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  • 光照对黄芩黄酮类活性成分积累及其相关基因表达的影响

    作者:陈顺钦;袁媛;罗毓健;黄璐琦;陈平;李晓明

    目的:研究光照对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响.方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,应用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析.结果:光照对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,与黑暗条件相比,细胞生长13 d后黄芩苷含量显著增长了806.1%,黄芩素含量显著增长了42.5%,PAL基因在光照条件下的转录水平高于在黑暗条件,光照条件下UBGAT同黄芩素显著相关(r=-0.995).结论:光诱导对黄芩悬浮细胞中有效成分的积累有显著的促进作用,光诱导刺激了与有效成分的积累相关基因(PAL,UBGAT)的表达.

  • PEG胁迫对黄芩黄酮类有效成分积累及相关基因表达的影响

    作者:杨兆春;袁媛;陈敏;帅凌飞;肖倩;林淑芳

    目的:研究不同程度PEG胁迫对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响.方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,用酶标仪检测细胞内游离脯氨酸含量,并用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析.结果与结论:黄芩悬浮细胞内游离脯氨酸含量随PEG胁迫浓度升高而升高,10% PEG胁迫黄芩悬浮细胞可以模拟干旱条件,提高悬浮细胞PAL基因表达量且会促进黄芩素的积累.20% PEG胁迫提高了UBGAT基因的表达量,但同时APX酶活性的提高抑制了黄芩素参与清除活性氧,导致了黄芩素向黄芩苷的转化.

  • 大鼠急性肺栓塞后cytokeratin-19表达下降

    作者:李圣青;遆新宇;简文;刘阿茹;欧阳海峰;赵峰

    目的 研究急性肺血栓栓塞大鼠的肺组织中细胞角蛋白19(cytokeratin-19,CK-19)及其分解产物CYFRA21-1的表达变化.方法 建立大鼠急性肺血栓栓塞模型并做肺泡灌洗.用半定量RT-PCR法和Western blot法检测CK-19的mRNA和蛋白表达;免疫组化方法检测CK-19在肺组织内的分布;放免法检测血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1的水平;检测动脉血氧饱和度.结果 急性肺栓塞后CK-19 mRNA和蛋白质水平均逐渐降低;肺泡上皮细胞CK-19的表达明显下降;血清和肺泡灌洗液中CYFRA21-1水平升高;动脉血氧饱和度呈明显下降趋势.结论 急性肺栓塞不仅导致CK-19表达降低,而且分解代谢增强,因此CYFRA21-1的检测对于判断急性肺栓塞的严重程度及预后具有重要意义.

  • 急性肺血栓栓塞大鼠肺组织中COMT和MAO表达降低

    作者:李圣青;遆新宇;简文;刘阿茹;阙海萍;杨树广;刘少君

    目的 探讨急性肺血栓栓塞大鼠的肺组织中儿茶酚胺代谢相关酶类氧甲基转移酶(COMT)和单胺氧化酶(MAO)的表达变化. 方法 建立大鼠急性肺血栓栓塞模型,分别在血栓栓塞后1、8、24和48 h采取心脏穿刺法取血,用半定量RT-PCR法和Western blot法检测COMT、MAO-A及MAO-B的mRNA和蛋白表达;用HPLC法检测血清中儿茶酚胺水平. 结果 在急性肺栓塞的不同时间点,COMT、MAO-A及MAO-B的mRNA和蛋白水平均逐渐降低,而血清中肾上腺素(EPH)和去甲肾上腺素(NE)呈逐渐升高趋势. 结论 急性肺栓塞大鼠的血清儿茶酚胺水平升高源自肺组织内的降解减少.本研究部分阐明了急性肺栓塞导致肺动脉高压的分子机制.

  • 红景天对慢性高原心脏病大鼠心肺组织中内皮抑素和血管内皮细胞生长因子受体表达的影响

    作者:隋岫兰;陈荣华;杨锋;闫慧;郑俊;汪林勇;噶布;张世馥

    目的探讨内皮抑素和VEGF受体与慢性高原心脏病发病的关系以及红景天治疗高原心脏病的机理.方法建立慢性高原心脏病大鼠模型,分为对照组、吸烟运动刺激组、拟高原心脏病组和治疗组.利用免疫荧光组织化学和半定量RT-PCR方法检测内皮抑素和VEGF受体的表达水平.结果刺激组心肺组织与对照组相比,VEGF受体表达水平升高,而内皮抑素下降.治疗组与拟高原心脏病组相比VEGF受体表达水平降低,而内皮抑素升高.结论慢性高原心脏病发病与内皮细胞损伤密切相关,红景天可以减少内皮细胞损伤.

