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子宫内膜异位症和腺肌症患者子宫内膜雌激素受体的时空表达
目的研究子宫内膜异位症和子宫腺肌症子宫内膜各种细胞中雌激素α和β受体的表达模式,为探索子宫内膜异位症和子宫腺肌症的致病机理提供依据.方法108例患有内膜异位症、腺肌症、两症并发组和对照组子宫内膜组织,常规光镜下按Noyes分期标准行形态学分期.采用免疫组织化学的方法观察不同月经周期时相子宫内膜腺上皮、基质和血管内皮细胞中雌激素受体ERα和ERβ的表达.结果与对照组相比,ERα信号强度在各组相应的细胞类型、相应的时相无显著差异,但子宫内膜腺上皮细胞、基质细胞和血管内皮细胞中显示阳性信号的细胞比例增大,且腺上皮细胞质普遍出现ERα阳性信号.子宫内膜异位症和腺肌症的血管内皮细胞中ERα阳性细胞数显著增加.ERβ在各组的表达模式与对照组相比无明显差异,甚至略呈下降趋势.结论人子宫内膜中ERα为雌激素效应的主要受体亚型,表达ERα的腺上皮、基质和血管内皮细胞数量的增多以及腺上皮细胞质普遍出现ERα阳性信号可能与这两种疾病的发病密切相关;ERβ并不参与这一过程.
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血管紧张素Ⅱ及其受体在人卵巢的表达
目的探讨卵巢血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)及其受体(AT1、AT2)在人卵巢的表达与分布. 方法免疫组化法检测33份人卵巢组织标本中Ang II及其受体AT1、AT2的表达与分布. 结果 Ang Ⅱ及受体AT1、AT2在卵巢的分布基本一致,三者在卵母细胞均有表达,大卵泡尤其是排卵前卵泡的颗粒细胞含量丰富,卵泡膜细胞几无表达;颗粒黄体细胞与膜黄体细胞三者含量均丰富,并伴随黄体退化而消失. 结论 Ang Ⅱ及其受体可在人卵巢局部生成,并存在于同一种细胞内,提示它们可能以自分泌方式参与卵巢功能的调节.
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子宫内膜异位症患者在位内膜Stathmin的表达研究
目的 探讨Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜及正常妇女子宫内膜中的表达. 方法 收集子宫内膜异位症患者在位子宫内膜36例和对照妇女的子宫内膜组织20例.通过免疫组化和免疫蛋白印迹法(Western-blotting)检测Stathmin的表达. 结果 Stathmin在子宫内膜的腺体和基质中均有表达,且在增殖期和分泌期的表达无显著性差异(P＞0.05).Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达明显高于在对照组妇女子宫内膜中的表达(P＜0.05). 结论 Stathmin在子宫内膜异位症在位内膜的表达增高,可能参与子宫内膜异位症的发病.
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胚泡着床期碱性成纤维细胞生长因子在小鼠子宫内膜的转录和表达
为进一步阐明碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在胚泡着床过程中的生物学作用.采用昆明小鼠30只,随机分为5组,分别于受精后4～8天处死孕鼠.应用原位杂交和免疫组织化学的方法,检测了不同孕期的子宫内膜bFGF的转录和表达状况.结果:子宫内膜多种细胞可产生bFGF,受精后第4～5天,bFGF表达仅限于子宫腔上皮和腺上皮,bFGF在蜕膜细胞的转录则早出现于受精的第5天,随胚泡植入的进程,蜕膜细胞bFGF的转录和表达明显增加,但在胚泡着床部位周围蜕膜细胞转录和表达由有至无.表明bFGF通过自或旁分泌的方式参与调节胚泡着床的生理过程.
