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甲状腺肿瘤cyclin E蛋白与PCNA免疫组化的定量研究
近年来,随着人们对细胞周期的研究深入,人们逐渐认识到细胞周期的调控异常与细胞癌变密切相关,细胞周期蛋白(cyclin)及其依赖性激酶(CDKs)形成的复合物是细胞周期的核心调控装置[1],在cyclin家族中,cyclin E是其中较重要的一种[2],其含量异常不仅将导致细胞周期的调控失常,也与肿瘤细胞的增殖、发展相关.Wang以Western Blot法研究38例结直肠癌,发现35例癌组织的cyclin E水平显著高于癌旁粘膜,并同时平行应用增殖细胞核抗原(PCNA)测定增殖指数,发现41%的病例中增殖指数也同时增高,提示cyclin E可作为结直肠癌组织的又一细胞增殖指标.我们利用免疫组化和图像定量分析研究cyclin E在甲状腺"正常"与良恶性病变中的表达情况,并同时平行检测PCNA的表达,将两者对比分析,旨在探讨cyclin E与PCNA在甲状腺肿瘤中的相关性及cyclin E的异常表达.
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DNA图像定量分析对星形胶质细胞瘤的预后判定
星形细胞瘤的病理形态表现复杂,仅从形态学角度判断预后较困难.本研究采用定量图像分析和流式细胞光度术,对80例星形细胞瘤的保留标本进行了DNA定量分析,辅以对患者临床资料的随访调查,以探讨星形细胞瘤的DNA含量与其预后的相关性.
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牙髓牙本质复合体纤维粘连蛋白的免疫组织化学研究与定量分析
目的研究纤维粘连蛋白在牙髓牙本质复合体内的表达,探讨其分布与功能间的关系. 方法免疫组织化学染色与图像定量分析.结果纤维粘连蛋白免疫反应(-IR)普遍存在于牙髓、前期牙本质和成熟牙本质的牙本质小管与成牙本质细胞突起,以成牙本质细胞层,牙髓血管与神经周围为丰富.冠髓和冠部牙本质纤维粘连蛋白的积分光密度分别为:0.49±0.33,0.50±0.29;线密度分别为:38.44±20.7,19.34±18.72;体密度分别为:24.56±10.8,44.52±28.5. 结论纤维粘连蛋白-IR不仅见于牙髓与前期牙本质,而且也见于成熟牙本质的牙本质小管与成牙质细胞突起,它对维持牙髓牙本质复合体各结构的正常位置,形态和防止炎症扩散可能发挥了重要作用.
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显微成像分析技术在中性粒细胞运动及吞噬功能研究中的应用
目的:使用转盘式激光共聚焦显微镜及显微图像处理软件对中性粒细胞的运动及吞噬功能进行分析与评估.方法:使用Percoll分离液分离小鼠骨髓中性粒细胞,用PE荧光标记后与FITC标记的酵母聚糖颗粒(Zymosan)混匀,置于转盘式激光共聚焦显微镜下进行多通道时间序列成像.使用Volocity和ImageJ分析中性粒细胞的运动及吞噬相关参数,包括形态变化、运动轨迹、伪足振荡、结合吞噬指数,得出时间序列下各项参数的变化趋势.结果:中性粒细胞在受到Zymosan诱导后趋化作用明显,大部分细胞在短时间内发生极性化,在40分钟内能快速结合Zymosan,行使吞噬功能.结论:使用显微成像技术结合图像处理分析技术可准确、定量地分析中性粒细胞运动及吞噬功能,直观快速地对中性粒细胞的生理学状态进行初步评估.通过这项技术,得到正常生理状态下中性粒细胞对Zymosan的快速响应情况,为今后中性粒细胞相关功能学研究提供了参考依据.
