降钙素基因相关肽对缺血-再灌注心肌细胞电生理的影响

降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)近来发现它能明显延缓或者拮抗缺血-再灌注性心律失常的发生,因而倍受关注.本实验采用标准玻璃微电极技术,观察CGRP对缺血-再灌注过程中心室肌细胞电生理特性的直接作用,为其能防治缺血性和再灌注性心律失常提供理论依据. 资料和方法健康家兔24只,麻醉后迅速开胸取出心脏,制备左心室肌标本(10 mm～15 mm×3 mm×3 mm),采用标准玻璃微电极技术(电极阻抗10 MΩ～20 MΩ)记录正常状态动作电位(action potential,AP)作为对照,开始实验.由不同缺血条件分为四组:(1)缺血未用药组:用模拟缺血台式液配方(mM):NaCl 144.0,KCl 8.0,NaH2PO40.33,MgCl2@6H2O 1.05,CaCl2 1.8,HEPEs 5.0,乳酸钠20,NaOH调节pH为6.80±0.05,并在其使用前和灌流中持续充以100%N2,使动脉氧分压保持在40 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)左右灌流左心室肌20 min后,立即换成100%O2的改良台式液再灌注30 min;(2)预处理组:用含10-8MCGRP的改良台式液灌流10 min后,方法同①组进行缺血-再灌注过程;(3)缺血同时用药组:用含10-8M CGRP的模拟缺血台式液灌流20 min后,再同①组进行再灌注;(4)缺血后用药组:用模拟缺血台式液灌流10 min后,给予内含10-8M CGRP的缺血液继续灌流10 min后,再同①组进行再灌注.整个缺血-再灌注过程中的AP经微电极放大器(MEZ-8201,Nihon Kohden)输入VC-10双线记忆示波器,同时用磁带记录仪记录实验的全过程,实验结束后再经多导生理记录仪ACQ4600软件和计算机DASA软件采集参数,再由Gould 6120绘图仪绘出.测量心肌细胞AP的各项参数包括:①细胞静息膜电位(RMP);②动作电位振幅(APA);③零相大除极速率(Vamx);④动作电位时限(APD)本实验取动作电位复极至50%(APD50)和95%(APD95)的时限;⑤APD50-95(=APD95-APD50,反映动作电位后期时限);⑥APD50/APD95(反映动作电位复极前期占整个复极过程的比例).并观察缺血-再灌注过程中异常电活动的发生情况.

控制性降压对降钙素基因相关肽的影响

冠状动脉旁路移植术围术期血浆内皮素及降钙素基因相关肽的变化及临床意义

体外循环下施行冠状动脉旁路移植术(CABG)期间,心肌组织、心包和血液中的许多生物活性因子,如血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、肿瘤坏死因子等均可发生变化,而这些变化与CABG术中及术后心功能的维持与恢复、移植血管的通畅与否、围术期疗效等可能有密切的关系.

非洛地平治疗高血压患者后血压变异性及降钙素基因相关肽的变化

国产磨菇伞型封堵器治疗动脉导管未闭的疗效及对血浆神经肽Y、降钙素基因相关肽影响的研究

降钙素基因相关肽和受体活性修饰蛋白1对血管平滑肌细胞迁移的影响及机制

目的 探讨转染降钙素基因相关肽(CGRP)的骨髓间充质干细胞(MSC)对血管平滑肌细胞(VSMC)迁移的影响,及活性修饰蛋白1(RAMP1)在其中的作用和机制.方法 分离、培养大鼠MSC和VSMC,分别应用携带CGRP和RAMP1的慢病毒载体转染MSC和VSMC,然后将MSC与血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的VSMC共培养.实验分为5组:(1) AngⅡ对照组(MSC+ VSMC+ AngⅡ);(2) MSCCGRP+组(MSCCGRP++ VSMC+ AngⅡ);(3)MSCCGRP+ RAMP1 组(MSCCGRP++ VSMCRAMP1-+AngⅡ);(4) MSCCGRP+ RAMP1+组:(MSCCGRP++ VSMCRAMP1++ AngⅡ);(5) RAMP1+ (MSC+VSMCRAMP1++ AngⅡ).应用Transwell实验评价VSMC的迁移能力,Western blot检测蛋白的表达水平.结果 Transwell实验结果显示,MSCCGRP+组VSMC迁移数量[(50.8±2.6)个]少于AngⅡ对照组[(71.4±2.3)个],而多于MSCCGRP+ RAMP1+组[(30.4±3.0)个](P均＜0.05);MSCCGRP+ RAMP1-组VSMC迁移数量[(69.0±5.6)个]多于MSCCGRP+ RAMP1+组(P＜0.05),而与AngⅡ对照组差异无统计学意义(P＞0.05);RAMP1+组VSMC迁移数量[(71.6±3.4)个]与AngⅡ对照组差异也无统计学意义(P＞0.05).Western blot结果显示,MSCCGRP+组磷酸化核因子-κB P65(P-P65)蛋白表达水平低于AngⅡ对照组(0.475±0.022比0.642±0.035,P＜0.05);MSCCGRP+ RAMP1-组P-P65蛋白表达水平高于MSCCGRP+ RAMP1+组(0.670±0.030比0.373 ±0.041,P＜0.05),而与AngⅡ对照组差异无统计学意义(P＞0.05);RAMP1+组P-P65蛋白表达量(0.643 ±0.039)与AngⅡ对照组比较差异也无统计学意义(P＞0.05).结论 RAMP1对CGRP抑制VSMC迁移起促进作用,RAMP1-CGRP通过核因子-κB信号通路抑制VSMC迁移.

