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姜黄素和苏拉明抑制兔RPE细胞增生的对比研究
目的 对比研究姜黄素和苏拉明对兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的抑制作用.以苏拉明为对照药,探讨姜黄素防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的潜在价值.方法 MTT法检测不同质量浓度姜黄素和苏拉明在各时间段对体外培养的RPE细胞增生的抑制率.相关回归分析计算两种药物各时间段的半数抑制率(IC50)剂量.流式细胞仪检测姜黄素和苏拉明对RPE细胞周期及细胞凋亡的影响,并且检测姜黄素作用不同时间后RPE细胞的凋亡率.结果 姜黄素和苏拉明对RPE细胞均有明显的抑制作用,呈时间和质量浓度依赖性.姜黄素在24、48、72及96h的IC50均明显低于苏拉明.姜黄素使RPE细胞阻滞在G0/G1期,早于苏拉明的G2/M期.姜黄素可以诱导RPE细胞凋亡,苏拉明则不能.姜黄素15μg/mL作用24、48及72h后,RPE细胞的凋亡率分别为(12.83±0.13)%、(32.27±4.51)%、(56.81±8.67)%.结论 姜黄素通过诱导RPE细胞凋亡而有效抑制其增生,比苏拉明药效强且起效快,有望成为防治PVR的理想天然药物.
关键词： 姜黄素 苏拉明 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜色素上皮细胞 -
曲安奈德对培养人视网膜色素上皮细胞表达survivin的影响
目的 观察曲安奈德(TA)对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞表达survivin基因的影响,探讨TA治疗增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的机制.方法 四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法和流式细胞术检测不同质量浓度(0.01、0.1、1.0 g/L)TA对人RPE细胞增生及凋亡的作用,免疫组织化学法、RT-PCR检测药物在蛋白和基因水平对survivin表达的影响. 结果 在不同质量浓度的TA作用下,人RPE细胞的增生受到抑制,凋亡率增加,在蛋白水平和基因水平,药物均对RPE细胞survivin的表达有明显的抑制作用,且均与药物的作用时间和剂量呈正相关.各组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 TA能抑制人RPE细胞的增生及survivin蛋白和mRNA在人RPE细胞的表达,诱导RPE细胞的凋亡.
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玻璃体切割术后视网膜前膜中Ⅱ、Ⅳ型胶原及CD8 T淋巴细胞检测
目的 探讨玻璃体切割术后视网膜前膜的发病机制.方法 采集裂孔源性视网膜脱离玻璃体切割术后因增生性玻璃体视网膜病变(PVR)再次行剥膜术的所有视网膜前膜标本35例,分黄斑前膜组与周边前膜组.用免疫组织化学方法检测35例视网膜前膜中CD8 T淋巴细胞及Ⅱ型、Ⅳ型胶原的表达,比较两组间3个指标的阳性率.结果 黄斑前膜组中13例Ⅱ型胶原阳性表达(86.67%),5例Ⅳ型胶原阳性表达(33.33%),11例CD8 T淋巴细胞阳性表达(73.33%);周边前膜组中,17例Ⅱ型胶原阳性表达(85%),1例Ⅳ型胶原阳性表达(0.05%),18例CD8 T淋巴细胞阳性表达(90%).结论 孔源性视网膜脱离玻璃体切割术后视网膜前膜发生与玻璃体视网膜界面有关.CD8 T淋巴细胞在这种视网膜前膜发生中起一定作用.
关键词： 孔源性视网膜脱离 玻璃体切割术 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜前膜 免疫组织化学 -
环孢素A壳聚糖纳米微粒防治增生性玻璃体视网膜病变
目的 评价环孢素A(CsA)壳聚糖纳米微粒抑制增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的有效性和安全性.方法 20只健康中华大耳白兔制作的PVR动物模型随机分为4组:A组玻璃体腔内注入0.1 mL平衡液,B组玻璃体腔内注入0.1 mL壳聚糖溶液(含壳聚糖2 mg),C组玻璃体腔内注入0.1 mL CsA溶液(含CsA 0.1 mg),D组玻璃体腔内注入0.1 mL CsA壳聚糖纳米粒(含CsA 0.1 mg).以检眼镜、电生理、光镜和电镜观察视网膜变化情况.结果 玻璃体腔注药2周及4周后D组PVR等级均明显较A、B、C三组轻,组间差异具有统计学意义(P＜0.05);而A组与B组、B组与C组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).D组注药前与注药后4周暗适应闪光ERG b波振幅的差异无统计学意义(P＞0.05);D组注药后视网膜组织病理及超微结构未发现明显异常.结论 一次性兔眼玻璃体腔注入GsA壳聚糖纳米微粒(含CsA 0.1 mg)能明显抑制或延缓PVR的发生,并具有生物相容性及安全性.
