华南地区汉族华法林药物基因CYP2C9、VKORC1基因多态性研究

目的 探讨华南地区汉族华法林药物基因CYP2C9、VKORC1的基因多态性分布情况.方法 收集2015年5月至2016年5月于广州市妇女儿童医疗中心就诊的华南地区汉族儿童1311例为研究对象,其中男855例、女456例,包括川崎病694例、非川崎病617例.收集外周静脉血进行CYP2C9*3 rs1057910、VKORC1 rs9923231、VKORC1 rs9934438基因PCR扩增和序列分析.分析性别与上述基因的基因型分布的关系;按疾病类型进行分组,分析疾病类型与上述基因的基因型和等位基因分布的关系.结果 纳入本研究华南地区汉族儿童1311例,基因检测显示CYP2C9*3 rs1057910基因中A等位基因频率为0.9607,基因型分布为AA型92.37%、AC型7.40%、CC型0.23%;VKORC1 rs9923231基因中T等位基因频率为0.8951,基因型分布为TT型80.32%、CT型18.38%、CC型1.30%;VKORC1 rs9934438基因中A等位基因频率为0.8970,基因型分布为AA型79.94%、AG型18.00%、GG型1.30%.按性别分组,上述基因的基因型分布组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05).按疾病类型分为川崎病组(n=694)和对照组(n=617),上述基因的基因型及等位基因分布组间比较差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 华南地区汉族儿童华法林药物基因CYP2C9*3 rs1057910以野生型为主,而VKORC1 rs9923231和rs9934438以变异型为主.

VKORC1及CYP2C9基因多态性对肥厚型心肌病合并房颤患者华法林稳定剂量和抗凝效果的影响

目的 研究维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORC1)基因和细胞色素P450 2C9(CYP2C9)基因的多态性、临床特征及其与肥厚型心肌病患者应用华法林稳定剂量、出血并发症及抗凝过度的相关性.方法 选取2011年1月至2016年12月辽宁省人民医院心血管内科收治的明确诊断为肥厚型心肌病(HCM)及房颤并规律口服华法林抗凝的患者60例,记录患者年龄、身高、体质量、华法林稳态剂量、是否曾出现抗凝过度及出血并发症等临床特征,采用荧光PCR-毛细管电泳测序法对VKORC1及CYP2C9基因进行检测,使用统计学方法对各基因型及临床特征与华法林稳定剂量、出血并发症及抗凝过度的相关性进行分析.结果 60例患者中,VKORC1-1639G>A检测有AA型50例、AG型9例、GG型1例,AA型华法林稳定剂量较AG型低,差异有统计学意义(P<0.05),携带A等位基因不增加出血及抗凝过度风险,差异无统计学意义(P>0.05);CYP2C9检测中*1/*1型51例,*1/*3型6例,*3/*3型3例,未检测到*2突变,携带*3突变者华法林稳定剂量较*1/*1型低,且所携带*3突变越多稳定剂量越低,差异有统计学意义(P<0.05),携带*3等位基因不增加出血及抗凝过度风险,差异无统计学意义(P>0.05).年龄≥65岁患者出血及抗凝过度发生率显著高于年龄<65岁患者,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HCM患者应用华法林稳定剂量与VKORC1和CYP2C9基因多态性有关,年龄可能是华法林出血并发症及抗凝过度的影响因素.

华法林基因检测及临床应用进展

华法林(warfarin)是香豆素类口服抗凝药,多用于人工瓣膜置换、静脉血栓形成(肺栓塞)、房颤等的口服抗凝治疗[1].华法林的结构与维生素K相似,可干扰肝脏合成凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ及Ⅹ,这些凝血因子的合成依赖维生素K,由于华法林能和维生素K竞争,使其不能再参与上述诸凝血因子的合成,从而产生抗凝血作用.

