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蛋白激酶D1在大鼠骨髓源性内皮祖细胞中的促血管新生作用
目的：探讨蛋白激酶 D1（PKD1）对大鼠骨髓源性内皮祖细胞（EPCs）黏附、迁移、增殖、血管形成能力及内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）表达的影响。方法体外培养、分离和鉴定大鼠骨髓源性 EPCs，观察 PKD1及其特异性阻断剂CID755673对 EPCs 的黏附、迁移、增殖、血管形成能力的影响，以及对 EPCs 中 eNOS 的 mRNA 表达和蛋白表达的影响。结果 EPCs 体外细胞培养实验表明，PKD1可明显促进EPCs 的黏附、迁移和增殖，提升 EPCs 的血管形成能力，上调EPCs 中 eNOS 的 mRNA 表达和蛋白表达水平。结论PKD1具有调控 EPCs 促血管新生的作用，其促血管新生的作用可能以一种依赖 eNOS 的方式进行。
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诱导型一氧化氮合成酶参与大鼠心脏缺血后处理延迟相的保护作用
目的：探讨心肌缺血后处理的延迟相保护作用，以及诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）在延迟相保护作用中的意义。方法160只大鼠随机分为5组：缺血再灌注组（I／R 组）、缺血后处理组（IPO 组）、缺血后处理＋1400W （iNOS 阻断剂）组（IPO ＋1400W 组）、缺血再灌注＋1400W 组（I／R ＋1400W 组）和假手术组，每组32只，分别接受3、24、48、72 h 再灌注（每时间点8只）。测定各组心肌梗死面积与肌酸激酶（CK）活性，检测磷酸化内皮型一氧化氮合酶（p-eNOS）与 iNOS 的表达。结果再灌注3 h，IPO 组与 I／R 组相比，左室梗死面积明显减少[（18．0±2．3）％ vs （30．7±3．1）％，P ＜0．05]；再灌注72 h，IPO 组与 I／R 组相比梗死面积差异有统计学意义[（25．7± 1．1）％ vs （34．9±0．8）％，P ＜0．05]；各组 CK 活性的差异与梗死面积的差异一致。再灌注3、24 h，IPO 组与 I／R组相比，p-eNOS 表达增多；再灌注48、72 h，IPO 组 iNOS 表达增多。结论缺血后处理具有延迟相心肌保护作用， iNOS 在后处理延迟相心肌保护中必不可少。
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小凹蛋白与内皮型一氧化氮合成酶在大鼠肝硬化组织中的表达
目的 探讨小凹蛋白Caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶eNOS在大鼠肝硬化组织中的异常表达及其意义.方法 构建二甲基亚硝胺(DMN)致肝纤维化大鼠模型,在造模4周后观察肝纤维化程度.免疫组织化学染色检测30例大鼠肝硬化肝组织和3C例正常大鼠肝组织中Caveolin-1和eNOS的细胞定位;Western Blot检测Caveolin-1和eNOS的蛋白表达水平变化.结果 Caveolin-1和eNOS均主要分布于肝窦内皮细胞中,Caveolin-1在肝硬化组表达阳性率为90%,对照组为37%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);eNOS在肝硬化组表达阳性率为30%,对照组为66%,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Western Blot检测Caveolin1在肝硬化组织中较正常肝组织中表达明显增强;eNOS在肝硬化组织中呈低水平表达,较正常肝组织中表达明显减少.结论 肝硬化肝窦内皮细胞中Caveolin-1的异常表达促进eNOS-Caveolin-1复合物的生成,结合形式的eNOS活性降低,导致NO合成减少,肝内血管阻力持续增加,从而导致了门静脉高压症的形成.
