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基质金属蛋白酶-1治疗兔眼增生性玻璃体视网膜病变的效果
目的:评价基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)对富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)所诱导的兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)增殖膜的降解作用. 方法:健康成年有色家兔30只,采用日本大耳白兔动脉血制备富含血小板血浆(PRP)诱导家兔双眼PVR动物模型.A组玻璃体腔注入组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator, t-PA)12.5μg(0.05mL),B组注入t-PA 12.5μg+MMP-1 100ng(0.1mL),C组注入 t-PA 12.5μg+ MMP-1 800ng,各组均以右眼为实验眼,左眼注入等量BSS为对照,共观察28d.采用裂隙灯和间接眼底镜等方法行临床观察,PVR分级评分,闪光视网膜电图(F-ERG)b波波幅值评价注药前及注药后各时间点视网膜功能状态,光镜观察视网膜各层结构改变,电镜观察视网膜感光细胞超微结构变化.结果:C组注药后各时间点PVR级别与对照组比较差异有显著统计学意义(P<0.01);注药后各时间点F-ERG b波波幅值比较,B组及C组分别于对照组比较差异具统计学意义(P<0.05,P<0.01),注药后28d时,B组与C组比较差异也具有统计学意义(P<0.05),C组与正常F-ERG b波波幅值比较差异也具有统计学意义(P<0.05).结论:MMP-1玻璃体腔注射能对实验性兔眼增生性玻璃体视网膜病变中的增殖膜产生一定的降解作用.
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活血利水法对外伤性PVR兔眼玻璃体FNmRNA表达的影响
目的:探讨活血利水法对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)纤维连接蛋白信使核糖核酸(FNmRNA)的影响.方法:用兔眼后节穿通伤加注入血浆法制备PVR模型,利用免疫组化法对正常组、模型组、活血利水组、活血化瘀组、利水明目组PVR中的玻璃体腔增殖膜FNmRNA进行检测.结果:活血利水组增殖膜中FNmRNA的阳性表达低于模型组、活血化瘀组和利水明目组(P<0.05).结论:活血利水法能够降低PVR增殖膜中FNmRNA的阳性表达,抑制PVR的发生发展.
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实时荧光PCR检测17-AAG对人RPE细胞Akt等基因表达的调控
目的:建立检测17-AAG对人RPE细胞不同处理条件下mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察17-AAG对人RPE细胞中Akt,Raf,Hsp90,Hsp70基因表达的调控.方法:体外培养人RPE细胞株.当加入处理因素17-AAG并作用不同浓度及时间梯度后,收集细胞,抽提RNA进行反转录.同时根据Akt,Raf,Hsp90,Hsp70的基因序列,设计Akt1,Raf1,Hsp90,Hsp70的引物,利用ABI 7300PCR仪和SYBR Green,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct进行基因表达的相对定量分析.结果:熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证明了PCR反应的特异性;相对定苗结果显示,17-AAG可以下调Akt及Raf基因的表达,上调Hsp90及Hsp70基因表达.结论:应用SYBR Green实时荧光PCR可以特异、准确地分析RPE细胞相关增殖基因表达差异,为系统研究17-AAG治疗PVR的复杂调控机制创造有力条件.
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17-AAG对人RPE细胞PDGFR和EGFR基因表达的调控
目的:通过检测17-AAG对人RPE细胞不同处理条件下mRNA的SYBR Green实时PCR方法,观察17-AAG对人RPE细胞中PDGFR和EGFR基因表达的调控.方法:体外培养人RPE细胞株.当加入17-AAG并作用0,2,5,10μmol/L及0,16,24,48h后,收集细胞,抽提RNA进行反转录.同时根据PDGFR、EGFR的基因序列,设计PDGFR、EGFR的引物,利用ABI 7300PCR仪和SYBRGreen,建立实时荧光PCR反应条件,通过比较Ct值进行基因表达的相对定量分析.结果:熔解曲线分析和琼脂糖凝胶电泳结果证明了PCR反应的特异性;相对定量结果显示,17-AAG可以下调PDGFR基因的表达(P<0.05),上调EGFR基因表达(P<0.05).结论:SYBR Green实时荧光PCR可特异、准确地分析RPE细胞相关增殖基因表达差异,为系统研究17-AAG治疗PVR的复杂调控机制创造有力条件.
