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白术内酯Ⅰ对免疫性肝损伤的保护作用
目的:研究白术内酯Ⅰ对卡介苗(BCC)联合脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其可能的机制.方法:昆明种雄性小鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照药联苯双酯组和白术内酯Ⅰ低、中、高剂量组(60,120,240mg·kg-1),每组12只.BCG联合LPS诱导免疫性肝损伤,比较各组小鼠的肝脏、脾脏系数,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和门冬酸氨基转移酶(AST)的含量、肝匀浆液中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)的含量以及血浆和肝组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α),NO,诱导型一氧化氮合酶(iNOS)含量,HE染色切片观察肝组织病理学变化.结果:白术内酯Ⅰ与联苯双酯均可显著降低免疫性肝损伤小鼠增加的肝脏指数、脾脏指数(P＜0.05),改善肝脏组织病理学变化和肝脏组织病理学分级,减轻BCG联合LPS所致肝损伤的炎症反应；对免疫性肝损伤中肝匀浆MDA产生和GSH-px水平有明显改善作用.结论:白术内酯Ⅰ对免疫性肝损伤具有显著的保护作用,并且在实验剂量范围内呈显著的剂量依赖性.抑制NO,iNOS,TNF-α等炎症介质的释放或过强表达可能是其主要的作用机制.
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银杏酮酯抑制LPS/ATP诱导原代小胶质细胞NLRP3炎症小体的激活机制研究
该研究利用原代小胶质细胞观察了银杏酮酯(Ginkgo biloba extract 50,GBE50)的抗炎机制及其对NLRP3炎症小体的作用机制.以LPS/ATP刺激小胶质细胞,筛选佳的刺激时间点及GBE50佳浓度;ELISA检测细胞培养液中IL-6,TNF-α含量;Western blot法检测GBE50对NLRP3,ASC,caspase-1,IL-1β炎症小体蛋白表达水平的影响;CO-IP检测GBE50对NLRP3炎症小体聚合的影响.GBE50(10 mg·L-1)预处理后可以明显抑制LPS(100μg·L-1,12h)、ATP(5 mmol·L-1,30 min)诱导原代小胶质细胞NLRP3炎症小体相关蛋白表达、NLRP3炎症小体聚集以及炎性因子IL-6和TNF-α的释放.以上实验结果表明,GBE50抑制小胶质细胞激活后炎性因子的分泌,与其下调NLRP3炎症小体的蛋白表达及活性有关.
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桂枝茯苓胶囊及其活性成分组合物抗炎作用与机制研究
该研究旨在脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞模型上,对桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物(15个成分组成)进行体外抗炎活性量效评价,并对其作用机制进行初步探索.采用MTT法检测桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对RAW264.7细胞活力的影响,ELISA法检测桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对LPS诱导RAW264.7细胞释放IL-1β,TNF-α和PGE2的影响,Western blot法检测桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对IL-1f和mPGES-1表达的影响.结果显示在测定浓度下,桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物对RAW264.7细胞活力无显著影响;ELISA检测结果表明桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物能有效抑制IL-1β,TNF-α和PGE2的释放,且均呈现一定的浓度-效应依赖关系;Western blot结果表明桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物能有效降低IL-1β与mPGES-1的表达.以上结果表明桂枝茯苓胶囊及活性成分组合物能有效抑制LPS诱导的炎症因子释放,其作用机制可能与降低IL-1β与mPGES-1的表达有关.该研究为阐明桂枝茯苓胶囊的抗炎活性和相关机制奠定了实验基础,同时对桂枝茯苓胶囊的效应物质基础解析提供了一定的理论依据.
