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肝激酶B1在肺腺癌中的表达及意义
目的 探讨肝激酶B1(LKB1)在肺腺癌中的表达及意义.方法 应用免疫组化方法 检测LKB1在87例肺腺癌及癌旁正常肺组织中的表达,并分析其表达与肿瘤临床病理因素及预后的相关性.结果 LKB1在正常肺组织中高表达,在肺腺癌中表达下调(P<0.001);在肺腺癌中,LKB1表达下调与患者的淋巴结转移正相关(r=0.337,P=0.002)同时与高分化负相关(r=-0.269,P=0.012);在预后分析中,除了TNM分期(P<0.001)之外,LKB1表达下调也是影响肺腺癌患者预后的独立因素(P=0.001).结论 LKB1表达下调促进肺腺癌的发生发展,并与其不良预后相关.
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LKB1和PTEN在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的 探讨肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)和张力蛋白同源基因蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其与患者预后的关系.方法 免疫组化检测115例HCC患者肿瘤组织中LKB1和PTEN蛋白的表达,分析两种蛋白表达与临床病理因素的关系,应用COX比例风险模型进行多因素预后分析.结果 115例肿瘤中LKB1阳性表达率仅为10.4％(12/115),PTEN阳性表达率为28.7％ (33/115);两种蛋白共表达与缺失的比例分别为5.2％ (6/115)和66.1％(76/115).LKB1与PTEN蛋白双缺失更多出现在≥50岁年龄组(x2=7.968,P=0.001)、中-低分化HCC(x2=11.297,P=0.025)以及合并脉管癌栓的HCC (x2=6.797,P=0.011)中.LKB1、PTEN蛋白共表达与共缺失患者的5年生存率分别为100％和36.5％(x2=10.969,P=0.004).多因素COX比例风险模型分析显示,脉管癌栓、PTEN缺失和LKB1/PTEN双缺失是影响HCC预后的独立危险因素. 结论 LKB1/PTEN蛋白双缺失是影响HCC患者生存时间的独立危险因素.
关键词： 癌 肝细胞 基因表达 肝激酶B1 张力蛋白同源基因蛋白 -
肝激酶B1增强肺癌H460细胞放射敏感性的体内研究
目的 研究肝激酶B1(LKB1)对肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤放射敏感性的影响.方法 构建肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分别给予空载质粒(pEGFP-Ctrl)、照射+空载质粒(IR+pEGFP-Ctrl)、过表达LKB1质粒(pEGFP-LKB1)、照射+过表达LKB1质粒(IR+pEGFP-LKB1)处理;观察移植瘤生长情况,计算抑瘤率及放射增敏比;并采用免疫组织化学和蛋白印记技术检测各组瘤组织中LKB1表达情况,分析LKB1与放射敏感性的关系.结果 相较于pEGFP-Ctrl组,IR+pEGFP-Ctrl组、pEGFP-LKB1组和IR+pEGFP-LKB1组的肿瘤生长都受到不同程度的抑制,抑瘤率分别为31.30%、14.78%和43.48%,其中IR+pEGFP-LKB1组较其他组为明显.IR+pEGFP-LKB1组LKB1的放射增敏系数为1.18.转染pEGFP-LKB1组的LKB1在免疫组织化学和蛋白印记水平上表达增高,其余组未见LKB1表达.结论 成功构建肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤模型,LKB1具有增强肺癌H460细胞裸鼠皮下移植瘤放射敏感性作用.
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腺苷酸活化蛋白激酶途径与肿瘤的研究进展
腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)是哺乳动物细胞中高度保守的蛋白质,是细胞的重要的代谢感受器.哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路,是一种不典型的丝/苏氨酸激酶,在进化中也具有高度保守性,主要通过调控蛋白合成来调节细胞的生长,mTOR激酶通过多种信号通路来实现对细胞生长的调节作用,其中营养信号激活通路为细胞外的氨基酸通路LKB1-AMPK途径.二甲双胍(LKB1/AMPK的激活剂),可抑制mTOR的活性,从而可以应用于多种肿瘤的治疗,目前研究表明AMPK信号通路及其相关的信号通路与多种肿瘤的发生、发展有关.
