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强脉冲光对UVB照射后人皮肤成纤维细胞金属基质蛋白酶-1、金属基质蛋白酶-3表达的影响
目的 观察强脉冲光(IPL)照射人皮肤成纤维细胞后金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)表达的变化,探讨强脉冲光嫩肤的分子生物学机制.方法 原代培养人皮肤成纤维细胞,分为三组:A组(正常对照组):无UVB照射无IPL照射;B组(UVB照射组):采用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞;C组(UVB+IPL照射组):先用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞,24 h后再用强脉冲光照射成纤维细胞.培养48 h后采用免疫组化检测细胞中MMP-1、MMP-3的表达.结果 UVB照射后成纤维细胞中MMP-1及MMP-3表达较对照组显著升高(P＜0.05),C组成纤维细胞MMP-1及MMP-3表达较B组显著降低.结论 强脉冲光能显著抑制UVB导致的成纤维细胞MMP-1、MMP-3的表达升高,可能通过该机制改善光老化中皱纹的形成.
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人类全厚皮片移植裸鼠模型烧伤后MMP-1、TIMP-1表达的动态变化
目的研究MMP-1、TIMP-1在烧伤创面愈合至HS形成的过程中的表达、关系和作用.方法将人类正常全厚皮肤移植于裸鼠,待其完全存活后造成深Ⅱ度烧伤创面;然后用免疫组织化学染色的方法,观察MMP-1、TIMP-1在烧伤创面愈合至瘢痕形成全过程中的表达变化.结果 MMP-1于烧伤后第2d出现,第3d～15d表达较强,第28d已下降到基底值.它在具有不同流动性组织的界面明显.TIMP-1于烧伤后第2d出现,很快就表现为类似于MMP-1的接触界面的表达模式,并且一直持续到烧伤后5月瘢痕的形成;它的表达模式没有MMP-1那么规则,但在血管周围有明显的分布.结论在伤口愈合的炎症期和增生期,MMP-1和TIMP-1两种力量处于动态平衡;在重塑期,TIMP-1通过抑制MMP-1的表达,减少胶原降解,从而诱导HS形成;并且它们可能在具有不同流动性组织的界面起着特殊的作用.
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TIA、脑卒中患者血清MMP-1、MMP-3、MMP-9的表达水平
目的 分析短暂性脑缺血性发作(TIA)和脑卒中患者血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-3、MMP-9的表达水平.方法 本研究选取2016年1月至2017年1月收治的TIA患者100例(TIA组),急性脑卒中患者100例(卒中组),健康体检患者100例(对照组)为研究对象.分析三组研究对象的一般资料,MMP-1、MMP-3、MMP-9基因表达与水平及其相关性.结果 TIA组、卒中组患者在性别、年龄、体质指数(BMI)、糖尿病史及饮酒史与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),而吸烟史、高血压病史与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05).TIA组、卒中组患者的血清MMP-1分别为(123.31±8.20)μg/L和(87.12±5.27)μg/L、MMP-3分别为(93.31±8.15)μg/L和(57.64±5.24)μg/L、MMP-9分别为(133.31±8.89)μg/L和(109.56±5.13)μg/L,水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).TIA组、卒中组患者的MMP-1基因、MMP-9基因中基因型T/T与等位基因频率T均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).TIA组、卒中组患者的MMP-3基因中基因型6A/6A与等位基因频率6A均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).MMP-1、MMP-3、MMP-9水平增高均是TIA组、卒中组患者的独立危险因素,差异有统计学意义(P<0.05).结论 MMP-1、MMP-3、MMP-9水平检测有助于TIA、脑卒中诊断,且其主要基因位点突变与TIA、脑卒中发生相关,可为临床预防及治疗提供重要指导.
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脐血中MMP-1及TIMP-1对妊娠期高血压疾病患者新生儿出生体重的影响
目的 探讨脐血血清中MMP-1及TIMP-1的表达对妊娠期高血压疾病患者新生儿出生体重的影响.方法 选取43例妊娠期高血压疾病患者为实验组,其中妊娠期高血压18例、轻度子痫前期9例、重度子痫前期16例,同期30例正常晚孕妇为对照组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脐血血清中MMP-1及TIMP-1的表达.结果 随妊娠期高血压疾病严重程度加重,脐血血清中MMP-1表达逐渐下降,新生儿出生体重逐渐下降,且两者之间呈正相关(r＝0.551,p<0.01);但各组间TIMP-1的表达差异无统计学意义(p>0.05),且脐血血清中TIMP-1的表达与新生儿出生体重之间无相关性(r＝-0.107,p=0.369>0.05).结论 MMP-1与妊娠期高血压疾病患者新生儿出生体重之间存在相关性,影响新生儿出生体重.