  • 大鼠脊髓全横断损伤后Wnt信号基因的表达

    作者:蔚洪恩;王春芳;李鹏飞;王晋丽;索耀君;王菲

    目的 探讨大鼠脊髓全横断损伤后,Wnt信号基因在不同时相脊髓表达的变化及意义.方法 成年健康Wistar大鼠30只,随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组分为术后1d、3d、7d、14d、21d组,每组5只.SCI组大鼠T11脊髓段做全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,术后大鼠进行BBB运动功能评分.采用半定量RT-PCR方法检测脊髓损伤组织中Wnt信号基因的表达.结果 SCI组所有动物在术后均表现为双后肢瘫痪,BBB运动功能评分明显低于sham组.SCI组在脊髓横断术后1d、3d、7d Wnt3a表达均较sham组明显增加;尾侧端wnt3a较同时相头侧端的表达多,且在21d又出现明显的升高.在Blmm组和SCI组均未检测到神经基因蛋白1(Ngn1)的表达.发状分裂相关增强子1(Hes1)的表达在SCI后第1d较sham组有明显的下降,第3d出现升高,之后逐渐下降.结论 Wnt信号可能参与了脊髓损伤后修复再生的过程.

  • 冈比亚按蚊嗅觉结合蛋白基因agCP1588的克隆鉴定及其组织特异性表达谱分析

    作者:李正西;Jing-Jiang Zhou

    昆虫主要依靠嗅觉发现寄主,嗅觉在按蚊的寄主搜索行为中起关键作用.本文基于冈比亚按蚊的全基因组序列,设计特异引物,采用RT-PCR克隆了该按蚊嗅觉结合蛋白候选基因agCP1588.测序分析结果表明该基因具有嗅觉蛋白的标志性结构域,通过半定量RT-PCR技术研究了该基因的组织特异性表达谱,发现该基因只在雌蚊触角中表达.这一发现为进一步研究该嗅觉蛋白基因的功能奠定了基础.

  • 实时定量PCR技术在转基因肿瘤细胞株筛选中的应用

    作者:胡绍燕;陈子兴;赵晔;顾伟英;岑建农;钱军

    为了探讨实时定量RT-PCR技术用于筛选转基因细胞株的可行性,以转染RbAp46基因的细胞株为研究对象,利用优化的SYBR Green I染料实时定量PCR技术检测RbAp46基因的的表达水平,并与半定量PCR及Western blot检测结果相比较.结果表明:K562/RbA46中RbAp46N为2064.42±253.47,KA562/CMV中RbAp46N为860.94±291.07;单克隆SHG44/RbAp46的细胞株中RbAp46N为234.46±31.08,多克隆SHG44/RbAp46的细胞株RbAp46N为18.17±5.14,SHG44/CMV为1.46±0.54.与半定量RT-PCR及Western blot检测结果比较,三者之间具有非常好的一致性.结论:实时定量RT-PCR技术可以用于筛选转基因细胞株,与半定量RT-PCR及Western blot检测方法比较,具有简便、快捷、重复性好、灵敏度高且不需要后期处理等优点.

  • 变异链球菌临床株乳酸脱氢酶mRNA水平的表达研究

    作者:杨德琴;刘天佳;肖晓蓉;付春华;庄恒;李颂

    目的分析来自不同龋敏感人群变异链球菌不同基因型乳酸脱氢酶(LDH)的基因表达差异,探讨mRNA水平上基因表达与蛋白生物学功能及细菌致龋性的关系.方法应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对20株来自不同基因型的LDH进行基因表达水平差异的评价和比较.结果两种不同基因型LDH的mRNA表达水平不同(P<0.05),表现为低酶活性的B基因型ldh表达高;高龋和无龋菌株ldh表达的差异无统计学意义(P>0.05).结论变异链球菌乳酸脱氢酶基因表达水平具有遗传异质性,产酸因子ldh基因表达高低与龋病活跃性不呈正相关关系.

