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原花青素对a-淀粉样肽(25-35)诱导 PC12 细胞bax和bcl-2基因表达的影响
目的 探讨原花青素 (Procyanidins,PC) 对a-淀粉样肽(25-35)(Aa25～35) 诱导凋亡PC12细胞bax和bcl-2基因表达的影响.方法 采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变,RT-PCR 检测bax和bcl-2基因 mRNA 表达,Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 不同剂量PC预处理 PC12细胞 1 h,可剂量依赖性对抗Aa25～35引起的细胞凋亡,增加细胞存活率,减少Aa25～35引起的细胞核固缩、核碎裂,降低bax mRNA及Bax蛋白表达,增加bcl-2 mRNA及Bcl-2蛋白表达.结论 PC可剂量依赖性对抗Aa25～35诱导的 PC12细胞凋亡,其机制可能与下调凋亡基因bax和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关.
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原花青素对高脂血症模型大鼠脂肪因子及免疫调节的影响
目的 观察原花青素对高脂血症模型大鼠血清瘦素(Leptin)、抵抗素、脂联素以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6的影响.方法 SD大鼠随机分成对照组(C组)、高脂血症模型组(H组)、原花青素高剂量组(HD组)、原花青素低剂量组(LD组),各10例.除对照组饲普通饲料外,其余各组喂饲高脂饲料并进行干预实验比较.6 w后检测大鼠血脂,血清胰岛素、瘦素、抵抗素、脂联素及TNF-α、IL-6的变化.结果 与对照组相比,H组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)水平升高(P＜0.01或P＜0.05)；高密度脂蛋白(HDL-C)水平降低(P＜0.01)；血清胰岛素、瘦素、抵抗素和TNF-α、IL-6含量明显升高(P＜0.01)；脂联素水平明显降低(P＜0.01).原花青素干预组血脂水平明显降低(P＜0.01)；血清胰岛素、瘦素、抵抗素和TNF-α、IL-6含量降低(P＜0.01或P＜0.05)；脂联素水平升高(P＜0.01).结论 瘦素、抵抗素、脂联素和TNF-α、IL-6在高脂血症的病理和生理过程中起着重要作用.原花青素通过增加脂联素,降低血清胰岛素、瘦素、抵抗素、TNF-α和IL-6含量,控制炎症反应,对高脂饮食所致高脂血症相关性胰岛素抵抗的防治发挥重要作用.
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原花青素对阿尔茨海默病模型大鼠脑组织的预防保护作用
目的 探讨葡萄籽原花青素(GSP)对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠脑组织的预防保护作用和其机制.方法 Wistar大鼠60只随机分为4组:空白对照组、AD模型组、GSP大剂量(40 mg/kg)组、GSP小剂量(20 mg/kg)组,每组15只,大鼠海马区注射凝聚态Aβ1～40制作AD模型成功后,先观察大鼠的认知功能,然后检测海马区脑组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、ATPase活性,免疫组织化学染色检测海马区脑皮质神经细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达,Hoechst33258染色观察海马区脑皮质神经细胞凋亡情况.结果 原花青素能明显改善AD大鼠的认知功能,使大鼠脑组织MDA含量明显降低,SOD、ATPase活性明显升高,Bcl-2蛋白表达明显升高,Bax蛋白表达显著降低.结论 GSP对AD模型大鼠的认知功能有一定的改善作用；GSP可通过清除自由基和抗脂质过氧化作用来提高AD模型大鼠脑组织的抗氧化能力；GSP对AD模型大鼠神经细胞凋亡有明显的抑制作用.
