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巴戟天中主要环烯醚萜苷的稳定性研究
目的:研究巴戟天中主要环烯醚萜苷-水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的稳定性和转换条件.方法:利用HPLC,测定不同年份生巴戟天中水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸的含量,以探寻二者在植物体自身环境内的稳定性；观察水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸在不同pH(人工胃液、水、人工肠液)下的转化情况,以探寻二者在不同pH溶液中的稳定性.结果:水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸在巴戟天中的含量相对稳定,前者在人工胃液中可以转化为后者.结论:水晶兰苷和去乙酰基车叶草苷酸在巴戟天中相对稳定；水晶兰苷在酸性条件下不稳定,可以转化为结构比较稳定的去乙酰基车叶草苷酸.
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正交试验优选巴戟天饮片的软化和切制工艺
目的:优化巴戟天的软化和切制工艺,为该饮片的规范生产提供技术参数.方法:以甲基异茜草素-1-甲醚、水晶兰苷和耐斯糖的综合评分为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察加水量、闷润时间、闷润温度、切段长度对巴戟天软化切制工艺的影响.采用HPLC测定甲基异茜草素-1-甲醚的含量,流动相乙腈-0.2％磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长277 nm;水晶兰苷含量测定的流动相甲醇-0.1％磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长235 nm.采用高效液相色谱电雾式检测器法(HPLC-CAD)测定耐斯糖含量,流动相甲醇-水(3∶97).结果:佳软化切制工艺为加1.0倍量水于50℃下闷润9h,切段长度10 ～ 15 mm.甲基异茜草素-1-甲醚、水晶兰苷、耐斯糖及水浸出物平均质量分数分别为0.045％,5.074％,63.202％,74.651％.结论:优选的巴戟天软化切制工艺合理可行,可作为该饮片的规范生产工艺.
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巴戟天不同炮制品中水晶兰苷的大鼠体内血药浓度及组织分布研究
目的 探讨炮制对巴戟天中水晶兰苷在大鼠体内血药浓度及组织分布的影响.方法 分别给予SD大鼠灌胃巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天的正丁醇萃取物,采用HPLC,Venusil MP C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.4%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,检测波长235 nm,测定血浆及各组织中水晶兰苷的含量.结果 巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天中水晶兰苷高、中、低剂量(0.177、1.77、17.7μg/mL)的药代动力学特征符合二室模型,在所研究的剂量范围内,AUC与给药剂量呈现良好的线性相关性,符合线性动力学特征.灌胃给药60 min后,水晶兰苷在肾、肺、肝、脾的浓度达到大,在肾组织和肝组织中的浓度分布为盐巴戟天>巴戟肉>制巴戟天,在脾组织中浓度分布为制巴戟天>盐巴戟天>巴戟肉.结论 不同炮制方法对巴戟天在大鼠体内血药浓度及组织分布有一定影响.
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巴戟天中水晶兰苷酶辅助提取工艺的研究
目的 优选巴戟天中水晶兰苷的纤维素酶辅助提取工艺.方法 以水晶兰苷提取率为指标,通过HPLC含量测定方法,在单因素考察(酶用量、酶解温度、酶解时间、料液比、提取时间)的基础上,采用二次通用组合设计优化纤维素酶辅助提取的佳工艺.结果 纤维素酶辅助提取巴戟天中水晶兰苷的佳工艺为:pH值5.0,酶用量0.24％、酶解2.1h、液固比22∶1、提取3次、每次76 min,提取率达13.61 mg·91.结论 通过二次通用旋转组合设计所筛选的巴戟天中水晶兰苷纤维素酶辅助提取工艺可显著提高水晶兰苷的提取率,为巴戟天中水晶兰苷的高效利用提供试验依据.
