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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性研究
监测金黄色葡萄球菌的耐药状况,为临床治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染提供依据.采用试管双倍稀释法(改良)及纸片扩散法对128株金黄色葡萄球菌进行药敏试验,并用Nitrocefin纸片法测定其β-内酰胺酶.M RSA检出率72.65%,产β-内酰胺酶83.70%.对青霉素G、克林霉素、红霉素、头孢唑啉、庆大霉素、四环素的耐药率在100%～92.47%之间,万古霉素、去甲万古霉素对所有菌株的抑菌率达100%.多数药物对甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)作用良好,头孢唑啉、利福平、亚胺培南和异帕米星的抑菌率均在94.3%～100%之间.MRSA对多数β-内酰胺类、氟喹诺酮类及某些氨基糖苷类抗生素呈多重耐药性.万古霉素、去甲万古霉素对其显示强的抗菌活性, 利福平、壁霉素、异帕米星亦显示较强的抗菌活性,提示上述抗菌药物可用于MRSA所致严重感染.
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超广谱β-内酰胺酶阳性大肠埃希菌感染致产后四次开腹手术1例
产后出血四大原因早已深入人心,虽然近年对晚期产后出血原因有感染的描述,但在人们的理念中因感染所致产后出血尚未牢固树立[1].本院收治1例超广谱β-内酰胺酶( extended spectrum beta-lactamases,ESBLs)阳性大肠埃希菌感染致产时产后出血、感染,先后4次开腹的手术病例,前后历时3个月才完全治愈,现报告如下:
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超广谱β-内酰胺酶大肠埃希氏菌分布特征及耐药性监测
目的了解超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希氏菌的发生率、分布情况及耐药性,以便指导临床用药.方法采用纸片扩散法对2000年10月～2001年3月临床分离的144株大肠埃希氏菌进行药敏试验,采用双纸片增效试验法按NCCLS1999年版标准检测出ESBLs株,并对阿莫西林/棒酸、头孢类等抗生素来做药敏试验,分析其耐药性.结果 43.06%(62/144)的大肠埃希氏菌产ESBLs,在各类标本中产ESBLs大肠埃希氏菌以痰标本产生率高(45.16%).在各病区的分布情况,以重症监护病房感染率高(37.1%)、其次为外科(19.35%),产ESBLs大肠埃希氏菌除对亚胺培南的敏感性100%,对阿莫西林/棒酸敏感性>95%以外,对头胞类、青霉素类、氨基糖甙类、氟诺酮类抗生素的耐药性明显高于不产ESBLs的大肠埃希氏菌.结论治疗ESBLs菌引起的感染,应用亚胺培南、β-内酰胺类/β-内酰胺抑制复合物、头胞菌素类药物.
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大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的检测与耐药性分析
目的 通过对临床上分离出的大肠埃希菌株和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株进行检测及其耐药性分析.方法 临床上用API20E自动细菌分析仪分离出2 32株大肠埃希菌, 经过鉴定确认ESBLs菌株,并用纸片扩散法做药敏试验.结果 共检出产 ESBLs108株.产ESB Ls菌呈多重耐药,其耐药率明显高于非产ESBLs菌,对产ESBLs菌具较高抗菌活性的抗生素有亚胺培南或美洛培南.结论 临床上出现的产ESBLs大肠埃希菌的耐药率较高,应引起临床高度重视.
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肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶检测与分析
目的:掌握肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶发生率及对多种抗生素耐药现状,比较三种检测方法.方法:按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)1999年版推荐的纸片扩散法的筛选试验和确证试验,同时以非NCCLS推荐的双纸片协同法检测超广谱β-内酰胺酶.结果:超广谱β-内酰胺酶发生率肺炎克雷伯菌35.8%,大肠埃希菌34.1%.超广谱酶株对多种抗生素耐药率高.确证试验与协同试验相符率高.结论:本院肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶发生率高,临床应慎用第三代头孢菌素和氨曲南.筛选法可疑株必须做确证试验.协同试验直观,便于观察,有一定的漏检率和误检率.纸片间距离问题不宜规定统一标准.