关键词： 壳聚糖 纳米微粒 环孢素A 增生性玻璃体视网膜病变 -
PDGF抗体和VEGF抗体预防增生性玻璃体视网膜病变
目的 评价血小板源性生长因子(PDGF)抗体和血管内皮生长因子(VEGF)抗体对实验性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的预防作用.方法 将兔制成PVR模型,将一定浓度的PDGF抗体、VEGF抗体及BSS液分别在当时及第7 d注入兔眼的玻璃体腔,每日观察兔眼情况,处死兔子做眼病理切片及免疫组织化学染色.结果 间接检眼镜观察可见对照组与实验组均出现视网膜脱离.玻璃体腔内注药后第21 d、28 d PVR分级实验组与对照组差异有统计学意义(P＜0.05),在制作动物模型时直接注入和第7 d时注入差异无统计学意义(P＞0.05).病理检查所见与间接检眼镜所见相符.免疫组织化学染色计算阳性细胞百分率,亦得出相同结果.结论 玻璃体腔内注入PDGF抗体、VEGF抗体均可预防PVR的进展,注药时间对于PVR的发展无明显影响.
关键词： 血小板源性生长因子 血管内皮生长因子 增生性玻璃体视网膜病变 -
地塞米松和维甲酸缓释系统预防增生性玻璃体视网膜病变的实验研究
目的 研究地塞米松缓释系统(DexDDS)和维甲酸缓释系统(RADDS)预防增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的效果和安全性.方法 60只兔随机分为7组,A～E组建立PVR模型,A、B组为对照组,C、D、E组分别植入DexDDS、RADDS、DexDDS+RADDS,观察术眼前后段变化;F、G组植入DexDDS或RADDS,观察药物的毒性作用;检测各组玻璃体中Dex和RA的质量浓度变化.结果 A、B组术眼术后前后段反应重,E组反应轻,C、D组为中度反应.F、G组未见毒性作用;DexDDS在植入后1周即达到较高质量浓度并持续到6周,而RADDS在植入后6周质量浓度达到高峰并持续到8周.结论 DexDDS和RADDS玻璃体腔内植入安全,联合应用可以有效地抑制PVR.
关键词： 地塞米松 维甲酸 药物缓释系统 增生性玻璃体视网膜病变 -
GM6001预防dispase诱导的兔眼增生性玻璃体视网膜病变
目的评价金属蛋白酶抑制剂GM6001对dispase诱导的兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的预防作用.方法健康成年的青紫蓝兔20只,采用dispase诱导的PVR动物模型,右眼玻璃体腔注射100μmol/L GM6001 0.05 ml,左眼注射PBS作为对照,共观察6周.采用PVR分级评分进行临床观察,流式细胞学方法检测玻璃体细胞增生,免疫组织化学方法标记抗增生核抗原(PCNA),判断视网膜细胞增生状况.结果GM6001组与对照组的PVR分级评分分别是1.19和2.54,差异有显著统计学意义(P＜0.05);GM6001组的玻璃体增生细胞数低于对照组(P＜0.05);GM6001组PCNA阳性率低于对照组(P＜0.05).结论GM6001玻璃体腔注射能抑制和延缓实验性PVR的发生.
关键词： GM6001 金属蛋白酶抑制剂 增生性玻璃体视网膜病变 -
实验性视网膜脱离模型中视网膜色素上皮细胞黏附分子的表达
目的观察大鼠视网膜脱离及复位状态下视网膜色素上皮(RPE)细胞黏附分子的表达变化,探讨其与增生性玻璃体视网膜病变(PVR)发生的关系.方法通过视网膜下注射透明质酸钠的方法制造视网膜脱离的动物模型.在不同的时间点摘除眼球,制作冰冻切片,进行免疫组织化学及免疫荧光染色,比较RPE细胞上几种黏附分子,包括神经钙粘素、上皮钙粘素、整合素α5、整合素β1,以及纤维连接蛋白(FN)在正常视网膜、脱离的视网膜、复位的视网膜中的表达情况.结果几种黏附分子在脱离区的RPE细胞上的表达均明显高于正常视网膜以及脱离后复位的视网膜.结论视网膜脱离会导致RPE细胞上几种重要的黏附分子的表达增加,视网膜复位可逆转此种变化.视网膜脱离可能是PVR发生的始动因素.