关键词： 二次通用旋转组合设计 巴戟天 水晶兰苷 酶法提取 -
不同产地巴戟天中水晶兰苷的含量测定
巴戟天是著名的四大南药之一,来源于茜草科巴戟天属植物Morinda officinalis How的干燥根~([1]),在我国主要分布于热带、南亚热带北纬19°～25°,东经107°～118°区域内,以广东省为中心,向东北延伸至北回归线以北的福建西南部及武平县南部;向南分布到海南兴隆,向西南达北回归线以南的广西东南部等.据清·陈仁山<药物出产辨>云:"巴戟天产广东清远、三坑、罗定为好,下四府,南乡等均次之,西江德庆系种山货,质味颇佳,广西南宁有出".说明历史上广东为巴戟天的道地产区.目前巴戟天除在广东有种植外,福建、广西巴戟天有少量种植.
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巴戟天中水晶兰苷的提取方法研究
中药巴戟天为茜草科巴戟天属植物巴戟天Morinda officinalis How.的干燥根.性甘、辛,微温.具有补肝肾、强筋骨,祛风湿的功效,用于治疗阳痿遗精,宫冷不孕,月经不调,少腹冷痛,风湿痹痛,筋骨痿软等症[1].
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星点设计-效应面法优化盐巴戟炮制工艺
目的 优化盐巴戟的炮制工艺.方法 在单因素试验基础上,以加水量、闷润时间、蒸制时间为自变量,耐斯糖、甲基异茜草素-1-甲醚、水晶兰苷的综合评分为评价指标,通过星点设计-效应面法优选盐巴戟的炮制工艺.结果 佳炮制工艺为加水1.05倍,闷润5.48 h,蒸制2.90 h(100 g巴戟肉加盐1.5 g),测量值和预测值之间的相对误差为3.04％.结论 该方法得到的炮制参数准确,重复性好,有一定实际意义.
关键词： 盐巴戟 耐斯糖 甲基异茜草素-1-甲醚 水晶兰苷 星点设计-效应面法 -
盐炙巴戟天工艺研究
目的:研究巴戟天盐炙的佳工艺条件.方法:用单因素考察法分别考察加水量、闷润时间、蒸制时间和干燥时间.主要以巴戟天中总蒽醌的含量和水晶兰苷的含量为指标,利用综合评分法处理数据,优选盐巴戟大的炮制工艺.结果:盐炙巴戟天的佳炮制工艺为每100 g巴戟大,加盐水50 mL(其中含食盐2 g),闷润90 min后,置蒸制容器蒸15 min,取出,趁热去心,切段,置80℃烘箱干燥2 h.结论:该工艺稳定可行,为建立规范的巴戟天饮片炮制方法提供科学依据.
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HPLC法测定水晶兰中水晶兰苷的含量
建立HPLC法测定水晶兰中水晶兰苷的含量,采用Kromalsil C<,1x>(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(85:15);检测波长为231 nm;流速为1.0 mL·min<'-1>;柱温为25℃.该测定方法具有良好的线性关系(r=0.9997);平均回收率为98.7%,能准确测定水晶兰药材中水晶兰苷的含量.
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盐巴戟天与生巴戟天中水晶兰苷含量对比研究
目的:测定不同产地盐巴戟天与生巴戟天中水晶兰苷的含量.方法:采用HPLC法.色谱条件:色谱柱为phenomenon Cl8柱(250.0 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-0.4％磷酸水溶液(5∶95～28.8∶71.2,15 min)为流动相;流速1 mL·min-1;检测波长237 nm;柱温30℃.结果:巴戟天盐制后水晶兰苷含量与生品比较降低15％.结论:盐制对巴戟天中的水晶兰苷含量有一定影响.