关键词： 腺苷酸活化蛋白激酶 肝激酶B1 雷帕霉素靶蛋白信号途径 二甲双胍 肿瘤 -
LKB1蛋白在食管鳞癌组织中的表达及意义
为了探讨肝激酶B1(LKB1)蛋白在食管鳞癌组织中的表达水平及其与食管鳞癌临床特征及生存期的关系,应用免疫组化方法检测120例食管鳞癌患者组织中LKB1蛋白表达情况并对诸多临床特征进行相关性分析研究,发现LKB1蛋白在食管癌旁正常组织的阳性表达率高于癌组织；LKB1蛋白表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、病变长度及浸润深度无关而与分化程度、淋巴结转移及临床分期(TNM)相关,且LKB1蛋白阴性组预后较阳性组差.可见LKB1视为抑癌基因影响食管鳞癌的预后,可能成为食管鳞癌新型的临床预后指标之一.
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LKB1通过增强间隙连接细胞通讯增加乳腺癌细胞对顺铂的敏感性
目的 研究LKB1对乳腺癌细胞顺铂化学敏感性的作用及机制.方法 构建LKB1高表达的稳定转染细胞MDA-MB-231/LKB1及其空载对照细胞MDA-MB-231/VEC.RT-PCR、Western印迹法检测细胞间隙连接蛋白Cx26、Cx32、Cx43和Cx50的核酸、蛋白水平表达;免疫荧光实验对Cx43进行胞内表达定位;染料传输实验评估间隙连接细胞通讯功能;细胞毒实验检测顺铂杀伤乳腺癌细胞的“旁观者效应”及计算顺铂的半数抑制浓度.结果 LKB1增加了间隙连接蛋白Cx43的核酸及蛋白水平表达(P＜0.01),但对Cx26、Cx32及Cx50的表达水平无明显影响.LKB1增加了细胞膜上Cx43的表达,增强了细胞传递荧光黄染料的能力,并使顺铂对细胞的旁观者杀伤效应增强.LKB1也增加了细胞对顺铂的敏感性,MDA-MB-231、MDA-MB-231/VEC和MDA-MB-231/LKB1的半数抑制浓度分别为22.46、24.72、6.55 nmol/L,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 LKB1通过增强乳腺癌细胞的Cx43表达及间隙连接细胞通讯功能增强了顺铂的旁观者杀伤效应,并增加了细胞对顺铂的敏感性.
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沉默LKB1基因对肺癌细胞侵袭迁移和EMT的影响
目的 探讨沉默肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)基因对肺癌95-D和H1299细胞侵袭、迁移能力和上皮间质转化(epithelial to mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 设计靶向沉默LKB1的shRNA,构建shLKB1重组质粒以及含无关shRNA的shCtrl阴性对照质粒,转染肺癌95-D和H1299细胞,Western blot检测LKB1表达情况,荧光显微镜观察转染效率;Transwell实验和划痕实验检测转染后细胞的侵袭和迁移能力;Western blot检测EMT标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达情况.结果 成功构建shLKB1 重组质粒,并转染人肺癌95-D和H1299细胞.Western blot检测结果显示,与对照组相比,转染组LKB1表达下降,侵袭和迁移能力增强,E-cadherin表达减少,Vimentin表达增加,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 沉默抑癌基因LKB1可使肺癌95-D和H1299细胞侵袭和迁移能力增强,并且可能与EMT现象上调有关.
