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信号传导与转录激活因子3与肝细胞癌的研究进展
肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是我国常见的恶性肿瘤,病死率高.探索HCC的相关危险因素和治疗靶标,开展HCC病因预防和早期治疗具有重要公共卫生价值.信号传导与转录激活因子3 (signal transducer and activators of transcription 3,STAT3)是多条炎症信号通路的关键分子,在肝癌组织中有较高表达水平,其异常活化可能与HCC的发生发展、侵袭转移和预后等过程密切相关.本文对STAT3与HCC相关性研究、HCC病因预防、针对性治疗等问题进行综述,可为HCC预防和治疗策略制定提供参考.
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α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂抑制骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性因子
目的 探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)激动剂PNU282987对骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性反应因子的影响及其分子机制.方法 分离培养小鼠外周血单核细胞,使用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微粒刺激后,ELISA检测培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量;RT-PCR检测细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达;Western blot检测p-p65、p65、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3及β-actin的表达;ELISA检测NF-κB DNA结合活力. 结果 单核细胞经PMMA微粒刺激后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显增高(P<0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达明显增高(P<0.05);p65、JAK2和STAT3磷酸化明显增强(P<0.05);NF-κB DNA结合活力明显增高(P<0.05).不同浓度PNU282987作用后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量呈浓度依耐性下降(P<0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达呈浓度依耐性下降(P<0.05);总p65、JAK2和STAT3的表达不变;p-p65、p-JAK2和p-STAT3的表达呈浓度依耐性下降(P<0.05);NF-κB DNA结合活力也呈浓度依耐性下降(P<0.05). 结论 α7nAChR激动剂PNU282987能显著抑制PMMA骨水泥微粒所诱导的小鼠血单核细胞炎性反应因子的分泌.
关键词： α7烟碱型乙酰胆碱受体 单核细胞 核因子κB 信号传导与转录激活因子3 -
miR－21靶向调控STAT3基因抑制人乳腺癌MCF－7细胞的侵袭
目的探讨miR－21和信号传导与转录激活因子3（signal transducer and activator of tran-scription 3， STAT3）基因在人乳腺癌MCF－7细胞中的表达，阐明miR－21对STAT3基因的靶向作用及其对MCF－7细胞侵袭的影响。方法购买并培养MCF－7细胞，采用免疫荧光法检测STAT3在癌细胞中的表达。运用生物信息学方法对miR－21和STAT3基因的靶向配对关系进行预测，采用荧光素酶报告系统鉴定；脂质体2000转染miR－21模拟物后，qRT－PCR检测miR－21和STAT3 mRNA在癌细胞中的表达，Western blot检测STAT3蛋白在癌细胞中的表达，Transwell小室检测MCF－7细胞体外的侵袭性。结果光镜下可见人乳腺癌MCF－7细胞成片生长，有突起；细胞免疫荧光法检测结果显示胞质内有STAT3蛋白的表达，显示红色荧光。生物信息学软件miRanda和TargetScan显示miR－21和STAT3基因二者靶向配对良好，荧光素酶报告系统鉴定发现miR－21 mimics能够抑制STAT3 mRNA表达。 qRT－PCR和Western blot检测结果表明过表达miR－21能够降低STAT3 mRNA和蛋白的表达。 Transwell小室实验结果表明miR－21的过表达能够抑制MCF－7细胞的侵袭。结论 miR－21通过负性调控人乳腺癌MCF－7细胞中STAT3基因的表达，进而抑制癌细胞的侵袭。
