隔约2周,头痛时伴恶心、呕吐.近两月来上述症状明显加重,疼痛持续时间达44小时,自觉说话口齿不清,右侧口角流涎,头晕、耳鸣、右手麻木.追忆10余年前曾有皮下结节,未进行治疗,结节已消失.体检:神清,语言欠流畅,回答问题准确,步态稳,双侧瞳孔等大等圆,对光反应存在,颈项无明显抵抗,心肺功能正常.实验室检查:红细胞凝集试验、血酶联免疫吸附试验、囊虫皮试均阳性.脑MRI表现:平扫发现左顶叶见一多房囊性病灶,大小约6cm×4cm× 4cm,内有分隔,强化扫描后病灶内见一小结节状增强,囊壁轻度增强,病灶周围未见明显水肿,邻近脑沟回受压移位,左额叶近中线旁见一大约15cm×1cm囊性病灶,内有小结节影,无明显强化,双侧颞肌亦见囊性病灶,内部信号欠均,邻近颞叶受压、推移.
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以头痛为主要症状的钩端螺旋体脑病3例长期误诊分析
1 病历简介例1:女,23岁.因反复发作性头痛2年入院.2年来经常感双侧额顶部胀痛,甚为剧烈,偶伴头晕、恶心及呕吐,每次发作持续3~5天,每月发作2~4次,一直按功能性或血管性头痛口服安定、萘普酮、苯妥英钠、麦角胺咖啡因等治疗无效.入院查体正常,血白细胞11.0×109/L.头颅CT及脑脊液检查均正常.入院后第6天查钩体间接红细胞凝集试验(钩凝试验)为1∶160,遂行静脉滴注青霉素、地塞米松、复方丹参等治疗,头痛于5天后逐渐减轻,1月后症状基本消失.
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2012-2015年青海省流感病原学监测结果分析
目的 了解青海省2012-2015年流感病毒流行病学特征,分析流感病毒分离株变化规律,为流感防控提供科学依据.方法 按照《全国流感监测方案》的具体要求,在青海省2家国家级和1家省级流感监测哨点医院采集流感样病例的鼻咽双拭子标本,采用Real-time PCR方法进行病毒核酸检测,用MDCK细胞培养法分离流感病毒,对分离后的毒株用红细胞凝集试验(hemagglutination test,HA)及红细胞抑制试验(hemagglutination inhibition test,HI)进行型别鉴定.结果 2012-2015年青海省流感监测哨点医院共报告流感样病例(influenza like illness,ILI)8 011例,共检测鼻咽双拭子标本5 317份,分离到流感病毒毒株256株,总毒株分离率为4.81%.以冬春季为高发季节,2014年11月~ 2015年1月以H3N2亚型流感病毒流行为主,侵袭人群主要以15岁以下儿童为主.结论 监测结果显示青海省流感流行具有明显的季节性,不同型别的流感病毒在不同年份均有分布.应继续加强流感病毒的监测并积极推广流感疫苗的接种.
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IHA和Slide诊断旋毛虫病的研究
旋毛虫病是一种动物源性寄生虫病,除寄生人外,还在猪、犬、羊、牛、鼠等120多种哺乳动物之间广泛传播.我国自1964年西藏自治区首次报道人体病例后,东北、云南、西藏、河南、湖北等地又相继发现并报道了多起病例[1~3].确诊本病虽依据活检,但因诸多不便而漏诊、误诊较多.本文采用间接红细胞凝集试验(IHA)和玻片法环蚴沉淀试验(Slide)论断旋毛虫病,旨在研究这两种免疫血清学方法的敏感性和特异性,以期替代传统的肌肉活检法.
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抗人红细胞非凝集单克隆抗体的研制与应用
目的研制出抗人红细胞非凝集单克隆抗体,进而构建双功能抗体试剂,用于临床实验室诊断.方法用自愿者O型红细胞免疫BALB/C小鼠,采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗人红细胞非凝集单克隆抗体.结果获得4株分泌抗人红细胞非凝集单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7 A1、7A2、1H7、7H3).4株单克隆抗体免疫球蛋白的轻链均为κ型,重链均为IgG1类.检测2 00例正常人红细胞(A、AB、B、O型).Cooma's试验均发生凝集;与实验所用10种动物的红细胞无交叉反应.进一步对其在检测肾综合征出血热抗体的全血凝集试验方法方面的应用进行了初探.结论研制的7A1抗人红细胞非凝集单克隆抗体可用于构建双功能试剂.