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复方鹿角霜片的质量控制
目的 建立复方鹿角霜片的质量控制方法. 方法 采用薄层色谱法对制剂中鹿衔草、忍冬藤进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定忍冬藤中的马钱苷、当药苷,鹿衔草中的水晶兰苷的含量. 结果 定性鉴别薄层色谱斑点清晰,特征明显,专属性强;高效液相色谱法测定含量,专属性强,在范围内水晶兰苷、马钱苷、当药苷进样浓度与色谱峰面积均呈良好的线性关系(r>0.999),平均回收率分别为97.2%,98.4%,96.0%,RSD分别为1.4%,0.8%,0.8%. 结论利用薄层色谱法定性、高效液相色谱法定量,方法简便准确,重复性好,可有效控制复方鹿角霜片的质量.
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基于水晶兰苷含量优选制巴戟天炮制工艺
目的：：以制巴戟天中水晶兰苷含量为指标,优选制巴戟天炮制工艺。方法：以甘草用量、拌炒时间和煮制锅温为考察因素进行正交试验设计,采用HPLC法测定各样品中水晶兰苷含量：色谱柱为Kromalsil C18(200 mm ×4.6 mm,5μm)；流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(90∶10)；柱温为30℃；流速为1 ml·min-1；检测波长为233 nm；进样量为5μl。结果：制巴戟天经不同工艺炮制后,各试验号水晶兰苷平均含量分别为0.5356,0.5824,0.5234,0.5891,0.5786,0.5878,0.5752,0.6091,0.5587 mg· g-1,说明制巴戟天炮制工艺的改变对水晶兰苷的含量有影响。结论：基于水晶兰苷含量的制巴戟天佳炮制工艺为：甘草用量为6%,拌炒时间为10 min,煮制锅温为100℃。
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不同炮制去心法对巴戟天水晶兰苷含量的影响
目的：比较不同炮制去心方法炮制的巴戟天中水晶兰苷的含量。方法：采用HPLC法,色谱柱为Kromalsil C18(200 mm ×4.6 mm,5μm)；流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(90∶10),流速为1.0 ml·min-1,柱温为30℃,检测波长232 nm,进样量为5μl。结果：巴戟天各去心炮制品中水晶兰苷含量以润法高,其次为煮法,泡后蒸法,泡法,清蒸法,低为盐蒸法。结论：润法去心对巴戟天中水晶兰苷的含量影响小,其炮制品中水晶兰苷含量高。
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巴戟天中水晶兰苷的提取分离及其含量测定
目的 提取分离巴戟天茎中的水晶兰苷并测定巴戟天不同部位中水晶兰苷含量.方法 巴戟天茎用80%的乙醇提取,石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,正丁醇萃取物上D101大孔树脂富集环烯醚萜类成分,反复常压正相及反相柱层析,分离得水晶兰苷.采用高效液相色谱法测定巴戟天茎、根、叶中水晶兰苷含量.结果 从巴戟天茎中分离得到水晶兰苷.水晶兰苷在巴戟天茎、根、叶的含量分别为18.11、12.22及11.03 nag·g-1.结论 巴戟天茎中可以分离得到水晶兰苷,含量比巴戟天根和叶高.
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炮制方法对巴戟天有效成分水晶兰苷含量的影响
目的:测定巴戟天炮制品中水晶兰苷的含量.方法:采用HPLC法.色谱条件:Kromalsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm);甲醇-0.4%磷酸水溶液(5∶95→28.8∶71.2,15 min)为流动相;流速1 ml/min;检测波长231 nm;柱温25℃.结果:巴戟天不同炮制品中水晶兰苷含量与生品比较有较大差异,生巴戟天、巴戟肉、盐巴戟天、制巴戟天中水晶兰苷的平均含量分别为13.92 mg/g、9.10 mg/g、9.21 mg/g、12.86 mg/g.结论:不同炮制方法使巴戟天炮制前后水晶兰苷的含量发生改变.