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抑癌基因LKB1与肿瘤关系的研究进展
肝激酶B1（ LKB1）是一种具有普遍作用的抑癌基因，编码一种丝氨酸／苏氨酸激酶，LKB1基因的胚系突变是黑色素斑?胃肠多发性息肉综合征的主要致病因素。现有研究表明，LKB1对细胞代谢、细胞周期和细胞极性等的调控是其抑制肿瘤发生和发展的重要方面。 LKB1的失活性表达以低频率事件广泛存在于全身多种类型恶性肿瘤中，如肺癌、胃癌和乳腺癌等；其功能异常还与腺癌的发生密切相关。本文就目前已知的LKB1的抑癌机制作以综述。
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LKB1在肝细胞癌中的表达及其对预后的影响
目的 探讨LKB1基因在肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其与肝细胞癌患者预后的关系.方法 采用免疫组化技术检测70例HCC患者肝癌及癌旁组织和20例正常肝组织中LKB1蛋白的表达,采用x2检验分析LKB1表达与临床病理因素的关系.对该组70例患者进行随访,并应用COX比例风险回归模型对其预后影响因素进行评估.结果 LKB1蛋白在HCC组织中的阳性表达率明显低于正常肝组织和癌旁组织(P＜0.05).HCC患者中,LKB1蛋白表达与HCC的分化程度,门静脉侵袭,TNM分期有关(P＜0.05).LKB1阳性表达的患者生存时间比阴性表达的显著延长(P＜ 0.05).门静脉侵袭、胆管癌栓、TNM分期和LKB1表达是影响HCC预后的独立危险因素(P＜0.05).结论 LKB1蛋白表达是影响HCC患者生存时间的独立因素之一,检测LKB1蛋白可能为HCC患者预后判断提供参考.
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非小细胞肺癌组织中VEGF、P-ACC、LKB1表达变化与微血管密度的关系
目的 分析非小细胞肺癌(NSCLC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、乙酰辅酶A羧化酶磷酸化后的产物(P-ACC)、肝激酶B1(LKB1)表达变化与微血管密度(MVD)的关系.方法 采用免疫组化法检测100例NSCLC组织中的VEGF、P-ACC、LKB1、CD34,并根据CD34染色情况计算MVD,分析VEGF、P-ACC、LKB1表达与NSCLC患者临床病理参数及MVD的关系.结果 100例NSCLC组织中,VEGF、P-ACC、LKB1阳性表达率分别为70％、27％、25％;与肿瘤直径<5 cm、组织高中分化、无淋巴结转移者比较,肿瘤直径≥5 cm、组织低分化、有淋巴结转移者VEGF阳性表达率增高而P-ACC、LKB1阳性表达率降低(P均<0.05).与同指标阳性组织比较,VEGF阴性组织中MVD升高而P-ACC、LKB1阴性组织中MVD降低(P均<0.05);NSCLC组织中VEGF表达与MVD呈正相关(r=0.379,P<0.05),P-ACC、LKB1表达与MVD呈负相关(r分别为-0.563、-0.456,P均<0.05).结论 在NSCLC组织中,肿瘤直径大、组织分化低、有淋巴结转移者VEGF表达增加而P-ACC、LKB1表达减少;VEGF表达与MVD呈正相关关系,而P-ACC、LKB1表达与MVD呈负相关关系.
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肝激酶B1过表达对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及转移的影响
目的 探讨肝激酶B1(LKB1)过表达对人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖及转移的影响.方法 将培养好的甲状腺乳头状癌K1细胞随机分为空白组、阴性对照组和实验组,将空载病毒、LKB1重组真核体分别转染入阴性对照组、实验组,空白组不做任何处理.RT-PCR技术检测各组LKB1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞内LKB1蛋白表达,用MTT法检测细胞增殖能力(OD值),用Transwell侵袭试验检测细胞转移能力,流式细胞术检测细胞周期分布.结果 实验组LKB1 mRNA、蛋白相对表达量高于阴性对照组、空白组(P均＜0.05).转染72h,继续培养24、48、72、96 h实验组OD值低于阴性对照组、空白组(P均＜0.05).转染24 h,实验组穿膜细胞数少于阴性对照组、空白组(P均＜0.05).转染24 h,与阴性对照组、空白组比较,实验组G0/G1期细胞增多,S期、G2/M期细胞减少(P均＜0.05).结论 LKB1过表达能抑制人甲状腺乳头状癌K1细胞增殖、转移.