关键词： 视网膜脱离模型 黏附分子 增生性玻璃体视网膜病变 -
增生性玻璃体视网膜病变后的玻璃体后膜裂孔组织学改变
目的研究视网膜脱离伴有增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的后膜裂孔组织学变化.方法3例孔源性视网膜脱离伴有PVR患者进行玻璃体手术同时获得后膜裂孔,应用免疫电镜和光镜技术对3个标本进行超微结构和细胞外基质蛋白、细胞中间丝蛋白标记观察.结果后膜裂孔膜组织有中等量细胞分布和丰富的胶原纤维.细胞主要有两种类型:含有色素颗粒的上皮样细胞和有明显微丝结构的梭形或肾形细胞,分散分布;Ⅰ和Ⅲ型胶原标记阳性.免疫组织化学光镜观察发现波形蛋白阳性标记强,胶质原纤维酸性蛋白次之,细胞角质蛋白阳性标记较弱,而抗S-100、神经元特异性烯醇化酶以及巨噬细胞抗体标记偶有阳性标记细胞.结论研究提示视网膜脱离伴有PVR的后膜裂孔组织成分发生变化,除神经胶质细胞外,还有其他细胞参与,包括视网膜色素上皮细胞、成纤维样细胞,胶原类型也发生改变,后膜裂孔组织学上的变化与在玻璃体、视网膜表面形成的PVR膜一致.
关键词： 视网膜脱离 增生性玻璃体视网膜病变 Weiss环 组织病理学 -
外伤眼迁移视网膜色素上皮细胞增生活性的观察
目的观察外伤眼经玻璃体切割手术获取的增生组织内迁移视网膜色素上皮(RPE)细胞增生活性随伤后不同时间、不同外伤类型变化的特点.方法利用细胞增生标志物Ki-67和PCNA的单克隆抗体对22例外伤眼增生标本进行免疫组织化学染色.结果伤后迁移RPE细胞增生活性迅速升高,1.5个月前后分组比较,Ki-67表达率(LI)分别为38.27%和10.82%(P=0.0000);PCNA LI分别为32.91%和18.09%(P=0.0273).病程延长和增生性玻璃体视网膜病变(PVR)加重,RPE细胞增生活性逐渐下降.1.5个月以内手术11例全部为开放伤合并视网膜脱离(RD),Ki-67 LI为38.27%,6例无RD病例Ki-67 LI为18%,(P=0.0031).结论眼外伤后迁移RPE细胞增生活性迅速升高,合并RD是发生PVR的重要危险因素.早期实施玻璃体切割手术将有效地清除异常增生的RPE细胞,减少合并症的产生.
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结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达
目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源.方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源.结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞.17例C2～C3级膜中12例阳性,26例D1～D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%.统计学分析CTGF阳性表达与膜分级间无相关性(P＞0.1).免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF.结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展.
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维甲酸纳米粒混悬剂预防实验性增生性玻璃体视网膜病变
目的探讨维甲酸纳米粒混悬剂对兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的预防作用.方法新西兰白兔20只(40眼),随机分为2组:对照组、用药组各20眼.行气体压迫玻璃体手术3 d后,所有兔眼玻璃体腔内注入2×105个成纤维细胞,再分别注入BSS平衡盐溶液或17.894 mg/L的维甲酸纳米粒混悬剂0.2 mL.以间接检眼镜观察玻璃体混浊情况,4周后剖开眼球观察视网膜脱离发生情况.结果在术后1、4、7、14、21、28 d,对照组分别有12、14、14、16、20、20眼发生了玻璃体增殖;用药组分别有9、10、10、11、12、13眼发生了玻璃体增殖,有统计学意义(P＜0.05).第28 d病理检查对照组20眼中18眼(90%)发生了视网膜脱离,用药组20眼中4眼(20%)发生了视网膜脱离,具有统计学意义(P＜0.01).结论维甲酸纳米粒混悬剂能有效地预防增生性玻璃体视网膜病变的发生.