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加味凉膈散含药血清对脂多糖刺激小鼠血小板Toll样受体4表达及细胞因子释放的影响
目的 观察加味凉膈散对小鼠血小板Toll样受体4(toll like receptor 4,TLR4)表达及对血小板源细胞因子IL-8、β血小板球蛋白(β-TG)、可溶性CD40配体(sCD40L)释放量的影响.方法 比较脂多糖(LPS)刺激TLR4单克隆抗体封闭和不封闭的血小板对细胞因子释放的影响.应用加味凉膈散低(0.94 g/mL)、中(1.89g/mL)、高(2.84 g/mL)剂量含药血清孵育LPS刺激的血小板,观察血小板TLR4表达及血小板源细胞因子释放量的变化.结果 LPS刺激后血小板TLR4阳性表达率明显降低(P＜0.01),sCD40L和β-TG释放量显著升高(P＜0.01)；加入TLR4单克隆抗体后,sCD40L和3 -TG释放量明显下降(P ＜0.05,P＜0.01).LPS刺激前后IL-8浓度比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与LPS组比较,加味凉膈散中、高剂量含药血清组血小板TLR4阳性表达率明显升高(P＜0.01)；血小板sCD40L和β-TG的释放量明显下降(P＜0.01,P＜0.05),且随剂量增加抑制作用增强.结论 LPS通过血小板TLR4诱导血小板活化并释放细胞因子sCD40L、β-TG,而血小板IL-8的释放不依赖于血小板TLR4-LPS途径；加味凉膈散能抑制LPS刺激的血小板释放sCD40L、β-TG,并以剂量依赖方式抑制LPS与血小板TLR4的结合,减少血小板细胞因子的释放.
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山奈酚干预对D-氨基半乳糖/脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭的保护作用
目的 探讨山奈酚对D-氨基半乳糖(D-GaIN)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝衰竭(acute hepatic failure,AHF)的干预作用.方法 37只C57B L/6小鼠按完全随机分组法分为正常对照组(10只)、AHF模型组(13只)、山奈酚干预组(14只).AHF模型组小鼠腹腔注射D-GaIN(700 mg/kg)/LPS(10 μg/kg),作用6h,建立AHF模型;山奈酚干预组小鼠于建模前2h尾静脉注射5 mg/kg的山奈酚,后腹腔注射D-GaIN (700 mg/kg)/LPS(10 μg/kg),作用6h,建立AHF模型.正常对照组腹腔注射等量生理盐水.检测血清ALT、AST水平,观察肝脏组织病理学变化,检测肝脏组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA表达,检测NF-κB通路相关分子表达及肝细胞凋亡情况.结果 与AHF模型组比较,山奈酚干预组小鼠的生存率提高(P＜0.05).与正常对照组比较,AHF模型组血清ALT和AST水平升高(P＜0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA表达升高(P＜0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α表达降低(P＜0.05),p-N F-κB p65表达升高(P＜0.05),肝脏病理损伤严重,细胞凋亡增多;与AHF模型组比较,山奈酚干预组血清ALT和AST水平降低(P＜0.05),炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达降低(P＜0.05),肝脏组织中NF-κB信号通路相关分子IκB-α升高(P＜0.05),p-NF-κBp65表达降低(P＜0.05),肝脏病理损伤减轻,细胞凋亡减少.结论 山奈酚干预通过抑制炎症反应对D-GaIN糖/LPS诱导的小鼠AHF发挥保护作用.
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内毒素性休克的分子机制与中药防治
尽管在过去50年中抗生素的应用和临床治疗措施取得了长足的进步,但感染性休克患者的病死率仍高达40%～60%[1].内毒素或脂多糖(lipopolysaccha-ride, LPS)在感染引起的全身炎症反应综合征中发挥重要作用.
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异功散对脂多糖介导的小鼠铁代谢紊乱的影响
目的 探讨异功散对炎症诱发的铁代谢紊乱的影响. 方法 40只C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、异功散组、脂多糖组、异功散加脂多糖组,每组10只.异功散组、异功散加脂多糖组给予异功散灌胃10.57 g/(kg·d),空白对照组每只灌胃0.2ml超纯水,各组均连续灌胃7天.第8天,脂多糖组和异功散加脂多糖组腹腔注射脂多糖1.5 mg/kg建立铁代谢紊乱模型,6h后处死所有小鼠.检测血常规、血清铁和肝组织铁含量、血清和肝组织白细胞介素6(IL-6)含量.结果 各组小鼠血常规无明显变化,差异无统计学意义(P＞0.05).与空白对照组比较,脂多糖组小鼠血清铁降低,肝组织铁和血清、肝组织IL-6均明显上升(P＜0.05),而异功散组加脂多糖组较脂多糖组肝组织铁、血清和肝组织IL-6均明显下降(P＜0.05).结论 异功散可改善脂多糖介导的急性炎症条件下的铁代谢紊乱,其机制可能与降低血清和肝组织IL-6有关.
