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骨髓间充质干细胞成骨分化过程中碱性磷酸酶基因表达含量的变化
目的:提取鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)进行成骨诱导并对BMSCs成骨分化过程中碱性磷酸酶(ALP)的表达量进行定量监测,揭示BMSCs在成骨分化过程中活性的变化.方法:采用全骨髓贴壁法提取鼠BMSCs,培育、扩增至第3代时,以地塞米松、β-甘油磷酸钠、维生素C为主要成分配制诱导培养基进行成骨诱导3周.在成骨诱导过程中,通过实时荧光定量(qRT-PCR)探针法对目标细胞的ALP表达量进行实时监测.结果:成骨诱导BMSCs,经显微镜观察、ALP染色、矿化结节染色等检测方法证实诱导成功.qRT-PCR实时检测的ALP表达量在1周后快速上升并维持1周的高值,2周后快速下降至初始值.结论:采用全骨髓贴壁法提取、培养的BMSCs,利用经典的成骨诱导方法可分化为成骨细胞.成骨分化过程中,目标细胞的成骨活性1周后开始快速增强,并可在高水平维持1周,2周后活性开始下降.
关键词： 骨髓间充质干细胞 成骨分化 碱性磷酸酶 基因表达 实时荧光定量聚合酶链反应 -
miR-21和miR-125在结直肠癌中的表达及其与临床病理指标的关系
目的 探讨miR-21和miR-125在结直肠癌中的表达与临床病理特征之间的关系.方法 选取2006年7月至2007年12月经手术切除的原发性结直肠癌标本100例,采用实时荧光定量PCR分析miR-21和miR-125的表达情况.结果 相对于癌旁组织,100例结直肠癌组织中miR-21表达上调2.3倍(P=0.025),其表达与TNM分期(P=0.028)以及浸润深度有关(P=0.023);而miR-125在癌组织中的表达则下调3.3倍(P=0.005),其表达与TNM分期、浸润深度和远处转移无明显关联(P>0.05).结论 miR-21可能参与了结直肠癌的发生和发展;而miR-125可能未参与.
关键词： 结直肠肿瘤 实时荧光定量聚合酶链反应 微RNAs -
细胞增殖标记物微型染色体维持蛋白2在结肠腺瘤和腺癌中的表达差异及意义
目的 探讨细胞增殖标记物MCM2在结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠黏膜中的表达差异及在不同临床病理特征的结肠腺瘤巾的表达差异.方法 应用免疫组织化学(免疫组化)SP法检测MCM2在正常结肠黏膜、结肠腺瘤及结肠癌中的表达部位;应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测MCM2 mRNA在12例结肠癌、33例结肠腺瘤及5例正常黏膜中表达量的差异并分析其意义,同时用REST-XL(C)软件分析不同临床病理特征的腺瘤之间MCM2的表达差异及其意义.结果 MCM2在正常黏膜中仅表达在腺凹底部,而在结肠腺瘤及腺癌组织中均呈全层上皮表达,但两者在MCM2 mRNA水平上的表达量差异有统计学意义(P=0.001).结肠腺瘤与正常黏膜相比较,MCM2表达上调,但差异无统计学意义(P＞0.05).不同临床病理特征的结肠腺瘤之间MCM2表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MCM2在正常黏膜和结肠肿瘤中表达部位不同,且在结肠腺瘤及结肠癌中的表达量差异显著,可能作为早期筛查诊断结肠癌及评估腺瘤突变的指标之一.