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子宫内膜癌热休克蛋白70、90的表达及其临床意义
目的:探讨子宫内膜癌中热休克蛋白(HSP)70、90的表达及意义.方法:用免疫组化Envision法及图象分析仪检测了30例正常子宫内膜、30例增生过长子宫内膜和53例子宫内膜癌中HSP70、90的表达情况.结果:子宫内膜癌中HSP 70的表达为(209.06±5.36),明显高于正常内膜(145.21±4.09)和增生过长内膜(148.59±4.23),P均<0.01;子宫内膜癌中HSP 90的表达为(166.98±5.71),明显低于正常子宫内膜(208.57±31.14)和增生过长子宫内膜(249.73±4.94),分别为P<0.05、P<0.01.子宫内膜癌中HSP70表达随肿瘤病理分级升高而增强(P<0.01),非内膜样癌较内膜样癌表达增强(P<0.01);子宫内膜癌中HSP90表达随肿瘤病理分级升高而表达减弱(P<0.01),非内膜样癌较内膜样癌表达减弱(P<0.01).但子宫内膜癌中HSP70、90表达与肌层浸润深度、术后病理分期、淋巴结转移未见显著相关性(P>0.05).结论:HSP70、90可能与子宫内膜癌发生及预后有关.
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干燥综合征对唇腺活检病理与免疫学临床价值
目的:分析干燥综合征对唇腺活检的临床病理意义.方法:70例干燥综合征的临床和病理资料,其中50例进行了CD3、CD4、CD8、CD20蛋白的免疫组织化学染色与观察.结果:唇腺组织内至少一个病灶60个淋巴细胞浸润或一个灶淋巴细胞浸润面积4mm2以上,浸润的细胞80％ 以上为T淋巴细胞.结论:唇腺活检是干燥综合征有效、易恢复的诊断方法,尤其是在抗SSA/抗SSB阴性病例的诊断有着决定性的诊断价值.
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大鼠精子发生过程中热休克蛋白70-2特异表达的研究
目的运用蛋白质组学方法,寻找大鼠精子发生相关蛋白质,找到目标蛋白质后,进一步用免疫组织化学方法做定位研究.方法用重力沉降法(STAPUT法)从9 d龄雄性大鼠睾丸中分离出A型精原细胞,从成年的雄性大鼠睾丸中分离出粗线期精母细胞、圆形精子细胞.分别提取这3种细胞的总蛋白质,进行双向电泳.对所得双向电泳凝胶扫描,分析并找出差异蛋白质.对挑选出的差异蛋白质做质谱分析,发现在这3种不同细胞的表达上有明显差异的蛋白.进一步做睾丸免疫组织化学组织定位、定量研究.结果双向电泳结果显示,HSP70-2在粗线期精母细胞、圆形精子细胞中表达量较高,在A型精原细胞则表达量极少.HSP70-2在粗线期精母细胞中表达量大.用HSP70-2抗体对大鼠睾丸组织切片行免疫组织化学研究,发现粗线期精母细胞、Sertoli细胞、Leydig细胞有阳性颗粒反应.HSP70-2主要表达于细胞质. 结论HSP70-2在精子发生过程中有明显的差异表达,推测其对精子发生起重要调节作用.
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白血病抑制因子及其受体在人输卵管组织中的表达
目的探讨白血病抑制因子(LIF)及其受体(LIFR)在人输卵管中的表达和定位. 方法采用原位杂交和免疫组织化学染色技术检测22例人输卵管组织中的LIF mRNA及LIF和LIFR蛋白的表达. 结果人输卵管上皮细胞和血管内皮细胞的胞浆中有LIF mRNA及LIF和LIFR蛋白表达;分娩后未转经及月经增殖期妇女的输卵管组织的表达较弱,而在月经分泌期妇女输卵管组织的表达则较强. 结论人输卵管组织中存在LIF和LIFR表达,且在卵巢周期中有相应的变化.
