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PDLIM2基因在膀胱癌组织中的表达及其临床意义
目的 探讨PDLIM2 mRNA在膀胱尿路上皮癌组织与正常膀胱组织中的表达及其临床意义,研究PDLIM2基因在预测膀胱癌术后复发、进展以及预后判断中的价值.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测80例膀胱尿路上皮癌组织、10例膀胱黏膜正常组织中PDLIM2 mRNA的表达,并结合临床病理特征进行分析.结果 膀胱癌组织中PDLIM2 mRNA表达量明显低于正常膀胱组织(P＜0.05),仅是正常组织中表达量的49.8％,其表达水平与膀胱癌的分化程度、病理分期、肿瘤数目、大小相关,随肿瘤分级、分期、数目、直径的增加而减少(P＜0.05),与性别、年龄无相关(P＞0.05).单因素分析表明肿瘤分级、分期、数目及PDLIM2 mRNA表达量是膀胱癌患者术后复发或进展的预后因素.Logistic回归分析表明PDLIM2 mRNA表达是评估膀胱癌患者无病生存预后的独立预测因子[相对危险度(RR)=0.982,95％可信区间(CI)=0.967 ～0.997,P＜0.05],PDLIM2表达低的膀胱癌患者较PDLIM2高表达的患者更容易出现复发或进展.多因素分析发现膀胱肿瘤的分级、数目与PDLIM2 mRNA表达明显相关(P＜0.05).结论 PDLIM2 mRNA的表达与膀胱癌的发生、发展密切相关,可能是预测膀胱癌术后复发或进展的潜在肿瘤标志物.
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Ⅰ期非小细胞肺癌纵隔淋巴结中肺特异性蛋白X mRNA表达与微转移及预后的关系
目的 检测肺特异性蛋白X(LUNX) mRNA在Ⅰ期非小细胞肺癌纵隔(N2)淋巴结中的表达,探讨其与微转移及预后等相关性.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测160例Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织及N2淋巴结中LUNX mRNA表达,分析与肿瘤大小、病理类型及预后等相关性.结果 LUNX mRNA在肿瘤组织中均表达,在良性疾病淋巴结中未见表达,160枚N2淋巴结中17枚表达；腺癌患者N2淋巴结表达明显高于鳞癌(P＜0.05)；Ⅰa期患者N2淋巴结表达高于ⅠA期(P＜0.05)；N2淋巴结表达患者5年生存率较不表达患者明显降低(P＜0.01).结论 Ⅰ期NSCLC患者N2淋巴结中LUNX mRNA表达提示可能存在微转移,且预后较差；腺癌N2淋巴结微转移率可能高于鳞癌；Ⅰa期患者预后较ⅠA期差,可能与其N2淋巴结微转移率较高有关.
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细胞因子通路抑制因子3在前列腺癌中的表达及其意义
目的 检测细胞因子通路抑制因子3( SOCS3)在前列腺癌和前列腺增生组织中的表达,分析其表达水平与临床病理参数的关系,探讨SOCS3在前列腺癌中的意义.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测SOCS3基因在前列腺癌、前列腺增生组织中的表达,免疫组织化学技术检测前列腺癌、前列腺增生组织中SOCS3蛋白的表达,结合SOCS3免疫组织化学评分与前列腺癌患者临床病理参数进行分析.结果 相对于前列腺增生组织,前列腺癌患者组织中SOCS3表达下调(P＜0.01)；49例前列腺癌组织有26例阳性,29例前列腺增生组织有22例染色阳性,SOCS3在前列腺增生组织的染色强于前列腺癌组织(P＜0.05)；SOCS3表达与前列腺癌患者血清前列腺特异性抗原(PSA)水平(P＜0.01)、Gleason评分(P＜0.05)和肿瘤TNM分期呈负相关(P＜0.01),与肿瘤转移呈正相关(P＜0.01),与年龄无明显相关(P＞0.05).结论 检测SOCS3可鉴别前列腺癌和前列腺增生；在前列腺癌中SOCS3表达下调可抑制前列腺癌的进展,表达上调促进前列 腺癌转移.