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调补肺肾三法对香烟烟雾提取物和脂多糖刺激单核巨噬细胞THP-1分泌细胞因子的影响
目的 探讨调补肺肾三法治疗慢性阻塞性肺疾病的分子机理. 方法 用香烟烟雾提取物(CSE)和脂多糖(LPS)及两者联合(LC)体外刺激单核巨噬细胞THP-1,每种刺激物下分为正常组(加入20％正常大鼠血清)、刺激物组(加入20％正常大鼠血清和5％CSE,或75pg/ml LPS,或5％CSE和75pg/ml LPS)、补肺益肾组、补肺健脾组和益气滋肾组(加20％相应方药大鼠含药血清和5％CSE,或75pg/ml LPS,或5％CSE和75pg/ml LPS),检测各组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-3(IL 3)、巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、超氧化物歧化酶(SOD)、CD36、磷脂酸磷酸酶2B(PPAP2B),应用网络工具分析细胞因子的转录因子.结果 与正常组比较,CSE组、LPS组和LC组分泌MMP-9增加,分泌TNF-α和PPAP2B减少；CSE组分泌TIMP-1减少,LPS组分泌TGF-β增加,LC组GM-CSF分泌增加(P＜0.05或P＜0.01).3个复方对细胞分泌的各因子调节明显不同(P＜0.05或P＜0.01),其中补益肺肾方在各条件下,所调节分泌的因子和涉及转录因子较为广泛. 结论 CSE和LPS对THP-1分泌细胞因子影响不同,调补肺肾三法在一定程度上都对CSE和LPS刺激下分泌细胞因子有调控作用,补益肺肾方药作用明显而广泛,补肺健脾方次之.
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黄芪多糖对原发性高血压病血瘀证患者Toll样受体4、核转录因子-κB表达的影响
目的 以TLR-NF-κB信号转导通路的角度,探讨高血压病血瘀证的形成机制及黄芪多糖的干预作用.方法 80例高血压病患者中医辨证分为血瘀证组40例、非血瘀证组40例,另选健康志愿者(健康组)30例,收集各组受试者血清,实时PCR法测Toll样受体4(TLR4) mRNA表达.不同浓度的黄芪多糖(APS)干预脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞株TLR4表达及核转录因子-κB(NF-κB)活化,PCR法测TLR4、抑制性κBa(I-κBa) mRNA的表达,免疫印迹法检测TLR4蛋白及I-κBa蛋白的表达.结果 TLR4 mRNA在血瘀证组和非血瘀证组的表达明显高于康健组(P<0.01),血瘀证组明显高于非血瘀证组(P<0.01);LPS诱导组TLR4 mRNA表达明显高于康健组、I-κBa mRNA明显低于健康组(P<0.01);APS大、中、小剂量组与LPS诱导组比较,TLR4、I-κBa mRNA表达差异均有统计学意义(P<0.01);并且APS大、中、小剂量组之间TLR4、I-κBa mRNA表达比较差异亦均有统计学意义(P<0.01).结论 高血压血瘀证患者较非血瘀证患者存在着更为严重的炎症反应和免疫紊乱,TLR-NF-κB信号途径介导的炎症反应和免疫紊乱是高血压病血瘀证形成的机制之一.
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小鼠耳蜗核因子-κB P50的表达
核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)是许多细胞对各种刺激反应起重要作用的转录因子之一,NF-κB P50是其家族成员.为了显示NF-κB P50在耳蜗的表达,给实验组小鼠皮下注射卡那霉素(kanamycin,KA),或鼓室注射脂多糖(1ipopolysaccharides,LPS),对照组小鼠注射等量生理盐水,用NF-κB P50兔多克隆抗体(PcAb)免疫组化染色(DAB显色),观察NF-κB P50在小鼠耳蜗的表达.结果显示:在小鼠耳蜗各圈螺旋韧带、盖膜(TM)、螺旋突、螺旋神经节和神经纤维可观察到较强的表达;Corti器的内毛细胞(inner hair cells,IHC)、外毛细胞(outer hair cells,OHC),内柱细胞(inner pillar cell,IP)、外柱细胞(outer pillar cell,OP)、Deiter细胞(DC)、Hensen细胞(HC)和Claudious细胞的细胞质也有NF-κB P50的表达;IHC、OHC和上述细胞的核及基底膜(B)和对照组均未见表达.注射LPS和KA处理的小鼠耳蜗NF-κB P50的表达,都比对照小鼠明显增强.注射LPS和KA后3d和7d的小鼠,NF-κB P50的表达没有显著性差别.注射LPS和KA可使NF-κB P50在小鼠耳蜗产生急性免疫反应.