VKORC1和CYP2C9*3基因对华法林敏感性的相关研究

目的 探讨心房颤动(AF) VKORC1 (1639G＞A)及CYP2C9*3 (1075A＞C)不同基因型患者对华法林作用的敏感性.方法 连续选取在新疆维吾尔自治区人民医院住院期间行华法林基因检测的AF患者81例,采用微测序基因分析方法检测患者VKORC1及CYP2C9*3基因型,分析基因型对华法林的敏感性的影响.结果 VKORC1基因型检测:敏感型(AA)为67.9％,杂合子GA为28.4％,野生不敏感型GG为3.7％;CYP2C9*3基因型为91.36％,突变型基因(AC+CC)为8.64％.VKORC1敏感基因型AA及CYP2C9*3基因AC+CC型的华法林用量明显低于其他基因型(P＜0.05).结论 VKORC1 (1639G＞A)、CYP2C9*3 (1075A＞C)基因突变后所需华法林剂量下降,药物敏感度升高.

华法林维持剂量与不同民族VKORC1和CYP2C9基因多态相关性研究

华法林是临床常用药,但是其维持剂量个体之间和民族之间差异比较大.特别是在治疗初期,使用华法林行抗凝治疗的并发症较多.文中简要综述了细胞色素P4502C9基因多态性、维生素K环氧化物还原酶亚单位1(VKORC1)基因多态性对华法林维持剂量的影响,以及它们在不同民族的分布情况.初步提出民族因素是导致华法林维持剂量出现差异的决定因素.

VKORC1基因多态性对汉族静脉血栓栓塞患者服用华法林剂量的影响

目的探讨VKORC1 1173C>T和3730G>A基因多态性与静脉血栓栓塞患者服用华法林剂量的关系.方法应用扩增受阻突变体系聚合酶链式反应技术(ARMS-PCR)对205例华法林治疗达标患者(INR 2-3)的VKORCl的1173C>T和3730G>A位点进行基因分型.结果 205例患者中,在VKORC1 1173位点,CC型患者2例(1.0%),CT型25例(12.2%),TT型178例(86.8%);C等位基因频率7.1%,T等位基因频率92.9%.在VKORC1 3730位点,AA型2例(1.0%),CA型26例(12.7%),GG型177例(86.3%);G和A的基因频率分别为7.3%和92.7%.VKORC1 1173位点和3730位点存在着强烈连锁不平衡关系(D'=0.77,r2=0.58).VKORC1的基因型差异与华法林维持剂量相关,VKORC1 1173的CC、CT和TT型患者的华法林维持剂量分别为(8.13±0.88)mg·d-1、(5.33±2.03)mg·d-1和(3.86±1.52)mg·d-1.VKORC1 3070的AA、GA和GG型患者的华法林维持剂量分别为(8.13±0.88)mg·d-1、(5.48±2.05)mg·d-1和(3.83±1.49)mg·d-1.单因素方差分析的结果显示,VKORC1两位点基因型对华法林维持剂量具有显著相关性(P均小于0.0001).结论 VKORC1 1173和3730位点对VTE患者服用华法林剂量有明显的影响.

关于《VKORC1基因多态性对汉族静脉血栓栓塞患者服用华法林剂量的影响》的勘误

基于NONMEM法的华法林群体药动学/药效学模型研究

本研究旨在建立中国人华法林群体药动学/药效学(PPK/PD)模型.研究中收集接受华法林治疗的73例患者190个血样,PCR-RFLP法检测患者CYP2C9及VKORC1基因分型,RP-HPLC-UV法测定华法林血药浓度.结合临床资料及263个国际标准化比值(INR)监测值,应用NONMEM软件考察患者遗传、生理、病理因素及合并用药等对华法林清除率及抗凝指标的影响,建立了华法林PPK/PD终模型:CL=θCL·(WT/60)θWT·θCYP·eηCL;EC50=θEC50·θVKOR·eηEC50;V=θV;KE0=θKE0;Emax=θEmax;E0=θE0·eηE0.其中体重、CYP2C9及VKORC1基因分型是影响华法林药动学/药效学参数的主要因素.经拟合优度诊断、Bootstrap法、NPDE验证显示,模型稳定、有效,具有良好的拟合优度与预测能力.