垂体中叶素生物学作用的研究进展

垂体中叶紊(IMD),肾上腺髓质素2(AM2)是新近发现的降钙素基因相关肽(CGRP)家族成员,其基因结构与肾上腺髓质素(AM)相似.IMD通过与降钙素受体样受体,受体活性修饰蛋白系统(CRLR/RAMPs)结合发挥生物学作用.IMD分布广泛,具有舒张血管床,减轻心肌缺血再灌注损伤,调节摄食和水盐代谢,调节多个激素分泌等生物学作用.IMD在多种病理状态下表达增高,提示这一新型小分子多肽对调节机体稳态具有重要作用.

外源性NGF对转基因CGRP干细胞移植治疗骨质疏松大鼠的影响

目的 研究外源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对转基因降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)骨髓干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗骨质疏松大鼠的影响.方法 构建CGRP基因表达载体,转染制备转基因CGRP-MSCs靶细胞;60只雌性SD大鼠骨质疏松模型随机均分为空白对照组(A组)、单纯MSCs移植治疗组(B组)、CGRP-MSCs移植治疗组(C组)、CGRP-MSCs+NGF移植组(D组).在治疗1w、2w、3w后,实时定量荧光PCR和Westernblot检测3个时间段每组大鼠股骨骨组织中CGRP基因和蛋白的相对表达水平,评价各组疗效.结果 与A组比较,3个时间点,C组和D组中CGRP表达水平均显著上调(P＜0.01);治疗1w后,C组和D组上调水平差异明显(P＜0.01),D组低于C组;治疗2w后,C组和D组之间仍保持显著差异(P＜0.05),D组仍低于C组;治疗3w后,C组和D组上调水平差异明显缩小,二者差异无统计学意义(P＞0.05).CGRP基因和蛋白相对表达水平在各组检测结果差异一致,同上.结论 在转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠中联合应用外源性NGF,无累计效应,并可能抑制大鼠股骨骨组织中CGRP的表达,表明外源NGF于转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松症中可能并无促进作用,至少在CGRP表达层面无促进作用,而单纯的转基因CGRP-MSCs移植治疗骨质疏松大鼠疗效优于联合应用外源性NGF治疗方案.

外源性CGRP诱导糖尿病大鼠膜性成骨的实验研究

目的 探讨外源性降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)对糖尿病大鼠骨膜微血管病变和膜性成骨的影响.方法 建立糖尿病大鼠模型,外源性CGRP静脉注射,随机分为对照组(CON)、糖尿病组(DM)、CGRP干预组(CGRP),分别在5w、10w后观察各组大鼠骨膜微组织结构及组织计量学测定;墨汁灌注观测骨膜微血管单位面积.结果 DM1骨祖细胞数较CON均增大(P＜0.01),DM2骨膜厚度等均明显小于CON组(P＜0.01);微血管单位面积增大,但渗透性大.CGRP骨膜厚度较DM1增多(P＜0.01).CGRP2较DM2骨膜厚度、骨祖细胞数均增大(P＜0.01),微血管连续性好.结论 外源性CGRP可改善糖尿病大鼠骨膜的微循环损伤,促进膜性成骨对糖尿病大鼠骨质疏松症起到修复作用.

