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γ线照射小鼠胸腺组织基因表达转录谱分析
目的 探讨6 Gy γ线照射后不同时间小鼠胸腺组织基因表达转录谱的动态变化.方法 应用快速高通量的cDNA基因芯片技术进行研究.结果 ①随照射后时间推移,差异表达基因数目和种类逐渐减少,如照射后1、6、14和28 d差异基因数量分别为878、318、162和2n5;②辐射所诱导的胸腺组织差异表达基因广泛涉及细胞周期、免疫和应激、细胞凋亡、细胞信号转导、转录调节、DNA合成修复和重组、细胞骨架、离子通道和运输、代谢、蛋白翻译和合成、发育、细胞分化多个方面;③照射后对某些重要差异表达基因的分析表明,与细胞周期相关的基因有5个(上调3个:CyclinG、Anxal、Fgf1,下调2个:Cdc2a、Cde25b);与免疫应激相关的5个(上调4个:IL-18、Casp1、IL-15、IL-7,下调1个:Cd28);与细胞凋亡相关的7个(上调4个:Casp1、Anxal、Perp、IL-7,下调3个:Pten、Api5、Fas).结论 6 Gy γ线照射后,小鼠胸腺组织差异表达基因随照射后时间延长不仅涉及多个靶点、多个层次,显示出多样性变化的特点,而且显示出时间上的明显差异;从基因水平上揭示了中等剂量照射小鼠胸腺组织损伤修复和重建基因的变化规律,为辐射免疫损伤与修复的分子机制和防治措施的研究提供了新的启示.
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电离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达的影响
目的阐明电离辐射对小鼠EL-4淋巴瘤细胞P21蛋白表达的影响.方法采用免疫细胞化学方法和流式细胞术检测X射线照射对P21蛋白表达的时程和量效变化的影响.结果时程实验结果显示,离体培养的EL-4细胞经4.0Gy X射线照射后,P21蛋白表达在2～72 h(免疫细胞化学方法检测)和8～72 h(流式细胞术检测)明显增高(分别为P＜0.01、P＜0.001).量效实验结果显示,X射线照射后24h,P21蛋白表达在0.5～6.0 Gy(免疫细胞化学方法检测)和1.0～4.0Gy(流式细胞术检测)明显增高(分别为P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001).结论X射线能诱导P21蛋白表达增高,在一定范围内存在时间和剂量依赖关系.
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低剂量辐射对小鼠睾丸生精细胞中细胞色素c和caspase-3表达的影响
目的研究低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞细胞色素c(Cyt c)和caspase-3蛋白表达的影响.方法采用免疫组化法(SABC法),观察低剂量X射线照射后,小鼠睾丸各类生精细胞Cyt c和caspase-3表达的剂量与时程效应关系.结果0、0.025、0.05、0.075、0.1和0.2Gy照射后12 h,小鼠睾丸各类生精细胞不同程度表达Cvt c和caspase-3,以精原细胞和精母细胞表达为主,精子细胞和精子则表达相对较少,而且,随着剂量的增加,表达也增多.0.075 Gy照射后,两种蛋白的表达开始随时间推移而增强,12 h达到峰值,然后下降,但仍高于正常组.结论低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸生精细胞Cyt c和caspase-3蛋白的表达具有一定的剂量和时程效应规律性.
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荧光原位杂交微核技术在辐射生物剂量学的应用研究
目的探讨荧光原位杂交(FISH)微核作为生物剂量计及评价职业受照射人群辐射效应的可行性.方法用137Cs γ射线不同剂量(0.1～2.5Gy)照射离体人外周血细胞,用泛着丝粒探针的FISH技术进行微核分析,拟合剂量效应方程;检测医用X射线工作者的无着丝粒微核率并估算其生物剂量.结果离体照射条件下微核率随吸收剂量增加而增加,以无着丝粒微核增加为主,着丝粒微核仅有轻度增加.微核率与剂量之间的拟合曲线方程,CB微核法:Y=0.005+0.036D+0.011D2,R2=0.99;FISH微核法:Y=0.001+0.035D+0.007D2,R2=0.99.结论FISH微核法优于CB微核法.用FISH微核法对医用X射线工作者的检测结果显示无着丝粒微核率可以用来估算生物剂量.