  • 变异链球菌F-ATPase亚基β基因多态性及表达研究

    作者:杨德琴;刘天佳;肖晓蓉;亓庆国;付春华;刘建国

    目的 研究变异链球菌(Streptococcus mutans,简称变链菌)临床分离株耐酸因子F-AT-Pase亚基β结构基因uncD的遗传多态性和mRNA表达水平差异,探讨其与细菌耐酸力的关系.方法 实验株包括18株高耐酸和20株低耐酸变链菌临床株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncD,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较;应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件,对20株不同基因型和不同耐酸力变链菌uncD基因的mRNA表达水平进行评价和比较.结果 AluⅠ-RFLP产生A、B基因型,测序证实导致多态出现的基因变异不在uncD的功能区和催化结构域;这两种基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P<0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncD的检出高于低耐酸力菌株.不同耐酸力菌株uncD的mRNA表达水平不同(P<0.05),但A、B两基因型菌株uncD的mRNA表达差异没有统计学意义(P>0.05).结论 F-ATPase的β亚基基因具有明显的遗传多态性,基因型和mRNA表达水平的多态性与菌株的耐酸力有一定的关系,虽然β亚基基因功能区高度保守,但在酸耐受适应中,仍表现为F-ATPase较活跃上调的亚基基因.

  • 不同置换量血液滤过对脓毒症患者Toll样受体表达的影响

    作者:茅尧生;吕铁;郑建鹏

    目的 前瞻性的研究不同置换量血液滤过对严重脓毒症患者外周血单核细胞Toll样受体表达及其内在功能的影响.方法对2006年3月至2009年2月入住绍兴市人民医院ICU符合纳入标准的严重脓毒症患者30例,在脓毒症集束化治疗策略的基础上联合血液滤过治疗,并随机分为高通量血液滤过组(HVHF)(置换量4 I/h,15例)与常规通量血液滤过组(置换量2 L/h,15例).①血液滤过治疗0 h,6 h,12 h,24 h,48 h各时相点,分离外周血单核细胞,采用半定量RT-PCR法和流式细胞仪检测单核细胞表面Toll样受体-4(TLR4)和Toll样受体-2(TLR4)mRNA和蛋白表达变化.②血液滤过治疗24 h后分离患者外周血单核细胞于体外培养,以内毒素(LPS)刺激,在6 h,12 h,24 h,48 h各时相点检测单核细胞表面TLR4和TLR2受体mRNA和蛋白的变化,及ELISA法检测单核细胞培养液肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-8(IL-8)细胞因子水平.统计学方法:对计量资料采用均数±标准差描述,采用t检验或Oneway ANOVA分析.结果 高通血液滤过较常规通量可显著下调单核细胞TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05).不同置换量血滤治疗处理后孵育的单核细胞,其TNF-α,IL-6,IL-8分泌水平各时相点呈现:常规通量组>高通量组>正常对照,P<0.05;ILR4和TLR2 mRNA各时相点表达上调水平.呈现:正常对照>高通量组>常规通量组,P<0.05;其TLR2和TLR4蛋白表达亦呈现mRNA相同趋势,筹异无统计学意义.结论 高通量血液滤过能改善脓毒症患者单核细胞功能,使部分细胞免疫功能得到恢复,对重建机体免疫内稳状态起一定作用.