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尿路感染大肠埃希菌临床分离及耐药性的动态分析
目的:动态分析尿路感染大肠埃希菌的临床分离及其时常用抗生素的耐药谱,为临床经验治疗提供依据.方法:采用回顾性调查方法统计2005年1月至2008年9月我院尿路感染大肠埃希菌的分离情况,并用低抑菌浓度(MIC)法测定菌株对21种抗菌药物的敏感性.结果:4年间细菌感染情况,大肠埃希菌占尿路感染所有病原菌的首位(38.5%),临床分离趋势变化不大(P＞0.05);783例该类患者中住院患者为85.4%,且老年女性患者占40.6%,人群分布具有统计学意义(P＜0.01).4年间耐药性变化,大肠埃希菌仅对两种头孢类抗菌药物耐药率有显著变化(P＜0.01),其中对头孢他啶耐药率有上升趋势,而对头孢吡肟的耐药率呈下降趋势:在余下常用19种耐药率变化不大的抗菌药物中(P＞0.05),亚胺培南对该菌的抗菌活性强,其耐药率为0%,该菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、阿米卡星耐药率稳定在10%以下,对呋喃妥因耐药率＜20%,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢西丁、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素耐药率在20%～60%.但对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢唑啉、头孢呋辛、环丙沙星、左旋氧氟沙星、复方新诺明、四环素的耐药率＞60%.4年间产ESBLs大肠埃希菌株阳性率为49.4%,变化趋势不大(P＞0.05);产ESBLs菌株对17种抗菌药物的耐药率显著高于非产ESBLs菌株.结论:尿路感染患者病原菌以大肠埃希菌为主,并对临床经验治疗的氟喹诺酮类和磺胺类药物高耐药,应引起临床的高度重视.
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胆道感染大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析
目的:探讨胆道感染患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(EsBLs)的情况及耐药分析.方法:采用改良的酶提取物三维试验法检测EsBLs和AmpC酶,采用纸片扩散(K-B)法检测大肠埃希菌对18种抗生素的耐药率.结果:110株大肠埃希菌中检出单产EsBLs 42株,AmpC酶12株,同时产AmpC酶和ESBLs共6株,检出率分别为38.2%、10.9%和5.5%;产酶菌株对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株.结论:胆道感腥敬蟪ΠＯ＞驭?内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素.
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肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析
目的:探讨本地区肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况及其耐药性.万法:收集80株临床分离无重复肺炎克雷伯菌,通过改良三维试验检测肺炎克雷伯菌AmpC酶和ESBLs的产生情况.运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验.结果:从80株临床送检标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出单产ESBLs 25株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为31.3%、10.0%和5.0%.单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs对抗生素的耐药率均高于不产酶菌株(除哌拉西林/他巴唑).结论:产AmDc酶及ESBLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素.
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革兰阴性杆菌菌种分布及耐药性和分子流行病学研究
目的:了解我院多重耐药革兰阴性杆菌菌种分布、耐药性及分子流行病学状况.方法:收集2004年9月至2006年1月我院住院和门诊患者样本分离出的革兰阴性杆菌,分析多重耐药发生率、菌种分布、样本分布和药物敏感试验结果;用双纸片确证试验检测肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率;采用肠杆菌科基因间重复序列PCR(ERIC-PCR)检测菌株间的同源关系.结果:多重耐药株发生率为92.37%(605/655);分离率居前3位的菌种为肺炎克雷伯菌(23.05%)、大肠埃希菌(22.29%)和铜绿假单胞菌(15.73%);大肠埃希菌主要分离自尿液,肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌主要分离自痰液;分离的各菌种对美罗培南、亚胺培南、他唑新虽有较高的敏感率,但耐药率呈上升趋势;多重耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的发生率分别为61.54%(32/52)和47.83%(22/46);存在ESBLs菌株在院内的传播扩散.结论:临床上应重视革兰阴性杆菌引起的感染,合理选用抗生素和严格消毒措施.