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肝激酶B1对肝癌细胞增殖、迁移的影响及其与患者术后预后的关系
目的 探讨肝激酶B1(LKB1)对肝癌细胞生物学功能的影响及与术后复发的关系.方法 采用分子生物学技术构建LKB1过表达慢病毒载体,包装慢病毒感染高转移肝癌细胞MHCC97H,建立LKB1对照MHCC97H细胞株(对照组)和LKB1过表达MHCC97H细胞株(观察组).采用细胞计数试剂盒(CCK-8)分析对照组和观察组细胞的增殖能力,采用Transwell分析对照组和观察组细胞的侵袭能力.并选取我院接受治疗的142例晚期肝癌患者作为研究对象,取肿瘤组织,免疫组织化学分析LKB1表达,并分组分析LKB1高表达和低表达患者术后复发率.结果 成功构建LKB1过表达MHCC97H细胞株.与对照组细胞比较,观察组细胞株MHCC97H细胞的增殖能力明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组细胞[(87.12±9.25)个]比较,观察组细胞的侵袭能力[(28.32 ±7.32)个]显著下降,差异有统计学意义(P＜0.05).免疫组织化学分析LKB1低表达组患者98例,比率为69.01％,高表达44例,比率为30.99％.高表达组患者术后2年和3年复发率分别为27.27％和47.62％,低表达组患者术后2年和3年复发率分别为40.82％和68.37％,两组差异有统计学意义(Log-rank=2.013,P＜0.05).结论 LKB1与肝癌细胞的增殖和迁移能力有关,低表达LKB1患者术后复发率明显增加.
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肝激酶B1抑制肿瘤机制的新进展
1998年,在研究黏膜息肉黑斑综合征(PJS)的过程中人们首次鉴定出抑癌基因肝激酶B1(LKB1)也被称为丝氨酸、苏氨酸激酶11(STK11).从那以后,人们针对LKB1进行了大量的研究.有关LKB1功能的研究进展提示:LKB1在调节能量代谢、细胞生长与增殖、凋亡、分化、细胞极性等方面发挥重要作用.我们将对过去有关LKB1的研究做一下简单的总结.
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风湿性二尖瓣狭窄患者心肌LKB1/AMPK通路与心房颤动的相关性
目的:探讨风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者肝激酶B1/丝裂原活化蛋白激酶(liver kinase B1/AMP-activated protein kinase,LKB1/AMPK)通路与伴发心房颤动(atrial fibrillation,AF)的关系.方法:选择201 1年12月至2016年12月行换瓣手术治疗的风心病二尖瓣狭窄患者40例,根据病史和术前心电图记录分为房颤组(AF组,n=20)和窦性心律(sinus rhythm,SR)组(SR组,n=20),术前抽取空腹静脉血检测生化指标,术中留取左心耳组织.ELISA法测定血清超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP)及硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)的水平.实时定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)法检测左心耳组织中LKB1和AMPK的mRNA水平.采用Pearson相关分析检测LKB1与各指标的相关性.结果:与SR组相比,AF组患者左心耳组织中LKB1及AMPK的mRNA水平明显减低(均P＜0.05);血清中hs-CRP及TRX水平显著高于SR组(均P＜0.05).Pearson相关分析提示LKB1与AMPK呈正相关(r=0.373,P＜0.05),与hs-CRP,TRX呈负相关(r=-0.546,-0.417,均P＜0.05)结论:LKB1/AMPK通路可通过炎症及氧化应激机制触发和维持AF.