  • 落新妇甙对缺血再灌注损伤肝脏HO-1表达的影响

    作者:慕宁;江艺;吕立志

    目的:通过观察落新妇甙对肝脏热缺血再灌注损伤中血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)表达的影响,探讨其缺血再灌注保护作用的分子机制.方法:C57BL/6小鼠随机分为4组(n=8):假手术组(Sham)、模型组(I/R)、落新妇甙小剂量(10 mg/kg)干预组和落新妇甙大剂量(40 mg/kg)干预组.缺血前24和lh干预组小鼠腹腔注射分别给予10或40 mg/kg的落新妇甙,建立肝左、中叶70%部分肝缺血再灌注模型,模型组和假手术组给予同样体积的生理盐水.小鼠肝脏左叶缺血90 min、再灌注6h后各实验组采集血液和肝脏组织样本.检测血清中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)活性,Western blot检测肝组织中核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)和HO-1蛋白含量,半定量RT-PCR检测上述分子mRNA表达情况.结果:落新妇甙小、大剂量干预后血清ALT含量较I/R对照组均明显下降(假手术组:142U/L±25 U/L;模型组:3521 U/L±270 U/L;落新妇甙小剂量干预组:1766 U/L±179 U/L;落新妇甙大剂量干预组:1067 U/L±101 U/L,P<0.01);落新妇甙小、大剂量干预组肝组织中NF-κB蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次降低;落新妇甙小、大剂量干预组肝组织中HO-1蛋白表达与I/R模型对照组比较均渐次升高,亦与半定量RT-PCR结果相符(假手术组:0.53 U/L±0.07 U/L;模型组:1.00 U/L±0.11 U/L;落新妇甙小剂量干预组:1.17 U/L±0.16 U/L;落新妇甙大剂量干预组:1.57 U/L±0.07 U/L小剂量干预组P<0.05;大剂量干预组P<0.01).结论:落新妇甙干预能降低缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)引起的血清ALT水平升高;落新妇甙干预能降低IRI肝组织中NF-κB蛋白的高表达,促进IRI肝组织HO-1蛋白和mRNA的表达,显示其保护作用与促进HO-1的表达密切相关.

  • 肾母细胞瘤过度表达基因对大鼠肝星状细胞生物学行为的影响

    作者:徐冬;林菊生;任精华;陈琼;姚津剑;何星星

    目的:构建能表达靶向肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)的小干扰RNA(siRNA)的重组质粒,研究NOV对大鼠肝星状细胞(HSC)活化、增殖、凋亡、分泌细胞外基质(ECM)的影响.方法:以NOV为目的基因,以质粒psiRNA-hH1neo为载体,构建能在真核细胞中表达的靶向NOV的siRNA的重组质粒psiRNA(psiRNA1,2,3)和阴性对照重组质粒pconsiRNA.限制性酶切和测序鉴定构建成功后,脂质体介导重组质粒转染HSC,依据转染质粒的不同将HSC分为psiRNA1组、psiRNA2组、psiRNA3组、阴性对照pconsiRNA组,并以未转染重组质粒的HSC为空白对照组.半定量RT-PCR检测HSC的NOV、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达情况,Western blot检测α-SMA蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡.结果:限制性酶切和测序鉴定表明成功构建了NOVsiRNA表达质粒;与阴性对照组相比,转染外源重组质粒psiRNA2的HSC内NOV、α-SMA的mRNA表达水平下降(73.0%vs 23.2%,51.4% vs 15.1%,均P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达水平明显下降(59.8% vs 17.0%,37.1% vs 6.6%,P<0.05),α-SMA蛋白表达水平下降.与空白对照组相比,转染外源重组质粒psiRNA2的HSC内HSC增殖活性显著降低(24 h:0.172±0.005 vs0.318±0.018,P<0.05;48 h:0.296±0.004 vs0.472±0.029,P<0.05;72 h:0.432±0.024 vs0.672±0.050,P<0.05).psiRNA1组、psiRNA3组的HSC内NOV mRNA、α-SMA、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达及HSC增殖活性均无明显下降(均P>0.05).结论:NOV可促进HSC增殖、活化及分泌细胞外基质,提示NOV可以作为肝纤维化基因治疗的一个新的靶位点.

  • 四株人结肠腺癌细胞CEA表达水平的检测及其意义

    作者:王立峰;刘宝瑞;钱晓萍;殷海涛;禹立霞;魏嘉

    目的:检测四株结肠癌细胞株中癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的表达,并探讨其意义.方法:四株人结肠腺癌细胞(LS174T,LoVo,SW480及HCT-8)分别应用ELISA法测定细胞培养上清中CEA含量;免疫组化检测细胞CEA蛋白表达;半定量RT-PCR检测细胞CEAmRNA表达丰度.结果:LS174T和SW480细胞在蛋白和mRNA水平均可检测到CEA的表达且前者表达量高于后者(细胞培养上清中CEA含量:1050±25.0ng/107 cells vs 66±5.6 ng/107 cells,P<0.0001;半定量检测CEA mRNA表达丰度:1.137±0.155 vs 0.399±0.135,P=0.003);而LoVo细胞在蛋白和和mRNA水平均未检测到CEA的表达;HCT-8细胞免疫组化有弱阳性染色.结论:四株结肠癌细胞株的实际CEA表达情况与既往文献报道不尽相同.这种细胞株CEA表达特性的改变有可能影响其体外生物学行为从而导致实验结果的不确定性.