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原花青素对大鼠局灶性脑缺血损伤的脑组织TNF-α和HSP70含量的影响
目的 探讨原花青素(procyanidins,PC)对局灶性脑缺血大鼠细胞凋亡和鼠脑组织TNF-α、HSP70和含量的影响.方法 选用健康SD大鼠30只,雌雄各半,随机分为假手术组、模型组、PC50 mg/kg组、100 mg/kg组和200 mg/kg组,共5组.24h后进行神经功能评分,并断头取脑,制备组织匀浆,检测大鼠脑细胞凋亡率、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和热休克蛋白70 (HSP70)含量.结果 模型组神经功能评分和大鼠脑细胞凋亡率、TNF-α高于假手术组,差异有显著性(P＜0.05);模型组大鼠脑组织HSP70含量低于假手术组,差异有显著性(P＜0.05).PC 50 mg/kg组、100 mg/kg组和200 mg/kg组的神经功能评分和大鼠脑细胞凋亡率、TNF-α低于模型组,差异有显著性(P ＜0.05);HSP70含量高于模型组,差异有显著性(P＜0.05).结论 PC对缺血性脑损伤具有保护作用,其保护作用机制可能与其抑制鼠脑细胞凋亡,并抑制TNF-α的生成,增加HSP70的生成有关.
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原青花素的抗肿瘤机制研究现状
原花青素存在于多种植物中，属生物黄酮类家族，它具有多种抗肿瘤作用。本文从细胞周期、细胞凋亡途径、逆转肿瘤耐药性、抗炎等方面来揭示原花青素的抗肿瘤机制，为进一步开发原花青素作为抗肿瘤药物提供依据。
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紫外分光光度法测定蓝靛果中原花青素含量
[目的]测定长白山地区蓝靛果的原花青素含量.[方法]使用回流提取法及大孔吸附树脂纯化方法得到原花青素粗品,利用原花青素在280 nm波长处具有大吸收的特点,在pH值为3的酸性条件下应用紫外分光光度法测定原花青素的吸光度值.[结果]原花青素含量在15.625～250.000 mg/L之间呈现良好的线性关系,平均加样回收率为95.32％,RSD为1.67％,原花青素质量分数为1.72％.[结论]建立的含量测定方法操作简便、准确、稳定、重复性好,可用于原花青素含量的测定.
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葡萄籽原花青素对人晶状体上皮细胞凋亡的影响
目的 因葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)能减少人眼晶状体上皮细胞凋亡的发生.该研究主要探讨GSPE减少凋亡的机制.方法 对人晶状体上皮细胞(HLE-B3)进行培养,分别加入设计浓度的GSPE培养液,经过相应的培养时间后,再与含有不同浓度的过氧化氢(H2O2)的培养液共同作用.MTT法检测各组细胞活性.流式细胞仪检测各组细胞的凋亡程度.west-ern blot方法检测各组细胞中NF-κB蛋白的变化.结果 在体外HLE-B3细胞培养状态下,GSPE能有效地减少H2O2诱导的细胞凋亡,能够有效抑制NF-κB蛋白表达.结论 GSPE能够减少H2O2诱导的细胞凋亡.GSPE能够有效抑制NF-κB.GSPE对H2O2诱导的HLE-B3氧化损伤具有保护作用.
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葡萄籽原花青素对人晶状体上皮细胞中线粒体超氧化物歧化酶表达的影响
目的 葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidin extract,GSPE)能保护人眼晶状体上皮细胞免受氧化应激.该研究探讨葡萄籽原花青素对防止氧化应激相关的线粒体锰超氧化物歧化酶(mitochondrial-associated manganese superoxide dismutase,MnSOD)的表达(活力)的影响.方法 人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLE-B3)与GSPE共同预孵育相应时间段后收集mRNA和蛋白质的裂解物.Real-time PCR检测晶状体上皮细胞MnSOD基因的表达;Western印迹分析研究对其蛋白表达的影响;同时测定MnSOD活性.结果 HLE-B3细胞与GSPE共同作用6 h MnSOD活性无统计学意义的变化(67.5 ±6.5 u/mL,t=1.56,P＞0.05);12h后,MnSOD活性呈现一个显著的快速增长(110±10.3 u/mL,t=4.03,P＜0.05),24 h后下降到对照组水平(49.3±6.9 u/mL,t=1.69,P＞0.05).实验组的MnSOD基因和蛋白的表达检测没有显著变化.结论 该研究表明,GSPE能增加MnSOD的活性,但是并不影响其mRNA和蛋白的表达.MnSOD通过减少ROS的生成从而在线粒体氧化应激中起到重要作用,终促进细胞的存活.