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非生物诱导子对巴戟天不定根中水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸含量的影响
目的 利用茉莉酸甲酯、乙酰水杨酸等非生物诱导子诱导巴戟天中环烯醚萜苷类活性成分的生物合成,以提高巴戟天有效成分的含量,从而提高巴戟天的质量.方法 基于巴戟天组培苗不定根的培养,利用非生物诱导子茉莉酸甲酯、水杨酸、乙酰水杨酸对巴戟天组培苗不定根进行诱导处理后,采用高效液相色谱法(HPLC)对巴戟天不定根中的水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸进行含量测定.结果 0.8 mmol·L-1的茉莉酸甲酯对巴戟天不定根诱导处理效果佳,有利于巴戟天中水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸含量的积累.结论 本研究初步筛查出0.8 mmol·L-1的茉莉酸甲酯诱导效果优于其他非生物诱导子,能明显促进巴戟天中主要环烯醚萜类活性成分的积累,为巴戟天的优质栽培进一步奠定基础.
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抑乳调经颗粒含量测定方法的研究
目的 通过定量测定抑乳调经颗粒中多种指标成分,公式评分法综合评价制剂的质量,进一步完善其质量标准.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)对抑乳调经颗粒中君药成分水晶兰苷,臣药成分苔黑粉葡萄糖苷,佐药成分芍药苷,使药成分甘草苷,进行含量测定.结果 4种成分分别在2.156～53.9 μg· mL-1(r=0.9999),2.03～50.75μg·mL-1 (r=0.9998),3.26～81.5 μg·mL-1 (r=0.9999),1.42～35.5 μg·mL-1(r=0.9999)范围内线性关系良好,加样回收率分别为100.32％,99.43％,101.61％,98.96％.结论 该方法准确可靠,能全面控制该颗粒的内在质量,可作为该颗粒的含量测定标准.
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巴戟天不同部位及混伪品中水晶兰苷的含量测定
目的 测定巴戟天及其混伪品中水晶兰苷的含量.方法 采用HPLC法,色谱条件为Kromasil C18 柱(150 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.4%磷酸水溶液(5:95→28.8:71.2,15 min)为流动相,流速 1mL/min;检测波长231nm,柱温25℃.结果 除海巴戟果和羊角藤外,其他样品均含水晶兰苷,且以巴戟天和广东鸡眼藤的根、叶含量较高.结论 可用巴戟天叶及其混伪品广东鸡眼藤替代巴戟天根,进行水晶兰苷的提取.
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巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素、水晶兰苷、多糖的分布与积累研究
目的 测定巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素、水晶兰苷和多糖的含量,揭示其分布和积累规律.方法 分别采用HPLC法、紫外分光光度法,测定不同生长年限的巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素、水晶兰苷及多糖的含量.结果 种植2～6年的巴戟天根、茎、叶中甲基异茜草素的含量分别为2.61～9.98、0.69 ～ 3.87、0.11 ～0.41 μg·g-1;水晶兰苷的含量分别为9.1744～16.4693、8.4812 ～13.3430、14.1367 ～23.1610 mg·g-1;多糖的含量分别为76.8191 ～ 249.6826、44.3812～96.2719、61.0919～ 167.9649mg·g-1.结论 巴戟天中甲基异茜草素和多糖主要分布在根中,水晶兰苷主要分布在叶中.在种植2～6年间,甲基异茜草素和多糖的含量呈先上后降的变化趋势,水晶兰苷的含量则不断积累.
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HPLC测定巴戟天中的水晶兰苷
目的 以水晶兰苷为指标,评价商品巴戟天的质量.方法 采用HPLC法,色谱柱为Kromalsil C18柱(150 mm×4.6mm,5 μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸水溶液(5:95→8.8:71.2,15 min),流速为1 ml·min-1;检测波长为231 nm;柱温为25℃.结果 商品巴戟天中水晶兰苷的含量差异较大,仅广东省德庆县高良镇巴戟天规范化种植基地的4.5年生样品中水晶兰苷的含量较为稳定.结论 商品巴戟天的质量参差不齐,应从源头上控制巴戟天的质量.
