首页 > 文献资料
-
葛根总黄酮缓释片药动学研究
目的:考察葛根总黄酮缓释片体内缓释效果.方法:建立HPLC法测定葛根素的血药浓度,以市售愈风宁心片、自制葛根总黄酮普通片作为参比制剂,采用比格犬进行了缓释片的药动学研究及体内验证实验.结果:与愈风宁心片、自制葛根总黄酮普通片相比,葛根总黄酮缓释片在体内外具有明显的缓释作用.结论:葛根总黄酮缓释片达到了设计要求.
-
葛根总黄酮磷脂复合物制备工艺的研究
目的:优选葛根总黄酮磷脂复合物佳成型工艺.方法:以磷脂复合物的复合率和表观油水分配系数为指标,采用单因素正交试验优化葛根总黄酮磷脂复合物处方.结果:优选出制备工艺的佳条件:葛根总黄酮和大豆卵磷脂质量比为1:4,反应溶剂为甲醇,葛根总黄酮的浓度为4 mg·mL-1,反应温度为55℃,反应时间为2h.按得到的优化条件制备的磷脂复合物的复合率为102.98％;pH=3时,Papp=0.392;pH=6.8时,Papp=0.323;综合得分为95.11分.结论:优化所得葛根总黄酮磷脂复合物处方合理,复合率高,油水分配系数增高,脂溶性得到改善.
-
葛根总黄酮逆转链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠胰腺损伤的研究
目的:研究葛根总黄酮逆转链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病小鼠胰腺损伤.方法:STZ(150 mg·kg-1)ip复制糖尿病小鼠模型,随机分成5组:模型组、二甲双胍阳性组及葛根总黄酮低、中、高剂量组.ig给予葛根总黄酮80,160,240 mg·kg-1,阳性组给予二甲双胍80 mg·kg-1,持续给药14 d.采用葡萄糖氧化酶法检测空腹血糖(FBG)水平.放射免疫法检测空腹血清胰岛素(FIns)及胰岛素抵抗(IR)水平.ELISA法检测胰腺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)活性和丙二醛(MDA)含量.HE染色观察胰腺细胞病理学的变化.Western blot法检测胰脏血红素加氧酶1 (HO-1)的表达.结果:与模型组比较,葛根总黄酮有效降低糖尿病小鼠的血糖水平(P＜0.01).恢复胰岛素水平,改善IR(P ＜0.01).增加胰腺GSH-Px、SOD活性,同时降低ROS,MDA水平(P＜0.01).逆转STZ致糖尿病小鼠胰岛β细胞损伤.有效下调胰腺HO-1蛋白表达(P＜0.01).结论:葛根总黄酮对STZ致糖尿病小鼠胰腺损伤有保护作用,机制可能与改善血糖代谢和抗氧化应激有关.
-
大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮和葛根素的工艺优选
目的:优选大孔吸附树脂分离、纯化葛根总黄酮和葛根素的工艺.方法:考察AB-8,D-101,HPD-100,S-8 4种不同极性吸附树脂对葛根中总黄酮和葛根素的静态吸附及解吸性能,筛选树脂型号；以葛根素、总黄酮转移率和纯度为指标,通过单因素试验考察其吸附和洗脱条件.结果:选用AB-8型大孔吸附树脂,优选的工艺条件为上样液质量浓度1.0 g·mL-1,葛根与大孔树脂质量比1:2,径高比1:6,用2BV水洗除杂,加2 BV 80％乙醇以2 mL· min-洗脱.转移率均＞92％,所得葛根总黄酮纯度达80％,葛根素质量分数25％.结论:AB-8型大孔树脂用于富集葛根总黄酮和葛根素效果佳,是一种理想的分离纯化介质,且优选的工艺操作简单、方法可靠.
-
葛根总黄酮分散片的药动学研究及其与愈风宁心片的比较
目的:研究葛根总黄酮分散片在大鼠体内的药代动力学特征及生物利用度,并与市售愈风宁心片进行比较.方法:大鼠灌胃给药葛根总黄酮分散片(受试制剂)及市售片(参比制剂)混悬液,采用HPLC测定给药后各时间点的血药浓度,用统计软件计算主要药代动力学参数.结果:分散片与市售片的Cmax分别为(20.21 ±0.18),(9.90 ±0.25) mg·L-1;分散片的Tmax=(0.50±0.03)h,市售片Tmax=(1.09±0.02)h;分散片相对于市售片的生物利用度为182.68％.结论:葛根总黄酮分散片吸收快,起效时间明显提前,生物利用度明显优于市售片.