关键词： 转录因子 核因子NF-κB P50 小鼠耳蜗 免疫组化 脂多糖 -
白细胞介素-8的临床意义
白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)是近年由多家实验室发现的细胞因子; 曾有不同命名:如中性粒细胞激活蛋白(NAP-1),白细胞粘附抑制因子(LAF),T淋巴细胞趋化因子TCF).IL-8在炎症因子IL-1、TNF及脂多糖刺激下由多种细胞合成表达. 内皮细胞、T淋巴细胞、肺泡巨噬细胞、肝细胞、滑膜细胞、成纤维细胞和中性粒细胞等均可产生IL-8, 其中以血单核细胞产量为丰富.基因工程IL-8由72个氨基酸组成, 分子量为8kDa.
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藤黄酸减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤
目的 探讨藤黄酸(GA)对脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤的保护作用及其机制.方法 采用尾静脉注射LPS(4 mg/kg)建立小鼠急性肺损伤模型.实验将小鼠随机分为对照组(control组)、模型组(model组)、藤黄酸组(GA组)和藤黄酸预处理组(GA+LPS组),6 h后测定肺湿/干重比值(W/D);检测髓过氧化物酶(MPO)活性;检测肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量和白细胞计数;ELISA检测肺匀浆中白介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 模型组小鼠肺W/D、MPO活性、BALF中蛋白含量和白细胞数量均增加,肺组织IL-1β和TNF-α水平升高(均P<0.01);藤黄酸预处理可减轻LPS引起的以上指标变化(均P<0.05).结论 GA可减轻LPS诱导的急性肺损伤,其机制可能与降低肺组织IL-1β和TNF-α的含量、抑制中性粒细胞在肺部的聚集和减轻肺部水肿相关.
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Ⅰ型Na+/H+交换器在LPS引起的大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的作用
目的 探索Ⅰ型Na+/H+交换器(NHE1)在脂多糖(LPS)引起的大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用.方法 培养大鼠PMVECs.MTT比色试验检测细胞活力;比色法测试上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力和丙二醛(MDA)浓度;BECEF-AM荧光探针染色细胞,激光共聚焦显微镜下观察细胞内酸碱度,检测NHE1的活性;PT-PCR技术检测NHE1的mRNA表达.结果 LPS不仅使细胞活力降低35%(P＜0.05),使上清液中LDH和MDA分别升高3倍和2.5倍(P＜0.05),而且使NHE1的活性增强,mRNA表达增多(P＜0.05).但是NHE1的抑制剂--环己阿米洛利(HMA)能显著抑制LPS引起的这些变化(P＜0.05).结论 NHE1的活性增强和表达增多是LPS引起大鼠PMVECs损伤的重要机制.
关键词： Ⅰ型Na+/H+交换器 脂多糖 肺微血管内皮细胞 环己阿米洛利 -
水通道蛋白1、5在LPS诱导大鼠急性肺损伤组织中的表达
目的 探讨水通道蛋白1、5(AQP1、AQP5)在脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)组织中的表达变化及意义.方法 将Wistar大鼠48只随机分为对照组(NC)和急性肺损伤(ALI)组,ALI组通过尾静脉注射脂多糖(LPS),分别于2、6、12和24 h采集标本.HE染色观察肺组织病理;测定肺湿/干重比(W/D)、肺通透指数;ELISA检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)水平;Western blot、免疫组化和real-time PCR法检测肺AQP1、AQP5蛋白和mRNA变化.结果 与对照组比较,ALI组TNF-α、MIP-1α均有显著性升高(P＜0.05),至24 h点逐渐恢复.注射LPS后2h出现肺泡和间质水肿,炎性细胞浸润,以12h明显;肺W/D比、肺泡灌洗(BALF)蛋白含量、肺通透指数均较对照组明显升高(P＜0.05),12 h点达峰值.ALI组各时间点肺AQP1及AQP5mRNA及蛋白表达均较对照组明显下调(P＜0.01),以12h点下降明显.肺AQP1、AQP5 mRNA表达与肺W/D比、血清TNF-α,MIP-1α存在明显负相关.结论 脂多糖诱导大鼠急性肺损伤,其肺水肿的形成可能与AQP1、AQP5的表达下调有关.