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增生性玻璃体视网膜病变中组织型转谷氨酰胺酶的表达
目的:检测增生性玻璃体视网膜病变(PVR)视网膜前膜和视网膜色素上皮(RPE)细胞中组织型转谷氨酰胺酶(tTG)的表达情况,探讨tTG是否参与PVR的发病过程.方法:PVR患者21例,收集视网膜前膜,C级8例,D级13例,行tTG免疫组织化学染色.另对培养3-5代的人RPE细胞分别用含有1 00mL/L PVR玻璃体液、正常玻璃体液和PBS的DMEM培养液进行孵育24h后行tTG免疫细胞化学染色.光镜下观察,比较C级和D级膜的表达阳性率,显微图像分析测量3组RPE细胞染色的平均灰度值.结果:在PVR视网膜前膜中tTG呈阳性表达(81%),C级和D级膜表达阳性率无差异 (C级88%,D级77%,P＞0.05).培养的人RPE细胞表达tTG,在PVR患者的玻璃体液作用下,tTG表达的平均灰度值为137.0±2.6,与正常玻璃体液组(143.5±2.9)及PBS对照组(143.6±3.0)相比,表达水平升高(P＜0.05).结论:PVR视网膜前膜和培养的人RPE细胞tTG表达阳性,在PVR患者的玻璃体液作用下,RPE细胞的tTG表达水平升高,这表明tTG参与了PVR的发病过程,在PVR视网膜前膜的形成过程中可能有重要作用.
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IL-1ra及地塞米松对IL-1β诱导的人RPE增生的抑制
目的:观察IL-1ra及地塞米松对IL-1β诱导的RPE增生的抑制作用.方法:通过MTT比色实验观察IL-1ra及地塞米松对IL-1β促RPE增生的抑制作用.结果:IL-1ra(20～200 μ g/L)对加入IL-1β(2 μ g/L)培养的人RPE增生有明显的抑制作用,抑制率为9.4%～24.5%(P＜0.05);地塞米松在低浓度(10 mg/L)时刺激RPE增生,而在高浓度(35～70 mg/L)则表现为对IL-1β诱导RPE增生的抑制作用,抑制率为31.2%～43.9%(P＜0.05);IL-1ra(100 μg/L)联合地塞米松(35 mg/L)对IL-1β诱导RPE增生的抑制率40.6%,较两者单独使用的抑制率均高(P＜0.05).结论:IL-1β能促进培养的人RPE的增生,而IL-1ra及地塞米松可以抑制这种促增生作用.
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姜黄素对IL-1β诱导视网膜色素上皮细胞分泌IL-8和sICAM-1的影响
目的:研究姜黄素对IL-1β诱导RPE细胞分泌IL-8和SICAM-1的影响.方法:RPE细胞经含4 mL/L FBS的DMEM/F12同步后分为四组:①rhIL-1β干预组;②rhIL-1β+姜黄素组,姜黄素分5 mg/L和10 mg/L两个浓度;③姜黄素组,只分别加入5 mg/L和10 mg/L姜黄素;④空白对照组(4 mL/L FBS+DMEM/F-12).所有样本干预24 h后收集培养上清液和该孔细胞蛋白裂解液.ELISA法检测rhIL-1β(5 μg/L)和姜黄素诱导hfRPE细胞分泌IL-8和sICAM-1的量.结果:rhIL-1β(5 μg/L)组RPE细胞分泌的IL-8和sICAM-1分别比空白对照组升高了20倍和8倍,加入姜黄素能显著抑制其分泌.5 mg/L姜黄素使IL-8和sICAM-1含量分别降低了36.88%和14.90%,10 mg/L则分别达到55.73%和41.78%.姜黄素本身不刺激hfRPE细胞分泌IL-8和sICAM-1.结论:姜黄素可显著抑制IL-1β刺激的RPE细胞分泌炎前因子IL-8和sICAM-1,有可能防上PVR的发生.
关键词： 姜黄素 视网膜色素上皮细胞 增生性玻璃体视网膜病变 -
化瘀散结片对兔眼外伤性增生性玻璃体视网膜病变血液流变学的影响
目的:探讨化瘀散结片对外伤性增生性玻璃体视网膜病变(proliferatiVe Vitreoretinopathy,PVR)血液流变学的影响.方法:采用兔眼后节穿通伤加注血法制备PVR模型,第30d抽血观察正常对照组、阴性对照组、阳性(道诺霉素)对照组、化瘀散结片治疗组PVR兔子的血液流变学.结果:化瘀散结片治疗组对血液流变学部分指标有降低作用:纤维蛋白原、红细胞刚性、全血低切粘度、血浆粘度、红细胞聚集指数,与各对照组相比有显著或极显著性差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:化瘀散结片能够改善血液流变学状态,促进玻璃体积血吸收,对防治PVR的发生发展有一定作用.
