血小板减少性紫癜血小板特异性抗体和促血小板生成素检测的临床意义

目的 探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者抗血小板膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ)特异性抗体表达和促血小板生成素(TPO)水平与血小板计数(PLT)之间的关系.方法 应用改良血小板抗原单克隆抗体固相化检测技术(MAIPA)、酶联免疫吸附法(ELISA)检测50例ITP患者和30名健康对照抗GPⅡb/Ⅲa、GPⅠb/Ⅸ特异性抗体及血清TPO水平,同时检测其PLT及骨髓巨核细胞数.结果 抗GPⅡb/Ⅲ a及GPⅠb/Ⅸ抗体吸光度(A值)均高于健康对照组(P<0.05);血清TPO较健康对照组升高,差异无统计学意义(P>0.05),相关分析表明ITP组血小板计数与两种特异性抗体水平呈负相关;ITP患者血清TPO水平与血小板计数、骨髓巨核细胞数无相关性(P>0.05).结论 血小板膜糖蛋白特异性抗体检测对确定ITP诊断有重要意义,血清TPO检测对探讨血小板生成的调节机制及辅助ITP的诊断有一定意义.

特发性血小板减少性紫癜再生障碍性贫血患者血小板生成素水平测定

血小板生成素(thrombopoietin,TPO)为调控巨核细胞造血和血小板生成的细胞因子,经研究发现其调节机制发生在转录后.为了探讨TPO在不同发病情况下的调节机制并为rh-TPO的临床应用提供理论依据,我们测定了特发性血小板减少性紫癜(ITP)、慢性再生障碍性贫血(CAA)患者血小板生成素水平,测定报告如下.

血小板生成素对巨核细胞及血小板生成影响的研究

巨核细胞血小板系统的生长发育是一个复杂的过程,与其他系统的造血细胞相比,巨核细胞血小板是一类比较特殊的细胞,在骨髓中所占比例很小,故对该系统的研究一直落后于其他造血细胞.随着分子生物学技术的发展,特别是1994年,一种特异作用于巨核细胞系的造血生长因子--血小板生成素(thrombopoietin,TPO)的成功克隆才使得该领域的研究有了飞速发展.本文就巨核细胞和血小板生长过程及TPO的调节作用概述如下.

大鼠WAP启动子指导人TPO在真核细胞中瞬时表达

目的 构建以大鼠WAP启动子调控的人血小板生成素(TPO)真核表达质粒并进行瞬时表达,探讨TPO基因组中不同内含子对TPO表达影响.方法 通过基因工程方法构建以大鼠WAP启动子调控的6种TPO真核表达质粒,并通过酶切和测序进行鉴定,将上述重组质粒分别在HC-11和COS-1细胞上转染48 h后,通过双抗体夹心ELISA定量分析转染上清中TPO表达.结果 酶切及测序分析表明构建与设计相符,6种重组质粒在COS-1细胞和HC-11细胞中均获得表达,其表达水平从高到低依次为pTPOWE＞ pTPOWA＞ pTPOWD＞ pTPOWB＞ pTPOWC＞ pTPOWF,其中含有TPO IntronV的重组质粒pTPOWE表达量高,而含有TPO全基因组的重组质粒pTPOWF表达量低.结论 IntronV可能含有特殊增强TPO表达序列,而TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达结构元件.

重组人血小板生成素(rhTPO)国际上被看好的基因工程蛋白药物

重组人血小板生成素(rhTPO)国际上被看好的基因工程蛋白药物

重组人血小板生成素（rhTPO)国际上被看好的基因工程蛋白药物

促血小板生成素及白介素-11测定对原发性血小板减少性紫癜及再生障碍性贫血诊断意义探讨

原发性血小板减少性紫癜(ITP)及再生障碍性贫血(AA)患者临床表现均可出现血小板减少,但两者的发病机制及治疗均不相同.促血小板生成素(TPO)及白介素(IL)-11均对血小板有调节作用,近年来国内外很多学者对血清中TPO水平有很多研究,但国内对血清中IL-11水平与血小板数量的关系研究较少.本研究采用ELISA方法检测ITP及AA患者血清中TPO及IL-11水平,了解其与血小板的关系及临床意义.现将结果报道如下.