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凋亡相关基因bcl-2与bax在人食管鳞癌中的表达
目的:探讨bcl-2及bax基因在我国食管鳞癌中的表达特点,研究其在食管癌变中的可能作用.方法:应用原位杂交技术、流式细胞术及免疫组化方法对81例食管鳞癌中bcl-2及bax基因的表达进行检测,并应用图像分析技术对原位杂交及免疫组化结果进行定量分析.结果:bcl-2 mRNA在正常食管上皮无表达,在癌旁上皮主要是上皮近基底部细胞中呈阳性表达.食管鳞癌细胞胞质可见明显的bcl-2 mRNA表达.图像定量分析显示bcl-2mRNA表达与分化程度有显著相关性(灰度值37.88±11.40vs 23.03±8.71,19.90±4.33,6.60±3.36,P＜0.05;44.89±15.26 vs 23.03±8.71,19.90±4.33,6.60±3.36,P＜0.05).Bcl-2蛋白在食管鳞癌中表达随癌组织的分化程度降低其表达显著增高并且在不同分化组间差异显著(F=8.738,P＜0.01).Bax蛋白在食管鳞癌细胞中都有表达,但各组间均无显著性差异.结论:在食管鳞癌中凋亡相关基因bcl-2,bax表达异常增高,尤其是抗凋亡基因bcl-2可能在食管鳞癌癌变及浸润过程中起着重要作用.
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郁金类连续切片组织形态的计算机三维重建与显示图鉴
目的：为计算机辅助生药学教学和科研提供新的三维图像技术和资料。方法：采用三角形面元及NURBS(非均匀有理B样条)曲面重建算法并借助SGI三维实时图形卡，实现郁金类中药形态计算机三维重建与动态显示。运用计算机图像定量分析系统，测定郁金类中药有关形态学参数。结果：开发建立了郁金类中药三维重建模型图像及其形态学参数系统。结论：计算机三维重建与显示在生药学和解剖学教学和科研中科学可行，具有良好的应用前景。
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用涂片和石蜡包埋组织切片进行肿瘤细胞核DNA图像定量分析结果的比较*
石蜡包埋组织进行肿瘤细胞核DNA图像定量分析技术对于恶性肿瘤的早期诊断及其恶性程度和预后的评价具有参考意义[1].目前所用的方法有切片法和单细胞涂片法两种[2,3].前者简便易行,不破坏组织结构,但由于切片所致的细胞不完整而欠精确;后者准确性高,但操作步骤多,且缺少组织学背景,因而各有其优缺点.不同组织学类型的肿瘤,其细胞体积差别较大,对两种方法检测结果的影响不同,因此有必要比较两种方法对不同类型肿瘤的检测结果的差异,分析其产生原因,并评价在细胞体积不同的肿瘤中进行DNA图像定量分析的两种方法的可靠性和适用范围.笔者通过选择两种肿瘤体积差别较悬殊的肿瘤组织,经切片法和涂片法检测肿瘤细胞核DNA含量和倍体(C)参数,进行了初步探讨.
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抗独特型抗体NP30对血吸虫病虫卵肉芽肿及肝纤维化的调节作用
目的研究单克隆抗独特型抗体NP30主动免疫对血吸虫病虫卵肉芽肿及肝纤维化的影响.方法实验组ICR小鼠腹腔注射NP30 100μg/次,连续免疫3次,对照组腹腔注射SP2/0腹水.尾蚴攻击感染后第4、8、12、16、20和24周分别处死小鼠剖取肝脏,用VG(Van Gieson)组织化学染色,I型胶原、Ⅲ型胶原和纤维连接蛋白(FN)免疫组织化学染色,应用计算机图像分析系统对肝脏虫卵肉芽肿体积和虫卵肉芽肿内的胶原沉积进行定量测定.结果尾蚴攻击感染第12周后,实验组虫卵肉芽肿的体积明显小于对照组,虫卵肉芽肿细胞组分与对照组明显不同,出现两种不典型肉芽肿.VG染色显示实验组虫卵肉芽肿内胶原的平均光密度值明显小于对照组.免疫组织化学显示实验组虫卵肉芽肿内I型胶原、Ⅲ型胶原及FN含量均比对照组低.结论 NP30接种可能诱导体液和细胞两种保护性免疫,对血吸虫病虫卵肉芽肿具有负调节作用,对血吸虫性肝纤维化有明显的抑制作用.
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核抗原单克隆抗体Ki-67在原发性皮肤T细胞淋巴瘤分类中的表达
Ki-67作为识别存在于增殖细胞周期中除G0期细胞外的所有期中核抗原的单克隆抗体,与细胞周期密切相关,是细胞增殖的标志之一,已经被广泛地应用于测定各种肿瘤的增殖活性.原发性皮肤淋巴瘤(primary cutaneouslymphoma,PCL)是以皮肤损害为原发或主要表现的一组异质性、极为复杂的恶性淋巴增殖性疾病,其中皮肤T细胞淋巴瘤(cutaneous T-cell lymphoma,CTCL)占80%以上,各类型的预后有很大的差别.本文就Ki-67的免疫组化表达在原发性皮肤T细胞淋巴瘤分类中的意义进行初步探讨.