关键词： 微小RNA 信号传导与转录激活因子3 乳腺癌MCF-7细胞 生物信息学 -
STAT3、PPAR-γ在小鼠溃疡性结肠炎的作用及姜黄素的影响
目的:探讨姜黄素通过信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)通路对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型的作用,以及姜黄素对环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)的影响.方法:将♀BALB/c小鼠60只,随机分为6组,每组10只.A组:正常对照组;B组:模型组;C组:地塞米松组[1.5 mg/(kg·d)];L组:姜黄素低剂量组[25 mg/(kg·d)];M组:姜黄素中剂量组[50 mg/(kg·d)];H组:姜黄素高剂量组[100 mg/(kg·d)].小鼠UC模型采用葡聚糖硫酸钠诱导,观察小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,HE染色观察结肠组织学改变以及免疫组织化学测PPAR-γ、STAT3,ELISA测COX-2的表达,Westem blot测p-STAT3的表达,逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)测STAT3mRNA的表达.结果:(1)B组小鼠症状、组织学都符合UC标准,DAI评分和组织学评分均高于A组,C组、L组、M组、H组DAI评分和组织学评分较B组都有不同程度的下降;(2)免疫组织化学显示:B组小鼠结肠PPAR-γ低于A组(23.15±2.33 vs 42.07±3.82,P＜0.01);B组小鼠结肠STAT3比A组、C组、L组、M组、H组高(66.36±6.08 vs 28.25±2.84,29.84±3.32,45.26±5.42,29.02±3.28,21.22±3.30,P＜0.01);(3)ELISA显示与B组相比,C组、L组、M组、H组COX-2含量较B组低(P＜0.01);(4)Western blot检测显示B组p-STAT3蛋白水平相比A组明显上升,C组、L组、M组、H组水平较B组降低(P＜0.05);(5)RT-PCR显示结肠组织STAT3 mRNA的表达:B组STAT3 mRNA表达水平相比A组明显上升,C、L、M、H组水平较B组降低(P＜0.05).结论:(1)STAT3、PPAR-γ可能参与了溃疡性结肠炎的发病;(2)姜黄素治疗小鼠UC模型的机制可能通过提高PPAR-γ的含量,抑制STAT3信号通路,减少COX-2的释放,减轻中性粒细胞的浸润,从而减轻小鼠结肠黏膜的损伤而达到治疗UC的作用.
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p-STAT3与E-cadherin在胰腺癌中的表达及其临床意义
目的:观察信号传导和转录激活因子3(STAT3)活化形式-磷酸化STAT3(p-STAT3)和上皮型-钙黏附素(E-cadherin)在胰腺癌组织及细胞中的表达及其临床意义,探讨STAT3信号通路在胰腺癌侵袭转移中的作用.方法:免疫组化检测34例胰腺癌和10例正常胰腺组织中p-STAT3和E-cad的表达,并分析其与胰腺癌临床病理特征的关系.细胞侵袭测定试剂盒检测胰腺癌细胞株SW1990和CaPan-2侵袭能力;分别采用Western blot和电泳迁移率变迁实验(EMSA)检测2种细胞中p-STAT3蛋白表达及STAT3-DNA结合活性.结果:免疫组化发现p-STAT3在胰腺癌组织中存在高表达(64.7%),与临床分期及淋巴结转移有关(P=0.017,P=0.013);E-cad在胰腺癌组织中表达明显降低,与组织学分级(P=0.002)、临床分期(P=0.034)及淋巴结转移(P=0.019)有关.在胰腺癌组织中,p-STAT3与E-cad的表达呈负相关(r=-0.537,P=0.001).体外侵袭实验发现SW1990细胞比CaPan-2细胞具有更高的侵袭能力(P＜0.05).Western blot发现在胰腺癌高侵袭力细胞株SW1990中p-STAT3蛋白呈高表达,而在低侵袭力细胞株CaPan-2中呈低表达;EMSA实验亦证实SW1990细胞较CaPan-2细胞具有更高的STAT3-DNA结合活性(P＜0.05).结论:p-STAT3与胰腺癌侵袭转移及E-cad异常表达密切相关;联合检测两种蛋白对于胰腺癌恶性潜能的判断具有一定的参考价值.