血小板生成素和转化生长因子-β1与儿童特发性血小板减少性紫癜的相关性研究

目的研究特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿血小板生成调控因子的变化.方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测了2000年1月至2001年12月山东大学齐鲁医院儿科收治的45例急性ITP患儿治疗前后血清和骨髓上清液中血小板生成素(TPO)和转化生长因子-β1(TGF-β1)水平.结果 (1)ITP患儿治疗前血清TPO水平高于正常对照组,但差异无显著性;治疗前TGF-β1水平明显高于对照组(P<0.01).(2)经过激素治疗缓解后血清TPO水平较治疗前有所降低,但差异无显著性.治疗反应差者治疗前血清TPO水平较治疗反应好者显著升高(P<0.01),并高于对照组(P<0.01).缓解后血清TGF-β1水平与治疗前相比无明显下降(P>0.05).(3)治疗前骨髓上清液中TPO和TGF-β1水平均高于对照组(P<0.01),并明显高于同期血清水平(P<0.01),且和血清中的TPO和TGF-β1水平呈正相关.(4)ITP患儿血小板数目低时,TPO水平偏高;治疗后血小板数回升时,TPO水平有所降低,TPO水平与血小板数呈负相关(r=-0.649,P<0.05),同时和巨核细胞数也呈负相关(r=-0.519,P<0.05).结论血清、骨髓上清液中TPO、TGF-β1水平的检测可为ITP患儿的病情判断、估计预后、制定个体性治疗方案提供依据.

重组人血小板生成素治疗儿童免疫性血小板减少性紫癜临床观察

目的 观察重组人血小板生成素(rhTPO)治疗儿童免疫性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效.方法 2011年南京医科大学附属南京儿童医院血液肿瘤科收住院ITP患儿142例,常规给予激素治疗.在24例激素治疗无效患者中,16例(治疗组)采用rhTPO+小剂量激素(泼尼松5～10 mg/d)治疗,8例(对照组)在小剂量激素基础上分别采用注射用重组人白介素-11(3例)、大剂量激素冲击(2例)、CD20单克隆抗体(利妥昔单抗)(1例)、脾动脉栓塞(1例)、升血小板胶囊(1例).rhTPO采用300 U/kg,1次/d,连用14 d,或血小板计数＞50×109/L即停用,继续观察血小板数值1个月,同时观察出血情况.结果 男性、有前驱感染患儿对常规激素治疗反应更明显(P＜0.01),而是否有伴随症状、皮肤出血情况则无意义.rhTPO治疗组9例血小板＞50×109/L,对照组3例血小板＞50×109/L,但无统计学差异.与对照组比较,治疗组能显著改善出血倾向(P＜0.05).结论 对激素无效ITP患儿,rhTPO治疗能够显著改善出血症状,一定程度上提升血小板计数,但维持时间短.对于激素治疗无效的儿童ITP,尚须进一步寻找有效的治疗方法.

细胞因子在难治性血小板减少症治疗中的应用

免疫性血小板减少症(ITP)是一种自身免疫性出血性疾病,以血小板减少及皮肤黏膜出血为主要表现.ITP常规治疗包括免疫抑制剂、静脉丙种球蛋白及脾切除,而对于难治性ITP的治疗目前仍十分棘手.随着ITP发病机制的深入研究,出现了促血小板生成因子应用于ITP治疗的方法.现有研究发现一些细胞因子,如血小板生成素、白细胞介素11、α-干扰素等,可刺激巨核细胞的增殖、分化和血小板的生成,可用于难治性血小板减少症的治疗.

重组人血小板生成素在难治性血小板减少性紫癜中的应用

目的 评价重组人血小板生成素(rhTPO)对难治性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效和安全性.方法 将35例难治性ITP患者分为3组,试验1组(12例):应用rhTPO联合达那唑;试验2组(8例):单用rhTPO;对照组(15例):单用达那唑.结果 试验1组:用药前,血小板计数的中位数为6(1~15)×109/L;治疗后第14天,血小板为97(43~136)×109/L(P<0.01);停药后,血小板计数逐渐回落,至开始治疗后28 d,血小板计数降至48(22~76)×109/L.试验2组:用药前,血小板计数的中位数为6(2~13)×109/L;治疗后第14天,血小板为93(33~152)×109/L(P<0.01),第28天血小板计数降至32(12~44)×109/L.试验组近期有效率为80%,其中显效9例(45%),良效7例(35%).30%患者使用TPO达有效的平均时间为7 d,达峰值为13 d.对照组近期有效率为73%,其中显效6例(40%),良效5例(33.3%).第14天,试验组与对照组血小板计数比较,差异有统计学意义(P<0.01),第28天差异无统计学意义(P>0.05).结论 rhTPO治疗难治性ITP安全、有效,rhTPO联合达那唑比单用达那唑起效快,能更好地控制出血症状.