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电离辐射诱导PC12细胞分化的蛋白质组学分析
目的探索辐射诱导PC12细胞分化的分子机理,筛选神经系统辐射损伤的分子靶标.方法16Gyγ射线照射PC12细胞,照射48 h,提取正常与照射后细胞总蛋白,进行双向电泳分析,并对部分差异表达蛋白质进行质谱鉴定.结果电泳中共发现差异表达蛋白质位点876个,鉴定出表达水平增高的蛋白泛素羧端水解酶L1,表达水平降低的蛋白HP1α类似蛋白.结论应用蛋白质组技术鉴定出部分辐射后差异表达蛋白质,为辐射诱导PC12细胞分化的分子机理研究提供了线索.
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137CSγ射线对体外培养成骨细胞形态与几种细胞因子基因表达的影响
目的观察137Csγ射线照射对体外培养成骨细胞的形态、核浆比与几种细胞因子基因表达的影响.方法取第1代新生SD大鼠头盖骨成骨细胞传代后24h一次接受137Cs γ射线照射,吸收剂量分别为10,25,50 cGy和1,3,6,9,12 Gy.观察各组成骨细胞形态与超微结构改变;Giemsa染色后进行显微形态计量,计算核浆比;细胞培养至14 d抽提细胞内总RNA,RT-PCR方法半定量检测各组细胞IGF-1,OPG,ODF基因mRNA表达量.结果3Gy以上γ射线照射的细胞,胞体变大、变薄,细胞数减少,细胞内细胞器减少,溶酶体增多,核浆比降低,其改变随吸收剂量增加而突出.基因IGF-I、OPG、ODF与OPG/ODF mRNA表达量在1 Gy以上组随吸收剂量增加逐渐降低,与吸收剂量呈明显相关(P＜0.05或0.01).结论137Cs γ射线照射引起成骨细胞形态明显改变,增殖能力降低,核浆比降低,基因IGF-1、OPG、ODF与OPG/ODF mRNA表达量降低.
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咖啡酸苯一酯对人宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用
目的 探讨咖啡酸苯一酯(CAPE)对人宫颈癌HeLa细胞的放射增敏作用.方法 将宫颈癌HeLa细胞经不同浓度的CAPE作用24 h,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法检测细胞抑制效应与CAPE浓度的关系.将HeLa细胞设对照组和药物组,两组均经60 Coγ射线照射0、2、4、6和8 Gy,计数细胞克隆;另将HeLa细胞设对照组、CAPE组、单纯照射组、照射+CAPE组,流式细胞检测技术分析CAPE对细胞周期的影响.结果 CAPE对HeLa细胞的抑制率呈剂量依赖性增加(F=126.49-3654.88,P＜0.01);细胞经60Co γ射线照射后,HeLa细胞克隆存活率随着照射剂量的增加而降低(F=174.42～9422.81,P＜0.01);相同剂量下,药物组的HeLa细胞克隆存活率低于对照组(F=120.14～251.91,P＜0.01);药物组和对照组HeLa细胞的平均致死剂量(D0)为1.45和1.82 Gy、准阈剂量(Dq)为1.89和3.21 Gy,药物组较小,放射增敏比(SER)为1.26＞1;与对照组相比,CAPE组及单纯照射组G2/M期的细胞比例升高(P＜0.01),而在照射+CAPE组则降低(P＜0.01).结论 CAPE通过对人宫颈癌HeLa细胞G2/M期的阻滞及可能抑制细胞亚致死性损伤修复能力,发挥放射增敏作用.