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LPS和几种促炎细胞因子促进人血管平滑肌细胞iNOS mRNA的表达
LPS、rhIL-1b、rhIL-6、rhTNF-a和rhIFN-g 单独或两两组合加于培养的人血管平滑肌细胞(hVSMC),测定了hVSMC NOS活性,cGMP含量,iNOS mRNA表达丰度和培养液中NO2-浓度.LPS和细胞因子都能诱导hVSMC表达iNOS mRNA,升高hVSMC NOS活性、cGMP含量和培养液中NO2-浓度;TNF-a是受试细胞因子中唯一能与另外三种细胞因子分别组合都显示出协同效应的细胞因子;LPS 和其余三种细胞因子间的两两组合都没有显示出协同效应;本研究结果表明:LPS、rhTNF-a、rhIL-1b、rhIL-6、rhTNF-a、rhIFN-g都能诱导hVSMC合成NO;TNF-a可能是诱导hVSMC iNOS表达的致炎细胞因子中为重要的.
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CCK-8降低LPS诱导的小鼠单核细胞RAW264.7 CHOP／caspase-11／caspase-1的表达
目的：探讨CCK-8对LPS激活RAW264.7细胞CHOP／caspase-11／caspase-1信号通路的影响。方法用LPS和（或） CCK-8和（或） CCK-8的1受体阻滞剂孵育RAW 264.7细胞，用Western blot法检测CHOP、caspase-11蛋白表达，用试剂盒检测caspase-1活性，用ELISA技术检测细胞培养上清中IL-1β水平。结果与对照组相比，LPS组CHOP、caspase-11表达水平均显著升高（ P＜0.05），给予CCK-8可有效抑制LPS诱导的CHOP、caspase-11表达升高（ P＜0.05），而预先给予CCK-8的1受体阻滞剂可明显抑制CCK-8的作用。 caspase-1活性变化、IL-1β含量变化趋势均与CHOP、caspase-11表达水平变化趋势一致（ P＜0.05）。结论 CCK-8通过受体1抑制CHOP／caspase-11／caspase-1表达，减少LPS诱导IL-1β的生成，发挥抗炎作用。
关键词： 胆囊收缩素 脂多糖 C/EBP同源蛋白 caspase-11 Caspase-1 -
转染miRNAs降低脂多糖诱导的大鼠肠微血管内皮细胞水通道蛋白1表达
目的 探讨大鼠肠微血管内皮细胞miRNAs对脂多糖(LPS)诱导的水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法 用机械吹打法及胰蛋白酶消化法从大鼠空肠分离微血管内皮细胞,用免疫荧光染色鉴定细胞;用荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测AQP1和miRNAs的表达;miRNAs芯片分析结合在线软件筛选调控AQP1表达的miRNAs,瞬时转染miRNAs模拟体及对照序列进行进一步验证.结果 肠微血管内皮细胞vWF免疫荧光染色为阳性.用LPS(0、0.1、1和10 mg/L)处理细胞后,AQP1 mRNA表达水平随LPS浓度增加呈下降趋势,其中1和10 mg/L LPS处理细胞后AQP1 mRNA表达水平与对照组相比有明显差异(P<0.05和P<0.001);与对照组相比,LPS处理组有22个表达上调2倍以上的miRNAs及9个下调2倍以上的miRNAs;软件预测显示芯片结果中的miR-423-5p、miR-874-5p、miR-361-3p、miR-219a-5p、miR-27b-3p、miR-133b和miR-666可与AQP1启动子区互补配对;miR-874-5p、miR-361-3p、miR-133b和miR-666在LPS处理后的肠微血管内皮细胞中表达上调;转染miR-133b和miR-666模拟体后可使AQP1 mRNA表达水平下调.结论 LPS可通过上调miR-133b和miR-666表达水平,间接抑制AQP1的表达,继而影响肠黏膜通透性.