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电针对大鼠退变腰椎间盘组织IL-1β、MMP-1及TIMP-1表达的影响
目的：观察电针委中穴对大鼠腰椎间盘退变模型椎间盘组织中促炎因子IL-1β（interleukin-1beta）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属酶组织抑制剂-1（TIMP-1）表达影响，探讨电针治疗腰椎退变疾病的可能起效机制。方法：将40只清洁级SD大鼠随机等分为正常组、模型组、电针委中组、电针非穴组共4组，采用纤维环穿刺法建立大鼠腰椎间盘退变模型。造模4周后，电针委中组、电针非穴组分别予相应电针干预，疗程结束后取出腰椎间盘组织行HE染色及RT-PCR检测IL-1β、MMP-1、TIMP-1基因表达水平。结果：与正常组相比，模型组、电针委中组、电针非穴组的IL-1β、MMP-1的mRNA表达升高， TIMP-1表达下降；与模型组相比，电针委中组及电针非穴组的IL-1β、MMP-1的mRNA表达下降，TIMP-1的mRNA表达升高；而电针委中组与电针非穴组比较，电针委中组的IL-1β、MMP-1的mRNA表达下降，TIMP-1的mRNA表达升高；各组间比较差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：电针可通过下调IL-1β、MMP-1的表达及上调TIMP-1的表达以延缓椎间盘退变，且电针委中穴刺激较非穴刺激效果更为显著。
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中波紫外线对角质形成细胞MMP-1及TIMP-1的影响
目的:研究中波紫外线照射对永生化人角质形成细胞的影响.方法:绘制细胞生长曲线,用不同剂量UVB(30、60、90 mJ/cm2)照射永生化人角质形成细胞,用MTT方法测定UVB照射后细胞的增殖活性,用RT-PCR方法测定HaCaT细胞中MMP-1mRNA 和TIMP-1mRNA的表达.结果:UVB照射后,HaCaT细胞的增殖活性受到抑制,MMP-1 mRNA表达增强,TIMP-1 mRNA表达下降,90 mJ/cm2照光组与未照光组比较,差异均有统计学意义.结论:UVB照射可诱导HaCaT细胞损伤和细胞凋亡,促使MMP-1 mRNA表达增加,TIMP-1 mRNA表达减少,二者比例失调,这可能与光老化的发生有一定的关系.
关键词： 中波紫外线 光老化 MMp-1 TIMP-1 永生化人角质形成细胞 -
丹参对人粘连组织成纤维细胞MMP-1与TIMP-1mRNA表达的影响
目的 考察丹参及其化学成分对人粘连组织成纤维细胞(ATF) MMP-1与TIMP-1 mRNA表达的影响.方法 使用组织块培养的方法获取ATF,分别加入丹参提取物、丹参素钠、丹参酮ⅡA磺酸钠与地塞米松培养48 h,提取总RNA并逆转录为cDNA,采用Real-time PCR法检测各组MMP-1与TIMP-1 mRNA的表达水平.结果 与空白对照组比较,丹参提取物与丹参素钠10、40 μg·mL-1剂量组MMP-1 mRNA水平差异有统计学意义(P＜0.01),丹参素钠40μg·mL-剂量组TIMP-1 mRNA水平差异有统计学意义(P＜0.01),其余各组差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 上调MMP-1 mRNA水平是丹参抑制ATF胶原过度合成,防止粘连产生的作用机制之一,丹参素在其中起主要作用.