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电离辐射对小鼠骨髓细胞cyclinB1、cdc2基因转录的影响
目的研究X射线全身照射对小鼠骨髓细胞cyclinB1、cdc2基因转录的影响,以探讨电离辐射诱导小鼠骨髓细胞G2期阻滞的分子机理.方法采用流式细胞仪检测了X射线全身照射后小鼠骨髓细胞周期进程的变化.采用半定量RT-PCR方法分别检测cyclinB1、cdc2基因转录水平变化.结果2Gy X射线全身照射后4及12 h G2+M期细胞百分率升高(P＜0.05);0.5～6 Gy照射后12 h G2+M细胞百分率呈剂量依赖性增加(P＜0.05～P＜0.01).2 Gy X射线照射后2～48 h小鼠骨髓细胞cyclinB1转录水平在各个时间点未见明显变化,0.5～6 Gy X射线照射后12 h,骨髓细胞cyclinB1基因转录在各剂量点均未见明显改变;2 Gy X射线照射后小鼠骨髓细胞cdc2转录水平从照后4 h即开始不同程度下降,12 h达低值(为假照射组的46%),照射后48 h开始恢复,0.5～6 GyX射线照射后12 h,骨髓细胞cdc2基因转录水平在各剂量点均明显降低,分别达到假照射组的40%～70%.结论电离辐射可诱导小鼠骨髓细胞发生G2期阻滞,cdc2激酶活性下降在G2期阻滞中起重要作用.
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吩噻嗪衍生物协同放射对HeLa细胞增殖的抑制效应比较研究
目的探讨吩噻嗪衍生物对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用及与放射联合应用抑制肿瘤的协同效应.方法采用MTT法和细胞克隆形成法检测细胞的增殖活性和细胞辐射敏感性.结果比较了6种吩噻嗪衍生物对HeLa细胞增殖的抑制效应,发现化合物α-氯-N-二甲胺基乙基吩噻嗪(PTZD2)、α-三氟甲基-N-二甲胺基乙基吩噻嗪(PTZD3)和α-氯-N-二乙胺基乙基吩噻嗪(PTZD5)的作用比较明显,在10 μmol/L浓度能产生出显著抑制效应,40～50μmol/L浓度作用3和4d,细胞增殖完全被抑制而死亡.PTZD2或PTZD3与放射联合应用,显示出明显抗HeLa细胞增殖的协同效应,10 μmol/L PTZD3对2和4Gy照射细胞的增殖抑制的增强比分别为3.5和1.8.实验结果还表明,在照射前18 h用药的协同作用更加显著.结论吩噻嗪衍生物具有程度不同的抑制HeLa细胞增殖的作用,与放射联合应用具有抗肿瘤的协同效应,而且照射前18 h用药的效应佳.
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电离辐射对三维培养条件下人前列腺细胞形态学表现的影响
目的 研究在三维细胞培养条件下前列腺细胞(RWPE-1)腺泡样结构的形成及电离辐射的影响.方法 采用三维培养RWPE-1细胞,Western blot检测自噬相关基因Beclin 1及p53、p21的变化,制备Beclin 1 RNAi表达载体并感染细胞,免疫荧光染色和共聚焦法检测电离辐射作用后细胞形态学变化.结果 三维培养条件下RWPE-1细胞聚积形成腺泡样结构(Acini),Acini组成细胞出现明显极化,2和5 Gy照射后,Acini结构破坏,少量细胞发生死亡;经Beclin 1基因沉默后,对照组细胞仍呈聚积趋势,2和5 Gy照射后,Acini结构不再形成,细胞发生广泛性死亡.结论 电离辐射抑制RWPE-1细胞Acini结构形成,Beclin 1基因可能在其中发挥一定作用.
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TUNEL与PI双染流式细胞术在细胞周期与细胞凋亡检测上的应用
电离辐射对细胞凋亡和细胞周期的各自影响已见诸多报道.但采用一种方法对凋亡和周期同时进行定量检测的流式细胞术,目前在国内尚未见报道.笔者将TUNEL与PI染色的方法加以结合,借以探讨这一新方法以及该方法所揭示出凋亡与周期阻滞的内在关系.
