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鼻NK/T细胞淋巴瘤中组织蛋白酶D和E-选择素的表达及意义
目的:探讨组织蛋白酶D(CD)和E-选择素(E-selectin)在鼻NK/T细胞淋巴瘤中的表达及意义.方法:采用免疫组化SP法检测41例鼻部非霍奇金恶性淋巴瘤CD45RO,CD3ε,CD20,CD79α,CD56和TIA-1的表达;EBER原位杂交法检测EB病毒感染情况,根据新WHO分类及诊断标准诊断鼻NK/T细胞淋巴瘤;对完全符合诊断标准的21例鼻NK/T细胞淋巴瘤和10例鼻咽增生淋巴组织活检标本,用免疫组化方法检测CD和E-选择素的表达.结果:鼻NK/T细胞淋巴瘤间质中组织细胞CD阳性信号的表达明显高于增生淋巴组织组(t=39.12,P=0.000);E-选择素表达于血管内皮细胞,鼻NK/T细胞淋巴瘤与鼻咽增生淋巴组织中E-选择素平均血管阳性率差异无统计学意义(t=0.688,P=0.497).结论:鼻NK/T细胞淋巴瘤间质中CD的表达明显增高,与该肿瘤高度侵袭性相关;E-选择素与鼻NK/T细胞淋巴瘤恶性生物学行为无直接相关性.
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宫颈癌组织及细胞中环氧合酶-2的表达及其意义
目的: 研究宫颈癌组织及细胞株中环氧合酶-2(COX-2)蛋白及基因表达情况. 方法: 用免疫组化方法检测29例宫颈癌患者COX-2的表达水平,并以14例慢性宫颈炎症患者和18例正常宫颈上皮为对照组;用免疫细胞化学方法和原位分子杂交法检测宫颈癌细胞株SiHa和HeLa中COX-2蛋白及基因表达. 结果: ①宫颈癌患者COX-2表达阳性率为75.9%,高于慢性宫颈炎症患者和正常宫颈上皮组(P<0.01);②COX-2在不同宫颈癌FIGO(国际妇产科联盟)分期、病理分级中的表达水平不同,但这一差异无统计学意义(P>0.05);③COX-2在宫颈鳞癌及腺癌中均有表达,但两者相比无显著性差异(P>0.05),在腺鳞癌中未见COX-2表达;④COX-2在宫颈癌细胞株SiHa和HeLa中均有阳性表达,两者表达强度无明显差异;⑤在宫颈癌细胞株SiHa和HeLa中均可见到COX-2 mRNA呈阳性表达. 结论: 宫颈癌中COX-2的表达水平明显上调,其表达与宫颈癌的发生发展有关.
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原位杂交检测Epo,VEGF基因在子宫内膜异位症组织中的表达
目的: 探讨细胞因子Epo, VEGF基因在子宫内膜异位症(EMs)组织中的表达情况及其与临床分型间的关系. 方法: 应用原位杂交方法,检测38例EMs组织及35例正常子宫内膜Epo, VEGF mRNA的组织定位和表达强度. 结果: Epo, VEGF mRNA均以腺体细胞胞质表达为主,细胞核少量阳性. EMs组织中Epo, VEGF mRNA表达增高明显(3.08±0.48,2.95±0.43),高于正常对照组子宫内膜(0.55±0.46,0.45±0.42)(P<0.001);EMs组Epo, VEGF mRNA在增殖期和分泌期表达无明显差异(P>0.05);EMs组Epo, VEGF mRNA表达有相关性(C＝0.733, P<0.001),且Epo mRNA表达随AFS分期增加而升高(P<0.01). 结论: Epo, VEGF mRNA过度表达、转录所引起的局部新生血管生成增强可能是子宫内膜异位症发生的机制之一.