关键词： 胰腺癌 信号传导与转录激活因子3 E-钙黏附素 侵袭 转移 -
第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3信号通路对糖尿病心肌缺血后处理敏感性的作用
目的 评价第10号染色体丢失性磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)调控的酪氨酸蛋白激酶2/信号传导与转录因子3(JAK2/STAT3)信号通路在糖尿病心肌对缺血后处理敏感性中的作用.方法 健康雄性SD大鼠,体重220～ 280 g,采用1％链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液60 mg/kg腹腔注射法制备1型糖尿病模型.8周后取成模糖尿病大鼠60只,采用随机数字表法分为5组(每组12只):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组)、PrEN抑制剂BpV+缺血再灌注组(BpV+I/R组)、BpV+缺血后处理组(BpV+IPO组).I/R组采用结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法建立模型;IPO组于再灌注前行3个循环的再灌注10 s/缺血10 s;S组只穿线不结扎血管;BpV于缺血前lh静脉注射1 mg/kg,对照组注射等量生理盐水.各组于再灌注120 min时处死大鼠,测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平,心肌梗死面积(IS)和细胞凋亡指数(AI),PTEN活性及其蛋白表达,磷酸化JAK2(p-JAK2)、磷酸化STAT3(p-STAT3)以及凋亡相关蛋白活化的半胱酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(cleaved caspase-3)的表达水平.多组间数据比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验.结果 与S组比较,I/R组和IPO组血清CK-MB水平及PTEN活性升高,PTEN和cleaved caspase-3表达上调(t=2.997～ 7.702,均P＜0.05);与IPO组比较,BpV+IPO组血清CK-MB水平、IS和AI及PTEN活性降低,p-JAK2和p-STAT3的表达上调,cleaved caspase-3的表达下调[分别为3 003±613比1 247± 440、42％±8％比53％±6％、21％±3％比33％±6％、(584±78)比(918±136) pmol、1.73±0.29比1.06±0.24、1.75±0.19比1.01±0.16、1.6±0.4比2.2±0.5,t=2.837～9.249,均P＜0.05].I/R组与IPO组,BpV+I/R组与I/R组比较上述指标差异无统计学意义.结论 PTEN抑制可通过激活JAK2/STAT3信号通路从而恢复缺血后处理对糖尿病再灌注损伤心肌的保护作用.
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儿童1型糖尿病合并普通变异型免疫缺陷综合征并携带信号转导与转录激活因子3基因新突变一例并文献复习
目的探讨1例儿童1型糖尿病合并普通变异型免疫缺陷综合征（CVID）致病基因并复习相关文献。方法分析2015年7月我院收治的1例1型糖尿病合并CVID的儿童患者的临床特点并抽提相关家系成员的基因组DNA，全外显子组测序并用Sanger测序验证。结果该患者基因检测证实信号转导与转录激活因子3（STAT3）基因存在杂合错义新生突变c.1073T>C, P.Leu358Ser，该突变位于“DNA结合域”中，经SIFT、PloyPhen等功能软件预测，该变异可能影响STAT3蛋白结构域功能。结论本患者可能为第1例中国儿童1型糖尿病合并CVID患者，且携带STAT3基因新生突变，拓宽了STAT3基因突变的表型谱。
关键词： 糖尿病 1型 免疫缺陷综合征 信号传导与转录激活因子3 基因突变 -
STAT3抑制剂S3I-201对实验性肾小管间质纤维化的保护作用
目的 探讨STAT3抑制剂S3I-201对小鼠实验性肾小管间质纤维化的保护作用.方法 采用单侧输尿管梗阻手术的方法建立肾小管间质纤维化模型.将实验小鼠随机分为药物假手术组(Sham+ S3I-201),安慰剂假手术组(Sham+ Vehicle),药物造模组(UUO+ S3I-201),安慰剂造模组(UUO+ Vehicle)4组,通过腹腔注射S3I-201溶液(药物)或0.05％ DMSO PBS(安慰剂)给药,每天给药一次.造模第7天时留取肾脏标本,用Masson染色和颜色面积测算法评估胶原蛋白沉积的情况.用qRT-PCR法检测肾组织内趋化因子配体16 (CXCL16),白介素-1β(IL-1β),细胞间黏附分子1(ICAM-1),转化生长因子-β(TGF-β),肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA表达,用免疫组化法染色和免疫印迹法检测PDGFRβ蛋白在梗阻肾脏内的表达.结果 UUO+ Vehicle小鼠的肾间质胶原蛋白沉积显著高于Sham+ Vehicle组(P＜0.05).UUO+ Vehicle小鼠肾组织CXCL16,IL-1β,ICAM-1,TGF-β,TNF-α的mRNA表达显著高于Sham+ Vehicle组(P＜0.05),UUO+ Vehicle小鼠肾组织血小板来源生长因子受体β(PDGFRβ)蛋白表达显著高于Sham+ Vehicle组(P＜0.05).经过S3I-201治疗7d后,UUO+ S3I-201小鼠的上述各项指标均显著低于UUO+ Vehicle(P ＜0.05).结论 S3I-201通过抑制多种细胞因子的mRNA表达,以及降低PDGFRβ蛋白的表达,减轻实验性肾小管间质纤维化小鼠的肾间质炎症反应,从而发挥肾脏保护作用.