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LGL/Hugl-1在肾细胞癌及癌旁肾组织中的表达及其意义
目的 探讨肾细胞癌、癌旁肾组织中LGL( lethal giant larvae)/Hugl-1基因的表达水平及临床意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR法)方法检测肾细胞癌组织及癌旁组织各30例中LGL/Hugl-1基因的表达,同时应用统计学方法评价在肾细胞癌不同临床阶段LGL/Hugl-1基因表达的差异.结果 LGL/Hugl-1在肾细胞癌组织中平均表达(LGL/Hugl-1和18s的比值)为0.00018±0.00021,而癌旁组织中该值为0.00004±0.00003,差异有统计学意义(P＜0.05)；LGL/Hugl-1基因在80.0％ (24/30)的肾细胞癌组织中表达升高,其中升高超过2倍的病例为73.3％ (22/30)；LGL/Hugl-1在癌旁与肾癌的表达比值在临床分期(Ⅰ+Ⅱ)期中平均为7.2±8.7,而在(Ⅲ+Ⅳ)期中为8.9±11.1,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LGL/Hugl-1基因在肾细胞癌组织中表达明显高于癌旁组织.LGL/Hugl-1基因在肾细胞癌组织与癌旁组织中的表达差异与临床分期无关.肾细胞癌的发生、发展可能与LGL/Hugl-1基因有关.
关键词： 肾细胞癌 实时荧光定量聚合酶链反应 LGL/Hugl-1 -
微小RNA-506在肝癌组织的表达及其临床意义
目的 检测肝细胞肝癌(HCC)组织中微小RNA(miRNA,miR)-506的表达,探讨miR-506在肝癌临床诊治中的意义.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术检测70例肝癌及其对应癌旁肝脏组织中miR-506的表达并结合临床资料进行分析.结果 miR-506在肝癌组织中的表达量相对值(0.32±0.04)低于对应癌旁肝脏组织的表达量(0.91 ±0.04,t=6.342,P =0.000).miR-506的表达与患者的肝内转移、TNM分期及癌栓等临床病理学特征明显相关(x2=6.534、5.452、5.736,P=0.011、0.020、0.017).结论 miR-506在肝癌中的表达均低于癌旁组织,miR-506基因的表达异常在肝癌的发生、发展中起重要作用.
关键词： 癌 肝细胞 微小RNA 实时荧光定量聚合酶链反应 -
人宫颈癌基因在结直肠癌和结直肠腺瘤组织的表达及其意义
目的 观察人宫颈癌基因(HCCR-1)在结直肠癌、腺瘤和正常黏膜中的表达,探讨其临床意义.方法 采用免疫组织化学及实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测HCCR-1在80例结直肠腺瘤、30例结直肠癌以及20例正常结直肠黏膜组织中的表达.结果 HCCR-1在正常结直肠黏膜组、结直肠腺瘤组及结直肠癌组织中表达水平的差异有统计学意义(P =0.001),阳性表达率分别为10.00％、62.50％、100.00％.在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤组织中阳性表达率分别为46.70％、66.70％、80.00％,差异有统计学意义(P=0.015).FQ-PCR检测结果显示在正常对照组、管状腺瘤组、混合性腺瘤组、绒毛状腺瘤组及大肠癌组HCCR-1表达量分别为0.6092±0.326 1、4.0346±1.1884、12.353 4±2.828 0、22.563 7±78.952 0、43.202 9±7.675 4.结论 HCCR-1在结直肠腺瘤的恶变及结直肠癌的发生发生发展过程中起一定作用.