  • VEGF反义寡核苷酸对胆囊癌细胞VEGF,Flt-1及KDRmRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响

    作者:李海军;庞作良;毛拉艾沙·买买提

    目的:体外研究Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)转染对人胆囊癌GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响.方法:运用Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(ASODN)和错义寡核苷酸(Scrambled Oligodeoxynucleotide,SODN)转染人胆囊癌细胞GBC-SD,半定量RT-PCR检测转染后各组细胞不同时间的VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达变化,ELISA测定转染后各组细胞培养上清液VEGF蛋白浓度.结果:半定量RT-PCR发现ASODN组及ASODN+Oligofectamine组24,48,72,96h VEGF (ASODN组VEGF165:0.686±0.033,0.569±0.049,0.489±0.036,0.716±0.017;ASODN组VEGF121:0.462±0.046,0.338±0.034,0.219±0.022,0.471±0.038;ASODN+Oligofectamine组VEGF165:0.601±0.021,0.465±0.042,0.416±0.023,0.662±0.035;ASODN+Oligofectamine组VEGF121:0.408±0.014,0.286±0.019,0.1 57±0.021,0.418±0.037)、Flt-1 (ASODN组:0.694±0.01 9,0.562±0.045,0.435±0.042,0.724±0.026;ASODN+Oligofectamine组:0.609±0.018,0.442±0.049,0.314±0.015,0.614±0.029)及KDR (ASODN组:0.667±0.063,0.490±0.033,0.301±0.029,0.665±0.068;ASODN+Oligofectamine组:0.523±0.048,0.432±0.027,0.21 8±0.036,0.524±0.037)mRNA的表达显著低于Contril组(P<0.05),且ASODN+Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P>0.05).ELISA测定结果显示ASODN组(281.26±1 8.62,526.44±34.95,791.1 3±20.99)及ASODN+Oligofectamine组(250.7±14.57,506.09±19.14,711.79±19.91)24,48,72 h VEGF蛋白的分泌浓度均显著低于Control组(394.23±1 6.26,711.6±26.21,933.85±28.65)(P<0.05),且ASODN+Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P>0.05).结论:Oligofectamine介导的VEGF ASODN能抑制GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌.

  • 宫颈鳞癌组织SLP-2表达临床意义初步研究

    作者:杨晓;刘玉玲;任景丽;赵莉莉;胡晓军

    目的:研究SLP-2在宫颈鳞癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系.方法:收集郑州大学第二附属医院经手术切除的组织42例宫颈鳞癌组织、43例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者的宫颈组织和48例正常宫颈组织,采用半定量RT-PCR技术检测SLP-2mRNA的表达情况,以上组织在病理科存档的石蜡切片采用免疫组化SP法检测SLP-2蛋白的表达情况.结果:PT-PCR法检测结果显示,与CIN及正常宫颈组织相比,SLP-2mRNA在宫颈鳞癌组织中的表达水平显著降低,F=3 979.485,P<0.01;免疫组化染色结果显示,SLP-2蛋白在正常宫颈组织中的表达率81.3%,CIN组织中的表达率为51.2%,宫颈鳞癌组织中的表达率(14.3%)明显低于CIN及正常宫颈组织,x2=40.197,P<0.01;SLP-2的低表达与宫颈鳞癌的组织分化程度相关(P=0.033),而与患者年龄、临床分期、淋巴结转移、肌层浸润深度及肿瘤大小无相关性,P值均>0.05.结论:SLP-2在宫颈鳞癌中低表达,SLP-2的低表达在宫颈鳞癌的发生发展中发挥重要的作用,可能与宫颈鳞癌的组织分化程度密切相关.