腰椎小关节退变致腰腿痛机制的实验研究

目的:探讨退变腰椎小关节病变和腰腿疼的关系及其可能的作用机制.方法:收集我院骨科临床手术中切除的腰椎小关节标本,利用组织病理学和影像学检查对比研究正常和退变腰椎小关节的病变特点,免疫组织化学方法观察P物质(substance P,SP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)能神经纤维在小关节中的分布,酶联免疫吸附剂测定法(enzyme-linked immunosobnent assay,ELISA)测定腰椎小关节中细胞因子IL-1β的含量.结果:退变腰椎小关节的X线和CT表现为关节间隙有不同程度的变窄或消失、关节面骨质增生、硬化,HE染色软骨表面不平整、细胞排列紊乱;白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平升高.在两组小关节中都发现了SP、CGRP能神经纤维的存在.结论:腰椎小关节退变后发生了不同程度的病理变化,机械摩擦和细胞因子刺激小关节中的神经纤维可能是小关节病变引起腰腿疼的原因之一.

先天性心脏病合并肺动脉高压患者尾加压素Ⅱ、降钙素基因相关肽和内皮素浓度观察

目的 观察先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PH)患者手术前后尾加压素Ⅱ(UⅡ)、降钙素基因相关肽(CGRP)和内皮素(ET)的变化.方法 将42例先天性心脏病患者按其肺动脉收缩压分为无PH组.轻度PH组,中度PH组,重度PH组.采用放射免疫法测定各组术前术后UⅡ、CGRP和ET含量,分析其与肺动脉压力(PAP)的关系.结果 ①术前UⅡ含量各组间差异无显著性,UⅡ与PAP无关;CGRP含量随着PAP增高而减低;ET含量随着PAP增高而增高.②术后各组UⅡ与术前无明显改变;各组CGRP含量增高,与术前相比差异显著;各组ET含量降低,与术前相比差异显著.结论 UⅡ含量与PAP程度无明显相关;CGRP和ET在PH形成和血管重建中发挥重要作用,可作为衡量肺高压程度和性质的重要指标.

低温对内皮素和降钙素基因相关肽血浆含量的影响

目的 探索低温对内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)血浆含量的影响.方法 健康杂种犬12只,采用海水浸泡体温过低症模型,将犬置入低温人工海水中,使其肛温降至27℃.于实验前和肛温降至35℃、30℃、27℃时分别取血浆采用放射免疫分析进行ET和CGRP含量测定.结果 随着体温逐渐下降,ET含量逐渐增加,体温降至27℃时血浆ET含量显著增加(P＜O.01);而CGR含量则逐渐减少,体温降至27℃时血浆CGRP含量显著下降(P＜0.01).相关性分析显示CGRP含量与ET呈负相关(r=-0.9972,P＜0.05).结论 体温过低时,血浆内皮素含量明显增加,而降钙素基因相关肽含量明显下降,且两者呈负相关.

降钙素基因相关肽与风湿性心脏病的关系

降钙素基因相关肽(CGRP)是一种具有多种生理功能活性多肽,对于维持心血管系统的正常功能有重要作用.风湿性心脏病(RHD)是常见的心脏疾病.目前CGRP的分布及生物学作用越来越受到重视.现就其来源、结构、分布、生物学作用以及与心血管疾病、特别是RHD的研究简述如下.

降钙素基因相关肽对急性胰腺炎胰腺微循环的影响

目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)对急性胰腺炎(AP)胰腺微循环及血管通透性作用方法测定各组SD大鼠胰腺血流、微血管通透性,并对胰腺病理切片进行评分、对比.结果(1)AP时胰腺血流发生显著改变;在AP模型建立胶及过程中皮下注射CGRP,胰腺血流量、血液流速显著接连加,胰腺病变程度减轻;在AP模模型建立后注射CGRP,上述指标无改善,(2)AP时皮下注射CGRP,可使胰腺微循环血管通透性显著降低.结论在AP模型建立前或同时皮下注射CGRP可以增加胰腺的血流量、血液流速,降低微血管通透性,减轻胰腺组织的损伤程度.

脉冲电磁场和降钙素基因相关肽在肠粘膜萎缩中的作用

目的探讨脉冲电磁场对结肠造瘘后旷置肠段粘膜的刺激作用 ,及降钙素基因相关肽在粘膜萎缩时的变化. 方法将28只SD大鼠随机分为3组,1组为对照组(n＝9),另外两组接受结肠造瘘、远端结肠旷置术,于术后8 d起连续5 d分别接受每日半小时的电磁场刺激(n＝10)和不接受刺激(n＝9). 结果病理组织学检查发现,电磁场刺激有效地防止了旷置部分结肠粘膜的萎缩.接受刺激的大鼠结肠粘膜的DNA和RNA含量均比未受刺激的高.结肠旷置后大鼠血浆中的降钙素基因相关肽有了明显的下降,而电磁场刺激未使之升高. 结论脉冲电磁场能在缺乏肠内营养的情况下刺激肠道粘膜的增生,但未改变降钙素基因相关肽的水平,提示了肠粘膜萎缩和阻断机理的复杂性.