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医院感染肺炎克雷伯菌的耐药特点
目的 探讨肺炎克雷伯菌的耐药特点,为临床使用抗菌药物提供参考.方法从2008年1月至2010年12月间,对肺炎克雷伯菌临床分离株应用法国生物梅里埃公司ATB Expression系统进行细菌鉴定和耐药性测定,产超广谱β-内酰胺酶( ESBLs)菌株的鉴定采用复合纸片表型确证法.结果 509株肺炎克雷伯菌中,产ES-BLs138株,检出率为27.1％.产ESBLs菌株在20种抗菌药物试验中,除对美罗培南和亚胺培南全部敏感以外,对其它药物的耐药率为8.7％～100％,且呈多重耐药.除美罗培南、亚胺培南、阿莫西林、替卡西林外,对其他药物产ESBLs菌株耐药率明显高于非产ESBLs菌株(P＜0.05或＜0.01).结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药十分严重,临床上宜尽量避免使用广谱β-内酰胺酶类抗菌药物,以减少ESBLs菌株产生,对产ESBLs菌株重症感染者首选美罗培南或亚胺培南治疗,轻症感染者根据药敏结果选择抗菌药物,严防产ESBLs菌株的播散.
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阴沟肠杆菌耐药性与AMEs及BLa基因研究
目的 了解分离的阴沟肠杆菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶、β-内酰胺酶相关基因存在状况,给防治提供参考.方法 采用MicroScan微生物鉴定系统Neg Combo Panel Type 21阴性复合板微量肉汤法测定临床分离的20株阴沟肠杆菌对抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应方法分析氨基糖苷类修饰酶及β-内酰胺酶编码基因.结果 20株菌均呈严重多重耐药,仅对亚胺培南高度敏感(耐药率5.0%),哌拉西林/他唑巴坦耐药率50.0%,对包括3、4代头孢在内的其他β-内酰胺类及氨基糖苷类抗生素耐药率90.0%～100.0%,对复方新诺明耐药率100%;20株菌均检出氨基糖苷类修饰酶基因,未检出aac(3)-Ⅲ和aac(3)-Ⅳ基因;19株(95.0%)菌检出β-内酰胺酶相关基因,TEM和DHA基因阳性率均为70%,9株菌(45.0%)同时检出TEM和DHA基因,未检出SHV、OXA、PER、VEB和GES基因.结论 广州地区医院感染阴沟肠杆菌多重耐药严重,氨基糖苷类修饰酶基因、DHA型质粒AmpC酶基因和TEM型β-内酰胺酶基因携带率高,在介导细菌耐药方面起重要作用.
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铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素耐药状况及相关耐药基因检测
目的了解铜绿假单胞菌对β-内酰胺类抗生素的耐药状况,探讨其耐药机制.方法采用微量比浊法和纸片扩散法进行抗生素敏感试验,聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因.结果氨苄西林、头孢唑林、头孢替坦的耐药率均＞95%,头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林/他唑巴和头孢吡肟的耐药率分别为13.64%、10.23%,9.85%和9.09%.20株耐β-内酰胺类抗生素的铜绿假单胞菌中有9株检出VIM、IMP、TEM、DHA和oprD2基因缺失,其中有3株菌同时携带3-4种耐药基因.结论1、铜绿假单胞菌对青霉素类、头霉类和头孢Ⅰ、Ⅲ代等β-内酰胺类抗生素具有很强的耐药性.对头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南以及头孢吡肟的耐药率均低于15%.2、本院耐β-内酰胺类抗生素的铜绿假单胞菌株携带VIM、IMP、TEM、DHA耐药基因和有oprD2基因缺失.耐药表型相同的菌株可以携带不同的耐药基因,耐药表型不同的菌株可以携带相同的耐药基因.