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着床期小鼠子宫内膜促血管生成素-2的表达
目的检查促血管生成素-2(Ang-2)蛋白在小鼠着床期子宫内膜的分布及mRNA的表达,以探究Ang-2基因表达在着床过程中的作用和生物学意义(OD).方法取妊娠2、4、6和8 d的小鼠子宫内膜(蜕膜),运用免疫组织化学S-P法和原位杂交技术,检测着床期子宫内膜中Ang 2蛋白的表达及mRNA的转录水平.结合图像分析技术检测不同时期子宫内膜中Ang-2表达的平均光密度(OD).结果结果显示,Ang-2特异性免疫反应产物在基质细胞及腔上皮细胞胞浆中表达,随着妊娠天数的增加,表达逐渐增强(P＜0.01).原位杂交显示,Ang-2 mRNA自妊娠第2天起即表达于基质细胞和腺上皮;第4天血管壁胞浆中也出现阳性表达,且其表达强度在妊娠第6、8天时逐渐增加.平均OD值具有显著性差异(P＜0.01).结论在小鼠妊娠过程中Ang-2和Ang-2 mRNA在着床前小鼠子宫内膜中即开始表达,并随妊娠进程而表达增强,提示Ang-2基因在"胎-母"对话的信号传导过程中起调节作用.
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前列腺癌组织中p53、bcl-2和E-cadherin蛋白的表达水平及临床意义
目的 探讨不同前列腺组织中p53、bcl-2和E-cadherin蛋白的表达水平及临床意义. 方法 收集活检或手术切除的人前列腺组织标本,按病理诊断分为前列腺癌组46例、前列腺增生组25例;其中前列腺癌组又分为高分化组(11例)、中分化组(13例)、低分化组(22例).应用免疫组织化学SP法检测上述标本中p53、bcl-2和E-cadherin蛋白的表达情况.结果 前列腺癌组织中p53和bcl-2的阳性表达率(50.0％和58.7％)显著高于前列腺增生组织的p53和bcl-2的阳性表达率(12.0％和8.0％),差异具有统计学意义(P＜0.05).bcl-2在前列腺癌高分化组的阳性表达率(36.4％)显著低于低分化组(72.7％)(P＜0.05).前列腺增生组织中E-cadherin蛋白表达阳性表达率为100.0％,前列腺癌组织中阳性表达率为43.5％,两组E-cadherin蛋白表达阳性率相比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).E-cadherin蛋白在前列腺癌高、中、低分化3组中的阳性表达率分别为90.9％、46.2％、18.2％,高分化组阳性表达率显著高于低分化组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 p53、bcl-2和E-cadherin蛋白的异常表达与前列腺癌的发生发展密切相关,检测p53、bcl-2和E-cadherin蛋白表达水平对前列腺癌鉴别诊断及临床预后具有重要价值.
关键词： 前列腺癌 免疫组织化学 P53 Bcl-2 E-cadherin -
细胞色素P450芳香化酶在大鼠多囊卵巢中的表达及意义
目的 检测细胞色素P450芳香化酶(P450 arom)在大鼠多囊卵巢颗粒细胞中的表达水平,探讨P450 arom与多囊卵巢综合征(PCOS)的关系. 方法 应用半定逆转录-聚合酶链反应(RT-PcR)检测PCOS实验组及正常对照组大鼠卵巢组织中P450 arom基因(CYP19)的表达;采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法对大鼠卵巢组织中P450 arom进行检测. 结果 实验组和对照组卵巢组织中CYPl9基因,相对表达强度分别为(0.138±0.072)和(0.759±0.236),差别有显著性意义(P<0.01);实验组中原始卵泡、初级卵泡和成熟卵泡比较,P450 arom蛋白表达下降(P<0.05).对照组间初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡比较,arom蛋白表达有显著性差异(P<0.05). 结论 P450 arom mRNA在PCOS大鼠卵巢组织中呈低表达P450 atom蛋白在PCOS大鼠卵巢初级卵泡和成熟卵泡中表达下降;PCOS的发生可能与P450 arom在mRNA和蛋白水平的表达下调有关.
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促性腺激素释放激素受体在子宫内膜异位症患者在位与不同部位异位子宫内膜的表达及其临床意义
本研究采用免疫组织化学的方法比较促性腺激素释放激素受体(GnRHR)在子宫内膜异位症(内异症)患者的在位内膜和不同部位的异位内膜的表达,进一步探讨GnRHR在内异症发病机制中的作用,为更有效地运用促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)制剂治疗内异症提供参考.