关键词： 结直肠腺瘤 结直肠癌 免疫组织化学 实时荧光定量聚合酶链反应 人宫颈癌基因 -
组织因子及其剪切体在胃癌组织中的表达及其预后的研究
目的 探讨组织因子(TF)及其剪切体在胃癌组织中的表达,并分析全长组织因子(flTF)及其剪切体(asTF)与胃癌患者预后的关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测52例胃癌组织及10例正常胃组织的flTF及asTF的基因表达水平并分析临床意义,应用Cox模型分析其与胃癌患者死亡的关联程度.结果 胃癌组织flTF mRNA相对定量[7.45(0.34 ～33.68)]高于正常胃组织[3.00(1.36 ～5.02)],差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织asTF mRNA相对定量[0.88(0.07 ～26.00)]高于正常胃组织[0.33(0.03 ～0.97)],差异有统计学意义(P＜0.01).flTF与asTF基因表达水平与性别、年龄、TNM分期、肿瘤大小、组织学分型和化疗敏感性等预后相关因素的关系差异均无统计学意义(P＞0.05).Log-rank生存分析显示flTF低表达组[33.83(25.24 ～42.43)个月]比高表达组[18.18(13.32 ～23.04)个月]平均术后生存时间显著延长15.66个月,差异有统计学意义(x2=6.185,P＜0.05).asTF低表达组[25.32(21.19 ～29.45)个月]比高表达组[20.50(12.51～28.48)个月]平均术后生存时间显著延长4.82个月,差异有统计学意义(X2 =4.604,P＜0.05).多因素Cox模型分析显示,flTF及asTF均是胃癌独立的预后风险因素[风险比(HR)=6.03,95％可信区间(CI):1.02 ～35.71,P＜0.05]及(HR=10.74,95％ CI:2.32～49.59,P＜0.01).结论 flTF及asTF mRNA在胃癌组织中的表达水平较正常组织显著上调,flTF及asTF的基因表达水平是胃癌患者死亡的高危因素.
关键词： 胃癌 组织因子 剪切体 预后 实时荧光定量聚合酶链反应 -
宫颈癌中缺氧诱导因子-1α的表达及临床意义
目的 探讨缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1 alpha,HIF-1α)在宫颈癌组织中的表达及与宫颈癌临床病理特征关系.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,QRT-PCR)法检测49例宫颈癌患者、46例宫颈正常患者组织中HIF-1α mRNA的表达.结果 HIF-1α mRNA在宫颈癌患者组织中表达明显高于正常宫颈组织,相对定量结果为正常组织的4.6倍,且差异有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌患者中有淋巴结转移的组织中HIF-1α mRNA的表达明显高于无淋巴结转移者(P=0.03),低分化组织中HIF-1αmRNA的表达明显高于高中分化者(P=0.013),浸润深度≥1/2间质者明显高于＜1/2间质者(P=0.006);Ⅲ～Ⅳ期患者组织中HIF-1α mRNA的表达高于Ⅰ～Ⅱ期者(P＜0.05).结论 HIF-1α mRNA在宫颈癌组织中明显高表达,在宫颈癌的发生、发展中起着重要的作用.
关键词： 宫颈癌 乏氧诱导因子-1α 实时荧光定量聚合酶链反应 -
miR-181a在卵巢癌组织中的表达及临床意义
目的:分析miR-181a在卵巢癌组织中的表达并探究其与临床特征之间的关系.方法:选取我院妇科2011-2013年治疗的30例卵巢癌恶性肿瘤患者的卵巢组织为卵巢癌组,选取同期术中诊断卵囊巢浆液性或黏液性囊腺瘤行卵巢切除的卵巢组织为对照组.提取两组患者卵巢组织中的总RNA后通过microRNA茎环引物进行逆转录,实时荧光定量PCR(q-PCR)技术检测正常组织与卵巢癌组织中miR-181a的表达,并分析不同临床特征中miR-181a的表达差异.结果:miR-181a在卵巢癌中表达显著升高,相对正常组表达量(2-△△Ct值)为20.620±1.242.上皮性卵巢癌组织中,高分化卵巢癌miR-181a的表达明显低于中、低分化组织;病理分期Ⅰ、Ⅱ期的卵巢癌患者miR-181a表达明显低于Ⅲ、Ⅳ;存在淋巴转移的患者miR-181a表达明显高于无淋巴转移的患者;术前CA-125＜1 000 μmol/L的患者miR-181a表达明显低于CA-125＞1 000 μmol/L的患者;腹水量＜1000ml的患者miR-181a的表达明显低于腹水量＞1 000 ml的患者,以上差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:miR-181a在卵巢癌组织中表达差异明显,并与患者FIGO分期、组织分级、淋巴转移、术前CA-125等临床特征相关,提示它可能参与调节卵巢癌的发生、发展并可能成为卵巢癌治疗的一个潜在靶点.