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溃疡性结肠炎伏毒理论的生物学机制探讨
【目的】通过临床试验研究，探讨溃疡性结肠炎（UC）“伏毒理论”的生物学机制。【方法】选择符合纳入标准的活动期轻、中度和缓解期UC患者40例。活动期UC患者20例，分为中医干预组和西医治疗组，每组10例；缓解期患者20例，分为中医干预组和西医治疗组，每组10例。所有病例均施以常规西医治疗处理，中医干预组加服中药汤剂，疗程分别为8周。采用酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测治疗前后患者血浆前列腺素E2（PGE2）、人基质金属蛋白酶1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）表达水平。【结果】患者血浆MMP-1、 TIMP-1、 PGE2表达水平与病情严重度（缓解期，活动期轻度、中度）之间，均呈正相关（P＜0.001）。治疗后，2组活动期UC患者MMP-1、 TIMP-1、 PGE2表达水平均较治疗前显著下降（P＜0.001），但2组间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗后， UC缓解期中医干预组患者MMP-1、TIMP-1表达水平显著下降（P＜0.05），其降低作用优于西医治疗组（P＜0.05）；2组缓解期UC患者PGE2表达水平与治疗前比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。【结论】清伏毒法可有效治疗UC的生物学机制可能与其降低血浆MMP-1、 TIMP-1表达水平有关。
关键词： 溃疡性结肠炎/中药疗法 中医伏毒理论 MMp-1 TIMP-1 PGE2 -
血清MMP-1、脑钠肽及B型尿钠肽的测定在糖尿病性心肌病早期鉴别诊断中的应用
目的 观察血清MMP-1、 脑钠肽(BNP)以及B型尿钠肽的测定在糖尿病性心肌病早期鉴别诊断中的应用效果.方法 选取我院2014年10月至2017年10月收治的早期糖尿病性心肌病患者、 同期收治的单纯糖尿病患者、 体检健康者各100例,比较三组的FPG、HbAlc、TG、TC、 血清MMP-1、BNP、C反应蛋白水平.结果 糖尿病性心肌病组的FPG、HbAlc、TG、TC、LDL-C、 血清MMP-1、BNP及C反应蛋白水平均明显高于单纯糖尿病组与健康组(P<0.05).结论 血清MMP-1、BNP表达水平在早期糖尿病心肌病患者中明显升高,对于早期糖尿病心肌病的鉴别诊断具有较高的应用价值.
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Mmp-1和Hif-1α在喉癌组织中的表达
目的 研究基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,Mmp-1)和缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1 alpha,Hif-1α)蛋白在喉癌组织中的表达,探讨二者在喉癌发生发展中的作用及两者的相关性.方法 应用免疫组化法(SP法)检测34例喉癌组织、癌旁正常组织、15例声带息肉组织中Mmp-1、Hif-1α的表达.结果 ①Mmp-1、Hif-1α蛋白在喉癌组织中的表达明显高于癌旁组织和息肉组织(P＜0.01)；癌旁组织和息肉组织间的表达差异无统计学意义(p＞0.05).②Mmp-1、Hif-1α的表达与肿瘤病理分级、临床分期、淋巴结转移有关(P＜0.05),与患者的性别、年龄、吸烟量、肿瘤大小、临床分型无关(P＞0.05).③Mmp-1、Hif-1α在喉癌中的表达水平呈正相关.结论 Mmp-1和Hif-1α在喉癌组织中的高表达与喉癌的发生、发展有关,对判断喉癌的恶性程度、病情进展有重要价值.
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妊娠期高血压疾病患者胎儿脐血中MMP-1及TIMP-1的表达及意义
目的 探讨脐血血清中MMP-1及TIMP-1的表达与妊娠期高血压疾病发生及疾病严重程度的相关性.方法 选取43例妊娠期高血压疾病患者为实验组,其中妊娠期高血压18例,轻度子痫前期9例,重度子痫前期16例,同期30例正常晚孕孕妇为对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测脐血血清中MMP-1及TIMP-1的表达.结果 妊娠期高血压疾病组脐血血清中MMP-1表达低于对照组(P＜0.05),妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组MMP-1表达逐渐下降,三组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05),TIMP-1的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MMP-1与妊娠期高血压疾病的发生和疾病严重程度之间存在相关性,MMP-1、TIMP-1可能参与妊娠期高血压疾病的发生与发展.
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大鼠皮肤实验性枪弹伤后MMP-1和MMP-3的表达研究
目的 探讨枪弹伤后大鼠皮肤MMP-1和MMP-3随时间变化的表达情况,为枪弹伤后的损伤时间判断提供依据.方法 建立大鼠对照组和实验组模型.对照组断颈处死后直接取材;实验组分别于枪弹伤后0、1、3、6、12、18、24、48、72 h取材(n=3).取材后用Northern blot法对MMP-1和MMP-3的mRNA进行半定量检测.结果 MMP-1和MMP-3在枪弹伤后即刻其表达就有增加,以后表达继续升高,一直旱上升趋势(P<0.01,P<0.05);而阴性对照组几乎没有表达.结论 枪弹伤后大鼠皮肤MMP-1和MMP-3表达增加的规律性,对枪弹伤后损伤时间的推断有一定的价值.