CYP2C9和VKORC1-1639G＞A不同基因型组合与华法林平均日剂量相关性的Meta分析

目的:评价CYP2C9和VKORC1-1639G＞A不同基因型组合对华法林平均日剂量(mean daily warfarin dose,MDWD)的影响.方法:计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、万方数据库、PubMed(2007年1月-2013年7月),根据纳入标准对文献进行筛选和评估,采用RevMan 5.1软件及Stata 12.0软件对数据进行Meta分析.结果:共纳入包括998例患者在内的9篇研究,其中中文3篇,英文6篇.结果显示,与*1/*1 +AA组相比,*1/*1 +GG组、*1/*1 +GA组和*J/*3+GA组MDWD分别升高1.01 (95％ CI:0.38,1.65;P=0.002),0.41 (95％ CI:0.15,0.68;P=0.002)和0.06个标准单位(95％ CI:-0.06,0.18;P=0.31);*1/*3 +AA组和*3/*3 +AA组分别降低0.29(95％ CI:-0.45,-0.13;P=0.000 4)和0.38个标准单位(95％CI:-0.59,-0.17;P=0.000 3).敏感性分析表明,结果较为稳定可信.结论:本Meta分析得到CYP2C9和VKORC1-1639G＞A不同基因型组合对MDWD的影响的定量结果,该结果可对华法林个体化给药提供参考.

华法林药物基因组学研究及临床应用进展

华法林是临床上常用于治疗血栓性疾病的一种香豆素类口服抗凝药,具有抗凝和溶栓的双重作用.华法林血浆药物浓度和疗效存在明显的个体差异和种族差异,如何在临床安全、合理使用华法林长期以来是许多研究者关注的重点和难点.文中从药物基因组学角度阐述导致华法林维持剂量个体间差异的原因,综述CYP2C9和VKORC1等基因的遗传变异对华法林药物反应差异的影响,并介绍国内外基于药物基因组学研究结果结合临床数据构建华法林维持剂量模型的新临床应用进展,为个体化治疗提供了新的视角.

2例VKORC1与CYP2C9基因指导下的华法林起始剂量的选择

1 病例介绍病例1:患者,女,76岁,因摔倒后右肩部、腕部及髋部肿痛伴活动受限14小时于2009年12月15日入院,初步诊断为:右股骨粗隆间骨折、右肱骨近端骨折、右尺桡骨远端骨折,既往有冠心病、糖尿病、高血压病史10年.于12月18日行右股骨粗隆间骨折闭合复位内固定术,术程顺利,术后给予抗感染治疗并加强功能锻炼,恢复良好.

CYP2C9和VKORCl基因多态性对肺栓塞患者华法林维持剂量的影响

目的 研究细胞色素P450酶2C9(CYP2C9)及维生素K环氧化物还原酶复合体亚单位1(VKORCl)基因多态性对中国肺栓塞患者华法林维持剂量的影响.方法 对108例INR已稳定达标的中国肺栓塞患者,采用TaqMan MGB探针法,检测CYP2C9*2、*3位点和VKORCl-1639A＞G位点基因型.记录患者的年龄、性别、体重、身高及华法林日平均剂量.结果 VKORCl -1639AG或GG基因型患者华法林稳定日均剂量明显高于AA基因型患者(5.81±1.93vs 3.33±1.11mg,P ＜0.001)；CYP2C9*2或*3变异的患者华法林稳定日均剂量低于无变异的患者(2.57±1.31 vs 3.97±1.67mg,P＜0.001)；包括患者性别、年龄、身高、体重、CYP2C9和VKORC1基因型等因素在内的华法林稳定剂量预测模型可解释51.1％左右的华法林稳定剂量个体差异(R2=0.511,P＜0.001).结论 CYP2C9和VKORC1基因型检测对指导中国肺栓塞患者个体化应用华法林有一定的临床意义.