关键词： 卵巢癌 miR-181a 实时荧光定量聚合酶链反应 -
慢性心力衰竭患者心肌热休克蛋白47的表达及其与纤维化的相关性研究
目的 热休克蛋白47(HSP47)是一种高度保守的分子蛋白,被认为是胶原的特异性分子伴侣,在胶原合成及纤维化中发挥着重要的作用.本文探讨心室重构在慢性心力衰竭患者中的分子机制.方法 手术病人取血清及组织标本各60例,分为3组:心功能1级组、心功能2级组、心功能3级组,每组20例.采用实时荧光定量(RT-PCR)方法检测HSP47的mRNA表达量,并且运用酶联免疫吸附法测定上述60例患者血清HSP47、Ⅰ型前胶原羧基末端前肽(PⅠCP)浓度.结果 (1)与心功能1级组比较,HSP47 mRNA水平在心功能2级组、心功能3级组的心肌组织中表达明显增加(P＜0.05),且在心功能3级组较心功能2级组明显增加(P＜0.05).(2)心肌组织中HSP47表达量与血清中HSP47、PⅠ CP水平呈显著独立正相关(r=0.704,P＜0.05;r=0.811,P＜0.05).结论 HSP47 mRNA在慢性心力衰竭患者中表达增加,提示HSP47可能参与了心室重构.
关键词： 热休克蛋白47 慢性心力衰竭 实时荧光定量聚合酶链反应 心肌纤维化 心室重构 -
胰岛素样生长因子结合蛋白7过表达对人乳腺癌细胞系-7增殖的影响及其机制研究
目的：探究过表达胰岛素样生长因子结合蛋白7（IGFBP7）对人乳腺癌细胞系-7（MCF-7）增殖的影响及其机制。方法采用LipofectamineTM 2000将pIRES2- ZsGreen1- IGFBP7质粒或pIRES2- ZsGreen1空白质粒转染进MCF-7乳腺癌细胞，并用荧光显微镜鉴定细胞转染；实时荧光定量聚合酶链反应（Real- time PCR）对转染48 h后IGFBP7蛋白进行定量；细胞凋亡实验检测转染24、48和72 h后各组细胞增殖情况；Western bolt检测转染48 h后各组细胞（蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白）（AKT/mTOR）信号通路相关蛋白的表达。结果 Real- time PCR的检测结果提示经过IGFBP7转染的细胞IGFBP7 mRNA表达水平明显升高；细胞凋亡实验结果发现，与空白处理组和空白质粒转染组比较，IGFBP7过表达组细胞增殖能力明显降低；West-ern bolt检测结果发现，AKT蛋白的磷酸化水平明显下降，且其下游的mTOR表达明显下降（<0.05）。结论IGFBP7过表达对MCF-7乳腺癌细胞的增殖具有抑制效果，可能是通过对AKT/mTOR信号通路的抑制达到对MCF-7的抑制。
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 胰岛素样生长因子结合蛋白7 增殖 蛋白激酶B -
过表达microRNA-29a上调锌脂蛋白91对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响
目的 建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(miR-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响.方法 将miR-29a前体表载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选.实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29a的表达,流式细胞术检测miR-29a稳定过表达组、空质粒对照组以及未感染组PC12细胞的凋亡情况,利用Tar-getScan 6.0数据库预测miR-29a的关键靶点,RT-qPCR以及Western blot检测预测的miR-29a下游靶基因mRNA以及蛋白表达的变化.结果 经抗性筛选后获得稳定表达miR-29a的PC12细胞系,荧光显微镜下观察各组PC12细胞的感染效率均达80％以上,miR-29a过表达组凋亡率为(5.1±0.92)％,空质粒对照组为(1.832±0.26)％,耒感染组为(1.667±0.185)％,miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡(P＜0.01),空质粒对照组与未感染组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义;RT-qPCR检测iR-29a过表达时锌指蛋白91(ZFP91)的表达量升高,miR-29a过表达组ZFP91 mRNA的表达量是空质粒对照组的1.835倍(P=0.000),空质粒对照组与未感染组ZFP91 mRNA的表达量比较差异无统计学意义;Western blot检测的ZFP91蛋白表达量与空质粒对照组比较也升高.结论 在PC12中miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡,过表达miR-29a也促进ZFP91表达,其机制仍待进一步阐明.