肢体负压对动脉闭塞犬血浆内皮素和降钙素基因相关肽的影响

目的观察肢体负压(LNP)对肢体动脉闭塞犬血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,以探讨肢体负压的作用机理.方法犬15只,分治疗组10只和对照组5只,采用切断左后肢股动脉分支,动脉腔内置入螺旋状金属丝的方法,制作肢体动脉闭塞模型.2周后,治疗组行患肢负压治疗,连续10 d;对照组不做负压治疗.于模型制作前、制作后2周及负压治疗10 d时,用放射免疫分析法检测患肢股静脉血浆ET及CGRP水平.结果治疗组经负压治疗后,血浆ET水平显著低于治疗前(P<0.01),血浆CGRP水平显著高于治疗前(P<0.01),两者呈负相关;而对照组无明显变化(P>0.05).结论肢体负压可显著降低肢体动脉闭塞犬的血浆ET水平,提高CGRP水平.

单纯血管束、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对降钙素基因相关肽和神经肽Y表达的影响

目的 比较单纯血管、神经束分别植入组织工程骨修复兔骨缺损对神经肽降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)和神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)表达影响. 方法 36只新西兰大白兔,随机平均分为3组:A组为组织工程骨+股血管束植入,B组为组织工程骨+感觉神经束植入,C组为单纯组织工程骨.每只动物均在右侧股骨制作长1.5 cm的段缺性骨与骨膜缺损,钢板固定后分别用以上方法修复大段骨缺损.术后3、6、12个月行免疫组化染色检测修复骨段内的CGRP和NPY的表达,并采用图像分析软件行半定量分析. 结果 CGRP和NPY的表达量在A、B、C 3组均随时间推移而增多(P=0.000),在3个月时A组较B组多(P=0.000),但在6个月和12个月时A组和B组的表达量无明显差异(P>0.05).A、B两组在3、6、12个月时的表达均较C组多(P=0.000). 结论 与单纯神经束植入组相比,单纯血管束植入组织工程骨修复兔骨缺损在术后3个月可以明显促进CGRP和NPY表达,但后期两组对神经肽表达的影响作用无明显差异.

降钙素基因相关肽与增生性瘢痕

增生性瘢痕(HS)是成纤维细胞大量增生和胶原过度聚积的结果.实验证实,外周神经系统通过神经肽的介导在瘢痕的增生过程中起重要作用.降钙素基因相关肽(CGRP)是主要的感觉神经肽之一,它参与局部的炎症反应、血管扩张、胶原增生等过程.有实验证实CGRP在创面愈合过程中明显高于正常组织[1],因此推测它在HS的形成过程中起重要作用.

全腔静脉肺动脉连接手术对降钙素基因相关肽分泌的影响

目的研究全腔静脉肺动脉连接术(TCPC)术后降钙素基因相关肽(calcitonin-gene-related peptide,CGRP)的变化情况及肺循环内无搏动血流对其分泌的长期影响. 方法实验组为13例心外管道TCPC术后患者,对照组为13例房间隔、室间隔缺损心内修复术患者,对2组患者分别于术前、术后第1天、第5天、第4周和术后6个月测量血CGRP含量.实验组患者术后经右心导管测量心脏指数(cardiac index, CI)及肺血管阻力(pulmonary vascular resistance,PVR). 结果术前实验组CGRP含量显著低于对照组(t=3.12,P<0.01);术后2组CGRP均出现一过性升高,第4周对照组恢复正常,而实验组仍显著高于对照组(t=3.14, P<0.01),且术后6个月仍保持高水平(t=2.32, P<0.05).CGRP含量与PVR呈显著负相关(r=-0.99, t=9.82, P<0.05),与CI呈显著正相关(r=0.98, t=6.95, P<0.05). 结论 TCPC手术完全旷置右心后,肺循环无搏动血流会刺激肺组织CGRP分泌增加,由此所引起的肺血管阻力降低,可能对手术患者的早期恢复有利.

风湿性心脏病二尖瓣置换术围手术期肿瘤坏死因子及降钙素基因相关肽的含量变化

通过对肿瘤坏死因子(TNF)、降钙素基因相关肽(CGRP)的测定,客观评价浅低温心脏不停跳与中低温心脏停跳心内直视术2种术式的心肌保护效果.