关键词： 小凹蛋白 内皮型一氧化氮合成酶 肝硬化 门静脉高压 -
子宫内膜异位症异位内膜组织中内皮型一氧化氮合成酶、血管内皮生长因子和CD34的表达
目的:探讨子宫内膜异位症(Ems)异位内膜组织中内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、血管内皮生长因子(VEGF)和CD34的表达情况.方法:采用免疫组织化学方法分别测定38例Ems异位内膜与40例正常对照组子宫内膜组织中eNOS、VEGF和CD34的表达,分析异位内膜组织中eNOS、VEGF表达的相关性.结果:Ems异位内膜组织中eNOS、VEGF和CD34的表达较正常内膜组织的表达明显增高;在Ems异位子宫内膜组织中,eNOS和VEGF的表达成正相关(r=0.984,P<0.05).结论:异位内膜组织的侵袭力增强及血管生成可能与eNOS、VEGF高表达有关.
关键词： 子宫内膜异位症 内皮型一氧化氮合成酶 血管内皮生长因子 微血管密度 免疫组织化学 -
霉茶总黄酮对原发性高血压大鼠胸主动脉功能的影响
目的 研究霉茶总黄酮对原发性高血压大鼠(SHRs)胸主动脉功能的影响及其作用机制.方法 SHRs随机分为模型组,总黄酮低(90 mg/kg)、中(180 mg/kg)、高剂量(360 mg/kg)组和复方罗布麻片(50 mg/kg)组.每天给药两次,连续7周.测定大鼠血压,胸主动脉舒张功能,血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)含量、血管内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因的表达.结果 霉茶总黄酮能降低SHRs血压;升高血清中NO含量,降低ET-1含量;上调组织中eNOS基因.结论 霉茶总黄酮能改善SHRs血管舒张功能,其机制与上调胸主动脉eNOS基因表达水平,增加NO的合成有关.
关键词： 霉茶总黄酮 原发性高血压 一氧化氮 内皮型一氧化氮合成酶 -
内皮型一氧化氮合成酶基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病的关系
探讨内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因Glu298Asp多态性与糖尿病肾脏病(DKD)的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)后限制性内切酶消化技术,对在我院就诊的326例中国汉族2型糖尿病(T2DM)患者和215名健康体检者进行Glu298Asp基因型分析.根据尿白蛋白排泄率(UAER)水平将T2DM患者分为3组:UAER正常组(DM组)102例,微量白蛋白尿组(MAU组)81例,临床肾病组(DKD组)143例.选择同时期本院健康体检者215名为对照组.用多因素Logistic回归分析法判定DKD的独立危险因素.结果 DKD组与对照组Glu298Asp基因型频率分布存在显著性差异(GG 72.72％、GT 26.57％、TT0.70％比GG 83.41％、GT 16.10％、TT0.49％,P=0.019),而DM组和MAU组则与对照组无差异(P＞0.05).Logistic回归分析显示,年龄、平均动脉压、GT基因型是DKD发生的独立危险因素.结论 eNOS Glu298Asp基因与中国汉族T2DM患者DKD具有相关性.
关键词： 糖尿病肾脏病 内皮型一氧化氮合成酶 基因多态性 -
丁苯酞对局灶性脑梗死大鼠氧化应激及内皮型一氧化氮合酶脱耦联的影响
目的 观察丙二醛(MDA)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在局灶性脑梗死大鼠的动态表达及丁苯酞干预效应.方法 将54只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.每组再分为3个亚组:1d组、3d组和7d组,每亚组6只.模型组和治疗组采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),假手术组只分离不结扎.治疗组在大鼠苏醒后以丁苯酞植物油灌胃,假手术组和模型组同法给予等量植物油灌胃.应用硫代巴比妥酸(TBA)法检测脑组织MDA含量,Western blot检测脑组织eNOS表达,并对两者进行相关分析.结果 MDA含量随时间延长从12.005±0.608(模型组)逐渐降至7.315±0.404(模型组).各时间点模型组12.005 ±0.608(1 d)较治疗组9.323±0.727(1 d)增高;治疗组9.323 ±0.727(1 d)较假手术组4.043 ±0.274(1 d)增高.差异均有统计学意义(P＜0.05).eNOS含量随时间延长从0.136 ±0.009(模型组)逐渐增加至0.241 ±0.012(模型组);各时间点模型组0.136±0.009(1 d)较假手术组0.101 ±0.012(1 d)增高,治疗组0.199±0.010(1 d)较模型组0.136 ±0.009(1 d)增高,差异均有统计学意义(P＜0.05).且MDA含量和eNOS表达呈负相关(P＜0.05).结论 丁苯酞通过减少脑缺血大鼠氧化应激损伤及eNOS脱耦联,发挥神经保护作用,且MDA和eNOS呈负相关.