外源血小板生成素基因体内导入对循环免疫因子水平的影响

目的:研究外源TPO基因由质粒载体导入后,小鼠体内一些细胞因子的变化规律.方法:用脂质体将表达人TPO的真核表达质粒pcDNA3/hTPO包裹后,注射到Balb/c鼠的后肢肌肉内,用ELISA法检测小鼠血液中多种细胞因子的水平.结果:在TPO cDNA转移到体内后,血液中IFN-γ、TNF-α和IL-2迅速升高.其中,IFN-γ与血小板计数呈明显负相关,并且在血小板计数回落后,保持在对照水平的9～12倍;TNF-α仅在第1周内与之成正相关,但可达对照水平的120倍;IL-2升高幅度较小,与TPO水平相一致.血液中Ⅱ型组织相容性抗原分子也呈升高趋势,与IL-2的变化类似 ;而Ⅰ型分子与TNF-α的变化相似.结论:TPO在多方面刺激了机体免疫机能,而免疫因子如IFN-γ在血小板生成过程中起重要的调节作用.

血浆TPO水平变化与血小板减少疾病的关系

目的:探讨血浆血小板生成素(Thrombopoietin ,TPO)水平变化与血小板减少疾病的关系.方法:采用多抗夹心酶联免疫吸附法对68例各种不同原因致血小板减少患者通过应用白介素-11(rhIL-11)来动态检测TPO水平,rhIL-11剂量为25 μg/(kg·d), 皮下注射,连用10天.结果:(1)急性白血病(Acute leukemia, AL)化疗后血小板减少患者TPO水平低于正常对照组;再生障碍性贫血(Aplastic anemia, AA)及骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome, MDS)患者TPO水平高于正常对照组;原发性血小板减少性紫癜(Idiopathic thrombocytopenic purpura, ITP)及肝硬化(Liver cirrhosis)患者TPO水平与正常对照组无明显差异.而其中的白血病化疗后血小板减少患者和AA患者的骨髓巨核细胞数较TPO正常组显著降低.(2)上述疾病患者用rhIL-11有效者TPO水平趋于正常,无效或疗效欠佳者,则TPO无变化.有效者TPO水平与血小板计数呈负相关.结论:血浆TPO检测,有助于临床鉴别各种血小板减少疾病的病因,对血小板减少患者合理应用rhIL-11提供理论的依据.

免疫性血小板减少性紫癜的发病机制与临床研究进展

免疫性血小板减少性紫癜(Immune thrombocytopenic purpura,ITP)是自身抗体介导的血小板减少综合征,自身抗原的主要成分是血小板一种或多种糖蛋白;细胞免疫也是血小板破坏的一个重要原因.目前ITP的诊断仍是临床排除性诊断,分为原发性与继发性两种.ITP治疗的目的是使患者血小板计数提高到安全水平.肾上腺糖皮质激素仍是ITP的首选药物,静脉输注丙种球蛋白(IVIg)用于控制严重出血与重度血小板减少,脾切除仍是治疗慢性ITP的主要手段.血小板生成素(TPO)类似物可能成为新的治疗方法.对成人慢性ITP患者应常规进行幽门螺杆菌(Hp)筛查,阳性患者应根除Hp.

血小板生成素对血小板减少性疾病鉴别诊断及疗效判断的应用价值

目的：探讨血小板生成素（TPO）对血小板减少性疾病鉴别诊断及疗效判断的应用价值。方法采用夹心酶联免疫吸附法测定了117例血小板减少患者及35例健康对照者血清 TPO 水平并进行分组比较，血小板减少患者包括再生障碍性贫血（AA）44例（初治21例、治疗后23例）、骨髓增生异常综合征（MDS）14例、免疫性血小板减少症（ITP）37例（疗效明显组22例、疗效欠佳组15例）、急性白血病（AL）21例、未明确诊断1例。结果①各组血清TPO 水平的比较：AA 组、MDS 组、ITP 组、AL 组及正常对照组血清 TPO 水平分别为（1964．47±734．74）pg／ml 、（248．85±149．35）pg／ml、（316．43±206．67）pg／ml、（1436．37±949．25）pg／ml 和（316．01±164．21）pg／ml 。AA 组与 AL 组均明显高于正常对照组（P ＜0．05）；MDS 组、ITP 组与正常对照组比较差异无显著性（P ＞0．05）；AA组与 AL 组比较差异无显著性（P ＞0．05）；MDS 组与 ITP 组比较差异无显著性（P ＞0．05）；AA 组明显高于 MDS 组与ITP 组（P ＜0．05）；AL 组明显高于 MDS 组与 ITP 组（P ＜0．05）。②皮质激素疗效明显组 ITP 患者初诊时血清 TPO水平[（233．30±127．85）pg／ml]低于皮质激素疗效欠佳组[（447．06±241．90）pg／ml]，P ＜0．05。③AA 患者初治组血清 TPO 水平[（1979．67±748．41）pg／ml]与治疗有效组[（1954．55±742．44）pg／ml]比较无明显差异，P ＞0．05。结论检测血小板减少患者的血清 TPO 水平，有助于血小板减少性疾病的鉴别诊断；ITP 患者初诊时血清 TPO 水平与皮质激素疗效相关。