  • 脂多糖刺激树突状细胞前后TLR2、3、4基因表达的检测

    作者:董薇;张兵;蔡美英;魏大鹏

    目的检测脂多糖作用于树突状细胞前后TLR2、3、4基因的表达情况. 方法从外周血分离单核细胞,加入rhGM-CSF及rhIL-4,培养的第6天,实验组加入脂多糖刺激24 h,对照组不加.分别提取细胞总RNA,行半定量RT-PCR,产物进行琼脂糖凝胶电泳分析. 结果单核细胞经GM-CSF 及IL-4诱导7 d后的DC表达较高水平TLR2、3、4.脂多糖刺激24 h后,TLR2、3、4表达下降,TLR4几乎测不到.结论树突状细胞在受脂多糖刺激前后TLRs的表达有显著变化,推测和它的功能成熟有关.

  • 代谢综合征相关新基因MSRG实时荧光PCR检测方法的建立

    作者:陈瑾歆;方定志

    目的 建立测定MSRG mRNA表达量的实时荧光定量PCR检测方法,为新基因的功能研究奠定基础.方法 根据MSRG cDNA序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品,建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的灵敏性、特异性和重复性.荧光PCR检测不同浓度葡萄糖[5 6mmol/L(G5.6)、22mmol/L(G22)、33.3mmol/L(G33.3)]刺激人肝癌细胞株HepG2细胞MSRG的表达并与半定量RT-PCR方法进行比较.结果 建立了MSRG mRNA表达的实时荧光PCR检测方法.荧光PCR检测显示G33.3、G22和G5.6组HepG2细胞MSRG表达均有显著差异,半定量RT-PCR方法检测G33.3组MSRG表达显著增加,但不能检测出G22和G5.6组间有差异.结论 本实验建立的MSRG mRNA表达实时荧光PCR检测方法灵敏性、特异性和重复性较好,为MSRG功能的研究提供了一种重要手段.

  • 注射活血生肌类中药对大鼠骨骼肌急性钝挫伤后肌肉Ⅱb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

    作者:朱文辉;陈世益;任惠民;李云霞

    目的:观察活血生肌类中药对骨骼肌钝挫伤后修复过程中IIb型肌球蛋白重链(myosin heavy chain; MHC)及Ⅰ、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅰ和Collagen-Ⅲ)mRNA表达的影响.方法:采用打击装置造成126只大鼠后肢肌群钝挫伤,用半定量逆转录-聚合酶链式反应(semi-quantitative RT-PCR)分析mRNA的表达.结果:(1)急性钝挫伤后,各组大鼠骨骼肌IIb型MHC及Ⅰ、Ⅲ型胶原的mRNA表达量均显著增高(P<0.01).(2)修复过程中,注射活血生肌类中药治疗组大鼠IIb型MHC mRNA表达水平的升幅显著高于生理盐水对照组(P< 0.01),但低于注射IGF-I治疗组(P< 0.05).(3)修复过程中,注射活血生肌类中药治疗组大鼠Ⅰ型与Ⅲ型胶原mRNA的表达水平显著低于生理盐水对照组(P<0.01),与注射IGF-Ⅰ治疗组相比无显著差异(P< 0.05).结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,注射活血生肌类中药能有效地促进Ⅱb型MHC mRNA表达,减少Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,并促使Ⅰ型胶原mRNA水平迅速恢复到正常水平.

  • 经前期综合征肝气逆证模型大鼠海马γ-氨基丁酸A受体β2亚基mRNA表达

    作者:张惠云;王杰琼;刘恒

    目的 探讨大鼠海马γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)B2亚基mRNA表达的变化与经前期综合征肝气逆证的关系.方法 采用半定量RT-PCR基因扩增技术对正常组、经前期综合征肝气'逆证模型组和白香丹胶囊给药组大鼠海马中GABAA受体β2亚基的表达变化进行检测.结果 与正常组大鼠相比,模型组大鼠海马GABAA受体β2亚基mRNA表达显著升高(P<0.05),调肝方药白香丹胶囊干预能改变该受体表达水平异常升高的状态.结论 经前期综合征肝气逆证的发病机制与海马GABAA受体β2亚基有关.

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