关键词： 化瘀散结片 增生性玻璃体视网膜病变 血液流变学 -
增生性玻璃体视网膜病变视网膜前膜超微结构及HGF受体表达
目的:研究增生性玻璃体视网膜病变视网膜前膜(epiretinal membrane,ERM)的超微结构及肝细胞生长因子(hepatoccyte growth factor,HGF)受体的表达情况.方法:严重增生性玻璃体视网膜病变(PVR)患者10例行玻璃体手术时取出视网膜前膜,透射电镜观察ERM的组成成分,免疫组化染色观察ERM组织中HGF受体的表达.结果:ERM以上皮样细胞、成纤维样细胞为主并含有大量胶原成分.ERM标本中HGF受体集中在细胞分布密集区域表达,阳性细胞多是一些含色素颗粒的细胞.结论:视网膜色素上皮(RPE)细胞是PVR的主要参与细胞,HGF可能参与了PVR膜形成.
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜前膜 肝细胞生长因子受体 免疫组化 透射电镜 -
维生素E防治增生性玻璃体视网膜病变的实验研究
目的:评价VitE对兔眼实验性增生性玻璃体视网膜病变的抗增殖作用.方法:15只健康家兔行气体压迫玻璃体术,3d后分3组,每组10眼行气液交换.对照组给予0.5mL平衡盐溶液;50μ g VitE组给予0.5mL含50μ g VitE 的平衡盐溶液;100μ g VitE实验组给予0.5mL含100μ g VitE的平衡液溶液.同时,3组玻璃体内还注入0.1mL含2.5×105的成纤维细胞悬液.以检验镜观察眼底4wk,记录牵引性视网膜脱离的发生情况.28d后摘除眼球,作病理切片,光镜检查.结果:14d时,对照组、50 μ g VitE和100μ g VitE 组平均PVR发生程度为3.5,2.4,2.即在观察的前2wk,给药组延迟了PVR的发生,且给药组和对照组相比有显著性差别(P＜0.05).结论:玻璃体内注入VitE的盐溶液可以延迟PVR 牵引性视网膜脱离的发生.
关键词： 维生素E 增生性玻璃体视网膜病变 动物模型 -
mTOR通路在眼科增殖相关性疾病中的研究进展
mTOR通路在细胞生长增殖过程中起十分重要的作用，越来越多的实验结果证明该通路的传导紊乱与肿瘤、糖尿病、肥胖、心血管疾病、年龄相关性疾病及其他与增殖性疾病有密切的联系。 mTOR通路通过整合来自营养、能量状态、氨基酸及生长因子的信号以调整诸如自嗜、核糖体合成和细胞新陈代谢等生命活动。使用特异性的mTOR通路抑制剂可减缓并部分逆转疾病的发生。本文就mTOR通路在眼科部分增殖性疾病的研究进展进行综述。
关键词： mTOR通路 后囊膜混浊 增生性玻璃体视网膜病变 增殖性疾病 -
增生性玻璃体视网膜病变的治疗进展
增生性玻璃体视网膜病变（ proliferative vitreoretinopathy ， PVR）描述孔源性视网膜脱离（ rhegmatogenous retinal detachment ， RRD）等疾病后玻璃体和/或视网膜表面特异细胞增殖形成纤维膜继而收缩、牵拉引起相关疾病的过程。玻璃体切割手术是目前临床治疗PVR的标准方法。基于对各种细胞和生长因子在PVR致病过程中作用的逐渐了解，涌现出很多新兴的药物治疗方法，主要包括抗炎药物、抗肿瘤药物和抗生长因子药物等。
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜脱离 生长因子 -
节段性垫压术在PVR B和C期视网膜脱离治疗中的作用
背景:PVR是孔源性视网膜脱离治疗终失败的原因.提出的问题是:①小量眼外脱离手术减少了术后PVR吗?②小量眼外手术(不用环扎手术或玻璃体切除术)治疗在术前伴有PVR B和C期的脱离恰当吗?③这种手术能使视网膜复位而且PVR长期稳定或消退吗?材料和方法:对1979-08/1982-07之间手术的伴有行PVR(B和C期)的72例脱离进行了前瞻性研究.38眼为PVR C1期,11眼为C2期,1眼为C3期.手术包括冷凝固定、不放液的节段性垫压或球囊垫压.41位患者随访11～13.5a;31例患者在随访的6～143mo期间死亡.所有患者平均随访期为7.5a.10眼进行了再次手术,由节段性垫压组成,没有环扎术或玻璃体切除术.结果:在初期节段性垫压手术后,57眼(79%)视网膜完全复位,11眼(15%)部分复位."早期"再脱离占8.3%,发生在6mo内;6mo～9a之间没有再脱离;"晚期"再脱离有2.8%,发生在9～13.5a之间.再次手术后(10例),85%在长期随访中保持复位.没有虹膜红变、继发性青光眼或眼球萎缩.12眼发生黄斑前膜.未经黄斑手术,术后6mo视力为0.3～0.8的26眼;0.1～0.2的16眼;≤0.05的30眼.平均随访7.5a后视力没有显著性差异.结论:PVR(B和C期)脱离的手术可以是相对无创伤的、通过对裂孔区有限的冷凝固定和节段性垫压且不引流视网膜下液.手术也检验了PVR等级.10眼中有8眼未经再手术而复位了,而且在长期的随访中一直保持.对这些结果的统计学分析以及用玻璃体切除术作为再次手术的一个可比较系列,证明在6mo后的解剖和功能结果都没有显著性差异,但在未作玻璃体切除术的系列并发症较少,而且损害较小.