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大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测和耐药性监测分析
目的 了解医院1998年1月至2006年12月期间临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,监测并分析大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药特性,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 对分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感试验,用筛选试验和确证试验确认产ESBLs菌株,用WHONET 5.4软件进行数据分析.结果 947株大肠埃希菌中,产ESBLs的有311株,占32.8%;293株肺炎克雷伯菌中,产ESBLs的有69株,占23.5%.产ESBLs菌株的耐药性显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05),产ESBLs菌株呈现多重耐药.结论 医院产ESBLs菌的阳性率较高,应加强对产ESBLs菌株的耐药性监测,合理使用抗菌药物,防止ESBLs菌株的增长、扩散与流行.
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肿瘤患者大肠埃希菌感染的分布及其耐药性分析
目的 了解肿瘤患者大肠埃希菌感染的分布及耐药性,指导临床合理用药.方法 对2004～2005年住院肿瘤患者感染性标本分离的大肠埃希菌采用常规法或API系统鉴定,K-B法做药敏试验,双纸片法检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌.并用WHOVET5.3和SPSS11.O软件对菌株来源、分布及药敏结果进行统计分析.结果 共分离出178株大肠埃希菌,从基础疾病来看,以宫颈癌、肺癌、肠癌、子宫内膜癌检出为主.从标本类别来看,以尿液、痰液、阴道分泌物、伤口分泌物检出为主.产ESBLs大肠埃希菌检出率为57.87%.大肠埃希菌对亚胺培南耐药率为零.亚胺培南、哌拉西林/三唑巴坦、阿米卡星、呋喃妥因对产ESBLs和非产ESBLs大肠埃希菌均有很好的抗菌作用.产ESBLs菌株的耐药性明显高于非产ESBLs菌株,特别是产ESBLs大肠埃希菌对第3代头孢菌素耐药性与非产ESBLs大肠埃希菌比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 大肠埃希菌感染率居该院首位,宫颈癌、阴道癌、卵巢癌、肺癌患者尿路感染,肠癌患者术后伤口感染及肺癌患者呼吸道感染时应首先考虑到大肠埃希菌所致.对所分离的病原菌应根据体外药敏试验及产ESBLs细菌检测的结果,合理选择抗菌药物进行治疗,并动态监测其耐药性变化,防止产ESBLs大肠埃希菌的局部流行.
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改良头孢西丁平板试验检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒介导的AmpC酶
目的 依据EDTA可渗透菌细胞内并促进β-内酰胺酶释放至外环境的原理,建立并评价检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒介导的AmpC酶的改良头孢西丁平板试验(MCAM).方法 于含有2、4、6、8 μg/ml 的头孢西丁平板上接种过夜培养的大肠埃希菌ATCC25922,然后用直径5 mm的打孔器在琼脂表面均匀间隔打孔,于孔中分别加入0.5 mol/L EDTA 0、3、5、7、10 μl(使孔中约含EDTA分别为0、450、750、1 000、1 500 μg),各孔加待检菌悬液(＞1011 CFU/ml)25 μl,35 ℃过夜培养.以孔周有细菌生长环为AmpCs阳性.以阴沟肠杆菌029M和大肠埃希菌ATCC25922作质控,用MCAM和酶粗提物三维试验(TDEM)同时检测临床分离的头孢西丁不敏感大肠埃希菌(14株)和肺炎克雷伯菌(13株)的AmpC酶,对两种方法进行比较.结果 MCAM试验应用6 μg/ml 头孢西丁平板和750 μg EDTA进行检测,其结果与TDEM试验完全一致.结论 该方法操作简便、结果易于判读,在一块平板上可同时进行多株菌的检测,适于各级临床微生物实验室应用.
