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肝细胞生成素核受体的确定及特性
目的:肝细胞生成素(HPO)特异性刺激肝细胞增生的信号转导存在特异性核受体信号转导途径.方法:利用125I标记的HPO,通过受体结合和特异性竞争抑制实验及Scatchard分析原代培养大鼠肝细胞和肝癌细胞核抽提物中核受体.结果:原代培养大鼠肝细胞和肝癌细胞核抽提物中存在核受体,核受体数量分别为1.7×109/g、和5.0×109/g,平衡解离常数(Kd)分别为35 pmol及1 2 pmol,且存在数量上和亲和力的差异,此结合不能被EGF、生长激素和甲状腺激素所竞争抑制.HepG2细胞放射自显影显示HPO核受体的存在.结论:HPO促肝细胞增生作用可以通过肝细胞核受体介导.
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高效液相色谱法测定新型免疫抑制剂FTY720的研究
FTY720(文献代号)是近几年开发的一种新型免疫抑制剂.它是将冬虫夏草抽提物中具有免疫抑制作用的成分ISP-I进行结构改造制得的.目前该药在国外已进入临床试验阶段.FTY720是一淋巴细胞免疫调节剂,可阻断T淋巴细胞黏附因子与淋巴结内皮细胞发生作用.测定生物样品中FTY720的方法和实验动物的药动学研究均未见文献报道,因此笔者建立了其血药浓度的高效液相色谱分析方法,将其进一步应用于FTY720在大鼠的药动学研究.
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缺氧诱导因子-1在肾脏疾病中的研究进展
缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是在缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,它先由Semenzata[1]于1992年在缺氧诱导的细胞核抽提物中发现.目前已发现HIF-1可调控一系列靶基因的表达,具有许多重要的生物学效应,调控机体对缺血缺氧产生适应性反应.近几年,HIF-1在某些肾脏疾病中的作用也逐渐受到人们的关注.
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F9细胞的培养和全细胞抽提物获取方法的比较
目的 对F9小鼠畸胎瘤细胞进行培养,探索理想的获取全细胞抽提物的方法.方法 应用蛋白质抽提试剂盒、反复冻融循环和超声波裂解法进行F9全细胞抽提物的获取.结果 通过蛋白质抽提试剂盒和反复细胞冻融循环的方法所获取的细胞抽提物渗透压和浓度偏低,而选用超声波裂解法所获取的细胞抽提物,无论从pH,渗透压,还是蛋白浓度方面分析均与理想值接近.结论 选择超声波裂解法作为获取F9小鼠畸胎瘤全细胞抽提物的理想方法.
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NF-kB与眼部疾病关系的研究进展
一、概述1.NF-kB首先由Sen和Baltimore在1986年从B淋巴细胞核的抽提物中检测到,因为它可与免疫球蛋白的(Ig)k轻链基因增强子上一段10bP的核苷酸序列特异性结合,故称之为核因子kB(nuclearfactor- Kappa B, NF- kB)[2].
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绿茶应用于化学防癌
一、绿茶的有效成分同抗癌有关的儿茶素类中,现知有4种代表性物质,其结果如图1所示.供本文实验用的绿茶抽提物"polyphenone E(R)"含表没食子儿茶素没食子酸盐(epigallocatechin gallate,EGCg)约60%、其它儿茶素30%,即共含约90%的总儿茶素.
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绿茶儿茶素的药理作用及其临床应用
儿茶素(catechin)富含于绿茶的茶叶中,也称之为多酚.据报道该多酚化合物具有抗氧化作用、抗变异原性、抗肿瘤活性、抗增进活性、抗病毒作用、抑制厌氧菌增殖作用、改善高胆固醇作用、改善肝功能等多种生物活性,目前绿茶抽提物已被应用作为多种食品的食品添加剂.
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紫苏种子皮抽提物保健作用初探
目的:研究紫苏皮抽提物的抗癌、抗衰老及其保健价值.方法:通过紫苏皮抽提物对人体内NO-2、Pb2+、LPO的清除能力测定.结果:发现紫苏皮抽提物具有消除NO-2,对Pb2+有很强的吸附及一定的抗细胞膜氧化能力等保健作用.结论:紫苏皮具有抗癌、抗衰老等保健作用.