关键词： 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜脱离 节段性垫压术 -
原发性视网膜脱离手术技术的概念变革
目的:分析从1929年开始的、现存的原发性视网膜脱离复位手术的术式演变,和决定不同技术的话题.方法:复习过去75a间视网膜脱离手术的文献,其中作者经历了过去35a持续进行的治疗方式的演变.为达到视网膜复位,一种演变是从对整个视网膜脱离的手术、转变到仅限于视网膜裂孔的手术,另一种演变是从眼外到眼内的手术转变.结果:在21世纪开端,治疗原发性视网膜脱离可应用的所有5种主要手术方式,有一个共同的要点:找到并封闭引起原发性视网膜脱离、或如果封闭不充分会造成再脱离的裂孔.这与手术是限于裂孔区、还是扩展到整个脱离区无关,也与在眼外还是眼内手术无关.结论:终发现并封闭原发性视网膜脱离中漏水的视网膜裂孔,已经伴随视网膜脱离手术医生的努力,成为过去75a的一条"红线",而且现在仍然是保持复位的关键.不过,在2l世纪开端,视网膜脱离治疗的3个假设毫无疑问地实现了:①应该做1次手术就达到视网膜复位;②手术不应在以后的年岁内引发威胁重获视力的并发症;③手术费用较少且在局麻下进行.
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视网膜增生膜结缔组织生长因子mRNA的表达
目的: 观察结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)mRNA在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜(periretinal membranes, PRM)中的表达, 探讨其临床意义. 方法: 采用原位杂交方法,对玻璃体切割手术获得的12例PVR增生膜进行CTGF mRNA的检测. 结果: 染色阳性9例,其中弱阳性(+)1例,阳性()3例,强阳性()5例,阳性率为72%;阳性细胞多是一类胞体为长圆形或多角型,胞核呈圆形或卵圆形,胞质丰富的上皮样细胞;也有少数阳性细胞呈梭形、胞体较大的成纤维细胞样细胞. 结论: PVR形成过程中视网膜色素上皮细胞(RPE)、成纤维细胞在TGF-β等生长因子的刺激下,CTGF mRNA表达显著上调,表明CTGF参与了PRM的形成和发展.
关键词： 结缔组织生长因子 原位杂交 增生膜 增生性玻璃体视网膜病变 -
柔红霉素联合bax基因转染对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变的影响
目的: 观察柔红霉素(DNR)和bax基因转染联合应用对兔实验性增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)形成的影响. 方法: 将2.5×105个正常视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial, RPE)细胞和3.5×105个经bax基因转染的RPE细胞注入兔玻璃体腔,观察诱发兔眼PVR形成的能力,同时观察10 nmol DNR对PVR形成的抑制作用. 结果: 在3, 7, 14, 21和28 d时RPE组PVR的平均分级为:0.625,2.000,3.000,4.125和4.250,基因转染细胞组PVR的平均分级为:0.500,0.875,2.000,3.125和3.625,后者PVR分级均低于RPE细胞组(P<0.05). 28 d时正常细胞组视网膜脱离发生率为100%(n=8),bax基因转染细胞组的视网膜脱离发生率为62.5%(n=8). 在7, 14, 21和28 d时,DNR对正常细胞组PVR的抑制率分别为60%, 64%, 57%和57%,对基因转染细胞组PVR分级的抑制率分别为73%, 71%, 68%和69%,后者普遍大于前者. 结论: DNR可以抑制PVR的形成,bax基因转染可以提高DNR对兔实验性PVR防治的有效性.