集落刺激因子测定及临床意义

集落刺激因子(CSFs)是一组体内外促进造血干/祖细胞增殖、分化为各种成熟血细胞的低分子量糖蛋白.主要有粒细胞集落刺激因子(G-CSF),粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF),单核细胞集落刺激因子(M-CSF/CSF-I),多系集落刺激因子(multi-CSF/IL-3),促红细胞生成素(EPO),干细胞因子(SCF),巨核细胞集落刺激因子(Meg-CSF),除上述集落刺激因子外,参与造血细胞的生长因子还有促血小板生成素(TPO)、IL-1、IL-2、IL-6、IL-7、IL-11等因子.

肝硬化患者血小板生成素测定

探讨血小板生成素水平改变在肝硬化患者的发生机制及临床意义.采用DIANA五分类血细胞计数仪测定33例肝硬化和25例对照组血小板计数(PLT),同时应用免疫放射分析法测定血小板生成素(Tpo)水平.虽然肝硬化血小板数量明显低于对照组(P<0.01),但Tpo水平不但不升高,反而下降呈正相关,但两者比较无差异(P>0.05).肝硬化患者因肝脏Tpo产生不足是导致血小板下降的重要原因之一.

慢加急性肝衰竭患者血小板计数及其动态变化的临床意义

目的 肝衰竭患者往往存在严重的血小板减少现象.对慢加急性肝衰竭(ACLF)患者血小板的动态变化进行监测分析,探讨血小板水平及其变化与患者预后的关系,并分析血小板减少的原因.方法 收集2014年9月-2016年9月于首都医科大学附属北京佑安医院住院的54例ACLF患者的临床资料.血小板由全自动血常规分析仪检测获得,促血小板生成素(TPO)水平采用ELISA方法检测获得.正态分布的计量资料2组间比较采用t检验;非正态分布的计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验;计数资料组间比较采用x2检验.预后相关参数采用单因素及多因素logistic回归分析;应用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血小板计数变化对肝衰竭的诊断价值.结果 ACLF患者出院时死亡18例,病死率为33.3％.ACLF患者基线血小板为80.0(36.0 ～334.0)×109/L,较正常值明显下降.出院前血小板下降幅度在死亡组显著大于存活组[(-43.4士58.9)×109/Lvs(-11.5±29.1)×109/L,t=-2.827,P=0.041].以血小板变化-27.5×109/L为cut-off值,血小板变化＞-27.5×109/L和≤-27.5×109/L组病死率比较,差异有统计学意义(22.2％ vs 72.2％,x2=12.623,P＜0.01).单因素分析表明:血小板变化、PTA、Glu为患者预后的影响因素.多因素分析表明血小板变化为ACLF患者预后的独立影响因素,ROC曲线下面积为0.743.其中24例ACLF患者检测了血浆TPO水平,出院时死亡8例,病死率为33.3％.ACLF存活组与死亡组TPO水平分别为(91.8 ±39.8)pg/ml和(93.3±46.5) pg/ml,2组比较差异无统计学意义(t=O,P=0.938).结论 ACLF患者基线血小板显著低于正常血小板的范围,血小板下降幅度是ACLF患者出院时死亡的独立影响因素,血小板减少与TPO水平下降无关.

FL,TPO对人脐带血CD34+细胞体外增殖的影响

[目的]研究Flt-3配体(FL)及血小板生成素(TPO)在无血清培养体系中对人脐带血CD 34+细胞体外增殖的影响.[方法]采用无血清液体培养法,分别用FL,TPO,FL加TPO作用于体外短期培养脐带血CD34+细胞,利用其计数及集落分析方法评价增殖效果.[结果]分别用FL,TPO,FL加TPO刺激增殖后,人脐带血细胞总数分别增加2.50,5.00,10.10倍,FL加TPO组细胞总数明显高于FL,TPO组;CD 34+细胞分别增殖0.90,1.26,1.61倍;集落总数分别增加2.07,2.27,7.37倍,造血祖细胞CFU-GM产率分别提高3.53,2.40,9.95倍,FL加TPO组产率高于其他组,BFU-E产率分别提高1.45,2.25.6.90倍.[结论]在短期无血清液体培养体系中,FL,TPO对人脐带血CD 34+细胞均具有增殖作用,且两者具有协同作用.