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凋膜止崩方对子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜MMP-1和TIMP-1蛋白表达的影响
目的:探讨凋膜止崩方靶向干预前后MMP-1和TIMP-1在子宫内膜增生症模型大鼠子宫内膜组织中的表达情况.方法:建立大鼠子宫内膜增生症模型,设立空白组(A)、模型对照组(B)、实验大剂量组(C)、实验小剂量组(D),并进行相应的处理.采用Western-blotting方法检测4组大鼠子宫内膜组织中MMP-1和TIMP-1蛋白的表达.结果:模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05)；实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1蛋白表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05)；实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中MMP-1蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).模型对照组与空白组比较,子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01)；实验大、小剂量组与模型对照组比较子宫内膜组织中TIMP-1/MMP-1的比值均明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:凋膜止崩方治疗子宫内膜增生症的机制可能是通过上调大鼠子宫内膜组织中MMP-1蛋白的表达,下调TIMP-1蛋白的表达,从而加速了子宫内膜组织中ECM的水解,导致子宫内膜崩解、脱落,达到祛除大鼠增生过长子宫内膜作用.
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中医祛腐生肌法祛腐作用机理的实验研究
目的:用现代医学方法探讨中医祛腐生肌法祛腐作用的可能机理.方法:以生肌红粉膏作为中医祛腐生肌法的代表药,对家兔创伤感染性创面模型进行换药,动态对比观察祛腐药在换药过程中对创面MMP-1、MMP-3、细胞凋亡、创面溶菌酶含量的影响.结果:生肌红粉膏能够提高创面MMP-1、MMP-3、创面溶菌酶含量、并促进创面成纤维细胞原位凋亡.结论:中医祛腐生肌法祛腐作用的可能机理是促进金属蛋白酶MMP-1、MMP-3的活性,增强巨噬细胞溶菌酶作用以及刺激局部细胞凋亡等,促进局部腐烂坏死组织的清除,从而达到祛腐作用.
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MMP-1,TIMP-1在丰宫并殖吸虫所致的大鼠肝纤维化中的表达
目的 观察丰宫并殖吸虫所致的大鼠肝脏损伤时MMP-1及其抑制剂TIMP-1在肝纤维形成过程中的动态表达,从而反映其在肝纤维化中的作用机理.方法 SD大鼠25只,随机分为2组.即正常对照组5只和感染组20只.感染组按感染时间长短分为4组,每组5只(感染3周组、感染5周组、感染7周组、感染9周组).感染组每只大鼠腹腔注射8条丰宫并殖吸虫后尾蚴建立动物模型,对照组每只大鼠腹腔注射等量的生理盐水.按感染时间处死各组大鼠.通过ELISA法检测大鼠血清中的MMP-1,TIMP-1含量.同时取肝组织行HE染色判断肝组织发炎程度及肝纤维化程度,行免疫组化染色测MMP-1,TIMP-1在肝组织的表达水平.结果 HE染色肝组织病理形态学结果显示:随着感染时间的延长,肝部炎症逐渐加重,以感染后5周为明显,之后肝细胞变性坏死逐渐增多.免疫组织化学显示:随病情进展,MMP-1、TIMP-1的表达都是持续上升的.ELISA法所检测的血清中的MMP-1呈现上升的趋势,TIMP-1含量是持续上升的.结论 丰宫并殖吸虫感染大鼠可引起肝脏纤维化病变,MMP-1和TIMP-1在此病变过程中的表达有所差异.肝脏病变的严重程度与感染时间、MMP-1和TIMP-1的表达有关.提示MMP-1和TIMP-1在丰宫并殖吸虫感染大鼠致肝纤维化的形成机制中起作用.
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γ射线对C57BL/6J和C3H/HeN小鼠肺成纤维细胞生物学行为影响的比较研究
目的:比较C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞以不同剂量的60Coγ射线照射后生物学行为的异同.方法:原代分离培养C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠肺成纤维细胞(LF), 应用2、 4、 6和8 Gy的60Coγ射线照射后, 通过MTT比色法、流式细胞术、 AgNOR染色和免疫荧光细胞化学染色法,检测照射后两种LF的增殖活力、细胞周期以及a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)表达的变化.结果:以2 ～8 Gy照射后, C57BL/6J和C3H/HeN小鼠的LF增殖活力与正常对照组相比较未见明显增强.照射后, C57BL/6J小鼠的LF非整倍体增多, a-SMA高表达, MMP-1的表达呈弱阳性, TIMP-1的表达呈增强趋势.照射后, C3H/HeN小鼠的LF出现G2-M期阻滞, a-SMA的表达减弱至消失, MMP-1和TIMP-1的表达均呈增强趋势.结论:以60Coγ射线照射后, C57BL/6J和C3H/HeN两种小鼠的LF生物学行为不同, C57BL/6J小鼠的LF呈"活化"状态, 为该种小鼠易发生肺纤维化的细胞学基础提供了实验依据.