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原花青素交联去细胞牛颈静脉带瓣管道的实验研究
目的:探讨原花青素(Proanthocyanidin,PA)交联去细胞牛颈静脉带瓣管道(valved bovine jugular vein conduit,BJVC)的方法和效果,为其在心血管外科和组织工程中的应用奠定实验基础.方法:新鲜BJVC 24根,随机分为原花青素交联组(PA组,n=8),戊二醛(Glutaraldehyde,GA)交联组(GA组,n=8)及新鲜对照组(Fresh组,n=8).分别检测各组牛颈静脉带瓣管道的生物物理性能.同时采用溶血实验和细胞毒性实验对PA和GA交联组分别进行生物学评价.结果:1.细胞成分去除彻底,纤维支架保存完整；2.固定指数检测显示虽然PA较GA交联速度慢,但两种交联剂交联效果无明显差异.3.生物物理性能检测显示:PA组管道厚度、管腔直径与新鲜对照组相当(P＞0.05),且优于GA组(P＜0.05)；PA组合水量高于GA组(P＜0.05)；两种方法交联后热皱缩温度、断裂强度、断裂延伸率均明显增强(P＜0.05),且PA组织断裂强度和断裂延伸率优于GA组(P＜0.05)；Fresh组浸泡8d后失重率为98％,而PA组和GA组分别为3.68％和4.31％,两组间无显著差异.4.生物学评价结果表明,PA组细胞毒性低于GA组(P＜0.05)；溶血实验结果表明两组溶血率均＜5％,符合国家生物材料溶血试验标准,且PA组明显低于GA组.结论:PA交联的BJVC具有良好的生物物理学特性,较低细胞毒性,为PA交联BJVC的深入研究做了初步探讨.
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超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的工艺研究
刺葡萄(Vitis davidii Fo(e)x.)是属于葡萄属东亚种群的一个种,在湖南西部和南部的山区分布广泛,资源丰富,其果实酸甜、风味浓,但其果粒小,种子多,从种子中提取天然活性物质--原花青素的前景可能更为广阔.目前关于刺葡萄的研究报道少,为此本文以"紫秋"刺葡萄种子为原料,采用单因素试验和正交试验,探讨了超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的工艺.研究结果表明,超临界CO2萃取刺葡萄籽原花青素的适宜工艺条件为:萃取压力30MPa,萃取温度55℃,料液比1:0.8,60%的乙醇为夹带剂,在此条件下,原花青素的产率为17.58 mg/100g,纯度可达89.7%.
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原花青素眼用剂型的临床应用及对干眼症的影响
目的 研究原花青素(procyanidins,PC)眼用剂型对干眼症的影响.方法 将40例(40只眼)于眼症患者,按完全随机原则等分为4组,即不同PC剂量的低(2μg/L)、中(20μg/L)、高(40μg/L)3个实验组与阴性对照组(生理盐水).在用药前及用药后第3、7天,询问患者自觉症状.检查泪液分泌试验(Schirmer test,ST)、泪膜破裂时间(tear flim break-up time,BUT).结果 用药后干眼症患者自觉症状有改善;对BUT延长,有统计学意义(P＜0.01);对ST的影响无显著性差异(P＞0.05).3种剂量滴眼液对BUT和ST较对照组有显著性差异(P＜0.01).结论 PC滴眼液对干眼症有较好的治疗效果.PC滴眼液的浓度越高(2～40μg/L之间),用药时间越长(7天之内),对干眼症患者各项指标改善作用越明显.
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HPLC法测定龙眼果核中的原花青素的含量
目的:建立龙眼果核中原花青素含量的测定方法.方法:采用Inertsil ODS-3 C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇、乙腈与水,比例为50:35:15;流速:1 mL·min-1;检测波长为280 nm.结果:在24.95～199.6μg·mL-1浓度范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,回归方程Y=9834.1X+6553.2,r=0.9998;结论:该法快捷方便,重复性和精密度良好,可用于原花青素的含量测定.