-
葛根总黄酮提取工艺的选择比较
葛根为豆科多年生落叶藤本植物,野葛PuerariaLopata(wild.)Ohwi的根,具有解肌退热、透发麻疹、生津止渴、升阳止泻等功效.葛根总黄酮能降低心肌耗氧量,增加氧供应[1],抗氧化作用并且能降低血管阻力,改善脑及冠状动脉循环等作用[2].
-
葛根总黄酮缓释片的多组分体外释放度研究
目的:研究葛根总黄酮缓释片中多组分体外释放度,探索中药缓释制剂的评价方法.方法:采用转篮法测释放度,HPLC进行指纹图谱分析,监测多组分释药特征.结果:建立了葛根总黄酮缓释片体外释放度的HPLC指纹图谱,通过对8个时间点体外释放液的测定研究,发现多组分的体外释放基本一致,具有均一性.结论:本法简便、重现性好,可用于评价葛根总黄酮缓释制剂体外释放度.
-
葛根总黄酮对卵巢切除大鼠鼻黏膜上皮细胞凋亡的保护作用
目的:观察卵巢切除诱导大鼠鼻黏膜上皮细胞凋亡,研究尼尔雌醇、葛根总黄酮对此的保护作用.方法:将60只大鼠随机分为4组:正常对照组,卵巢切除组,卵巢切除+尼尔雌醇组,卵巢切除+葛根总黄酮组.各组动物分期分3批处死,流式细胞仪检测各组动物鼻中隔黏膜的早期凋亡细胞.结果:卵巢切除后,大鼠鼻黏膜的早期凋亡细胞增多.葛根总黄酮、尼尔雌醇干预组与正常组比较,早期凋亡细胞无明显改变.结论:葛根总黄酮和尼尔雌醇可通过减少凋亡细胞的百分率而保护鼻黏膜免受雌激素缺乏的损害.
-
葛根总黄酮体外诱导SHI-1细胞凋亡的分子机制
本研究旨在探讨葛根总黄酮(puerariae radix flavoues,PRF)对人急性单核细胞白血病细胞株SHI-1凋亡的影响及其可能分子机制.以不同浓度PRF在不同时间作用于SHI-1细胞,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期,实时定量PCR检测Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2及MLL-AF6融合基因mRNA的表达,Western blot检测MAPK、p-MAPK及NF-κB凋亡相关通路蛋白的表达,明胶酶谱法检测细胞培养上清中MMP的活性.结果表明,PRF呈时间-剂量依赖性抑制SHI-1细胞增殖,使细胞阻滞于S期.以25、50及75 μg/ml的PRF分别处理SHI-1细胞,Caspase-3、Caspase-8及Caspase-9在mRNA水平呈浓度依赖性上升(P＜0.05),Bcl-2呈浓度依赖性下降但差异无统计学意义(P＞0.05),而融合基因MLL-AF6的mRNA与对照组相比无明显变化.将不同浓度PRF作用于SHI-1细胞,胞内JNK、p-JNK、P38 MAPK及p-P38 MAPK的表达均呈浓度依赖性上升(P＜0.01);p-ERKv2及NF-κB的表达则呈浓度依赖性下降(P＜0.01);另细胞培养上清中MMP-2及MMP-9的活性在各处理组中基本不变.结论:一定浓度PRF可体外诱导SHI-1细胞的凋亡,具体分子机制可能与活化Caspases水解酶、激活MAPK、下调NF-κB及Bcl-2等信号分子有关,而与MLL-AF6融合基因无明显相关性.
-
葛根总黄酮对不同急性髓系白血病细胞株增殖抑制的影响
为了探讨葛根总黄酮对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的作用及其可能的机制,观察不同浓度葛根总黄酮体外对4种AML细胞株Kasumi-1、HL-60、NIM和U937的增殖抑制影响和细胞周期的变化.应用MTT法检测细胞株细胞的增殖抑制作用.用流式细胞术检测细胞周期的变化.结果表明:一定浓度葛根总黄酮对4种AML细胞株增殖抑制作用差异显著,抑制强度依次为NIM细胞>Kasumi-1细胞>U937细胞>HL-60细胞;葛根总黄酮不同程度地改变NB4、Kasumi-1、U937及HL-60细胞周期进程,使G1期细胞比例下降,S期细胞比例增高,出现亚二倍体峰,呈现浓度依赖性.结论:葛根总黄酮体外对不同AML细胞株具有选择性增殖抑制作用,以对N1M细胞株的影响为显著.