关键词： 脑缺血 丁苯酞 氧化应激 丙二醛 内皮型一氧化氮合成酶 -
内皮型一氧化氮合成酶与蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛关系的研究进展
蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)是由于多种原因造成血液进人颅内或椎管内蛛网膜下腔所引起的综合征.脑血管痉挛(cerebralvasospasm,CVS)是蛛网膜下腔出血后严重的并发症之一,具有较高的致死率和致残率[1~3],至今尚无特效药物预防或治疗.
关键词： 内皮型一氧化氮合成酶 蛛网膜下腔出血 脑血管痉挛 -
内皮型一氧化氮合成酶T786C、白细胞介素-6C572G基因多态性与动脉瘤性蛛网膜下腔出血的相关性研究
目的 探讨eNOS T786C、IL-6 C572G单核苷酸多态性与动脉瘤性蛛网膜下腔出血的相关性.方法 收集2014年1月-2016年2月就诊于内蒙古包头市中心医院的动脉瘤蛛网膜下腔出血患者71例及非蛛网膜下腔出血或健康人群142例基线资料[实验组与对照组1∶2,性别相同,年龄35～81岁,平均年龄(55.07±9.98)岁],采集抗凝血标本,应用聚合酶链式反应(PCR)和限制性片段长度多态性(RFLP)分析方法检测实验组及对照组基因型,实验组和对照组之间基因型分布和等位基因频率分布比较采用x2检验,明确各基因型与散发颅内破裂动脉瘤蛛网膜下腔出血疾病之间的相关性.结果 实验组与对照组eNOS T786C、IL-6 C572G各基因型、等位基因无明显差异(P＞0.05);实验组与对照组高血压病、长期吸烟人数有明显差异(P＜0.05),其余指标均无明显差异(P＞0.05).结论 eNOS T786C、IL-6 C572G基因多态性与破裂的动脉瘤性蛛网膜下腔出血无关.
关键词： 动脉瘤 蛛网膜下腔出血 内皮型一氧化氮合成酶 白细胞介素-6 基因多态性 -
一氧化氮和内皮型一氧化氮合成酶与血管迷走性晕厥发病的关系
目的 探讨一氧化氮和内皮型一氧化氮合成酶与儿童血管迷走性晕厥发病的关系.方法 血管迷走性晕厥患儿14例(A组),其他原冈引起晕厥患儿10例(B组),健康志愿者20例(C组).于倾斜试验(HUT)前和倾斜不同时间测定A组与B组患儿的血浆一氧化氮(NO)水平,同时对3组儿童进行内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因G894T多态性检测.结果 ①A组患儿出现阳性反应时血浆NO水平较平卧时显著升高(76.7±9.6vs 90.0±11.4μmol/L,P＜0.05);②A组患儿存症状好转后血浆NO水平较试验前显著降低(82.7±9.2 vs61.5±6.9 μmol/L,P＜0.01);③B组患儿倾斜时血浆NO水平较平卧时差异无显著性;④A,B两组患儿的血压、心率变化与NO水平无显著相关性;⑤A组患儿eNOS基因G894T突变型基因频率显著高于B组与C组(42.9%vs10%,P＜0.05).结论 倾斜体位时血浆NO水平异常升高可能参与了血浆血管迷走性晕厥的发病机制,而其升高水平可能与eNOS基因G894T多态性表达有关.