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原花青素的研究进展
本文综述了近几年国内外关于原花青素的研究概况,尤其对原花青素的抗氧化、清除自由基、调节免疫、抗弹性酶、抗诱变等多种药理活性进行了讨论,并对其结构、生化及临床应用进行概述.
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正交试验优化龙眼核中原花青素的提取工艺
目的:研究从经处理后的龙眼核中提取原花青素的佳工艺条件.方法:以提取时间、温度、提取溶剂的体积分数以及提取的料液比进行单因素试验,并以此为依据进行L9(34)正交试验,优化得出佳的提取条件.结果:研究表明各因素中对龙眼核原花青素提取影响的大小次序为:提取时间＞料液比＞乙醇体积分数＞提取温度,其佳提取工艺为:50％乙醇,料液比1∶10、提取时间2h以及提取温度60℃.结论:正交设计优化得到的龙眼核原花青素提取工艺方法具有更佳的提取效率.
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应用大鼠模型研究原花青素治疗脊髓损伤的疗效
目的:研究应用原花青素后,脊髓损伤大鼠的后肢肌力及活动能力能否得以提高.方法:取用成年雌性的Wistar大鼠30只,将其分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组,每组10只.大鼠都使用艾伦(Allen)法造成脊髓撞击伤,伤后第Ⅰ组腹腔内给药原花青素,第Ⅱ组腹腔内给药为地塞米松,第Ⅲ组应用等量的氯化钠盐水.在制模成功后分别在第1天,第3天,第5天对每组大鼠进行BBB评分,并测定其超氧化物歧化酶(SOD)的含量值.结果:BBB评分显示,术后第3天和第5天,将Ⅰ,Ⅱ组与Ⅲ组进行比较,发现前两组后肢运动恢复情况比第Ⅲ组更为良好(P＜0.05).第5天时,Ⅰ组与Ⅱ,Ⅲ组相比较,Ⅰ组SOD活性数值升高较为明显.结论:原花青素能够改善脊髓打击伤后大鼠的生存情况,使其下肢活动功能部分恢复.
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原花青素羟丙基-β-环糊精包合物制备工艺的研究
目的:优化原花青素羟丙基-β-环糊精包合物的佳制备工艺.方法:以包合率为指标,采用正交试验方法,对包合物的制备工艺进行优化.结果:确定佳制备工艺投料质量比(原花青素和羟丙基-β-环糊精的质量比1:4)、羟丙基-β -环糊精质量分数30％、包合温度20C、包合时间2.5h.结论:用溶液搅拌法对原花青素进行包合方法可行,包合率为24.5％.
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原花青素对饮食所致高脂血症大鼠心血管的保护作用
[目的]研究原花青素对饮食所致高脂血症大鼠心血管的保护作用机制.[方法]对5周龄Wistar大鼠按体重随机分成4组:正常饮食组(对照组,C组)、高脂饮食组(高脂模型对照组,H组)、高脂饮食+20mg/ks原花青素(药物高剂量,HD组)、高脂饮食+10 mg/kg原花青素(低剂量组,LD组).喂饲4周后测定各组大鼠血脂、氧化应激和心肌瘦素、Na+-K+-ATPase酶和ca2-Mg2+-ATPase酶水平.[结果]与对照组相比,H组血清总胆固醇(CHO)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及丙二醛(MDA)水平显著升高,血清SOD、GSH-Px、CAT三种抗氧化酶水平明显降低,心肌Na+-K+-ATPase酶、Ca2+-Mg2+-ATPase酶和MDA水平降低;HD和LD组血清SOD、GSH-Px、CAT以及心肌Na+K+-ATPase酶、ca2+-Mg2+-ATPase酶和瘦素水平显著升高,MDA含量降低,但对血脂水平无显著影响.[结论]原花青素具有心血管保护作用,其作用机制至少包括抗氧化作用和增加心肌细胞对瘦素的调节敏感性两个方面.