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MMP-1在人牙周膜成纤维细胞中的表达
目的:在基因和蛋白水平检测体外培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLF)金属基质蛋白酶-1(MMP-1)的表达情况.方法:①收集4～6代体外培养的人PDL细胞,使用PCR方法检测细胞内MMP-1的基因表迭;②取细胞外液用Western blot方法检测MMP-1蛋白表达.结果:PCR结果显示MMP-1在PDL中基因水平上有表达,而Wostern blot结果在蛋白水平上也证明了MMP-1在PDL中有表达,结论:体外培养的PDL具有MMP-1的功能.
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富血小板血浆(PRP)对大鼠光老化皮肤胶原蛋白、TGF-β及MMP-1表 达的影响
目的:通过测定注射富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)后大鼠光老化皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白,转化因子β(TGF-β),基质金属蛋白酶1(MMP-1)的表达量,观察PRP对大鼠光老化皮肤的改善作用.方法:通过紫外线照射大鼠背部皮肤建立皮肤光老化模型.将模型动物随机分为5组,A-PRP注射组注射激活的PRP(A-PRP);N-PRP注射组注射未激活的PRP(N-PRP);生理盐水注射组注射生理盐水;空白对照组仅照射建模;正常大鼠组仅剃除毛发.干预4周后,通过免疫组化法对大鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量进行半定量分析;通过Western bolt法对大鼠皮肤TGF-β、MMP-1表达量进行测定.结果:Ⅰ型胶原表达:A-PRP注射组较N-PRP注射组、生理盐水注射组、空白对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).Ⅲ型胶原表达:A-PRP注射组显著高于生理盐水注射组、空白对照组(P<0.05),与N-PRP注射组比较,差异无统计学意义(P>0.05).TGF-β表达:A-PRP注射组显著高于N-PRP注射组、生理盐水注射组、空白对照组(P<0.05);MMP-1表达:A-PRP注射组显著低于生理盐水注射组、空白对照组(P<0.05),与N-PRP注射组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:注射PRP可以提高光老化大鼠皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白和TGF-β表达,降低MMP-1表达,其中A-PRP对Ⅰ型胶原和TGF-β表达的促进作用优于N-PRP.
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TGF-β1对UVA照射人皮肤成纤维细胞MMP-1和MMP-3 mRNA表达的影响
目的:研究转化生长因子-β1(tansforming gowth fctor-beta 1,TGF-β1)对长波紫外线(ultrayiolet A,OVA)照射人皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinasv-1,MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(matrix metalloprotein ase-3,MMP-3)mRNA表达的影响,探讨TGF-β1对皮肤成纤维细胞的光保护机制.方法:通过体外培养人皮肤成纤维细胞,加入不同浓度TGF-β1(0.1、1、10ng/m1)预处理细胞后UVA15J/cm2照射诱导细胞光老化,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测成纤维细胞增殖活性,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定MMP-1、MMP-3mRNA表达. 结果:UVA15J/cm2照射前给予不同剂量TGF-β1预处理,随TGF-β1剂量增加成纤维细胞增殖活性明显提高,MMP-1、MMP-3mRNA表达随着TGF-β1剂量增加而降低.结论:TGF-β1可提高UVA照射体外培养成纤维细胞增殖活性,减少UVA照射体外培养的皮肤成纤维细胞MMP-1、MMP-3 mRNA表达,减少其对胶原的降解,对UVA照射皮肤成纤维细胞起保护作用.
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强脉冲光对培养的人成纤维细胞表达MMP-1和TIMP-1的影响
目的:观察强脉冲光照射对体外培养的成纤维细胞表达基质金属蛋白酶(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)的影响,探讨IPL嫩肤作用的分子生物学机制.方法:采用能量密度分别为20、25、30J/cm2的强脉冲光对培养的人成纤维细胞进行照射,于照射后24h及48h应用ELISA法测定上清液中MMP-1和TIMP-1的表达并与对照组比较.结果:照射24h后25及30J/cm2组上清液中检测到的MMP-1、TIMP-1含量轻度升高;48h时各能量组MMP-1均升高,但各组间并无显著性差异.TIMP-1随能量的升高而含量增高.结论:强脉冲光照射成纤维细胞后可引起MMP-1,TIMP-1表达的增加,但是TIMP-1的增加远远大于MMP-1的增加,提示IPL嫩肤作用的生物学机制可能与成纤维细胞产生的TIMP-1增加有关.