关键词： 结肠腺瘤 结肠肿瘤 细胞增殖标记物 微型染色体维持蛋白 实时荧光定量聚合酶链反应 -
联合检测EB病毒相关抗体和抗原对诊断鼻咽癌的价值
背景与目的:近年来随着分子生物学的发展,提供了多项EB病毒(Epstein-Barr virus)相关的检测指标.本研究通过同时检测EB病毒VCA-IgA、EA-IgA、EBV-特异性DNA酶(EBV-DNase)抗体、EB病毒DNA(EBV-DNA),评价联合检测对诊断鼻咽癌的价值.方法:收集160例治疗前的鼻咽癌患者和76例健康成人的血清和血浆,应用免疫酶染色法检测血清VCA-IgA、EA-IgA;用正丁酸与巴豆油激发Raji细胞方法检测EBV-DNase抗体;用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative PCR,RQ-PCR)分析血浆EBV-DNA,评估其在诊断鼻咽癌中的价值.结果:单项检测时对鼻咽癌患者诊断的敏感性和特异性分别为:VCA.IgA 90.0%、89.5%,EA-IgA75.0%、94.7%.EBV-DNase抗体76.3%、90.8%,EBV-DNA 68.8%、88.2%.联合检测的敏感性和特异性分别为98.8%和84.2%.VCA-IgA、EA-IgA阳性率与临床分期无关(P＞0.05),各临床分期中EBV-DNase抗体阳性率、EBV-DNA水平与阳性率的差异有统计学意义(P＜0.05).结论:VCA-IgA、EA-IgA、EBV-DNase和EBV-DNA单项检测时VCA-IgA敏感性高,EA-IgA特异性好:四项指标联合检测可提高鼻咽癌诊断的敏感性和准确度.EBV-DNase抗体、EBV-DNA有助于评估鼻咽癌病程和协助判断临床分期.
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鼻咽癌中ABC转运蛋白基因表达的研究
目的 探讨10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中的表达及意义.方法 采用实时荧光定量PCR,检测10种耐药相关的ABC转运蛋白在25例鼻咽癌组织中的表达水平,并与其在正常鼻咽组织中的表达进行比较分析.结果 10种耐药相关的ABC转运蛋白在鼻咽癌组织中均有不同程度的表达,其中ABCA2、ABCC3在鼻咽癌组织及鼻咽正常组织中均高表达;ABCC1、ABCC5及ABCG2在鼻咽癌组织中的表达高于其在正常鼻咽组织中的表达.并有统计学差异;而ABCB1、ABCC2、ABCC3、ABCC4、ABCC6及ABCC11在两类样本中均为低表达.结论 在鼻咽组织中高表达的转运蛋白与鼻咽癌的天然耐药性有关;在鼻咽癌组织中高表达,而在正常鼻咽组织中表达显著降低的ABC转运蛋白很可能在鼻咽癌对化疗的耐药中起着重要作用,在鼻咽癌组织及正常鼻咽组织中均低表达的转运蛋白的转运药物则可能是鼻咽癌化疗的敏感药物.
关键词： 鼻咽癌 多药耐药 ATP结合盒膜转运蛋白 实时荧光定量聚合酶链反应 -
实时定量PCR检测GVHD患者TCRVγ亚家族基因表达水平
目的 了解异基因造血干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)疾病状态下T细胞受体(TCR)Vγ亚家族T细胞水平的变化情况.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应对18例GVHD患者外周血单个核细胞TCR VγⅠ～Ⅲ亚家族基因表达水平进行相对定量检测;12例健康成人外周血样本作为对照.结果 GVHD患者外周血中TCRVγⅡ的表达量显著低于正常对照;GvHD患者TCR VγⅠ～Ⅲ亚家族的表达模式也发生了改变.TCRVγⅡ的表达量比TCRVγⅠ或TCRVγⅢ的表达量低.结论 TCRVγ Ⅱ亚家族的表达低下可能与GVHD的发病相关.
关键词： 移植物抗宿主病 实时荧光定量聚合酶链反应 T细胞受体γ 基因表达 -
胃癌组织中miR-181a和miR-27a高表达及意义
目的:分析miR-181a与miR-27a两种miRNAs在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征的关系.方法:选取广州市第一人民医院胃癌外科手术切除的胃癌标本50例和对应的距离胃癌病灶5 cm以上的癌旁组织,以及25例慢性浅表性胃炎黏膜为对照,采用实时荧光定量-PCR(qRT-PCR)对miR-181a和miR-27a作定量分析.结果:相对于自身癌旁组织和他人的慢性浅表性胃炎组织,miR-181a和miR-27a在胃癌组织中表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌者的性别、年龄、病例分型和淋巴结转移与miR-181a和miR-27a表达无显著相关性.结论:miR-181a和miR-27a在胃癌组织中显著表达,可能参与胃癌的发生过程.