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抑癌基因PTEN在子宫内膜异位症发生发展中的作用
目的:检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)在子宫内膜异位症(EMS)中的表达,探讨其在EMS发病机制中的作用. 方法: 收集EMS患者子宫内膜病灶37(卵巢巧克力囊肿20,子宫肌腺症17)例和正常子宫内膜33例,采用原位杂交技术检测PTEN mRNA在异位内膜组织中的定位和表达强度,并比较PTEN基因表达与EMS临床分型的关系. 结果: PTEN mRNA主要表达于腺体细胞的胞质中;与正常子宫内膜相比,PTEN基因在异位内膜组织中的表达显著降低(48.6% vs 93.9%, P=0.0002);PTEN mRNA的表达呈明显的周期性改变,在增殖期内膜呈低水平表达,分泌期表达增加,但这一差异仅在正常子宫内膜组织中有意义(P=0.0102);PTEN mRNA的表达水平随临床分期的增加而降低(P=0.0026);但在子宫肌腺症和卵巢巧克力囊肿组织中,PTEN基因表达水平无差异(55.0% vs 52.9%, P=0.4018). 结论: PTEN mRNA表达水平的降低可能是EMS的发病机制之一.
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整合素β1亚基表达与人脑胶质瘤侵袭与复发的关系
目的: 检测脑胶质瘤中整合素β1基因表达,阐明其临床意义. 方法: 应用免疫组化和原位杂交法,分析53例人脑胶质瘤整合素β1基因表达,对患者随访并比较其预后. 结果: 整合素β1蛋白阳性率,在I～IV级脑胶质瘤分别为36.3%, 38.5%, 72.2%和81.8%,高级别(Ⅲ～Ⅳ)高于低级别(Ⅰ～Ⅱ)(P＜0.05),其mRNA表达同蛋白表达. 高表达整合素β1的患者预后较差. 结论: 整合素β1的高表达与脑胶质瘤分化程度低、侵袭性强密切相关,是预测患者预后的较好标示物.
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脑膜瘤MMPs和TIMPs的表达意义
目的: 研究基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase, MMP-2, MMP-9)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂-1和金属蛋白酶组织抑制剂-2(tissue inhibitor of metalloproteinase, TIMP-1, TIMP-2)在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤脑浸润,病理性质的关系. 方法: 用原位杂交法检测45例脑膜瘤组织中MMP-2, MMP-9 mRNA的表达;用免疫组化检测MMP-2, MMP-9, TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达. 结果: 有脑浸润的脑膜瘤MMP-2, MMP-9的表达阳性率较无脑浸润的脑膜瘤明显增高(P<0.05);非典型性及恶性脑膜瘤较良性脑膜瘤高表达MMP-2, MMP-9 (P<0.05);TIMP-1, TIMP-2的表达在各肿瘤中差异无显著意义(P>0.05). 结论: MMP-2, MMP-9, TIMP-1和TIMP-2对脑膜瘤的脑浸润有重要影响.
关键词： 脑膜瘤 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂 免疫组化 原位杂交 -
皮肤鳞状细胞癌组织中HB-EGF的表达意义
目的: 探讨肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)在皮肤鳞状细胞癌中的作用机制.方法: 用原位杂交的方法检测正常组织、癌旁组织和鳞状细胞癌皮损组织中HB-EGF mRNA的表达.结果: 在正常皮肤组织中,HB-EGF表达于基底层(100.0%),基底上层仅有少量表达(12.5%);在癌旁组织中,HB-EGF不仅位于基底层(100.0%),且在基底上层也有表达(91.7%);在鳞状细胞癌皮损中,全层几乎无HB-EGF的表达(8.3%).结论: HB-EGF在鳞状细胞癌发病的早期阶段起关键作用,基底层中的HB-EGF对保持正常表皮形态有重要作用.
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人硒蛋白P cDNA探针的制备及其在肝脏组织中的表达
目的: 探讨SeP基因与肝脏疾病特别是肝癌发生发展的关系. 方法: 采用美国Georgia大学惠赠的质粒PBluescript-Human Selenoprotein P,用PCR法制备人SeP cDNA探针,检测了13例正常肝脏、20例肝硬化、30例肝癌组织中SeP mRNA的表达水平. 结果: PCR产物经电泳鉴定与预期相符. 3种肝脏组织的组织间质均有SeP mRNA表达,主要位于脉管区的血管内皮;正常肝细胞、肝硬化肝细胞及肝癌细胞中SeP mRNA阳性率分别为84.6%,50.0%,20.0%. 肝癌细胞阳性表达率明显低于其他两组(χ2=15.84, P<0.005; χ2=4.96, P<0.05). 正常肝细胞和肝硬化肝细胞的胞质及胞核内均出现蓝色的阳性颗粒,在胞核主要分布在核仁与核周;正常肝细胞的核阳性强于肝硬化肝细胞. HCC细胞阳性表达颗粒位于胞质,胞核几无表达. 结论: 人SeP cDNA探针制备成功,可用于人体组织SeP mRNA的原位检测. 肝癌细胞中存在SeP mRNA的表达缺失,SeP基因的缺失可能与肝癌的发生有关.