关键词： 维甲酸 纳米混悬剂 增生性玻璃体视网膜病变 -
增生性玻璃体视网膜病变增殖膜的免疫组织化学及细胞凋亡研究
目的检测增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增殖膜标本中细胞Fas、Fas配体(Fas ligand,FasL)的表达和凋亡,并探讨Fas/FasL与凋亡的关系.方法通过免疫组织化学的方法检测12例增殖膜标本Fas和FasL的表达,TUNEL技术检测凋亡细胞.结果PVR增殖膜标本中Fas和FasL阳性细胞百分率分别为60.6%和43.75%,偶见两者同时表达的细胞.5例前膜和2例下膜标本可见TUNEL染色阳性细胞核.凋亡与Fas、FasL相关系数均为0.77(t=3.82,P＜0.05),PVR病程与凋亡的r值为0.74(t=3.11,P＜0.01).结论Fas、FasL高表达与凋亡的正相关性提示,通过Fas/FasL系统诱导增殖细胞及炎症细胞凋亡,可能成为临床防治PVR的新策略.
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Bak和bcl-xl在增生性玻璃体视网膜病变玻璃体内细胞和视网膜前膜中的表达
目的观察增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体内和视网膜前膜(ERM)中细胞凋亡、bak和bcl-xl基因表达、以及细胞凋亡和基因表达之间的关系.方法对12例PVR B级玻璃体切割液离心收集物,18例C级以上PVR的ERM进行研究,末端标记(TUNEL)染色法检测凋亡细胞,免疫组织化学染色法检测bak和bcl-xl基因的表达.结果B级玻璃体切割液标本中bak和bcl-xl阳性细胞百分数分别为73.0%和65.1%,TUNEL阳性细胞百分率平均为27.2%.C级以上PVR的ERM标本中bak和bcl.xl的阳性细胞比例分别为61.4%和77.0%,TUNEL阳性细胞百分率平均为18.6%.PVR B级的凋亡细胞百分数及bak的表达与C级以上标本之间相差明显(P,<0.05,P<0.01),而bcl-xl的表达在两者间没有差别(P>0.05).凋亡细胞bak表达与凋亡细胞百分数相关系数r值为0.86(P<0.01),与bcl-xl的r值为0.32(P>0.05).结论PVR眼增殖细胞中可见bak和bcl-xl的表达和细胞凋亡的存在.Bak的高表达可能与PVR中增生细胞凋亡有关.
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 色素上皮/眼 凋亡 Bak Bcl-xl -
IL-6对培养PVR的视网膜色素上皮细胞生长的影响及地塞米松的调节作用
目的探讨白细胞介素-6(IL-6)对增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的视网膜色素上皮(RPE)细胞体外生长的影响,以及地塞米松对这种增生的调节作用.方法将地塞米松加入体积比为10%PVR的玻璃体切割物培养的RPE细胞培养板中,放射免疫学方法检测IL-6的分泌;将IL-6、PVR的玻璃体切割物和RPE细胞共同培养,测定掺入的3H-TdR和3H-proline的cpm值;用不同浓度的地塞米松、PVR玻璃体切割物和RPE细胞共同培养,测定掺入的3H-TdR和3H-proline的cpm的值.结果加入地塞米松培养PVR的RPE细胞合成IL-6的量减少;IL-6和PVR的RPE细胞共同孵育后,细胞增殖明显,胶原合成增强;地塞米松抑制培养PVR的RPE细胞增殖和胶原合成,且随浓度的增加,抑制作用增强.结论IL-6促进PVR培养的RPE细胞增殖和胶原的合成,地塞米松抑制RPE细胞增殖和胶原合成,一定程度是通过抑制IL-6合成而发挥作用.
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜色素上皮细胞 地塞米松 白细胞介素-6 -
基质金属蛋白酶在孔源性视网膜脱离视网膜下液的定量研究
目的研究孔源性视网膜脱离(RRD)视网膜下液(SRF)基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,探讨MMPs与增生性玻璃体视网膜病变(PVR)的关系.方法采用明胶酶谱分析法定量检测88例RRD患者的SRF MMP-2和MMP-9的活性水平,PVR A组21例,PVR B组37例,PVR C组30例,其中包括伴有脉络膜脱离RRD 8例,术后随访PVR复发11例.结果88例RRD患者的SRF均有MMP-2活性水平升高,33例有MMP-9的表达,8例RRD伴有脉络膜脱离,有6例(75%)MMP-9活性水平升高,术后PVR复发11例SRF均有MMP-9活性水平升高.结论RRD患者的SRF有MMP-2和MMP-9的表达,MMP-9活性水平升高可能与PVR的发生有关,可能成为预测术后PVR复发的指标之一.