-
葛根总黄酮诱导人早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞凋亡的实验研究
本研究探讨葛根有效成分对恶性白血病可能的凋亡诱导作用及其分子机制.采用葛根总黄酮(flavonoids of puerarin,PR)处理人早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4,用MTT法检测细胞增殖抑制率;FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;实时定量PCR检测pml/rarα、bcl-2、survivin基因表达;Western blot检测.JNK、p38 MAPK、FasL及caspase相关酶的变化.结果发现,PR能明显抑制NB4细胞增殖,并诱导细胞凋亡.随着PR浓度的增加,pmL/rarα、bcl-2及survivin基因在mRNA水平表达下调,JNK、FasL、caspase 3及caspase 8蛋白表达增加,与PR浓度呈正相关;PR联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)处理后上述作用更为明显.结论:PR诱导NB4细胞凋亡的机制可能与JNK相关信号分子的活化有关;PR联合ATO具有协同诱导NB4细胞凋亡的作用.
-
葛根总黄酮上调磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B保护内皮细胞损伤
目的 探讨葛根总黄酮(PR)对H2O2诱导的内皮细胞氧化损伤保护作用及其可能机制.方法 分离培养大鼠主动脉内皮细胞.MTT法检测细胞活力,免疫印迹检测PR对PI3K和AKT蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况并进行细胞自噬荧光分析.组间比较采用单因素方差分析.结果 与PR+H2O2组相比,PR+H2O2+LY294002组的A570nm值显著降低[(2.07±0.08)vs(1.69±0.04),P<0.05].与对照组相比,H2O2组(25.47%)和PR+H2O2组(13.26%)的细胞凋亡率均显著增加(P<0.05);而与H2O2组相比,PR+H2O2组的细胞凋亡率亦显著降低(25.47%vs 13.26%;P<0.05).与对照组相比,H2O2组和PR+H2O2组的自噬荧光强度均显著增高(P<0.05),PR+H2O2组的自噬荧光强度显著低于H2O2组(P<0.05).H2O2+PR组的PI3K和AKT蛋白表达显著高于对照组(P<0.05),PR+H2O2+LY294002组的PI3K和AKT蛋白表达显著低于H2O2+PR组(P<0.05).结论 PR可通过抑制细胞过度自噬和凋亡,促进内皮细胞存活,对H2O2诱导的内皮细胞损伤有保护作用,且其作用机制可能与调控PI3K/AKT表达上调相关.
-
葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化病变内细胞凋亡及凋亡相关基因的影响
目的 探讨葛根总黄酮对载脂蛋白E基因缺陷(apoE-/-)小鼠主动脉窦动脉粥样硬化斑块抑制作用的分子机制.方法 采用电镜观察、缺口末端标记(TUNEL)法检测apoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块内的细胞凋亡.免疫组化方法检测平滑肌细胞、巨噬细胞及Caspase-3蛋白的表达.结果 电镜观察到凋亡细胞核形不规则,胞核内染色质浓集、边聚,附着在核膜周边,线粒体肿胀,内质网扩张,超微结构形态符合巨噬细胞早期凋亡,并可见典型凋亡小体形成.TUNEL结果表明,凋亡细胞主要分布在粥样斑块脂质核心处,模型组动脉粥样硬化斑块内凋亡细胞数较多,而葛根总黄酮干预组凋亡细胞数明显减少,葛根高、低剂量组细胞凋亡率明显低于模型组[分别为(0.38±0.17)%,(1.95±1.02)%,(10.50±5.89)%,P＜0.01],葛根高剂量组细胞凋亡率明显低于葛根低剂量组.抗CD68抗体免疫组化染色证实在动脉粥样硬化斑块脂质坏死核心内细胞CD68强阳性表达.葛根高、低剂量治疗组Caspase-3蛋白免疫表达低于模型组,葛根高剂量治疗组低于葛根低剂量治疗组.结论 葛根总黄酮可能通过下调apoE-/-小鼠主动脉窦动脉粥样硬化病变内Caspases-3蛋白的表达,显著降低了动脉粥样硬化病变内巨噬细胞凋亡,从而抑制了动脉粥样硬化斑块的进展.