关键词： 血管迷走性晕厥 一氧化氮 内皮型一氧化氮合成酶 直立倾斜试验 儿童 -
脑缺血再灌注大鼠外周血EPCs与VEGF、bFGF、eNOS水平变化及相关性
目的 探讨大鼠脑缺血再灌注后外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)、血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)及内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)水平变化及相关性.方法 SD大鼠随机分为正常空白对照组、假手术组、脑梗死组、糖尿病组、糖尿病假手术组和糖尿病缺血再灌注组.链脲佐菌素诱导制作糖尿病模型,线栓法制作脑缺血再灌注模型.流式细胞仪测定EPCs数量.ELISA法测定VEGF、bFGF及eNOS的数量.结果 脑梗组EPCs、VEGF、bFGF和eNOS数量较正常组及假手术组增高(P<0.01),糖尿病脑梗组EPCs较糖尿病组下降(P<0.05),而VEGF、bFGF和eNOS数量则升高(P<0.05).EPCs与VEGF和bFGF数量变化有相关性(P<0.05),与eNOS数量变化相关性无统计学意义.结论 大鼠脑缺血再灌注后外周血EPCs与VEGF和bFGF水平变化存在相关性,它们可能共同影响着缺血性脑血管病的一些病理生理过程.这种变化及相关性对于估测脑梗死患者病情程度和预后有一定的指导意义.
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Caveolin-1与内皮型一氧化氮合成酶在门静脉高压症性血管病变中的表达
目的 检测肝硬化门静脉高压症病人的脾血管中小凹蛋白caveolin-1、内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)的mRNA及蛋白表达水平的变化,探讨caveolin-1的表达对eNOS的影响.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测27例肝硬化门静脉高压症病人脾静脉组织和 20 例脾外伤病人正常脾静脉血管中caveolin-1和eNOS的mRNA;Western Blot检测caveolin-1 和eNOS的蛋白表达水平变化.结果 肝硬化门静脉高压症组脾静脉Caveolin-1mRNA与对照组脾静脉组织表达分别为(0.73±0.18)、(0.38±0.12),两组比较差异有显著性(p<0.05);肝硬化门静脉高压症组脾静脉eNOS mRNA为(0.23±0.11),显著低于对照组内脾静脉组织eNOS mRNA的表达(0.47±0.15) (p<0.05).Western Blot检测caveolin-1 在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中较正常脾静脉中表达明显增强;eNOS在肝硬化门静脉高压症组脾静脉中呈低水平表达,较正常脾静脉中表达明显减少.结论 肝硬化门静脉高压症组脾静脉中caveolin-1 的过量表达及eNOS表达降低,导致NO合成减少,脾静脉血管阻力持续增加,及caveolin-1致静脉血管病理改变作用,共同作用致脾静脉出现对门静脉高压失代偿改变.
关键词： Caveolin-1 内皮型一氧化氮合成酶 肝硬化 门静脉高压 -
线粒体定位eNOS对肺动脉内皮细胞ROS和NO的调控研究
目的 探讨肺动脉内皮细胞线粒体定位的eNOS减少与新生儿持续性肺动脉高压(persistent pulmonary hypertension of the new born,PPHN)的相关性.方法 PPHN的胎羊模型并分离肺动脉内皮细胞,运用免疫荧光、Western Blot和特异性靶向eNOS(endothelial nitric oxide synthase)等方法,比较正常胎羊和持续性肺动脉高压的胎羊来源肺动脉内皮细胞的eNOS线粒体定位与胞内活性氧ROS (reactive oxygen species)和一氧化氮NO(nitric oxide)的关系.结果 在持续性肺动脉高压来源的肺动脉内皮细胞中,Western Blot结果显示线粒体定位的eNOS减少;用Mito-HE荧光探针标记肺动脉内皮细胞中ROS,显示在PPHN的肺动脉内皮细胞中ROS增加;在293HEK细胞过表达不同靶向的eNOS,在线粒体过表达eNOS可减少胞内ROS含量.结论 线粒体定位的eNOS可能通过ROS调控胞内NO的量,从而影响血管的舒张.我们的研究揭示了PPHN发病新的机制并为PPHN治疗提供了潜在的靶向位点.