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3种克雷伯菌产β-内酰胺酶分析
目的 研究3种克雷伯菌所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况.方法 采用多底物纸片法(协同法、拮抗法)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认试验、AmpC酶检测法检测51株克雷伯菌属[产酸克雷伯菌(K.ox)23株,肺炎克雷伯菌臭鼻亚种(K.oz)18株,土生克雷伯菌(K.te)10株]所产各种β-lase.结果 (1)51株克雷伯菌属β-lase总检出率为80.4%,其中单独产青霉素酶、广谱酶、ESBLs菌株分别为7、4、21株,产ESBLs菌株总数32株(62.8%),未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶:产复合酶11株(21.6%),均产AmpC酶+ESBLs.(2)在4种产酶形式中,K.te检出率分别10.0%、10.0%、20.0%、20.0%;K.oz检出率分别5.6%、5.6%、33.33%、27.8%;K.ox检出率分别13.0%、8.7%、56.5%、17.4%.结论 (1)本组51株克雷伯菌属产β-lase总检出率很高,其中K.ox高;(2)4种产酶形式以AmpC酶、ESBLs为主,未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶,各种克雷伯菌属菌所产各种酶的检出率不同.
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耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的研究
目的检测该院2005年4～7月住院患者耐亚胺培南铜绿假单胞菌(PA )产金属β-内酰胺酶(MBL)的情况,为难治性感染治疗提供参考.方法 VITEK-60鉴定细菌及测定PA对抗菌药物的耐药性;纸片法检测PA产MBL.结果共检出PA 103株,耐亚胺培南PA 47株,同时耐头孢他啶16株,其中产MBL的PA 8株,占所分离PA的7.8%,占耐亚胺培南PA的17.0%.8株产酶菌株中除1株对左旋氧氟沙星敏感外,对羧苄青霉素、阿米卡星、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮、头孢他啶、头孢吡肟、奈替米星、复方增效磺胺、哌拉西林/他唑巴坦、环丙沙星等抗生素均耐药;非产酶菌株仅有2株对羧苄青霉素敏感,1株对阿米卡星敏感,对其他抗生素均耐药.结论临床感染分离的PA、产酶菌株与非产酶菌株均呈多重耐药性.产MBL是PA对头孢类及碳青酶烯类抗生素耐药的机制之一,实验室对其正确检测可帮助临床合理选用抗菌药物,并减少耐药性的扩散.
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KPC型β-内酰胺酶研究进展
KPC型β-内酰胺酶属于Ambler分类的A类、Bush分类的2f亚群,其特点是水解除头霉素类以外的几乎所有β-内酰胺类抗生素,包括青霉素类、头孢菌素类、单酰胺类和碳青霉烯类.其活性可被克拉维酸所抑制.由于产KPC酶菌株可能仅对碳青霉烯类灵敏度减低,尚达不到完全耐药的水平;产KPC菌株应用ESBLs确证试验检测可能阳性,很容易错误地鉴定为ESBLs菌株;以及产KPC菌株接种效应的存在,显著影响亚胺培南的MIC,这些因素都给实验室检测带来很多困难.尽管产KPC酶菌株较少且仅分布于少数国家,但其水解底物谱的广泛性和质粒介导的可传播性,必将给临床抗感染治疗带来威胁.因此,应引起临床医师和实验室的高度重视.
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铜绿假单胞菌产IMP型金属β-内酰胺酶的研究进展
IMP型金属酶是我国临床检出率高的金属酶,产金属酶(MBL)是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要机制之一.MBL基因可位于细菌质粒或染色体上,并可以基因盒的形式由整合子携带,从而导致耐药性在细菌间水平或垂直传播,给临床抗菌治疗带来极大的困难.现对IMP型金属酶的演变、分类、分子生物学特点等方面的研究进展作一综述.
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质粒介导AmpC β-内酰胺酶的研究进展
质粒介导AmpC β-内酰胺酶主要由肠杆菌科细菌产生,迄今已发现至少10个类型30多个亚型.其特点是对青霉素类、氧亚氨基头孢菌素、7-α-甲氧基头孢菌素和单酰胺类耐药,不被临床常用的酶抑制剂所抑制,但对氯唑西林敏感;其编码基因常与其他类抗生素的耐药基因位于同一质粒,表达对多类抗生素的耐药;并通过质粒复制、接合、转化及转座子移位,在革兰阴性菌种内或种间传播,引起更大范围的暴发流行.