-
葛根总黄酮与丹参酮对首发急性脑梗死后情感障碍患者疗效的对照研究
目的：观察固定剂量葛根素与丹参酮对首发急性脑梗死后情感障碍患者疗效。方法88例首发急性脑梗死患者随机分为葛根素组（41例）和丹参酮组（47例），治疗剂量分别为0.3 g/d和60 mg/d，连续治疗2周。2周后比较两组患者美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、生活能力评分(BI)、汉密尔顿焦虑量表（HAMA）、汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分以及血清氨基酸、5-HT浓度差异。结果葛根素组2周后各量表评分均优于丹参酮组，血清5-HT浓度较丹参酮组明显升高，但血清兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸两组比较无显著性差异。结论葛根总黄酮治疗急性脑梗死后情感障碍有效，且对急性脑梗死后神经功能和生活能力恢复均有帮助，其疗效优于丹参酮制剂。
-
葛根总黄酮对力竭运动大鼠肝脏部分抗氧化指标和超微结构的影响
目的:探讨补充葛根总黄酮对耐力训练大鼠力竭运动后肝脏部分抗氧化指标、肝糖原含量和超微结构的影响.方法:24只雄性SD大鼠随机分为安静对照组、运动训练组和训练服药组.运动训练组和训练服药组进行7周递增强度耐力训练.训练服药组每天灌服一次葛根总黄酮悬浮液,安静对照组和运动训练组灌服相同体积的蒸馏水.测定运动训练组和训练服药组力竭运动后即刻及安静对照组安静时肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的活性与丙二醛(MDA)含量、糖原含量及运动至力竭的时间等指标,并在电镜下观察大鼠肝脏超微结构的变化.结果:(1)训练服药组大鼠力竭时间(116.32±6.20min)显著长于运动训练组(94.82±9.05min)(P<0.05).(2)运动训练组肝脏组织T-SOD、GSH-Px和CAT活性显著低于安静对照组(P<0.05),CuZn-SOD活性和MDA含量显著高于安静对照组((P<0.05);训练服药组T-sOD、GSH-Px、CAT、铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性显著高于运动训练组(P<0.05),而MDA显著低于运动训练组(P<0.05).训练服药组肝糖原含量显著高于运动训练组(P<0.05).训练服药组血清谷丙转氨酶(GPT)活性显著低于运动训练组(P<0.05).(3)电镜观察发现,安静对照组线粒体结构完整;运动训练组线粒体形态变异明显,其膜、嵴均有溶解,断裂现象,甚至整个线粒体崩解,出现空泡化,基质电子密度降低,粗面内质网减少,出现不规则扩张、断裂、扭曲;训练服药组线粒体、粗面内质网发生了损伤,但程度较运动训练组轻.结论:葛根总黄酮可提高肝脏抗氧化酶的活性,促进机体自由基的消除,维护肝细织的正常结构,促进肝糖原合成,具有延缓运动疲劳发生的作用.
-
葛根总黄酮对糖尿病合并脑缺血再灌注小鼠模型的影响
目的观察葛根总黄酮(PLIS)对小鼠糖尿病合并脑缺血再灌注模型血糖及抗氧化能力的影响.方法采用四氧嘧啶复制小鼠糖尿病模型;用直径约为0.3mm的针灸针与CCAs血管一起结扎,20min后抽出针灸针的方法复制出脑缺血再灌注模型;通过测定该模型小鼠血糖、糖化血清蛋白、NO、NOS水平和总抗氧化能力,探讨PLIS对小鼠糖尿病合并脑缺血再灌注模型血糖及抗氧化能力的影响.结果PLIS能降低四氧嘧啶所致高血糖小鼠血糖及糖化血清蛋白水平;PLIS可显著降低糖尿病合并脑缺血再灌注模型小鼠的NO、NOS水平,提高总抗氧化能力.结论PLIS有降低糖尿病模型大鼠血糖和保护糖尿病性脑缺血再灌注损伤作用.
-
葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸体外Caco-2细胞转运和体内生物利用度评价
研究葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸在Caco-2细胞模型的转运及大鼠体内生物利用度.采用Caco-2细胞模型,用HPLC测定转运后药液中葛根素含量,比较不同生物黏附材料组成的葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸表观穿透系数Papp的异同.SD大鼠分别口服给予葛根总黄酮、葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸(100 mg.kg-1,以葛根素计),HPLC法测定葛根素血药浓度,绘制药-时曲线并计算药动学参数.结果表明,以羟丙基甲基纤维素(HPMC)与卡波姆组合材料制备的生物黏附漂浮微丸Papp大,差异具有显著性(P＜0.05).葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸曲线下面积(AUC0-t)为原料药的1.79倍;达峰质量浓度为6.39 μg.mL-1,较原料药(3.65 μg.mL-1)高,且具有显著性差异(P＜0.05);体内的平均滞留时间延长.研究表明,HPMC与卡波姆组合黏附材料促进葛根总黄酮Caco-2跨膜转运好,葛根总黄酮生物黏附漂浮微丸(HPMC与卡波姆组合)与葛根总黄酮原料药相比生物利用度更高,且具有缓释效果.