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寄生虫病疫苗研究的现状及展望
疫苗是控制乃至消灭传染性疾病的有效手段.寄生虫疫苗研究始于1903年,至今已有100多年历史.在低毒活疫苗、致弱活疫苗、灭活或死病原疫苗、亚单位疫苗(包括抽提物或代谢产物)、合成的和重组抗原疫苗、抗独特型疫苗和DNA疫苗等方面做了大量的实验研究,有的进行了现场验证.
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新型免疫抑制剂FTY720与器官移植
中药冬虫夏草的滤液抽提物ISP-I在体外实验中表现出强大的免疫抑制作用,但其在体内应用时却会引起严重的消化功能紊乱,甚至导致实验动物死亡.因此,人们试图通过优化结构来改善它的功能.研究中发现,在ISP-I烃链不同位置上引入苯环和羟烷基能对免疫抑制效果产生重大影响[1].在此基础上,1995年Fujita教授与Yoshitomi制药有限公司合作合成了一种新的免疫抑制剂2-amino-2-[2-(4-octylphenyl)ethyl]-1,3-propanediol hydrochloride,并取名为FTY720.FTY720的分子式为C19H33NO2HCl,分子质量为343.94U.在各种动物实验模型中,FTY720显示出很强的免疫抑制活性和独特的药理学作用,而且毒副作用小,能与多种常规免疫抑制剂产生协同效应.
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P27kip1蛋白在肾母细胞瘤中的表达及其意义
P27kip1是由Polyak等[1]在1994年用TGF-β和细胞接触抑制导致的静止细胞Mvllu抽提物中发现的一分子量为27KD的热稳定蛋白.人P27kip1基因定位于12p13,它的表达产物P27kip1蛋白能通过抑制细胞周期素依赖性的蛋白激酶(CDK)而抑制细胞周期,从而阻止肿瘤的形成.目前认为它与非小细胞肺癌、乳腺癌、结肠癌等[2-5]多种肿瘤的发生、发展、预后等生物学行为均有密切关系.我们用免疫组化方法对44例肾母细胞瘤的P27kip1蛋白的表达水平进行了检测,并分析了其与临床病理学特征和预后的关系.
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缺氧诱导因子-1与消化系肿瘤
缺氧诱导因子-1是缺氧条件下广泛存在于哺乳动物和人体内的一种转录因子,先由Semenza等于1992年在缺氧诱导的细胞核抽提物中发现,由HIF-1α和HIF-1β各两个亚单位组成.其中HIF-1α水平主要依赖于细胞间的氧供,决定了HIF-1的活性,它通过与靶基因特定序列DNA结合而调控他们的转录.这些基因包括血管内皮生长因子(VEGF)、促红细胞生成素(EPO)、诱导型一氧化氮合酶等.在肿瘤的发病及疾病的发展过程中很重要,因为它能使肿瘤更具有侵袭性,更容易发生远处转移.
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竞争PCR及其产物酶联杂交定量检测HBV DNA
我们用与野生模板等长和等效扩增的突变模板作为内参照,通过竞争PCR对HBV基因进行扩增，并引入微反应板酶联杂交技术对扩增产物定量分析。 1. 资料与方法：(1)HBV DNA标准品：质粒pADR-1 DNA 经BamH I酶切线性化后精确定量。(2)PCR2.1-WS319和PCR2.1-MS319质粒：均由长征医院感染科实验室（简称本室）构建。(3)HBV DNA阳性血清抽提物（10份）本室冻存。(4)竞争PCR：在0.2ml薄壁PCR反应管内，每管加入25μl PCR mix、引物EP1和EP2各1μl、按不同实验要求所需的各种模板，加双蒸水，使终体积为50μl。PCR扩增参数: 94℃，5min后；94℃，30s；54℃，30s；72℃，30s，共25个循环；再72℃延伸3min。(5)微反应板酶联杂交定量：由本室建立。(6)野生模板初始量的确定：采用Clementi等[1]介绍的公式: M/W=M'/W'。(7)统计学方法用Student's t检验。