关键词： 新生儿持续性肺动脉高压 内皮型一氧化氮合成酶 活性氧 一氧化氮 肺动脉内皮细胞 -
前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞中VEGF和eNOS表达的影响
目的：研究前列地尔对缺氧损伤的人肺微血管内皮细胞（HPMECs）中血管内皮生长因子（VEGF）和内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）表达的影响。方法：将HPMECs分为A组（正常培养）、B组（3％O2培养）、C组（3％O2培养+15μg/L前列地尔）及D组（3％O2培养+45μg/L前列地尔），相应培养24 h。观察各组细胞形态，MTT比色法检测细胞活力（以吸光度计），流式细胞仪检测细胞凋亡率，Western blot法检测细胞中VEGF、eNOS相对表达量。结果：A、D组细胞密度较高，B、C组细胞密度较低。与A组比较， B、C、D组细胞活力降低、凋亡率升高、VEGF与eNOS表达增强、eNOS/VEGF减少（P＜0.05）。与B组比较，C、D组细胞活力增加、VEGF表达减弱（P＜0.05）；D组细胞凋亡率降低、eNOS表达减弱、eNOS/VEGF增加（P＜0.05）。与C组比较，D组细胞凋亡率降低、VEGF表达减弱、eNOS/VEGF增加（P＜0.05）。结论：前列地尔可能通过上调HPMECs的eNOS/VEGF发挥保护作用。
关键词： 前列地尔 缺氧损伤 人肺微血管内皮细胞 血管内皮生长因子 内皮型一氧化氮合成酶 -
Z-没药甾酮对急性血瘀模型大鼠凝血和血管内皮功能的改善作用及其机制研究Δ
目的：研究Z-没药甾酮（Z-GL）对急性血瘀模型大鼠凝血和血管内皮功能的改善作用及其机制。方法：将40只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性组（阿司匹林片，50 mg/kg）和Z-GL低、高剂量组（25、50 mg/kg），每组8只，各给药组大鼠每12 h ig相应药物1次，正常组和模型组大鼠ig生理盐水，连续给药7次。第5次给药后，除正常组外其余各组大鼠ih盐酸肾上腺素+冰水刺激复制急性血瘀模型。给药结束后30 min内，取腹主动脉血检测凝血指标[凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）]，并取大鼠颈动脉观察其病理变化。将人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）分为空白组（生理盐水）、模型组（生理盐水）和Z-GL低、高浓度组（25、50μmol/L），培养24 h后，对模型组和Z-GL组细胞进行氧糖剥夺6 h，检测细胞中磷酸化内皮型一氧化氮合成酶（p-eNOS）蛋白表达水平；另取细胞，分组、给药、处理方式同上，检测细胞中一氧化氮（NO）水平。结果：与正常组比较，模型组大鼠PT、TT、APTT缩短，FIB含量增加（P＜0.01），颈动脉内皮受损、血管内皮细胞部分从血管壁脱落；与模型组比较，各给药组大鼠TT、PT、APTT延长，FIB含量减少（P＜0.05或P＜0.01），血管内皮受损程度减轻。p-eNOS蛋白及NO检测结果显示，与模型组比较，Z-GL给药组细胞中p-eNOS蛋白表达及NO水平升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论：Z-GL能有效改善血瘀模型大鼠凝血和血管内皮功能，其机制可能与其激活eNOS、升高细胞内NO水平有关。
关键词： Z-没药甾酮 血瘀证 凝血功能 血管内皮功能 内皮型一氧化氮合成酶 大鼠 人脐静脉血管内皮细胞 -
载脂蛋白E与蛛网膜下腔出血后脑组织中内皮型一氧化氮合成酶表达的关系