关键词： 基质金属蛋白酶 孔源性视网膜脱离 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜下液 -
实验性外伤增生性玻璃体视网膜病变玻璃体中细胞增殖的检测及意义
目的研究实验性眼后节穿通伤增生性玻璃体视网膜病变(PVR)玻璃体中细胞增殖情况及意义.方法 32只青紫蓝兔组制备外伤性PVR模型后随机分为四组,在伤后第3、7、14、21 d各抽取0.3 ml玻璃体进行细胞计数并用流式细胞仪(FCM)计算出增殖细胞比例.定期观察眼底情况并选择照相.结果在伤后第3、7、14、21 d玻璃体内细胞增殖指数分别为4.82%、13.21%、18.21%、31.48%;增殖细胞密度分别为2.862×103/ml、8.725×103/ml、12.249×103/ml、18.823×103/ml.伤后7 d内无明显的牵引性视网膜脱离(TRD)出现,在第35 d,TRD的发生率为81.3%(26/32).第7 d的增殖细胞数可以预测第35 d的TRD发生情况.结论 FCM分析玻璃体内增殖细胞数量可用来早期筛选高危PVR,反映PVR的预后.
关键词： 外伤性 增生性玻璃体视网膜病变 细胞增殖指数 流式细胞仪 -
维生素E对IL-6作用的视网膜色素上皮细胞增生及胶原合成的影响
目的探讨白细胞介素-6(IL-6)对视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及胶原合成的作用,以及维生素E对这种作用的影响.方法采用放射自显影的方法测定RPE细胞增生和胶原合成.用含IL-6和不同浓度维生素E的EMDM培养基培养RPE细胞,加入氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)和氚标记的脯氨酸(3H-proline),测定每分钟闪烁值cpm,反映3H-TdR和3H-proline的掺入量,即RPE细胞增殖和胶原合成情况.结果IL-6与RPE细胞共同孵育后,3H-TdR和3H-proline的掺入量较单纯RPE细胞培养组明显升高,提示IL-6促进RPE细胞增生明显,胶原合成显著增加;不同浓度的维生素E和IL-6共同培养的RPE细胞3H-TdR和3H-proline的掺入量较单纯IL-6培养的RPE细胞组明显降低.且维生素E浓度越高,3H-TdR和3H-proline的掺入量越低,提示维生素E抑制IL-6引起的RPE细胞的增生和胶原合成,且抑制作用随浓度的增加而增加.结论IL-6对RPE细胞的增生和胶原合成有促进作用,维生素E抑制IL-6引起的RPE细胞的增生和胶原合成,抑制作用与维生素E浓度成正比.
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜色素上皮细胞 白介素-6 -
内皮素-1在裂孔性视网膜脱离玻璃体液中的含量测定
目的检测内皮素-1(ET-1)在裂孔性视网膜脱离(RRD)不同病期玻璃体液中的水平.方法20例RRD患者采取血液和玻璃体液,玻璃体液分为视网膜下液(PVR A/B级),玻璃体液(PVR C/D级)各10例;10例尸眼取玻璃体液,10例正常人取血液,10例玻璃体积血(VH)患者取血液和玻璃体液;用放射免疫测定的方法检测其质量浓度.用单因素方差分析统计其意义.结果玻璃体标本中除正常对照10例、VH的3例和PVR-C/D级的3例外均检测出ET-1质量浓度.血浆各组间除正常对照组与PVR C/D组、PVR A/B和PVR-C/D组外均有显著性差异(P<0.01).玻璃体各组间除正常对照组与VH组、VH与PVR C/D组外均有显著性差异 (P<0.05).结论ET-1在视网膜脱离早期玻璃体内质量浓度较高,而在眼内增殖的晚期则下降,可能反映了PVR中细胞增殖状态.
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基质金属蛋白酶在视网膜前膜的表达和意义
目的研究增生性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜中基质金属蛋白酶(MMPs)的表达,探讨MMPs在PVR病理过程中的作用.方法经扁平部玻璃体切割术(PPV)和膜剥离术取得PVR C3～D3级视网膜前膜21例,免疫组织化学法分析MMP-2和MMP-9在PVR视网膜前膜的表达,同时进行视网膜色素上皮细胞(RPE)和巨噬细胞染色.结果 21例PVR视网膜前膜MMP-2阳性染色15例,MMP-9阳性8例,RPE细胞表达18例,巨噬细胞表达9例.结论 PVR视网膜前膜有MMP-2和MMP-9表达,可能主要由RPE细胞和巨噬细胞分泌,对PVR的发生和发展起重要作用.
关键词： 基质金属蛋白酶 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜前膜 发病机制