关键词： 胃癌 实时荧光定量聚合酶链反应 微小RNA -
炎症性肠病患者胸腺近期输出功能变化
目的:研究炎症性肠病(IBD)患者外周血T细胞受体删除DNA环(TRECs)的含量,了解IBD患者胸腺近期输出功能变化,探讨其在IBD发病中的意义.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time PCR)检测20名健康人、15例活动期克罗恩病(CD)患者和22例活动期溃疡性结肠炎(UC)患者外周血T细胞中TRECs的含量.结果:TRECs含量CD患者13.48±10.59、UC患者14.67±11.12,各组患者每1000个外周血T细胞中TRECs含量均明显高于健康组8.32±7.02(P均＜0.05).结论:IBD患者幼稚T细胞的含量显著高于正常人,提示IBD患者胸腺近期输出功能在炎症活动期明显增强.
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Satb2基因实时荧光定量聚合酶链反应标准品的制备及应用研究
目的:制备用于Satb2基因实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)的标准品.方法:提取胚胎上颌突组织总RNA,行逆转录反应获得第一链的cDNA,再通过PCR回收获得预期Satb2基因片段;通过T-A克隆将该片段插入pGMT质粒载体;大量提取质粒,定量后进行标准曲线的制作和实时荧光定量PCR.结果:重组质粒经PCR扩增及序列测定表明,pGMT/Satb2基因已成功克隆.结论:所构建的pGMT/Satb2基因实时荧光定量PCR检测标准品应用Taqman荧光探针技术建立的标准曲线线性关系好,灵敏度和特异性高,准确可靠,此法可作为实时荧光定量PCR检测Satb2基因的标准方法.
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 标准品 TaqMan探针 SATB2基因 -
淋巴细胞与血浆 EB 病毒核酸定量结果的关系
目的：探讨淋巴细胞与血浆EB病毒核酸（ EBV-DNA）定量结果的关系。方法收集88例疑似EBV感染者全血分离的淋巴细胞与血浆，实时荧光PCR定量检测EBV-DNA；同时检测另外249例疑似感染者、40例体检者淋巴细胞和血浆EBV-DNA量。结果88份配对的淋巴细胞和血浆EBV-DNA定量值及阳性率（＞500 copies／mL为阳性）差异有统计学意义（ P＝0.00）。两种标本类型EBV-DNA定量结果呈正相关（ r＝0.664，P＝0.00）；当淋巴细胞EBV-DNA浓度较低（＜500 copies／mL）或较高（＞106 copies／mL）时，两标本类型定量结果较一致（κ＝0.40），中等浓度（500～106 copies／mL）则一致度低（κ＜0.40）；EBV-DNA检出率：249份疑似感染者为55％（淋巴细胞），40份体检者为50％（淋巴细胞）和0（血浆）。结论淋巴细胞与血浆EBV-DNA定量呈正相关，淋巴细胞定量值高于血浆。推荐用血浆EBV-DNA定量来反映体内EB病毒增殖情况。
关键词： EB病毒 标本类型 实时荧光定量聚合酶链反应 -
实时荧光定量PCR法检测肾移植术后BK病毒感染及意义
目的 检测肾移植患者术后BK病毒DNA并探讨其临床应用价值.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)对86例同种异体肾移植患者术后血液及尿液标本进行BK病毒DNA检测.结果 86例肾移植患者中,尿BK病毒DNA阳性12例(14.0%),血液BK病毒DNA阳性6例(7.0%).BK病毒DNA血、尿均为阳性5例患者中有4例经肾脏穿刺病理活检确证为BK病毒相关性肾病(BKVAN).结论 尿液BK病毒检测能够早期发现BK病毒感染,结合血液BK病毒检测为早期诊断、治疗并预防肾移植术后BKVAN提供重要的依据.