关键词： 纤维化 单侧输尿管梗阻 信号传导与转录激活因子3 S3I-201 -
AG490抑制人胰腺癌细胞侵袭转移的体外研究
目的 探讨Janus激酶抑制剂AG490对高转移潜能人胰腺癌细胞系SW1990体外侵袭转移能力的影响及其机制.方法 用AG490处理SW1990细胞,细胞侵袭测定试剂盒检测细胞侵袭能力,Western blot检测信号传导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达,RT-PCR检测MMP-2 mRNA和VEGF mRNA的表达.结果 20 μmol/L AG490可显著抑制SW1990细胞侵袭能力,侵袭抑制率为(77.67±7.79)%.Western blot显示,p-STAT3、MMP-2和VEGF的蛋白表达在SW1990细胞中明显减低.RT-PCR显示,MMP-2 mRNA和VEGF mRNA在SW1990细胞中亦明显减低.结论 AG490通过阻断STAT3活化,下调MMP-2和VEGF表达,抑制胰腺癌细胞体外侵袭转移能力.阻断STAT3信号转导通路可能为预防和治疗胰腺癌的侵袭转移提供一种新的策略.
关键词： 胰腺肿瘤 信号传导与转录激活因子3 肿瘤侵袭 肿瘤转移 -
珍珠梅黄酮纳米粒抑制人肝癌HepG-2细胞STAT3诱导细胞凋亡
本文研究了珍珠梅黄酮纳米粒(5,2',4'-trihydroxy-6,7,5'-trimethoxyflavone nanoparticle,TTF1-NP)通过STAT3诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的分子机制.MTT法、免疫细胞化学染色和流式细胞术结合Annexin V-FITC/PI检测发现,TTF 1-NP可明显抑制人肝癌HepG-2细胞增殖,诱导细胞凋亡,且抑制作用呈浓度、时间依赖效应.免疫印迹结果显示,TTF1-NP下调survivin、p-STAT3和STAT3表达,上调cleaved caspase 3表达.采用siRNA沉默STAT3、脂质体转染STAT3载体表达质粒过表达STAT3技术,证明TTF1-NP可调控STAT3蛋白的表达,诱导细胞凋亡.结果表明:TTF 1-NP通过抑制STAT3的表达,诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡.
关键词： 珍珠梅 纳米粒 肝细胞癌 信号传导与转录激活因子3 细胞凋亡 -
基于分子对接技术探讨丹参治疗肝损伤的作用机制
目的:利用分子对接技术,探讨丹参治疗肝损伤的作用机制.方法:采用中医药化学数据库和Autodock 4.2软件,将丹参中丹酚酸B、丹酚酸D、丹参素、二氢丹参酮、咖啡酸、隐丹参酮和原儿茶醛等成分分别与枯否细胞表面抗原CD14和信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription,STAT3)进行分子对接.结果:丹酚酸B、丹酚酸D、丹参素、二氢丹参酮、咖啡酸、隐丹参酮和原儿茶醛与CD14结合的自由能分别为-11.20776、-8.78220、-9.82770、-25.92840、-16.43526、-26.13750和-19.90632 kJ/mol,与STAT3蛋白结合的自由能分别为-8.44764、-14.30244、-18.27534、-28.85580、-18.86082、-28.60488和-15.89160 kJ/mol.结论:隐丹参酮、二氢丹参酮、原儿茶醛、咖啡酸与CD14具有较小的自由能,结合作用较强;丹参素、二氢丹参酮、咖啡酸、隐丹参酮与STAT3蛋白具有较小的自由能,结合作用较强.提示丹参治疗脂多糖致肝损伤的作用机制可能为其主要成分与CD14及STAT3蛋白具有较强的结合作用,通过作用于表面受体调控枯否细胞细胞激活及下游STAT3调控STAT3通路,从而对损伤的肝脏起到保护和修复作用.本研究为进一步探讨丹参治疗肝损伤的分子机制提供了参考.