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PET显像中的校正技术
在PET显像数据采集过程中,不可避免地受到很多物理因素影响,如探测效率的不均匀性、死时间、光子衰减、散射、偶然符合、辐射衰变等.要保证图像重建的质量和图像定量分析的精确度,就必须在图像重建之前对上述影响因素进行校正.本文主要介绍PET显像过程中的校正技术.
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图像定量在耳鼻咽喉疾病分析中的应用
纤维喉镜和鼻内窥镜在临床上应用已经相当广泛.我科自拥有纤维喉镜和鼻内窥镜后,即将其应用于病变范围的估计,但却没有一个量化的指标.2002年以来,我科使用了计算机软件对声带新生物(肿块)及鼓膜穿孔进行了初步测量.发现它对于临床诊断和指导手术有很大的帮助,现报道如下.
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超声图像定量分析对乳腺良、恶性肿瘤的诊断价值
目的 研究乳腺良、恶性肿瘤超声诊断量化方法.方法 对手术确诊的良、恶性乳腺肿瘤各10例的原始超声图像的灰度特征进行提取,利用Matlab 7.0图像处理函数及算法编程计算两组图像的4个灰度特征参数(灰度均值M、灰度标准差V、扭曲度S、熵H),对比分析各参数在2组样本之间的差异.结果 良、恶性乳腺肿瘤患者超声图像的灰度均值M、灰度标准差V、扭曲度S均存在显著性差异,分别为60.30±11.77 vs 82.64±5.35、27.49±4.67 vs 31.89±3.38、0.20±0.05 vs 0.85±0.22.结论 超声图像定量分析能量化乳腺良、恶性肿瘤超声图像的特征,M、V、S具有作为乳腺良、恶性肿瘤超声诊断量化指标的价值.
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人前磨牙牙髓牙本质复合体的增龄变化
目的:研究人前磨牙牙髓牙本质复合体的增龄性变化,探讨牙衰老和老年牙病的形态学基础.方法:收集健康人前磨牙,按年龄分组,然后脱钙,石蜡包埋,切片,HE染色,光镜观察与图像定量分析.结果:随年龄增加,牙髓牙本质复合体钙盐大量沉积,牙髓体积缩小,牙髓内细胞、血管、牙本质小管和牙髓体密度减少;牙髓内结缔组织纤维与细胞外基质体密度增加,各年龄组间具有显著性差异.结论:随年龄增加,牙髓牙本质复合体的生物活性成分减少,非生物活性成分增加.
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MMP-2在声带息肉中的表达
目的 探讨声带息肉的发病机理,了解MMP-2在声带息肉发病机理中的作用,为临床防治声带息肉提供理论依据.方法 选取经病理诊断确诊,且排除其他声带病变的声带息肉患者标本35例为实验组.取正常声带组织标本18例为对照组.所有标本经HE染色后,进行MaxVisionTM免疫组织化学染色,用PBS(磷酸盐缓冲液)代替一抗作阴性对照,并行计算机图像定量分析.结果 在正常声带中,MMP-2的表达较弱,而在声带息肉组织中的上皮细胞、成纤维细胞、炎性细胞、和血管内皮细胞表达较强.声带息肉组MMP-2阳性单位均值[(30.57±7.18)高于正常声带组(16.14±4.33),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 在声带息肉的病理生理方面发挥着重要作用,参与了组织结构的重塑.选择性抑制MMP-2可望成为声带息肉病人的一种新的治疗方案.
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鳞癌与脂溢性角化病DNA倍体图像定量分析
目的对脂溢性角化病(SK)及侵袭性癌进行DNA定量分析,以回顾性探讨两者之间的关系.方法应用HI-CI真彩色病理图像分析仪对9例SK、16例鳞癌(SCC)进行DNA倍体图像分析.结果 SCC多呈现C5、＞C5,SK多呈现C3-4,但1例SK组织病理示增生活跃,DNA倍体分析出现少量(7.8%)的＞C5细胞,与SCC比较差异显著(P＜0.01),提示部分染色体已发生了质变,有癌变潜在可能.结论如临床上遇到SK有增大趋势,需取材做组织病理及DNA含量分析,对预测潜在的癌发生有重要价值.