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早期诊断肾综合征出血热自身红细胞凝集试验
肾综合征出血热(HFRS)是一种烈性病毒性传染病,早期诊断、早期治疗对于HFRS病人的预后尤为重要.目前常用的HFRS诊断方法如ELISA,间接荧光抗体试验(IFAT)等[1],尽管特异性和敏感性较好,但技术要求和设备要求较高,很难普及到基层医疗单位.本研究创造性地将肾综合征出血热病毒(HFRSV)G1G2结构蛋白与抗人红细胞单克隆抗体的2C8的Fab片段偶联,制备出既能与抗HFRSV抗体结合,又能与人红细胞结合,同时出现红细胞凝集的双功能抗原抗体结合物,将此结合物用于检测HFRS病人全血和血清标本中抗HFRSV特异性抗体,取得较好的实验结果,建立了检测HFRSV特异性抗体的简便快速的自身红细胞凝集试验(AGEN)方法.现报告如下.
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湖沼渠网型地区不同人群血吸虫病血清流行病学调查
为了解和掌握湖沼渠网型地区不同人群血吸虫病流行情况,为采取针对性防治措施提供依据,组织专业力量于化疗前、后两次对湖北省潜江市张金镇直属机关单位、镇办企业、中小学校和部分村民等不同人群,采用间接红细胞凝集试验(IHA)、环卵沉淀试验(COPT)和斑点-酶联免疫吸附试验(dot-EUSA)等3种方法进行检测,结果报告如下.
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红细胞血型抗体检测技术进展
本文通过综述盐水介质凝集试验、胶体介质凝集试验、酶处理红细胞凝集试验、抗球蛋白试验、低离子凝聚胺试验和微管凝胶检测试验等检测红细胞血型抗体的技术方法,认为微管凝胶检测试验技术将成为检测红细胞血型抗体的主流方法.
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世行贷款项目实施前后的湖区血吸虫病调查
为观察我省湖区在实施世界银行贷款中国血吸虫病控制项目(下称世行贷款血防项目)前后血吸虫病疫情的变化,1991年和1999年,我们在潜江市熊口镇连市、新沟、赵脑3个血吸虫病流行程度不同的村,采用环卵沉淀试验(COPT)、间接红细胞凝集试验(IHA)、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和粪便集卵孵化法进行了血吸虫病流行病学调查,结果如下.
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一起皂甙中毒的实验室分析
目的:通过了解安图县明月镇财政局楼工地发生食物中毒的经过,提高人们的饮食卫生防范意识,预防中毒事件的发生.方法:采用红细胞凝集试验,并在试验中进行了阴阳对照.结果:在一份剩余食物及3份呕吐物中,红细胞凝集试验均为阳性,凝集效价为1:32及1:16,阴阳对照均有效.结论:此次食物中毒是由于豆角烹调时加热不彻底造成的食物中毒.
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一起因食用豆角引起食物中毒的调查分析
豆角是我们生活中不可缺少的蔬菜,但豆角中含有的豆素和皂素对胃肠粘膜有刺激作用,能够凝集和溶解红细胞.豆角如果加热不彻底可引起食物中毒.安图县在2004年3月15日职业教育中心学生食堂集体就餐后引起了一起食物中毒事件.据流行病学调查、临床表现和实验室检测,确定该食物中毒是由未炒熟豆角而引起的,现将结果报告如下:
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20种抗菌中药的凝集活性研究
目的 比较常见抗菌中药的凝集活性.方法 选用盐-磷酸(PBS)、Tris-HCl、乙酸钠缓冲溶液提取20种常见抗菌中药的凝集素,测定各提取液对兔血红细胞的凝集作用.结果 20种抗菌中药用不同pH的浸提液提取后表现不同的凝集活性,在3种不同pH的浸提取液中均具有较高凝集活性的有虎杖、山豆根、黄连、板蓝根.结论 抗菌中药多数有较好的凝集活性,PBS对中药材中凝集素的提取具广谱性.