关键词： 葛根总黄酮 生物黏附漂浮微丸 Caco-2细胞单层 跨膜转运 生物利用度 -
葛根总黄酮生物黏附性缓释片在家犬体内的药动学及生物利用度研究
目的研究葛根总黄酮(TPF)生物黏附性缓释片和普通片在家犬体内的药动学与生物利用度,揭示葛根总黄酮生物黏附性缓释片在家犬体内的药动学变化规律,为临床合理运用该药提供实验依据.方法健康家犬6只,以自身前后交叉对照方式,单剂量分别给予葛根总黄酮生物黏附性缓释片和普通片600 mg.葛根素血药浓度经时数据以3P87药动学程序处理,以对两种片剂在家犬体内的动态过程进行拟合.以非室模型统计矩方法,计算药时曲线下面积(AUC0→12),并由血药浓度数据读取cmax,tmax,经统计分析比较普通片与缓释片的生物利用度.结果单剂量给予家犬TPF片及生物黏附片后,葛根素血药浓度变化符合一级吸收一室模型,Ke分别为(0.461±0.115)h-1,(0.238±0.042)h-1;Ka分别为(0.844±0.404)h-1,(0.446±0.100)h-1;t1/2ka分别为(0.954±0.352)h,(1.609±0.292)h,t1/2ke分别为(1.570±0.333)h,(2.995±0.617)h.普通片的AUC0～12,cmax,tmax分别为(4 430±998)ng·h·mL-1,(1241±247)ng·mL-1和(2.2±0.6)h.缓释片的AUC0→12,cmax和tmax分别为(6459±738)ng·h·mL-1,(1 040±134)ng·mL-1和(4.0±0.7)h.以普通片为参比制剂,缓释片的生物利用度为(151.4±37.6)%.结论葛根总黄酮缓释片在家犬体内表现出较好的缓释特性,主要药动学参数发生了变化,生物黏附片的生物利用度也明显高与普通片.
-
大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的研究
目的研究大孔吸附树脂分离纯化葛根总黄酮的工艺,为葛根总黄酮的工业化生产提供实验依据.方法采用D101型、D201型、AB-8型3种大孔吸附树脂对葛根总黄酮进行吸附纯化,以总黄酮收率、纯度为考察指标综合评价.结果D101型、D201型、AB-8型大孔吸附树脂吸附3种方法中静态饱和吸附量以干树脂计分别为113.5,133.1和133.9 mg@g-1;静态脱吸附率分别为75.6%,66.7%,94.2%;以70%的乙醇为洗脱剂洗脱率高为92.4%;AB-8型吸附树脂饱和吸附-洗脱量为82.0 mg@g-1;稳定性实验中第11个周期总黄酮收率为91.3%,纯度为86.0%.结论3种纯化方法中,以AB-8型树脂综合性能好,适合于葛根总黄酮的分离纯化.
-
HPLC法测定葛根总黄酮固体脂质纳米粒的载药量及包封率
目的：建立HPLC法同时测定葛根总黄酮固体脂质纳米粒中4种异黄酮类成分的包封率及载药量。方法采用RP-HPLC法，Kromasil C18（4.6mm ×250mm，5μm）色谱柱；甲醇-0.1%枸橼酸溶液为流动相梯度洗脱；流速1.0mL/min，柱温40℃，检测波长250nm。采用高速离心法分离固体脂质纳米粒中游离药物。结果3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷和大豆苷元线性关系良好，平均回收率分别为（100.28±2.52）%、（100.26±2.33）%、（100.08±3.35）%及（100.44±3.48）%。3批次葛根总黄酮固体脂质纳米粒中3'-羟基葛根素、葛根素、大豆苷和大豆苷元的包封率分别为（84.35±0.45）%、（86.84±0.48）%、（89.52±0.86）%及（93.80±0.50）%，其载药量分别为（10.37±0.36）%、（14.19±0.52）%、（16.79±0.34）%及（20.00±0.97）%。结论本法简单快速、结果准确可靠，可同时测定葛根总黄酮固体脂质纳米粒4种成分的载药量与包封率。