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三转基因银屑病小鼠模型建立与表型分析
目的：尿激酶型纤溶酶激活剂（ PLAU）、尿激酶型纤溶酶激活剂受体（ PLAUR）和信号传导与转录激活因子3（STAT3）是参与银屑病病理发生的重要基因。本文目的是制备皮肤特异性表达PLAU、PLAUR和STAT3三种基因的转基因小鼠，建立可进行性再现银屑病病理进程的小鼠模型。方法将PLAU、PLAUR和STAT3基因分别插入牛角蛋白5启动子（ BK5）下游，构建转基因表达载体，通过显微注射法建立在皮肤组织同时高表达PLAU、PLAUR和STAT3三种基因的转基因C57BL／6J小鼠。利用PCR法鉴定转基因小鼠的基因型，Western blot检测基因表达水平，HE染色观察皮肤病理表型。结果 PLAU、PLAUR和STAT3三种基因在选定的转基因小鼠皮肤组织均有明显表达；转基因小鼠与同龄野生型小鼠相比表皮状态差，炎症明显；4月龄的转基因小鼠真皮变簿，表皮过度角化、棘层增厚，毛囊减少、发育异常、部分毛囊内未见毛干，角化不全区域内可见Munro氏小脓肿，真皮炎细胞浸润。结论建立了稳定传代的皮肤特异性表达PLAU、PLAUR和STAT3基因的转基因小鼠品系，转基因小鼠具有进行性的银屑病表型，可以作为多病因综合银屑病小鼠模型。
关键词： 银屑病 信号传导与转录激活因子3 尿激酶型纤溶酶激活剂 转基因小鼠 -
砷对人正常膀胱上皮细胞信号传导与转录激活因子3 mRNA表达的影响
目的 研究亚砷酸钠对人正常膀胱上皮(SV-HUC-1)细胞中信号传导与转录激活因子3(STAT3) mRNA表达的影响.方法 将处于对数生长期的SV-HUC-1细胞分别进行急性染毒[暴露于含终浓度为0(对照)、1、2、4、8、10 μmol/L亚砷酸钠的培养基染毒24 h]和慢性染毒[以含终浓度为0(对照)、0.5 μmol/L亚砷酸钠的培养基染毒40代].采用逆转录PCR(RT-PCR)方法检测细胞STAT3 mRNA表达情况.结果 与对照组比较,4、8、10 μmol/L亚砷酸钠暴露组SV-HUC-1细胞内STAT3 mRNA的表达水平均升高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,SV-HUC-1细胞内STAT3 mRNA的表达水平呈先升高后下降的趋势.0.5 μmol/L亚砷酸钠慢性暴露组SV-HUC-1细胞内STAT3mRNA的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 砷可能通过调控STAT3的表达而在砷诱导的SV-HUC-1细胞恶性转化中发挥一定作用.