关键词： 肾移植 BK病毒 实时荧光定量聚合酶链反应 -
miR-31在肺癌患者血清和单个核细胞中的表达水平及临床意义
目的:探讨miR-31在肺癌患者血清和单个核细胞中的表达水平及临床意义.方法:选择确诊为肺癌的91例患者为研究对象,以同期在我院门诊体检处100例体检者为对照,应用RT-qPCR技术检测两组人群血清及单个核细胞中miR-31的表达水平,分析miR-31与肺癌病理指标的关系.结果:与对照组血清miR-31表达水平(0.59±0.36)相比,肺癌组血清miR-31表达水平(1.17±0.54)升高,肺癌组单个核淋巴细胞miR-31表达水平(3.41±0.79)较对照组(4.54±0.53)降低,差异具统计学意义(P＜0.05);肺癌组低、中、高血清miR-31表达水平依次为(1.13±0.28)、(1.39±0.34)、(1.07±0.38),分化程度不同肺癌患者miR-31表达差异具统计学意义(P＜0.05),中分化高,而单个核细胞中miR-31表达水平无统计学差异(P＞0.05);I～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血清及单个核细胞miR-31表达水平分别为(1.15±0.27)、(1.40±0.36)及(3.50±0.39)、(3.37±0.55),不同分期血清/单个核细胞miR-31相比,差异具统计学意义(P＜0.05);有、无淋巴结转移肺癌患者血清及单个核细胞miR-31表达水平分别为(0.98±0.22)、(1.23±0.41)及(3.35±0.37)、(3.52±0.51),两者相比,差异具统计学意义(P＜0.05).结论:这些研究结果表明,miR-31可能在肺癌发生发展及转移中起重要作用.
关键词： 肺肿瘤 miR-31 实时荧光定量聚合酶链反应 单个核细胞 -
RAEB 型骨髓增生异常综合征患者DDP10异常表达的研究
目的:检测难治性贫血伴幼稚细胞增多(RAEB)型骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血二肽基肽酶10(DDP10) mRNA的转录水平,探讨其临床意义.方法:利用实时荧光定量PCR方法,分别检测正常对照、急性髓性白血病及RAEB型MDS患者外周血细胞DDP10 mRNA的表达量;采集RAEB患者外周血细胞计数并随访其生存时间资料,分析两者与DDP10表达的相关性.结果:RAEB患者外周血DDP10 mRNA的表达量显著高于正常对照组及初诊白血病患者(P＜0.05),正常对照组与白血病患者之间DDP10表达无统计学差异(P＞0.05);RAEB患者总生存时间及外周血细胞数量与外周血DDP10表达量无显著相关性.结论:DDP10在RAEB型MDS患者外周血中的异常高表达,提示DDP10是RAEB的一个特异性标志,但其与患者外周血细胞数量及生存时间无关.
关键词： 骨髓增生异常综合征 二肽基肽酶 实时荧光定量聚合酶链反应 -
结肠癌组织FOXF1基因甲基化检测及其临床意义
目的 研究结肠癌组织中叉头框F1基因(FOXF1)启动子区甲基化状态及其临床意义,探讨其在结肠癌发生发展中的作用.方法 应用甲基化特异性PCR检测62例结肠癌标本中FOXF1基因启动子区甲基化状态,并分析其与结肠癌患者临床病理特征的关系.采用实时荧光定量PCR检测结肠癌标本中FOXF1基因mRNA表达水平,并分析FOXF1基因甲基化与其mRNA表达间的关系.结果 结肠癌组织中FOXF1基因启动子区甲基化率为64.5％(40/62),显著高于正常黏膜组织的4.8％ (3/62),差异具有统计学意义(P＜0.01),低分化组中FOXF1甲基化率为82.6％ (19/23),高于高中分化组的53.8％ (21/39),差异具有统计学意义(P＜0.05).结肠癌组织中FOXF1基因mRNA相对表达量为1.453±0.385,显著低于正常黏膜组织的3.648±1.228,差异具有统计学意义(P＜0.01).结肠癌组织中FOXF1基因甲基化状态与FOXF1基因mRNA表达呈负相关(rs=-0.438,P＜0.01).结论 FOXF1基因启动子异常甲基化及其mRNA表达下调是结肠癌中的频发分子事件；也是导致FOXF1基因mRNA表达下调的机制之一；FOXF1基因在不同分化程度的结肠癌患者中甲基化率不同,提示FOXF1基因甲基化状态有可能成为评价结肠癌恶性程度的辅助指标,FOXF1基因也可能成为结肠癌靶向治疗的潜在靶点.