华法林常规剂量方案下抗凝效果和相关因素分析

目的：探求华法林常规剂量方案下抗凝效果及相关因素。方法纳入华法林3mg qd po用药且超过5天未调整用药患者，分析华法林抗凝效果，收集患者临床资料，收集患者血液样本并检测患者VKORCl和CYP2C9基因型，统计分析遗传因素和非遗传因素对华法林抗凝的作用与影响。结果52人（54.74%）凝血酶原时间国际标准化比值（INR值）低于1.8，22人（23.16%）3 mg方案下INR值大于2.5，仅有21人INR值落在1.8~2.5之间，达标率22.11%。分析遗传因素和非遗传因素对华法林稳定剂量的作用与影响，仅发现年龄因素与INR值相关。结论多数患者华法林常规剂量应用INR值未达标。未发现遗传因素在常规剂量患者中的影响，发现年龄与这类患者相关。

胺碘酮和CYP2C9、VKORC1基因型对华法林抗凝效果的影响分析

分析胺碘酮在不同的CYP2C9和VKO RC1分型患者对华法林的抗凝作用的影响.纳入从2008年9月至2009年11月某三甲医院应用华法林的入院患者,收集患者一般信息、合并用药及其他临床相关数据,检测患者VKORCI和CYP2C9基因型;比较使用或未使用胺碘酮治疗患者抗凝稳定期INR值及华法林用量,纳入基因分型进行华法林/胺碘酮相互作用的亚组分析.结果未发现胺碘酮应用患者华法林稳定期用量和INR值的统计学差异,基因型亚组差异无统计学意义.这说明院内短期合并使用胺碘酮患者对华法林稳定剂量和INR值无显著影响.

CYP2C9和VKORC1基因分型患者华法林/胺碘酮药物相互作用的横断面研究

目的 分析不同的CYP2C9和VKORC1分型患者胺碘酮对华法林的抗凝作用的影响.方法 纳入从2010年1月至2012年11月某三甲医院应用华法林的入院患者,收集患者一般信息、合并用药及其他临床相关数据,检测患者VKORC1和CYP2C9基因型;比较使用或未使用胺碘酮治疗患者抗凝稳定期INR值及华法林用量,纳入基因分型进行华法林/胺碘酮相互作用的亚组分析.结果 未发现胺碘酮应用患者华法林稳定期用量和INR值的统计学差义,基因型亚组差异无统计学意义.结论 院内短期合并使用胺碘酮患者对华法林稳定剂量和INR值未见显著影响.

中国汉族人群华法林药物基因组学剂量预测公式比较

目的 对目前已发表的7个华法林药物基因组学剂量预测公式在中国汉族人群中进行比较.方法 选择服用华法林的静脉血栓栓塞患者302例,经签署知情同意书后,抽取静脉血,用ARMS(扩增阻滞突变系统)方法检测华法林药物基因组:CYP2C9*3、VKORC1 c.-1639G＞A及VKORC1 c.1173C ＞T,采用拟合优度X2检验判断各基因型频率是否符合Hardy-Weinberg(哈迪·温伯格)平衡；并用Epidata13.0软件记录患者年龄、性别、体重等临床和遗传信息,按目前已发表的7个华法林药物基因组学剂量预测公式计算预测华法林稳定剂量,计算预测误差并对7组预测误差进行方差分析,统计学软件采用SPSS13.0,检验水准设定为0.05.计算预测剂量过高、过低和理想剂量所占百分数.结果 在7个华法林药物基因组学剂量预测公式中,Anderson的公式平均预测误差绝对值小,为0.112mg,理想预测剂量所占百分数高(72.5％).Miao的公式平均预测误差绝对值1.607 mg,理想预测剂量所占百分数11.6％.IWPC华法林预测公式及其他公式平均预测误差绝对值在0.161 ～0.795 mg之间,理想预测剂量所占百分数相似,在33.4％～43％之间.结论 本试验表明,在中国汉族人群中,Anderson的华法林药物基因组学剂量预测公式的平均预测误差绝对值小,理想预测剂量所占百分数高,但方程的决定系数偏低还有待进一步研究以发现其他影响预测华法林剂量的因素.