目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)与蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑组织中内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达的关系.方法 采用枕大池注血法构建小鼠蛛网膜下腔出血模型.将30只apoE基因敲除(apoE knock out,apoE KO)鼠和30只apoE基因野生(apoE wild type,apoE WT)鼠均随机抽签分为对照组、蛛血组、干预组,每组10只；对照组为枕大池注射40 μL的生理盐水,蛛血组为枕大池注射40 μL自体尾动脉血,干预组在枕大池注血前6周,每天胃内灌注促进apoE蛋白表达的肝X受体激动剂T0901317 10 mg/(kg·d)；RT-PCR和Western blot法分别检测术后12 h各组脑组织中eNOS的mRNA和蛋白表达情况.结果 对照组apoE KO鼠及apoEWT鼠eNOS mRNA [(0.823 ±0.015) vs (0.811 ±0.021)]和蛋白[(0.902±0.038) vs (0.875±0.041)]之间的表达无明显差异(P＞0.05)；与对照组相比,蛛血组eNOS mRNA和蛋白表达明显降低,且蛛血组内apoE KO鼠eNOSmRNA[(0.411 ±0.022) vs (0.613 ±0.036)]和蛋白[(0.578 ±0.061) vs (0.694 ±0.026)]表达较apoE WT鼠更降低(P＜0.05)；与apoEWT蛛血组相比,apoE WT干预组eNOS的mRNA (0.796±0.052)和蛋白(0.775±0.062)表达明显增加(P＜0.05),但apoE KO干预组eNOS的表达与apoE KO蛛血组相比无明显差异(P＞0.05).结论 apoE与SAH后脑组织中eNOS的表达有关；增加脑组织中apoE的表达能明显促进eNOS的表达增加.
关键词： 载脂蛋白E 内皮型一氧化氮合成酶 蛛网膜下腔出血 -
三七总皂苷通过保护海绵体内皮功能改善糖尿病大鼠勃起功能障碍
目的：研究三七总皂苷（PNS）对糖尿病勃起功能障碍（ED）大鼠勃起功能的影响。方法90只雄性SD大鼠注射链脲佐菌素（STZ），构建糖尿病大鼠模型。利用阿朴吗啡诱导阴茎勃起，筛选出糖尿病ED大鼠。经过4周的 PNS处理后（分低、中、高剂量组），测定各组大鼠海绵体内压（ICP）值和平均动脉压（MAP）。硝酸还原酶法检测海绵体组织一氧化氮（NO）的水平， ELISA检测环磷酸鸟苷（cGM P）以及晚期糖基化总产物（AGEs）的水平。采用免疫组织化学法检测阴茎海绵体内皮细胞中内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）的表达，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定（TUNEL）法检测内皮细胞的凋亡水平。结果 PNS中、高剂量组的ICP值和ICP/MAP值较糖尿病对照组（未经PNS处理的糖尿病大鼠模型）明显升高（P＜0．05）。PNS中、高剂量组阴茎海绵体组织中的eNOS表达以及NO和cGMP水平较糖尿病对照组均有所增加（P＜0．05）。3个PNS治疗组阴茎海绵体的细胞凋亡率与糖尿病对照组相比明显降低（ P＜0．05）。结论 PNS通过调节 NO/cGM P信号通路和控制AGEs的积聚能够使阴茎海绵体内皮细胞功能恢复，可能有助于改善糖尿病ED大鼠的勃起功能。
关键词： 糖尿病 勃起功能障碍 一氧化氮 内皮型一氧化氮合成酶 阴茎海绵体内皮细胞 -
外周血早晚期内皮祖细胞的生物学特性及鉴定的初步研究