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乳腺癌组织nm23-H1和c-erbB-2基因表达与淋巴结转移的关系
目的研究nm23-H1, c-erbB-2基因表达与乳腺癌淋巴结转移的关系. 方法应用原位杂交技术检测正常乳腺组织30例,乳腺癌原发灶48例及转移淋巴结组织30例中nm23-H1 mRNA和c-erbB-2 mRNA. 结果 nm23-H1 mRNA失表达在有无淋巴结转移的原发肿瘤之间,组织学Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ分级之间,以及淋巴结转移灶与原发肿瘤之间的差异具有显著性(46.7% vs 16.7%; 20.0%,30.4% vs 53.3%, 63.3% vs 35.4%, P<0.05). c-erbB-2 mRNA阳性表达在有无淋巴结转移的原发肿瘤之间,ER阳性与阴性的乳腺癌之间,以及组织学Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ分级之间的差异具有显著性(70.0% vs 33.3%; 44.8% vs 73.7%; 30.0%, 56.5% vs 73.3%, P<0.05). c-erbB-2 mRNA在淋巴结转移灶与原发肿瘤组织之间的差异具有显著性(86.7% vs 56.2%, P<0.01). 结论肿瘤抑制基因nm23-H1和c-erbB-2癌基因在预测乳腺癌淋巴转移有着重要价值.
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肝细胞肝癌中尿型纤溶酶受体mRNA和c-erbB2的表达意义
目的探讨尿型纤溶酶受体(UPAR) mRNA和c-erbB2在肝细胞肝癌 (HCC)的表达与其病理学特性和肿瘤转移的关系. 方法采用原位杂交方法检测肝细胞肝癌中UPAR mRNA 表达,以免疫组化方法检测c-erbB2的表达. 结果 UPAR mRNA的表达阳性率为49.1%(27 /55), c-erbB2的表达阳性率为43.6%(24/55). 结论本结果表明 UPAR mRNA和c-erbB2 的表达可作为HCC的侵袭表型,可作为估计预后的指标,肝细胞肝癌中c-erbB2的表达与UPAR mRNA表达具有较高的相关性(r= 0.624).
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骨折愈合过程中BMP2和TGFβ1 mRNA的表达与凋亡的相关性
目的 探讨骨折愈合过程中骨形成蛋白2（BMP2），转化生长因子β1（TGFβ1） mRNA的表达与凋亡发生的相关性及意义.方法 建立颌骨骨折模型，利用原位杂交方法检测骨折愈合的不同时期BMP2和TGFβ1 mRNA的表达，同时采用TUNEL法检测细胞凋亡，并进行相关性分析.结果 ①骨折愈合早期（5～11 d）的间充质细胞、成骨细胞和软骨细胞内有BMP2 mRNA表达，而TGFβ1 mRNA主要在骨折愈合后期（11～14 d）的成骨细胞和软骨细胞内表达；②细胞凋亡在骨折愈合的5 d和11 d多，以间充质细胞和软骨细胞为主；③BMP2 mRNA的表达与凋亡具有正相关（r=0.887, P<0.01），TGFβ1 mRNA的表达与凋亡无相关性（r=0.51, P>0.05）.结论 骨折愈合过程伴随凋亡的发生，以控制细胞的数量和清除无用的细胞，BMP2可能直接参与了凋亡发生过程.