关键词： 亚砷酸钠 人膀胱上皮永生化细胞 信号传导与转录激活因子3 -
JAK/STAT通路及其阻断剂AG490在淋巴瘤中的研究进展
JAK/STAT是多种细胞因子和生长因子信号转导的重要途径，参与细胞增殖、分化以及免疫调节等多个过程，在肿瘤中的持续性激活可促进肿瘤的发生发展。目前研究发现在淋巴瘤中有STAT3异常表达和活化，其活化与肿瘤生长、侵袭及转移有关。AG490是JAK2抑制剂，可有效地抑制其下游的STAT的活化，阻断JAK/STAT信号转导通路。既往研究证实AG490能抑制淋巴瘤细胞的增殖，促进其凋亡，可提高某些化疗药物的敏感性。本文就JAK/STAT通路及其阻断剂AG490在淋巴瘤中的研究进展作一综述。
关键词： JAK激酶 信号传导与转录激活因子3 AG490 淋巴瘤 肿瘤治疗 -
STAT3和VEGF在皮肤恶性黑色素瘤组织中的表达及临床意义
目的 探讨信号传导与转录激活因子3和血管内皮生长因子在皮肤恶性黑色素瘤中的表达及临床意义.方法 采用组织芯片免疫组化学S-P法、免疫印迹法检测信号传导与转录激活因子3及血管内皮生长因子在35例皮肤恶性黑色素瘤、30例色素痣组织中的表达情况.结果 在皮肤恶性黑色素瘤组织中,信号传导与转录激活因子3、血管内皮生长因子的表达阳性率分别为65.7％、60.0％,均明显高于在色素痣中表达的阳性率(P＜0.01).皮肤恶性黑色素瘤中信号传导与转录激活因子3和血管内皮生长因子表达均与肿瘤的细胞生长、浸润深度和淋巴结转移呈正相关(P＜0.05);信号传导与转录激活因子3和血管内皮生长因子的表达呈显著正相关(P＜0.001).结论 信号传导与转录激活因子3可能通过上调血管内皮生长因子的表达,促进皮肤恶性黑色素瘤组织中新生血管的形成,与肿瘤生长、侵袭和转移呈密切相关.为皮肤恶性黑色素瘤的靶向性治疗提供新思路.
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TN-C在小细胞肺癌中的表达及STAT3对TN-C表达的影响
目的:探讨小细胞肺癌(SCLC)组织和小细胞肺癌细胞(H446)中肌糖蛋白-C(TN-C)的表达及STAT3对TN-C表达的影响.方法:应用免疫组化法检测58例小细胞肺癌和17例癌旁正常组织中TN-C的表达水平,应用RT-PCR和Western blotting法检测STAT-siRNA和STAT3过表达的H446细胞中TN-C的表达水平.结果:(1)小细胞肺癌组织中TN-C的表达水平显著高于癌旁正常组织(P＜0.05);(2)在H446细胞中,TN-C和STAT3均呈现高表达;(3)STAT3-siRNA处理的H446细胞中STAT3和TN-C的表达均显著降低(P＜0.05),而STAT3过表达的H446细胞中STAT3和TN-C的表达均显著上调(P＜0.05).结论:TN-C在小细胞肺癌中的表达上调,可能受到STAT3的调控.
关键词： 小细胞肺癌 信号传导与转录激活因子3 肌糖蛋白-C -
消痰通腑方对结直肠癌前病变模型小鼠结直肠黏膜上皮NF-κB/IL-6/STAT3和AICD蛋白表达水平的影响
目的 探讨消痰通腑方对结直肠癌前病变模型小鼠结直肠黏膜上皮核转录因子-κB (NF-κB)/白介素-6(IL-6)/信号传导与转录激活因子3(STAT3)和活化诱导胞嘧啶核苷脱氨酶(AICD)蛋白表达水平的影响.方法 C57BL/6小鼠90只,按随机数字表法分为空白组、模型组、西药组(柳氮磺胺吡啶组)、中药组(消痰通腑方组)和中西医结合组(柳氮磺胺吡啶加消痰通腑方组).除空白组外,其余四组采用AOM/DSS“四步三循环法”造模.观察各组小鼠一般状况及结直肠黏膜上皮病理情况,计算结直肠癌前病变成瘤率,Western blotting法检测造模过程中(6周、14周、18周)小鼠结直肠黏膜上皮中NF-κB/IL-6/STAT3及AICD的蛋白表达水平.结果 运用消痰通腑方后,小鼠一般状况较模型组好.中西医结合组的成瘤率(33.33％)低于模型组成瘤率(50.00％).在14周和18周,与西药组比较,中药组和中西医结合组的NF-κB表达水平变化不显著,而IL-6、STAT3和AICD表达水平均下调;与中药组比较,中西医结合组在IL-6和STAT3表达上差异不明显,但AICD表达显著低于中药组.结论 消痰通腑方能够改善小鼠一般状况,降低结直肠癌前病变的发生率,下调结直肠癌前病变小鼠直肠黏膜上皮中IL-6/STAT3蛋白的表达水平,下调AICD蛋白表达水平,此作用途径可能是其降低结直肠癌前病变发生率、预防结直肠癌发生的机制之一.