关键词： miRNAs 脂多糖 水通道蛋白1 大鼠肠微血管内皮细胞 -
Elafin基因重组气道上皮调节脂多糖诱导的人气道黏液高分泌
目的 探讨天然内生多肽Elafin对脂多糖诱导的气道黏液高分泌的调节机制.方法 构建人Elafin重组质粒pEGFP-N1-Elafin,转染正常人支气管上皮细胞HBE16,给予脂多糖(LPS)刺激,激光共聚焦扫描显微镜检测Elafin蛋白含量,Western blot法检测IKBa蛋白含量;荧光素酶报告基因检测系统测定核转录因子-κB(NF-κB)活性;RT-PCR检测Elafin和黏蛋白(MUC)SAC mRNA表达水平;ELISA法分析MUCSAC蛋白相对含量.结果 成功构建内生多肽Elafin真核表达载体pEGFP-N1-Elafin并转染HBEi6细胞.转染重组Elafin后Elafin蛋白含量及mRNA水平明显增加.与对照组相比,LPS刺激组IκBα蛋白含量降低,NF-κB相对活性明显增强,MUC5AC蛋白含量及mRNA水平也显著增加.转染重组Elafin后再予以LPS刺激,与单纯LPS刺激组相比,IκBα蛋白含量明显增加,NF-κB相对活性显著降低,MUCSAC蛋白含量及mRNA水平也明显降低.结论 天然内生多肽Elafin重组气道上皮可下调NF-κB的活性,降低脂多糖诱导的气道黏液高分泌.
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交感神经兴奋与树突状细胞活化加剧脂多糖诱导大鼠心肌损伤
目的 探讨交感系统兴奋及树突状细胞(DC)活化在脂多糖( LPS)诱导大鼠心肌损伤中的作用.方法 将大鼠随机分为4组:对照组、LPS组(腹腔注射LPS:10 mg/kg)、阿替洛尔(Ate)干预组(LPS造模后给予β受体阻断剂阿替洛尔5 mg/kg)和VAG539组(LPS造模后给予DC抑制剂VAG539 30 mg/kg灌胃,每天2次,共2 d).用Pow-erlab系统记录交感神经放电和血流动力学指标;高效液相色谱( HPLC)测定血浆中去甲肾上腺素( NE)含量;免疫组化检测心肌中TNF-α及DC含量.结果 与对照组相比,经LPS诱导24 h的3组大鼠血浆NE水平明显升高(P＜0.05),心肌TNF-α水平和DC含量明显升高(P＜0.05),肾交感神经放电活动明显增加( P＜0.05);与LPS组比较, Ate干预组或VAG539干预组NE水平明显降低(P＜0.05),心肌细胞TNF-α水平和DC含量明显降低(P＜0.05),肾交感神经放电活动明显降低(P＜0.05).结论 交感神经系统的过度兴奋及DC激活加剧LPS致大鼠心肌损伤.
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α-硫辛酸降低脂多糖诱导的Raw264.7细胞TNF-α的分泌
目的 观察α-硫辛酸(ALA)对脂多糖(LPS)在体外诱导的Raw264.7细胞TNF-α释放及机制.方法 用ALA或者ALA联合ERK或NF-κB的抑制剂或者激活剂预处理2h,再用LPS(1 mg/L)体外刺激巨噬细胞Raw264.7;采用MTT法检测ALA对Raw264.7细胞活力影响,利用ELISA方法对Raw264.7释放在培养上清中的细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α)的浓度,及用Western blot方法检测T-pERK、pERK和NF-κB的表达.结果 ALA可抑制LPS诱导的Raw264.7细胞TNF-α表达(P＜0.05),用ALA联合ERK或NF-κB的激活剂预处理后可减弱ALA产生的抑制效果(P＜0.05).同时ALA抑制LPS诱导的Raw264.7细胞pERK和NF-κB的表达(P＜0.05),用ALA联合ERK或NF-κB的抑制剂预处理后可加强ALA产生的抑制效果(P＜0.05).结论 ALA可能通过抑制LPS诱导的Raw264.7细胞的ERK和NF-κB信号通路来抑制TNF-α释放.
关键词： α-硫辛酸 脂多糖 RAW264.7细胞 肿瘤坏死因子