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NBQX对头部照射大鼠大脑皮质少突胶质前体细胞的保护作用
目的探讨大鼠头部照射后早期大脑皮质少突胶质前体细胞的放射性反应及MK801和NBQX对其保护作用.方法SD大鼠10 Gy单次头部照射后即分别向其脑皮质立体定向注射5mmol/L的MK801和50 mmol/L的NBQX各1 μl,然后用免疫荧光组织化学法分别检测各时间点大脑皮质NG2和04阳性细胞数量.结果和对照组相比,照射组大鼠照射后7 d时大脑皮质NG2和O4阳性细胞数显著增加(P＜0.05);MK801组大鼠照射后各时间点大脑皮质NG2和O4阳性细胞数与照射组大鼠比较差异无统计学意义(P＞0.05);而NBQX组大鼠照射后1和7 d时的大脑皮质NG2和O4阳性细胞数明显多于照射组大鼠(P＜0.05).结论大鼠头部照射后早期大脑皮质少突胶质前体细胞反应性增多,并有时程性变化;NBQX对少突胶质前体细胞早期的放射性损伤有一定的保护作用.
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放射性工作人员血细胞参数与个人剂量水平相关性分析
近年来,随着放射防护技术的发展,放射防护水平不断提高,放射性工作人员在职业过程中的受照剂量已处于较低水平.因此,探讨长期低剂量暴露电离辐射对人体生物学效应的影响,尤其是对造血系统的影响,具有一定的实际意义.
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新乡市医用诊断X射线工作人员防护意识及影响因素分析
从健康的辐射安全文化角度出发,放射工作人员及管理人员对于电离辐射的实践,应具有正确的思维、丰富的知识、准确的判断和强烈的责任心,严格完成与安全有关的任务[1],为了解我市医用诊断X射线工作人员的防护意识及行为表现,尽可能降低放射工作人员受照剂量、保证受检者辐射安全,2001年笔者对新乡市383名医用诊断X射线工作人员进行了有关放射防护知识、态度、行为等问题的问卷调查.
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新乡市医用诊断X射线工作人员防护意识及影响因素分析
从健康的辐射安全文化角度出发,放射工作人员及管理人员对于电离辐射的实践,应具有正确的思维、丰富的知识、准确的判断和强烈的责任心,严格完成与安全有关的任务[1],为了解新乡市医用诊断X射线工作人员的防护意识及行为表现,尽可能降低放射工作人员受照剂量,保证受检者辐射安全,笔者于2001年对新乡市383名医用诊断X射线工作人员进行了有关放射防护知识、态度、行为等问题的问卷调查.
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低剂量电离辐射对放射工作人员甲状腺功能影响的Meta分析
目的 系统评估低剂量电离辐射对我国放射工作人员甲状腺功能的影响.方法 检索自1996—2017年来国内外正式刊物上发表的有关文献,严格按照预先设定的纳入和排除标准筛选文献,终纳入15篇,共计6332人.分析放射工作人员甲状腺功能中血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)和促甲状腺素(TSH)水平.用Stata 14.0软件进行Meta分析.结果 随机效应模型分析结果显示,放射工作人员T3水平的标准化均数差(SMD)为-0.32[95%CI(-0.61,-0.04),P=0.03],与对照组相比有降低的危险性;单个协变量Meta回归对异质性来源进行分析仅显示性别组成与研究间异质性有关,调整研究后方差的解释比率(adjusted R-squared,Adj R2)为29.99%(P=0.03).T4水平的SMD为-0.49[95%CI(-0.94,-0.03),P=0.04],与对照组相比有降低的危险性;单个协变量Meta回归对异质性来源进行分析仅显示性别组成与研究间异质性有关:Adj R2为26.60%(P=0.02).TSH水平的SMD为1.10[95%CI(0.32,1.89),P=0.006],与对照组相比有升高的危险性.结论 长期暴露在低剂量电离辐射环境中可能对放射工作人员甲状腺功能造成不良影响,应该进一步加强对放射工作人员甲状腺的辐射防护.
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唐山市放射工作人员防护行为调查
由于电离辐射对人体可产生损害作用,因此有效的放射防护对保护放射工作人员的健康很重要.目前,国内外对放射工作人员防护行为的调查主要集中在医院临床医生和医护人员这两个工作岗位,且现状不容乐观~([1-4]).许多放射工作人员未经系统的放射卫生防护培训,缺乏必要的放射防护知识.据有关调查显示,介入放射学和手法接骨等实践中由于缺乏必要的防护而导致医务人员放射性损伤时有报道~([5]).本次调查从放射工作人员防护行为这方面来进行研究,从不同的角度进行分析.调查涉及医疗行业和非医疗行业的40多个工作岗位,研究放射工作人员的防护行为.