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白介素17对急性肺损伤时肺水肿液清除的影响
目的 探讨白介素17(IL-17)对急性肺损伤(ALI)小鼠肺水清除的影响及可能机制.方法 IL-17基因敲除鼠和野生型C57BL/6鼠各16只,随机各等分为两组(一共4组,每组8只),分别经气道给与磷酸缓冲盐溶液和脂多糖(LPS)干预,给药48 h后处死.比较各组肺湿干质量比(W/D)、支气管肺泡灌洗液中白介素8(IL-8)水平和肺组织钠通道(ENaC)蛋白表达情况.并采用HE染色观察肺组织病理改变,免疫组化法了解肝激酶B1(LKB1)表达差异.结果 与接受LPS干预的野生型鼠比较,IL-17敲除型鼠在接受LPS处理后W/D由9.739±3.3降至5.351±0.56,IL-8由67.50±7.33 pg/mL降至41.00±3.16 pg/mL,差异有统计学意义.病检结果提示IL-17敲除型鼠肺泡腔内水肿液聚集减少,肺损伤评分显著降低.Western blotting和免疫组化结果示接受LPS刺激的IL-17敲除型鼠ENaC表达更多,LKB1丢失相对较少.结论 敲除IL-17不仅可以减轻ALI小鼠肺组织炎症程度,还可以减少ENaC蛋白丢失,促进肺水清除,其保护作用可能与LKB1有关.
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LKB1抑制肿瘤机制的研究进展
LKB1(liver kinase B1)基因又被称为STK11(serine/thronine protein kinase 11)基因,LKB1的胚系突变可导致Peutz-Jeghers综合征(PJS),与错构瘤性息肉向肿瘤的发展密切相关[1].LKB1基因的表达产物在细胞内分布较为广泛,通过多种信号途径参与调节细胞的凋亡、极性等细胞生理过程.尽管LKB1的抑癌机制尚不完全清楚,但现有的研究表明作为一种蛋白激酶,它对细胞的增殖、生长周期阻滞、凋亡、能量代谢和极性等的调控可能都是抑制肿瘤的重要机制.
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过表达肝激酶B1(LKB1)抑制肺癌细胞的增殖
目的 探讨肺癌细胞过表达肝激酶B1 (LKB1)对细胞增殖的影响.方法 利用免疫细胞化学技术、Western blot法检测非小细胞肺癌(NSCLC) A549、NCI-H23、NCI-H157、XWLC-05细胞以及小细胞肺癌(SCLC) NCI-H446细胞中LKB1和第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)蛋白的表达水平.利用过表达载体pcDNA3.1+-LKB1质粒及对照质粒pcDNA3.1+-null通过脂质体转染以上5株肺癌细胞,转染后利用实时定量PCR及Western blot法分别检测LKB1的mRNA和蛋白水平,以PTEN基因表达水平作为对照;以过表达载体pcDNA3.1+-LKB1质粒以及对照质粒pcDNA3.1+-null转染5株肺癌细胞,应用CCK-8法检测细胞增殖活性.结果 NCI-H23细胞株中LKB1和PTEN均为阳性表达;A549和NCI-H446细胞株中LKB1为阴性、PTEN为阳性表达;NCI-H157和XWLC-05细胞株中LKB1和PTEN均为阴性表达;转染pcDNA3.1+-LKB1质粒后的以上5株肺癌细胞内LKB1表达水平明显高于转染pcDNA3.1+-null质粒的对照细胞;同时与对照细胞相比,转染过表达载体pcDNA3.1+-LKB1质粒后LKB1的过表达明显抑制肺癌细胞的增殖.结论 肺癌细胞中LKB1表达水平多发生不同程度下调,上调LKB1表达可明显抑制肺癌细胞的增殖.
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肿瘤抑制基因肝激酶B1在肺腺癌中的表达
目的:研究肝激酶B1(LKB1)在人肺腺癌组织中的表达.方法:收集肺腺癌组织标本(含癌旁组织、正常组织)共60例,采用实时荧光定量PCR法检测肺腺癌组织中LKB1的mRNA含量；Western blot法和免疫组化法检测肺癌组织中LKB1的表达情况.结果:实时荧光定量PCR检测显示LKB1的mRNA含量在正常对照组、癌旁组织和肺癌组织3组之间无显著差异；Western blot法检测和免疫组化结果显示肺腺癌组织中LKB1蛋白的表达量显著低于正常对照组和癌旁组织.结论:肺腺癌组织中LKB1的表达可能存在翻译后的调节.