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莲房原花青素对乙醇诱导肝细胞DNA损伤的拮抗作用
[目的]研究莲房原花青素(LSPC)对乙醇诱导的人胚肝L-02细胞株DNA损伤的拮抗作用.[方法]观察5、10、25 mg/L的LSPC与200mmol/L乙醇共同作用于L-02肝细胞24h后,对细胞生存率,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)含量,DNA损伤修复酶:[切除修复鼠缺陷交叉互补蛋白1(ERCC1)、O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)、错配修复hMSH2基因、DNA依赖的蛋白激酶复合物(DNA-PKcs)]表达水平等方面的差异进行比较.[结果]与乙醇组相比,5、10 mg/L的LSPC使细胞的生存率分别由73.14%上升到84.79%和90.52%,细胞SOD、CAT、GSH含量增加(P＜0.01),MDA含量减少(P＜0.01);有效降低细胞DNA损伤程度(P＜0.05).5 mg/L的LSPC可显著增加乙醇处理细胞中ERCC1、DNA-PKcs、hMSH2的表达(P＜0.01),但对MGMT的表达无影响(P＞0.05),10、25 mg/L的LSPC与乙醇组比较,所有4种DNA损伤修复酶的表达均无明显改变.[结论]适量的LSPC可拮抗乙醇诱导的L-02肝细胞的DNA损伤作用.
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原花青素和丹酚酸对果蝇等动物抗氧化指标及存活时间的影响
[目的]探讨原花青素和丹酚酸(Proanthocyanidir and Salvianolic acid,PS)胶囊对果蝇、12月龄大鼠、ICR小鼠的寿命、抗氧化性及存活时间的影响.[方法]采用果蝇生存、抗氧化和耐缺氧实验方法观察果蝇、大鼠、小鼠生存时间及脂质过氧化指标.果蝇喂饲PS剂量为0.012%、0.036%、0.108%和0.324%,大鼠、小鼠均以0.09、0.18、0.36 g/(kg·bw)PS胶囊剂量连续灌胃1～2个月.[结果]各剂量PS胶囊组动物与对照组比较能明显延长果蝇的半数死亡时间(0～4.0d)、平均寿命(0.4～4.04d)和平均高寿命(0.8～4.8 d);能明显提高12月龄大鼠血清SOD的活力8.8～15.5 NU/ml,降低MDA的含量0.8～0.98 nmol/ml;能明显延长ICR小鼠常压下缺氧的存活时间(420～777 s)、亚硝酸钠中毒致死的存活时间(184～966 s)及急性脑缺血性缺氧的喘气时间(2.3～4.4 s).[结论]提示原花青素和丹酚酸为主要成分的PS胶囊具有延缓动物衰老作用及增强耐受力的作用.
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氯化汞致大鼠肾损伤及原花青素的保护作用
[目的]观察氯化汞对大鼠肾脏的损伤作用及原花青素的保护作用.[方法]30 只 Wistar 大鼠按体重随机分成 5 组,第 1～4 组以大豆油灌胃,第 5 组以原花青素 450mg/kg 灌胃;2h 后,第 1 组皮下注射生理盐水,第 2～5 组分别皮下注射 2.2、4.4、8.8、8.8μ.mol/kg 氯化汞.第 2 天重复上述步骤后,收集 24h 尿液测定尿汞(Hg)和蛋白含量,以及碱性磷酸酶(ALP)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和乳酸脱氢酶(LDH)活力;腹主动脉采血测定血清尿素氮(BUN);切取肾皮质测定Hg含量和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力.[结果]与对照组比较,各染毒组的尿蛋白含量、尿 LDH 活力、肾皮质 Hg 含量、GSH、MDA 含量及SOD、GSH-Px 活力差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);4.4、8.8μmol/kg 染毒组的尿汞含量、ALP、NAG 活力、血清 BUN 含量的差异均具有统计学意义(P<0.01).原花青素干预组与 8.8μmol/kg 染毒组比较,尿 LDH、ALP、NAG 活力降低,尿蛋白含量下降,肾皮质 GSH、MDA 含量下降,SOD、GSH-Px 活力升高,血清 BUN 含量下降,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).[结论]氯化汞可蓄积于大鼠肾脏并产生损伤,原花青素对大鼠氯化汞所致肾损伤具有一定程度的保护作用.