关键词： 结肠肿瘤 甲基化 实时荧光定量聚合酶链反应 叉头框F1基因 -
负压伤口治疗对小鼠大肠癌模型肿瘤进展的影响
目的 观察负压伤口治疗对小鼠大肠癌模型肿瘤进展相关指标的影响,探讨负压伤口治疗在肿瘤难愈性伤口中的运用价值及理论依据.方法 建立BABL/C小鼠大肠癌伤口动物模型,利用负压吸引进行伤口治疗,实时荧光定量PCR检测治疗后不同时间点肿瘤组织HIF-1α、VEGF、MMP-2 mRNA的表达水平,对比负压伤口治疗小鼠(试验组)与常规治疗小鼠(对照组)肿瘤大小的变化.结果 负压治疗后2、4 d试验组肿瘤组织HIF-1α mRNA表达水平比对照组明显升高(P<0.05),至治疗后8 d时HIF-1α mRNA表达水平比对照组明显下调(P<0.05).同时,治疗后4、8 d试验组肿瘤组织VEGF mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05).至治疗后14 d时2组HIF-1α mRNA、VEGF mRNA表达比较差异无统计学意义(P>0.05).试验组肿瘤组织MMP-2 mRNA表达水平持续下降,其不同时间点的表达水平均低于对照组(P<0.05);治疗后14 d对照组出现3例肿瘤转移,而试验组仅有1例转移,试验组肿瘤体积明显大于对照组(P<0.05).结论 负压伤口治疗可以较快改善氧供,且肿瘤不易转移,但同时可促进肿瘤血管生长,使肿瘤体积明显增大.
关键词： 负压伤口治疗 大肠癌 实时荧光定量聚合酶链反应 -
实时荧光 PCR 方法检测结核杆菌的价值分析
目的：探讨实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测结核杆菌的应用价值。方法收集我院2014年1月~12月间收住院的152例肺结核确诊患者,分别采用 FQ-PCR、痰涂片和痰培养法检测患者痰标本,比较各方法诊断监测结果。结果痰培养法、FQ-PCR、痰涂片法对结核杆菌的检出率分别为53.95%(82/152)、47.37%(72/152)、30.26%(46/152),FQ-PCR 检出率与痰培养法比较差异无统计学意义(P >0.05),而 FQ-PCR、痰培养法检出率均明显高于痰涂片法(P <0.01)。以痰培养为金标准,FQ- PCR 的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为82.93%、94.29%、94.44%、82.50%,痰涂片法分别为86.96%、69.81%、55.56%、92.50%。FQ-PCR 与痰培养一致性良好(Kappa 值=0.764),痰涂片法与痰培养一致性较差(Kappa 值=0.489)。结论 FQ-PCR 具有较高检出率和敏感度,且操作简便、快捷,可作为结核杆菌培养法较为理想的补充检测方法。
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 结核杆菌 肺结核 痰液 -
实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞肝癌中B-myb的表达及其临床意义
目的 建立B-myb mRNA表达量检测的实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)系统,检测肝细胞肝癌(HCC)中B-myb的表达并分析其临床意义.方法 用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测70例HCC患者癌组织、癌旁肝组织及18例正常肝组织中B-myb mRNA的表达情况.结果 B-myb mRNA在肝癌组织(0.0375±0.0168)及癌旁肝组织(0.0353±0.0128)中的表达水平明显高于在正常肝组织(0.0265±0.0099)中的表达水平(P＜0.05),而在肝癌组织及癌旁肝组织中的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).B-myb在人肝癌组织中的表达与临床分期、肝外转移及术后复发明显有关,而与门静脉癌栓、肿瘤个数、肿瘤直径、血清AFP水平及分化程度无明显关系.结论 该方法克服了传统PCR只能定性检测而不能定量检测的缺点,为研究B-myb在HCC中的表达提供了定量方法.B-myb可能与肝癌的发生、发展有关.