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大鼠肉瘤蛋白样激活剂2在结肠癌中的表达及临床意义
目的 检测大鼠肉瘤蛋白样激活剂2(RASAL2)在结肠癌组织中的表达,探讨其与结肠癌临床病理特征的相关性及意义.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹及免疫组织化学法检测RASAL2在42例结肠癌及其癌旁组织中的表达,分析其与结肠癌临床病理特征的相关性.结果 qRT-PCR及蛋白质印迹检测显示,RASAL2在结肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(P＜0.05);免疫组织化学法染色结果显示,RASAL2在结肠癌组织中的高表达率明显低于癌旁组织(42.9％ vs 88.1％,x2=19.012,P＜0.01),且RASAL2的表达与肿瘤的Dukes分期、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论 RASAL2在结肠癌中的低表达可能与肿瘤的发生、发展和浸润转移等恶性生物学行为相关.
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MicroRNA-9-3p在2型糖尿病合并不稳定型心绞痛患者血浆中的表达分析
目的 检测microRNA-9-3p(miR-9-3p)在2型糖尿病(T2DM)患者以及T2DM合并不稳定型心绞(T2DM+UA)痛患者血浆中的表达水平,分析miR-9-3p对于T2DM以及T2DM+UA的诊断价值.方法 选取2012年1月-2013年6月唐山市工人医院就诊的单纯T2DM患者50例为T2DM组,T2DM+UA患者50例为T2DM+UA组,健康体检人员30例为对照组.抽取患者外周静脉血,提取microRAN(miRNA),应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR),以miR-423-5p为内参,检测3组血浆中miR-9-3p表达水平,应用受试者工作曲线(ROC)统计分析其对于T2DM以及T2DM+UA的诊断价值.结果 3组血浆miR-9-3p表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),T2DM组及T2DM+UA组均高于对照组,T2DM+UA组高于T2DM组;miR-9-3p对于T2DM的诊断价值AUC=0.723(95%CI:0.610,0.837,P<0.05),miR-9-3p对于T2DM+UA的诊断价值AUC=0.972(95%CI:0.963,0.981,P<0.05).结论 miR-9-3p在T2DM以及T2DM+UA患者血浆表达水平升高,miR-9-3p有望作为T2DM以及T2DM+UA早期诊断的分子标志物.
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老年晚期非小细胞肺癌外周血RRM1表达与吉西他滨疗效及预后的相关性研究
目的 探讨老年晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)外周血中核苷酸还原酶M1(RRM1)的表达水平与吉西他滨化疗疗效及预后的相关性.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应方法(qRT-PCR)检测40例老年晚期NSCLC患者外周血中RRM1的表达水平,并对临床特征、吉西他滨化疗的疗效及预后的关系进行分析.结果 外周血RRM1的表达水平与性别、组织学类型及分期差异均无统计学意义(P >0.05).低表达组的外周血RRM1化疗有效率(35%)及疾病控制率(60%)均高于高表达组(10%,20%)(P <0.05).生存分析显示:低表达组的外周血RRM1生存期(14.8个月)及无疾病进展期(4.4个月)均长于高表达组(11.6个月,3.2个月)(P <0.05);低表达组的1年生存率(76.7%)及2年生存率(9.3%)均高于高表达组(53.3%,0%)(P <0.05).结论 老年晚期非小细胞肺癌外周血中RRM1低表达的患者对吉西他滨化疗反应率更高,生存期更长,是独立的预后因素.这为无法获取组织进行化疗药物筛选的老年晚期NSCLC患者提供了一种新的选择.