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地高辛素标记探针原位杂交技术检测肝硬变组织中TIMPs mRNA
[谢玉梅,聂青和,周永兴,程勇前,康文臻.世界华人消化杂志,2001;9(3):251-254]目的金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)具有抑制金属蛋白酶(MMPs)的作用,为了阐明T1MP-1和TIMP-2在肝硬变患者肝组织中的表达水平及分布状态,我们检测了肝硬变患者肝组织中的TIMP-1和TIMP-2,探讨TIMP-1和TIMP-2在肝硬变发病机制中的作用.方法以TIMP-1和TIMP-2 cDNA探针为试剂,采用原位杂交技术检测40例经肝组织病理学检查证实为结节性肝硬变患者肝组织中(其中男32例,女8例,平均年龄为50岁)TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达.结果 40例肝硬变患者肝组织中TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达的阳性率为100%,TIMP-1 mRNA的表达强阳性40例中有32例,占80%,中等阳性6例,占15%,弱阳性2例,占5%;TIMP-2 mRNA的表达强阳性40例中有22例,占55%,中等阳性16例,占40%,弱阳性2例,占5%;TIMP-1 mRNA阳性的肝组织中TIMP-2 mRNA亦为阳性,且TIMP-1 mRNA表达强度略高于TIMP-2 mRNA,而正常肝组织中未见阳性表达.TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达的阳性信号主要位于肝细胞胞质中,未见细胞核表达.结论肝硬变患者肝组织中的肝细胞中存在TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达,TIMP-1和TIMP-2可能与肝病的进展相关,它通过抑制MMPs的活性,使得ECM降解减少而导致肝纤维化,以至肝硬变. (潘伯荣)
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胃癌组织ezrin表达的意义
目的:研究ezrin基因与胃癌发生发展的关系.方法:采用原位杂交和免疫组化法,检测60例胃癌和15例正常及40例不典型增生胃黏膜中ezrin mRNA及蛋白的表达.结果:在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中ezrin mRNA及蛋白阳性表达率呈递减趋势.组间差异性均有统计学意义(P＜0.001);ezrin mRNA和蛋白表达在不同浸润深度、肿瘤大小和有无淋巴结转移组内表达率的差异性有统计学意义(P＜0.05),而在年龄、性别和脉管侵犯组内差异无统计学意义(P＞0.05).Ezrin mRNA和蛋白表达呈正相关(rs=0.990,P＜0.01).结论:Ezrin表达降低与胃癌的发生、发展及浸润转移有密切关系.
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食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1表达的意义
目的:探讨食管鳞癌组织中细胞周期素B1和D1(Cyclin B1, Cyclin D1) mRNA和蛋白的表达及其与食管鳞癌床生物学指标的关系. 方法:应用原位杂交法、免疫组化SP法对62例食管鳞癌组织(组织学Ⅰ级15例,Ⅱ级25例,Ⅲ级22例;有淋巴结转移20例,无淋巴结转移42例;肿瘤浸润深度:浸润至黏膜层、黏膜下层或浅肌层7例,深肌层14例,纤维膜41例)、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织进行Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的检测,分析其阳性表达与食管鳞癌患者临床病理因素的关系. 结果:Cyclin B1,D1的mRNA和蛋白在正常食管黏膜组织中不表达或低表达,在癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中高表达,三者阳性表达率比较差异有统计学意义(P<0.05);食管鳞癌患者癌组织中CyclinB1,D1的mRNA和蛋白的表达与性别、年龄无关;与组织学分级、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05). Cyclin B1,D1 mRNA与蛋白正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中的表达有高度的一致性. 结论:Cyclin B1,D1 mRNA和蛋白的高表达可促进食管鳞癌的发生与发展,在癌前病变期的鳞状上皮不典型增生组织中即出现高表达,是食管鳞癌发生过程中的早期事件.
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在小鼠着床前胚胎中c-myc的表达
目的: 观察小鼠着床前胚胎细胞中c-myc基因的表达, 了解其对早期胚胎发育可能影响的作用. 方法: 采用原位杂交及免疫组织化学ABC法,分别检测小鼠着床前胚胎细胞中c-myc mRNA及c-myc蛋白. 结果: 在小鼠2细胞、4细胞、6细胞、8细胞和囊胚期胚细胞中均检测到原癌基因c-myc转录产物的表达,c-myc mRNA分布于胚细胞的胞质和胞核. 免疫组织化学方法也发现,2细胞至囊胚期胚胎细胞的 c-myc蛋白均呈免疫反应阳性, 阳性物质分布于胞质和胞核中, 胚胎透明带则呈阴性反应. 结论: 小鼠早期胚胎有c-myc基因表达,c-myc基因对小鼠着床前胚胎发育可能起重要调节作用.