关键词： 肝细胞肝癌 B-MYB 实时荧光定量聚合酶链反应 -
乳腺癌组织中巨噬细胞移动抑制因子的表达研究
目的 探讨巨噬细胞移动抑制因子( MIF)在乳腺癌组织及癌旁组织中的表达情况. 方法 运用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹分析( Western Blot)方法检测85例乳腺癌组织和相应的癌旁组织中MIF的表达情况. 结果 乳腺癌组织中MIF mRNA表达量为(3.18 ±1.19) ×10 -2 ,高于癌旁组织的(1.38 ±0.05) ×10 -2 ( P<0.05);Western Blot结果显示乳腺癌组织中MIF蛋白表达水平为(0.879 ±0.232),高于癌旁组织的(0.325 ±0.178)(P<0.05). 结论 MIF在乳腺癌组织中表达高于癌旁组织,其可能在乳腺癌发生发展过程中起重作用.
关键词： 乳腺肿瘤 巨噬细胞移动抑制因子 实时荧光定量聚合酶链反应 蛋白质印迹 -
老年痴呆症患者血清中miR-132的表达及临床意义
目的 探究微小RNA-132(miR-132)在老年痴呆症患者血清中的表达水平及临床意义.方法 选择我院80例老年痴呆症患者进行研究,其中阿尔茨海默病(AD)组37例,轻度认知功能障碍(MCI)组43例,另选取同期在我院正常体检者48例作为对照组,实时荧光定量聚合酶链反应法(RT-PCR)测定血清中miR-132水平,比较三组间临床指标以及血清中同型半胱氨酸(Hcy)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、脂联素(ANP)水平、miR-132水平.结果 三组受检者在教育程度、血清LDL-C水平、Hcy、ANP、MMSE评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05).AD组患者的血清LDL-C水平、Hcy水平高于对照组与MCI组, MCI组血清LDL-C水平、Hcy水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).AD组患者的血清ANP水平、精神状态评分(MMSE)低于对照组和MCI组,MCI组血清ANP水平、MMSE评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).AD组血清miR-132水平低于对照组、MCI组,MCI组miR-132水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).直线相关性分析显示血清miR-132水平与血清Hcy水平呈负相关(r=-0.586,P=0.034),血清miR-132水平与ANP水平、MMSE评分呈正相关(r=0.562,P=0.041;r=0.624,P=0.023).结论 miR-132可能参与老年痴呆症的发病过程,可作为老年痴呆症诊断和治疗的血清指标.
关键词： 老年痴呆 微小RNA-132 同型半胱氨酸 实时荧光定量聚合酶链反应 临床意义 -
实时荧光定量PCR检测结直肠癌患者粪便肿瘤型M2-PK DNA及临床应用研究
目的 建立适用于结直肠癌患者粪便标本肿瘤型M2丙酮酸激酶(M2-PK)DNA检测的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法,分析自建方法的临床应用价值.方法 采用PCR方法扩增肿瘤型M2-PK DNA片段(162 bp),纯化后采用TA克隆法转入PGM-T载体,构建重组质粒.以重组质粒为模板,建立实时荧光定量PCR检测方法,评价自建方法的敏感性、特异性和重复性.选择2014年1月至2016年6月确诊的结直肠癌患者200例,同期体检健康者100例,采用自建方法对受试者粪便和血清标本进行肿瘤型M2-PK DNA检测,并与酶联免疫吸附法肿瘤型M2-PK检测结果进行比较.结果 测序结果证实重组质粒构建成功.自建方法检测肿瘤型M2-PK DNA的灵敏度为10 copy/mL,对肌肉型M2-PK DNA和M1型丙酮酸激酶(M1-PK)DNA检测结果为阴性,批内及批间变异系数为0.3%~2.9%.实时荧光定量PCR检测患者粪便标本肿瘤型M2-PK DNA阳性率为92.50%,ELISA检测肿瘤型M2-PK阳性率为80.00%.粪便和血清标本肿瘤型M2-PK DNA实时荧光定量法检测结果与肿瘤病理分期密切相关.结论 本研究建立的实时荧光定量PCR法适用于结直肠癌患者粪便标本肿瘤型M2-PK DNA检测,具有特异性强、灵敏度高的特点,可用于结直肠癌早期诊断.
关键词： 结直肠癌 粪便 肿瘤型M2丙酮酸激酶 实时荧光定量聚合酶链反应