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瘦素对TRAIL诱导大鼠肝星状细胞凋亡的影响及机制研究
目的：了解瘦素对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导肝星状细胞（HSC）凋亡的影响及调控机制。方法MTT比色法、流式细胞术检测瘦素对外源性TRAIL诱导HSC-T6细胞增殖和细胞凋亡的影响；采用Western印迹检测信号传导与转录激活因子3（STAT3）、磷酸化STAT3（pSTAT3）、Bcl-2。结果TRAIL抑制HSC-T6细胞增殖、诱导HSC-T6细胞凋亡，而瘦素使TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡明显减少（P＜0．05）；当TRAIL诱导HSC-T6细胞凋亡时加入瘦素，pSTAT3、Bcl-2表达上调。结论瘦素可以使外源性TRAIL诱导的HSC-T6细胞凋亡减少，可能与瘦素促使STAT3磷酸化，Bcl-2表达上调有关。
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上调双特异性磷酸酶2表达对胶质瘤细胞增殖凋亡及STAT3信号通路的影响
目的: 探讨双特异性磷酸酶2(DUSP2)基因对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制.方法: 构建DUSP2过表达慢病毒载体,筛选出DUSP2稳定过表达的胶质瘤细胞株,空载慢病毒转染并筛选后的胶质瘤细胞作为对照.采用CCK8细胞毒性实验和克隆形成实验检测上调DUSP2表达后胶质瘤细胞增殖能力的变化;蛋白质印迹法检测DUSP2、STAT3、p-STAT3(Tyr705/Ser727)、bcl-2、p53等蛋白表达水平.结果: 慢病毒载体感染细胞并筛选后,荧光显微镜下观察显示荧光表达效率在90%以上.蛋白质印迹结果显示DUSP2稳定过表达的胶质瘤细胞(实验组)中DUSP2表达较对照组明显上调.CCK8细胞毒性实验结果表明,实验组细胞活力较对照组明显下降;克隆形成实验结果显示,实验组细胞克隆形成数明显少于对照组.蛋白质印迹结果表明,实验组细胞中p-STAT3(Tyr705/Ser727)及bcl-2表达显著下调,p53表达上调.结论: 上调DUSP2的表达可显著抑制胶质瘤细胞的增殖,并促进其凋亡,其机制可能与DUSP2抑制了STAT3(Tyr705/Ser727)信号通路的磷酸化水平有关.
关键词： 双特异性磷酸酶2 信号传导与转录激活因子3 神经胶质瘤 -
STAT3 Y705与S727磷酸化水平的相互调控
目的: 明确信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)中Y705与S727在磷酸化过程中的相互作用.方法: 通过构建STAT3 Y705F和S727A两个磷酸化位点突变的质粒,将其分别转染至TSC2-/-MEF细胞中,蛋白质印迹法检测STAT3 Y705F对STAT3 S727磷酸化水平和STAT3 S727A对STAT3 Y705磷酸化水平的影响.结果: 基因测序结果显示编码丝氨酸的TCC突变为GCC,编码酪氨酸的TAC突变为TTC;蛋白质印迹检测结果显示转染STAT3 Y705F组中STAT3 Y705的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 Y705F下调STAT3 S727磷酸化水平;转染STAT3 S727A组中STAT3 S727的磷酸化水平显著低于转染HA-STAT3组,且STAT3 S727A下调Y705磷酸化水平.结论: STAT3中Y705与S727两个磷酸化位点具有协同作用.
关键词： 信号传导与转录激活因子3 STAT3Y705 STAT3S727 突变 磷酸化