关键词： 子宫内膜异位症 子宫在位内膜 子宫异位内膜 促性腺激素释放激素受体 免疫组织化学 -
P53、p21WAF1/CIP1蛋白在宫颈鳞癌中的表达
P53野生型蛋白质分子具有抑制肿瘤细胞的作用,但其突变型的等位基因却具有癌基因的作用特点,可使体外培养的细胞发生恶变[1].近年来P53与肿瘤的发生机制研究较多,认为P53通过两种途径:一是下调p21WAF1/CIP1,一是非p21依赖型.本研究探讨P53、p21WAF1/CIP1表达与宫颈鳞癌的组织学分级及相关性.
关键词： 宫颈肿瘤 P53 p21WAF1/CIP1 免疫组织化学 -
临床胃腺癌Fas、PCNA表达与癌浸润转移的关系
目的探讨临床胃腺癌浸润转移与肿瘤细胞增殖、凋亡的关系及癌浸润转移的可能机制.方法采用免疫组化S-P法检测59例人胃腺癌中Fas和PCNA的表达.结果 (1)Fas和PCNA与分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关;(2)Fas阳性表达片数为42.4%,PCNA Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级阳性片数分别为8.5%和33.9%,两者表达呈负相关(P<0.01).结论 (1)胃腺癌的发展是肿瘤细胞不断增殖和肿瘤细胞凋亡抑制的结果.(2)Fas和PCNA分别反映了胃癌细胞凋亡和增殖的情况,可能对临床治疗和预后有提示意义.
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甲基汞对大鼠脑谷氨酸能神经元的免疫组化影响
[目的] 研究甲基汞亚急性染毒诱导大鼠脑内谷氨酸能神经元免疫组化改变,探讨其毒性机制.[方法] 免疫组织化学方法.[结果] 在低剂量组(2 mg.kg-1.d-1×7 d)大鼠脑内谷氨酸免疫反应阳性细胞(Glu-IRPC)数目、积分光密度、阳性面积比在给药14 d时下降有显著性意义(P<0.05).在高剂量组(10 mg.kg-1.d-1×7 d),各时点大鼠各脑区Glu-IRPC的数目下降,积分光密度降低,阳性面积比下降均有显著性意义(P<0.05),且Glu-IRPC的分支突起明显减少,有些细胞仅见胞体,未见突起.[结论] 甲基汞亚急性染毒可使大鼠脑内谷氨酸能神经元中谷氨酸水平降低.
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蒸制轮叶党参对顺铂致小鼠肾损伤的保护作用及机制
目的 探讨蒸制轮叶党参(steamed codonopsis lanceolata,SCL)对顺铂(Cisplatin)致小鼠肾损伤的保护作用及机制.方法 雄性ICR小鼠一次性腹腔注射20 mg/kg顺铂诱发急性肾损伤模型,观察SCL给药后的改善作用.相关试剂盒测定小鼠血清中肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)、炎症因子(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和肾组织中丙二醛(MDA)的含量.苏木素-伊红(HE)和Hoechst 33258染色观察肾组织病理学改变.免疫组化法检测肾组织中相关凋亡蛋白的表达.结果 与模型组比较,SCL均能不同程度的降低血清中CRE、BUN、TNF-α、IL-1β及组织中MDA的水平(P＜0.05),改善顺铂所致的炎症反应,同时SCL能够下调肾组织中Bax,上调Bcl-2的蛋白表达水平.结论 SCL对顺铂致肾损伤具有保护作用,其主要部分通过减少炎症反应,抑制脂质过氧化及抗细胞凋亡而实现的.