老年患者VKORC1和CYP2C9基因多态性对华法林应用的影响及分析

目的 探求遗传因素和非遗传因素对≥60岁老年人华法林应用的影响.方法 纳入≥60岁使用华法林的老年患者,收集患者血液样本并检测患者VKORCl和CYP2C9基因型,收集患者临床资料,统计分析遗传因素和非遗传因素对华法林稳定剂量的作用与影响.结果 VKORCl和CYP2C9基因型对华法林剂量有显著影响,VKORC1:1173C＞T,体重、AST(谷草转氨酶)、CYP2C9*34个变量可以解释23.2％的华法林稳定期用量的变异.结论 遗传因素在老年患者华法林作用影响巨大,VKORC1和CYP2C9基因多态性检测同样适用于老年患者的华法林个体化用药.

VKORC1-1639G＞A基因多态性对华法林出血并发症的影响

目的 采用回顾性队列研究方法,探讨VKORC1-1639G＞A基因多态性与心脏瓣膜置换术后接受华法林治疗的患者出血并发症的影响.方法 选择2011年1月～2013年8月在福建省立医院(下称“我院”)心血管外科行心脏瓣膜置换术的患者,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)-基因测序法检测患者的VKORC1-1639 G＞A的基因型.采用SPSS19.0统计软件评估该基因型与出血并发症之间的关系.结果 总共纳入196例患者,年龄(50.8±10.7)岁,男性80名,女性116名;平均累积随访(26.9±11.8)个月.在434人年中发生18例严重出血和59例轻度出血.VKORC1-1639 G＞A基因型,AA等位基因增加总出血的风险(HR 3.14;95％ CI:1.14～8.68),而没有增加轻度出血(HR 2.81;95％ CI:0.80～9.93)、严重出血(HR4.59;95％ CI:0.86～24.48)的风险.对于VKORC1-1639 G＞A基因型,Kaplan-Meier生存曲线显示,AA等位基因患者发生总出血事件所经过的时间比GG和GA等位基因患者显著缩短(Log-rank检验,P=0.03).结论 VKORC1-1639 G＞A纯合突变型携带者出血事件的风险增加.该基因可能是中国华法林抗凝治疗的患者出血并发症的主要遗传因素.

KKXX-motif对VKORC1亚细胞定位的影响

目的 研究细胞内质网蛋白贮留信号KKXX-motif,对维生素K环氧化物还原酶复合物亚基1(VKORC1)的亚细胞定位的作用.方法 利用点突变试剂盒构建VKORC1的KKXX突变体--VKORC1-SSXX;同时应用pEGFP载体构建VKORC1-SSXX和VKORC1-KKXX的绿色荧光融合蛋白表达质粒.瞬时转染HEK293s细胞,观察野生融合蛋白和突变融合蛋白的表达情况.结果 野生型融合蛋白荧光分布在胞浆内,而突变型融合蛋白聚集表达.结论 KKXX-motif影响了VKORC1的亚细胞定位.

CYP2C9和VKORC1基因多态性对华法林抗凝治疗的影响

自从1954年被批准以来,华法林已被广泛用作预防和治疗静脉血栓、与房颤相关的并发症及心脏瓣膜置换的处方用药[1].即使新的口服抗凝药物如利伐沙班、阿哌沙班、达比加群酯等显示抗凝作用不劣于华法林,但华法林仍然是常用的口服抗凝药[2-4].但华法林的治疗窗相当窄,达到抗凝治疗的剂量在不同种族和个体间差异较大,甚至可相差20倍[5,6].许多临床和环境因素包括年龄、性别、种族、体重、合并疾病和合并用药以及基因突变等影响华法林需要剂量[7].细胞色素氧化酶P450 2C9 (CYP2C9)和维生素K环氧化酶复合物亚单位1 (VKORC1)基因多态性成为近年来研究的重点.研究认为,CYP2C9和VKORC1基因多态性很大程度上与华法林剂量个体间差异相关,是对华法林起作用的抗凝药物重要决定因子,共同可解释华法林剂量全部个体差异的10％～45％[4,8].