目的 通过人外周血分离培养早晚期内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),比较两类EPCs的特性,以期找到可靠的稳定生物学表征及鉴定方法鉴定EPCs.方法 通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,体外种植于内皮细胞全培养基诱导培养,分别于培养4～7d及2～3周获得早、晚期EPCs.对两类EPCs的细胞形态、增殖能力、细胞表型、细胞因子表达情况、体外成血管能力及一氧化氮(nitric oxide,NO)释放能力进行检测比较,并以成熟人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)作为阳性对照.结果 两类EPCs形态不同,早期EPCs形成纺锤样细胞簇,而晚期EPCs呈鹅卵石样外观;晚期EPCs具有高增殖潜能,可在基质胶上形成毛细管状结构,而早期EPCs则不具备该特性;两类EPCs均可摄取乙酰化低密度脂蛋白,并能与荆豆凝集素Ⅰ结合;流式细胞仪检测发现早期EPCs不表达CD34和CD133,但造血干细胞标记CD14和CD45表达却呈阳性,而晚期EPCs对于内皮型表面标记CD31和CD34表现为强阳性,但CD14、CD45、CD133表达则呈阴性.RT-PCR分析发现早期EPCs的血管内皮生长因子受体2及血管内皮钙黏蛋白基因的相对表达量显著低于晚期EPCs及HAECs (P＜0.05),而血管性血友病因子及内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因的相对表达量比较差异无统计学意义(P＞0.05).细胞因子分泌方面,早期EPCs培养上清液中的VEGF、粒细胞集落刺激因子及IL-8浓度明显高于晚期EPCs (P＜0.05).Western blot检测示,两类EPCs均表达eNOS,但培养5周的晚期EPCs的eNOS表达水平高于早期EPCs (P＜0.05);两种EPCs均可释放NO,但NO产量差异无统计学意义(P＞0.05).结论 eNOS的表达及NO释放能力作为内皮细胞的可靠生物学特征可用于EPCs鉴别,多方法联合方式用于鉴定EPCs更为可行.
关键词： 内皮祖细胞 内皮型一氧化氮合成酶 一氧化氮 细胞鉴定 -
高糖对内皮型一氧化氮合成酶的表达及功能的影响
目的:研究高糖对内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达及其功能的影响.方法:将分离的小牛主动脉内皮细胞在含有不同浓度右旋葡萄糖的DMEM中培养24小时.内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达分别以RT-PCR和Western Blotting方法进行分析,其产物一氧化氮以高效液相层析法(HPLC)测定.结果:与低糖(5.6mM)相比高糖(12.5mM,25mM)可以刺激内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达,并伴有一氧化氮的浓度降低.结论:高糖可致内皮型一氧化氮合成酶的基因和蛋白表达增加,并可能导致其功能障碍.
关键词： 高糖 内皮型一氧化氮合成酶 一氧化氮 -
内皮型一氧化氮合成酶基因多态性与早产儿脑病的相关性研究
目的 研究AGT M235T、ACE I/D、eNOS G894T和eNOS T-786C单核苷酸多态性和早产儿脑病发生的关系,为全面评估患儿病情提供参考.方法 选取2014年6月-2017年9月于新乡市中心医院新生儿重症监护室就诊的胎龄＜34周的早产儿为研究对象,进行头颅超声和核磁共振影像学检查和基因多态性测定,回顾性分析其临床资料,研究AGT M235T、ACE I/D、eNOS G894T和eNOS T-786C基因多态性和早产儿脑病发生的关系.结果 eNOS T-786C的C等位基因的表达是中重度早产儿脑病的独立危险因素(OR=3.206,95％CI:1.850～7.652).结论 早产儿脑病存在基因易感性,检测eNOS基因多态性有助于评估早产儿预后.
关键词： 基因多态性 早产儿脑病 内皮型一氧化氮合成酶 核磁共振成像