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大肠癌bcl-2基因蛋白及mRNA的表达
为了探讨大肠癌组织中bcl-2基因蛋白及mRNA的表达情况,应用免疫组织化学和原位杂交技术检测60例大肠癌组织中不同分化程度的bcl-2基因蛋白及mRNA的表达程度.结果显示,60例大肠癌bcl-2蛋白阳性表达率为90%,60例大肠癌bcl-2 mRNA阳性表达率为83.3%,两者的表达水平呈正相关(rs=0.999,P＜0.01),并均显示高分化组低于低分化组.提示大肠癌bcl-2基因高表达可抑制细胞凋亡,由此引起的细胞过度增殖在大肠癌的发生发展中起着重要作用.
关键词： 大肠癌 Bcl-2基因蛋白 Bcl-2 mRNA 免疫组化 原位杂交 -
Y-box结合蛋白-1在胃癌组织中的表达及意义
目的 研究Y-box结合蛋白-1(YB-1)在胃癌的不同发展阶段中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学和原位杂交方法检测正常胃组织、肠化生组织、早期胃癌和进展期胃癌组织中YB-1蛋白和mRNA的表达变化.结果 在正常胃组织中YB-1蛋白和mRNA无表达;在肠化生组织中可见YB-1阳性染色于胃黏膜上皮细胞中,但表达较弱;在早期胃癌中YB-1表达于全层胃黏膜上皮细胞中,染色较肠化生组织重,而在进展期胃癌中其表达较在早期胃癌中下降.结论 YB-1的升高可能在胃癌的早期发生和发展中起作用.
关键词： 胃癌 Y-box结合蛋白-1 免疫组织化学 原位杂交 -
Survivin在涎腺良性、交界性、恶性多形性腺瘤中的表达及意义
目的探讨Survivin在涎腺良性多形性腺瘤(PA)、交界性多形性腺瘤(RPA)、恶性多形性腺瘤(MPA)中的表达及其与肿瘤增殖活性的相关性.方法应用免疫组织化学方法及原位杂交技术检测14例涎腺PA、9例RPA、11例MPA以及9例癌旁腺组织中Survivin的表达.结果Survivin mRNA在涎腺PA、RPA、MPA中的表达与其蛋白表达相比均无显著性差异,而在癌旁腺体中的表达存在显著性差异(P＜0.05);在涎腺PA中Survivin mRNA及其蛋白的表达均明显低于RPA、MPA及癌旁组织(P＜0.01),而RPA与MPA中的表达无显著性差异;在MPA中高分化者与中低分化者的表达均有显著性差异(P＜0.05).结论Survivin基因的转录和扩增可能参与多形性腺瘤的发生、发展及恶变进程,并且在肿瘤发生的不同阶段有不同表达,有望成为涎腺肿瘤诊断和治疗的新靶点.
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原位杂交检测CD44v6和P16基因在食管癌组织中的表达
目的探讨CD44v6和P16基因表达与食管癌生物学行为的关系.方法应用催化信号放大原位杂交技术,对65例食管癌组织进行CD44v6 mRNA和P16 mRNA检测,结合肿瘤的病理生物学行为和临床随访资料分析.结果在食管癌组织中, CD44v6 mRNA和P16 mRNA的阳性表达率分别为61.5%和43.1%.CD44v6 mRNA高表达和P16 mRNA低表达与食管癌浸润、淋巴结转移和患者预后密切相关(P<0.05).食管癌中CD44v6表达与P16 mRNA表达呈负相关性(r=-0.39,P<0.005).结论 CD44v6和P16基因异常表达与食管癌的生物学行为密切相关,可作为预测食管癌转移潜能和评估食管癌预后的客观指标.
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表皮中HB-EGFmRNA的表达与银屑病发病的关系
目的探讨HB-EGF在进行期银屑病发病中的作用机制.方法用原位杂交的方法检测正常组织、进行期银屑病皮损和未受累表皮中HB-EGF mRNA的表达.结果在正常皮肤组织中,HB-EGF mRNA位于基底层(100%),基底上层几乎不表达;在未受累表皮和进行期银屑病皮损的周围部分,HB-EGFmRNA不仅表达于基底层,且以灶状高表达于基底上层(95.24%、85.71%);在进行期银屑病皮损的中央部分,全层均无HB-EGFmRNA的表达(0).结论 HB-EGF在银屑病发病的早期阶段起关键作用.纠正其异常表达可为银屑病治疗开辟新途径,提供新药物.