关键词： 老年 非小细胞肺癌 外周血RRM1 吉西他滨 实时荧光定量聚合酶链反应 -
MicroRNA-125a-5p表达对弥漫大B细胞淋巴瘤耐药及临床预后的影响
目的 检测microRNA-125a-5p(miR-125a-5p)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达情况,探讨其对肿瘤耐药及预后的影响.方法 收集DLBCL石蜡标本及其临床病理资料并随访;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测组织中miR-125a-5p的mRNA相对表达量;用免疫组织化学染色检测肿瘤组织中P糖蛋白(P-gp)、细胞增殖核抗原(Ki-67)蛋白的表达;分析miR-125a-5p与耐药蛋白P-gp表达的关系,以及该表达对DLBCL肿瘤细胞增殖和临床病理特征及预后的影响.结果 MiR-125a-5p在DLBCL组中的表达高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);其表达量与患者乳酸脱氢酶(LDH)、免疫表型相关(P <0.05),与年龄、性别、原发部位、临床分期、国际预后指数(IPI)均无相关(P >0.05);miR-125a-5p高表达组P-gp蛋白阳性率高于低表达组;Kaplan-Meier及Log-rank生存分析显示低表达miR-125a-5p患者的总生存期(OS)及无复发生存期(RFS)均高于高表达组,COX风险比例模型分析显示Ann Arbor分期Ⅲ、Ⅳ期及miR-125a-5p高表达均可作为DLBCL患者预后不良的因素.结论 miR-125a-5p与DLBCL耐药蛋白P-gp表达相关,miR-125a-5p高表达及Ann Arbor分期Ⅲ、Ⅳ提示DLBCL患者预后较差,可作为潜在的DLBCL预后预测分子.
关键词： 大B细胞淋巴瘤 miR-125a-5p P-gp 实时荧光定量聚合酶链反应 预后 -
氯化镉对大鼠肾细胞内MAPK基因mRNA表达的影响
目的 观察不同浓度氯化镉(CdCl2)对大鼠肾(NRK)细胞MAPK基因mRNA表达的影响.方法 应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度CdCl2(0、2.5、5.0、10.0、20.0和40.0μmol/L)染毒24 h后对NRK细胞存活率的影响;应用带有SYBR Green Ⅰ的实时荧光定量PCR技术观察不同浓度CdCl2(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)对NRK细胞内MAPK基因(ERK1/2、p38MAPK、JNK1/2)mRNA表达的影响.结果 以阴性对照组(CdCl2 0μmol/L)NRK细胞存活率为100%,各染毒组(CdCl25.0、10.0、20.0和40.0μmol/L)NRK细胞存活率分别为72.28%、39.95%、15.66%、10.39%,且与对照组之间差异有统计学意义(P<0.01),并存在剂量-效应关系,经CdCl2染毒后,各实验组(CdCl2 2.5、5.0和10.0μmol/L)NRK细胞的ERK1/2、p38MAPK、JNK1/2基因的mRNA的相对表达量均低于阴性对照组(P<0.05或P<0.01).结论 CdCl2可能引起NRK细胞内MAPK基因mRNA的表达水平发生改变.
关键词： 镉 丝裂素活化蛋白激酶 实时荧光定量聚合酶链反应 -
137 Cs γ射线慢性照射诱导大鼠血MDM2基因表达改变研究
目的 探讨长期慢性137Cs γ射线照射对大鼠血中MDM2基因表达改变的影响.方法 无特定病原体级雄性SD大鼠120只,随机分成1个对照组,11个剂量组,每组均为10只,各剂量组137Cs γ射线慢性累积照射分别为0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 Gy,对照组不予照射.照射完成后采腹主动脉血,利用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组血中MDM2基因表达的剂量-效应关系.结果 各剂量组和对照组比较,血中MDM2基因的表达量均发生变化,从整体水平看随受照剂量的增加,基因表达量先上升后下降.其中,0.05、0.10Gy剂量组中的基因表达量升高,其后0.20～1.00 Gy剂量范围MDM2基因的相对表达量出现一定程度回落,以0.20 Gy剂量组中的基因表达量降至低点;0.20～2.00 Gy剂量范围随着照射剂量增大,MDM2基因的相对表达量呈线性关系升高,2.00 Gy剂量组的MDM2基因表达量高;其后随着剂量的增加,MDM2基因的相对表达量再次出现下降趋势.拟合建立了0.20～2.00 Gy剂量范围内MDM2基因表达量与照射剂量之间的回归方程为多=1.918 9x+0.386 0,决定系数=0.99,P＜0.01.结论 慢性累积照射可诱导大鼠血中MDM2基因表达发生改变,其总体表达趋势是先上升后下降,其中0.20～2.00 Gy剂量内MDM2基因表达量与照射剂量有较好的剂量-效应关系.