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已烯雌酚对雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡影响的动态观察
目的 了解新生期注射己烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对雌性BALB/c小鼠生后不同时期脾细胞凋亡及Bcl-2、Bax的影响.方法 新生雌性BALB/c小鼠,在生后24h内颈背部皮下注射 DES 40 μg,每隔24h注射一次,共连续5次.对照组平行注射等量无菌豆油.分别在生后7、14、21、35和49 d将小鼠处死,取其脾进行常规石蜡包埋和切片,进行TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling,)检测以及Bcl-2、Bax的免疫组织化学检测.结果 与对照组相比,DES组雌性BALB/c小鼠脾细胞的TUNEL阳性细胞数目在生后各点均有显著性增加.Bcl-2在各时间点DES组的表达均弱于相应的对照组.Bax在生后7d的对照组和DES组中的表达差异无统计学意义,而在生后14、21、35和49d DES组的阳性表达明显多于对照组.结论 新生期注射 DES 可以导致雌性BALB/c小鼠脾细胞凋亡明显增加.细胞凋亡在对照组和DES组不同时间点的动态变化以及在两组间相同时间点的差异可能与Bcl-2表达的减少以及Bax表达的增加有关.
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雌激素对小鼠骨中原癌基因c-myc蛋白的影响
为初步探讨雌激素对骨的作用机制,以体外培养的小鼠胚胎长骨作为模型,通过免疫组织化学方法检测雌酚酮对骺板静止区、增殖区和肥大区c-myc蛋白表达的影响.结果显示,培养介质中雌酚酮浓度为10-9mol/L时,增殖区c- myc蛋白阳性细胞面积与对照组相比显著增加;浓度为10-8mol/L时,除增殖区外,静止区阳性细胞面积也显著增加;当浓度增至10-7mol/L时,3个区阳性细胞面积均显著增加.提示雌激素可通过促进长骨c-myc的表达促进软骨内成骨.
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胃癌组织中增殖细胞核抗原表达及c-met基因异常的实验研究
目的 探讨胃癌和相应癌旁组织中增殖细胞核抗原(PCNA)和c-met蛋白表达以及c-met基因异常扩增在胃癌中的变化规律.方法 采用免疫组化抗原热修复技术分别检测58例胃癌和相应癌旁组织中c-met及PCNA蛋白的表达;半定量多聚酶链反应(PCR)技术检测c-met基因的扩增.结果 58例胃癌及相应癌旁组织中均检测到c-met基因扩增.阳性率为100%,两组间c-met基因的扩增水平差异有显著性(t=9.455.P<0.01).胃癌组c-met蛋白表达阳性率为67.24%(39/58),癌旁组织组c-met蛋白均为阴性,两组间差异有显著统计学意义(X2=58.75,P<0.001).58例胃癌及相应癌旁组织中PCNA标记指数(PCNA LI)分别为49.3768±12.1823和14.8390.4-7.1847,两组间差异有显著性(t=8.805,P<0.01).胃癌组织中c-met基因的表达和扩增与肿瘤大小、肿瘤部位、淋巴结转移、分化程度和临床分期等方面均无显著相关性.39例c-met阳性胃癌组织和19例c-met阳性胃癌组织中PCNA标记指数LI分别为48.321±7.296和30.109±5.728,统计学分析表明两组间PCNA LI有显著性差异.结论 胃癌组织中存在c-met基因的异常扩增和c-met及PCNA蛋白的过表达.
关键词： 胃肿瘤 c-met增殖细胞核抗原 PCR 免疫组织化学 -
子宫颈鳞癌中E-cadherin,catenin的表达及意义
目的探讨上皮钙依赖粘附素(E-cadhedn,E-cad),连环素(Catenin,cat)、α、β、γ在子宫颈鳞癌中的表达及意义.方法应用免疫组化S-P法观察70例子宫颈鳞癌组织中E-cad,α-cat,β-cat,γ-cat的表达并结合临床随访资料进行分析.结果E-cad,α-cat,β-cat,γ-cat阳性病例分别为42例(60%),35例(50%),35例(50%),31例(44.3%);其中E-cad与β-cat、α-cat表达呈正相关性(P＜0.05);E-cad、β-cat的表达缺失与子宫颈鳞癌的去分化、淋巴结转移及术后生存期短有显著相关性(P＜0.05).结论E-cad、β-cat蛋白的表达可作为判断子宫颈鳞癌转移及预后的指标之一.