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个人辐射防护用品防护质量检测结果与评价
目的 通过有效监测个人防护用品防护质量,探讨促进个人防护用品的研制和开发,以保障放射工作人员的健康与安全.方法 应用标准铅片迭代法测量个人防护用品和材料的铅当量厚度,用"mm Pb"表示.共检测了77件产/样品,其中铅橡胶板37件,各类个人防护制品27件,包括防护服12件、防护帽4件、防护围脖5件、防护手套4件和防护面罩2件;其中铅玻璃眼镜13件.结果 铅橡胶板比铅当量分别在0.20～0.39 mm Pb/mm之间,铅橡胶板比铅当量在0.25 mmPb/mm以下有6件,不符合相关标准的要求.个人防护制品和铅玻璃眼镜检测结果表明,实测铅当量均大于标称铅当量.结论 国产和进口的个人辐射防护材料及用品的防护质量是可靠的,但介入防护手套的防护质量有待于提高和改进.
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低剂量电离辐射对放射工作人员眼晶状体影响的Meta分析
目的 综合分析长期低剂量电离辐射对放射工作人员眼晶状体的影响.方法 检索国内外相关数据库,辅以查阅文献,查找1990-2013年发表的关于职业照射对放射工作人员晶状体影响的文献.终纳入Meta分析的中外文文献28篇,总研究对象数17 608人.用Stata 12.0软件做Meta分析,异质性检验用Q检验和I2统计量,发表偏倚识别用漏斗图、Begg秩相关法和Egger线性回归法.结果 放射工作人员眼晶状体混浊和晶状体后囊下混浊的合并比值比及其95％的可信区间分别为2.51(2.01,3.13)和4.03(2.77,5.85).结论 在目前的职业防护状况下,低剂量电离辐射对放射工作人员眼晶状体可造成不良影响,且晶状体后囊下混浊所占比重上升,应加强眼晶状体的辐射防护.
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137Cs γ射线诱导人外周血线粒体DNA缺失的时间和剂量-效应关系
目的 研究137Csγ射线诱导的人外周血线粒体DNA 4934 bp和4977 bp缺失的时间和剂量·效应,并探讨其在电离辐射受照者剂量估算中的应用意义.方法 采集5名健康成人外周血进行137Cs γ射线离体照射,取其中1份血样给予5 Gy照射后分别培养2、24、48和72 h,另4份血样均经6等分后分别给予0、0.5、1、2、5和10 Gy照射,孵养2h后采用实时荧光定量PCR方法和凝胶电泳,检测人外周血线粒体DNA 4934 bp(mtDNA 4934 bp)和4977 bp(mtDNA 4977 bp)缺失的表达水平,并用Curve Expert 1.4软件拟合剂量·效应曲线.结果 137Cs γ射线照射离体人血后,诱发的mtDNA 4934 bp缺失和mtDNA 4977 bp缺失在照后2h即升高,mtDNA 4934 bp缺失水平在照后2h和48 h有相对表达高点(t=10.782和8.966,P＜0.05)；而mtDNA 4977 bp缺失水平在照后48 h表达高(t =7.433,P＜0.05).0.5～10 Gy的137Csγ射线照射诱发的mtDNA 4934 bp缺失(t=2.895 ～8.105,P＜0.05)和mtDNA 4977 bp缺失(t=3.006～7.715,P＜0.05)均随照射剂量增加.其中,mtDNA 4977 bp缺失在相同照射剂量下变化更大,尤其是在10 Gy剂量照射时,二者差异更明显(t=2.919,P＜0.05),即对于大剂量照射,mtDNA 4977 bp缺失可能更为灵敏,但是个体差异较mtDNA 4934 bp缺失大.拟合的剂量-效应曲线回归方程分别为Y11=1.178+0.1219D(R2=0.9269,mtDNA 4934 bp缺失)和Y2=1.2578 +0.1933D(R2 =0.9016,mtDNA 4977 bp缺失).结论 137Csγ射线诱发的线粒体DNA片段缺失与辐射剂量有良好的数学回归关系,有可能为照射后生物剂量快速估算和预后评估提供依据.