关键词： 电离辐射 γ射线 mdm2基因 实时荧光定量聚合酶链反应 -
60Co γ射线诱发人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因表达变化研究
目的 探讨电离辐射诱导人正常肝细胞HL-7702甲型肝炎病毒受体2(HAVCR2)和MXR7基因的表达变化,为寻找辐射致肝脏损伤早期诊断标志物提供实验依据.方法 将对数生长期的人正常肝细胞HL-7702分为10组,利用中国辐射防护研究院钴-60(60Co)照射装置对各组肝细胞照射,吸收剂量率为1.29 Gy/min,吸收剂量分别为0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 Gy,利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的变化,分析剂量-反应关系.结果 HAVCR2基因表达在照射后4、24 h总体上调;其中,0.2～0.8 Gy剂量组在照射后24 h基因相对表达量与照射剂量具有很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.14x2-0.48x+ 1.34;1.0～3.0Gy剂量组在照射后24 h,基因相对表达量与照射剂量呈现很好的剂量-反应关系,满足回归方程:y=0.44x+0.56.MXR7基因表达在照射后4、24 h较对照组显示出明显差异;其中,0.2～0.8 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后4h与对照组相比总体上调,但随照射剂量增大,上调幅度降低;照射后24h,其基因表达未见明显规律;1.0～5.0 Gy剂量组MXR7基因表达在照射后24 h整体上调,且基因的表达与照射剂量呈现一定的剂量相关性,满足方程为y=0.57x+0.43.结论 电离辐射可以诱导人正常肝细胞HL-7702 HAVCR2和MXR7基因的差异表达,且基因表达与照射剂量存在一定的剂量相关性.
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大鼠脊髓发育及损伤后NIDD mRNA表达的实验研究
目的:探讨在大鼠发育过程中及急性脊髓损伤后脊髓组织中NIDD(nNOS-interacting DHHC domain-containing protein with dendritic mRNA)mRNA的表达变化及意义.方法:采用改良Allen's打击法,咬除T8～10椎板后,造成大鼠脊髓损伤模型,致伤量为10×10 g·cm;借助实时荧光定量PCR、原位杂交与免疫荧光结合的方法,定量、定位研究发育过程中及脊髓损伤后早期大鼠脊髓组织中NIDD mRNA与nNOS mRNA表达的时间和空间分布特征.结果:大鼠发育过程中,胚胎16 d的大鼠脊髓中可见NIDDmRNA的高表达,在生后1 d,与nNOS共表达于尚未分化成熟的前角,在白质也见NIDD的阳性信号.成年后呈低表达;nNOS mRNA于生后1～3 d出现表达高峰;脊髓损伤后NIDD mRNA表达明显增多,在8 h到达高峰,分布于脊髓前角、中间带、中央管周围及后角nNOS阳性的神经元,7 d恢复至正常水平;nNOSmRNA在损伤后8h达到高峰,1 d降低至正常水平.而且,在脊髓损伤后NDD mRNA与nNOS mRNA二者表达呈正相关.结论:胎鼠脊髓中,NIDD高表达于nNOS阳性细胞,提示其在脊髓组织的发育成熟过程中的作用可能与nNOS相关.脊髓损伤后脊髓组织中NIDD与nNOS表达增多,提示在脊髓损伤的病理过程中,NIDD可能通过调节nNOS的细胞亚定位及活性而发挥一定的生物学作用.
