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昆明山海棠种子检验规程研究
目的 研究昆明山海棠种子检验规程.方法 参照农作物种子质量检验规程对昆明山海棠种子扦样、种子净度、真实性、吸水特性、种子质量、含水量、生活力、发芽率等进行研究,建立起了昆明山海棠的种子质量检验规程并对30份样品进行检测.结果 种子质量采用百粒法,昆明山海棠千粒重为6.01～11.81 g;种子含水量为8.21％～9.81％;生活力测定采用TTC法:在70℃恒温避光条件下,种子在0.05％TTC溶液中染色8h.结论 本规程适用于昆明山海棠种子检验.
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昆明山海棠人工栽培技术研究
昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum(Lévl.)Hutch为卫矛科多年生落叶攀援藤本,以根入药.具有祛风除湿、活血通络、消肿止痛及杀虫解毒等功能,现代药理研究表明其有抗炎、免疫抑制、抗生育、抗肿瘤、抗菌活性,用于治疗类风湿性关节炎、慢性肾炎、麻风病、白血病、肿瘤以及多种皮肤病等症.
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昆明山海棠联合环孢素A防治小鼠急性移植物抗宿主病
移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)是影响异基因造血干细胞移植患者长期生存和生活质量的重要因素之一.临床常用的治疗包括糖皮质激素、环孢素A等免疫抑制剂,副作用大、费用高.昆明山海棠(tripterygium hypoglaucum hutch,THH)是一种中药免疫抑制剂,具有肾上腺皮质激素类疗效但无激素类副作用,停药后无反跳和戒断症状,且价格低廉.本研究拟将其应用于小鼠清髓性异基因骨髓移植模型中,以观察其是否有预防aGVHD的作用,通过测定受鼠血浆INF-γ、IL-4、IL-10浓度来探讨其可能的作用机制,并观察其是否能够减少CsA的用量.
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昆明山海棠内生真菌ThF11化学成分抗菌杀线虫作用的研究
目的：研究昆明山海棠[Tripterygium hypoglaucum （Levl．）Hutch]内生真菌化学成分及其抗菌杀线虫活性。方法分离、纯化内生真菌 ThF-11，利用基因测序对分离的昆明山海棠内生真菌进行鉴定。应用层析法和波谱法对其代谢产物进行分离纯化、结构鉴定。分别采用生物活性测定法、抑菌圈法和试管法测定杀线虫和抑菌活性。结果经ITS 鉴定昆明山海棠内生真菌 ThF-11为简青霉（Penicillium simplicissimum），波谱法鉴定化合物结构为 Penicillic acid [1]、2，4-dimethoxy-6-methylphenol[2]和5（6）-dihydropenicil-lic acid[3]。杀线虫活性显示化合物[1]随着时间、浓度增加活性逐渐增强，且对大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均具有较强的抑菌活性。结论首次从内生真菌 ThF-11获得3个化合物，且化合物[1]具有较强的抑菌、杀线虫的生物活性，值得进一步开发应用。
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昆明山海棠联合局部封闭治疗口腔扁平苔藓46例
别为95.7%、82.6%,2组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 昆明山海棠联合局部封闭治疗口腔扁平苔藓有较好的疗效,是治疗口腔扁平苔藓较为有效的方法.
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昆明山海棠与雷公藤急性毒性试验对比研究
目的:对比昆明山海棠与雷公藤乙醇提取液对小鼠的急性毒性.方法:灌胃给药后观察两药对小鼠的毒性反应、死亡时间、死亡率和脏器病理改变.结果:昆明山海棠和雷公藤乙醇提取液的LD50分别为34.84 g/kg和 16.31 g/kg.给予大剂量昆明山海棠(65.6 g/kg·d)和雷公藤(26.88 g/kg·d)后,肉眼见小鼠肝脏颜色变为灰白色,表面呈细颗粒状.光镜下肝细胞肿胀、胞浆内有大小不等的空泡以及数量不等的细胞凋亡.结论:昆明山海棠乙醇提取液的毒性小于雷公藤乙醇提取液.
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遗传性肾炎1例
患者男,20岁.因腰痛、尿检异常1年入院.1年前5公里越野后患者觉腰痛,但无血尿、尿痛与浮肿,亦无发热、皮疹及关节痛.当地医院查尿蛋白+++、RBC+++,予昆明山海棠、及PSS等治疗效果欠佳.患者近视已10年,听力减退3年,上颌窦炎1年余.
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昆明山海棠对小鼠迟发型超敏反应的免疫抑制作用
目的 探讨昆明山海棠(THH)对小鼠迟发型超敏反应(DTH)的免疫抑制作用.方法 将2、4二硝基氟苯诱导的昆明种小鼠迟发型超敏反应动物模型随机分为五组,昆明山海棠低、中及高剂量组分别予THH 1、2、4g/(kg·d),地塞米松组予2mg/(kg·d)地塞米松,对照组予生理盐水,均用灌胃器灌饲,给药体积按0.4 mL/10 g.自致敏前1d开始,每天1次,连续6d,再于诱发前2h灌药1次.观察左右耳重量差及单一核细胞浸润数.结果 THH低、中、高剂量组左右耳重量差分别为(22.3 ±3.56)、(18.1±1.37)、(14.5 ±2.37) mg,地塞米松组为(2.8±1.48)mg,对照组为(21.8±3.36) mg;THH低、中、高剂量组单一核细胞分别为(1 237.8±178.25)、(936.9±36.95)、(467.7±37.09)个/mm2,地塞米松组为(132.7±20.82)个/mm2,对照组为(1 236.5±160.54)个/mm2;THH中和高剂量组与生理盐水组比较均有显著性差异(P均＜0.01),THH低、中及高剂量组与地塞米松组比较均有显著性差异(P均＜0.01),且随着THH剂量的增加,免疫抑制表现逐渐增强,表现出一定的量效关系.结论 THH提取液对DTH具有免疫抑制作用,作用效果与剂量有一定的量效关系.
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昆明山海棠提取物预防冠脉介入术后再狭窄的新研究进展
冠心病是21世纪严重危害人类健康的常见病,经皮腔内冠状动脉介入治疗(PCI)是目前冠心病血运重建的主要方法 ,尽管随着雷帕霉素、紫杉醇、西莫罗斯等药物涂层支架的临床应用,有效降低了支架内再狭窄的发生率.然而药物涂层支架(DES)亦存在支架内血栓形成的风险,抗PCI术后支架内再狭窄药物的研究开发依然是目前PCI研究中的核心问题.昆明山海棠(THH)具有抗炎、抗免疫、抑制平滑肌细胞增殖和抑制损伤血管新生内膜形成等作用,在PCI术后再狭窄中具有一定的应用前景.
关键词： 昆明山海棠 经皮腔内冠状动脉介入治疗 再狭窄 -
雷公藤和昆明山海棠植物根中卫茅醇的提取方法及鉴别研究
目的 从雷公藤和昆明山海棠植物根中提取卫茅醇并鉴别比较,寻找雷公藤和昆明山海棠植物在临床疗效上具有相似性的原因.方法 采用95%乙醇为溶剂,对雷公藤和昆明山海棠植物根中进行热提取.其提取液经浓缩后的相对应部位进行薄层层析检查对照、化学成分的预测、熔点的测定及红外吸收光谱的测定来判别两种植物的差异.结果 两种植物均含有相同的卫茅醇.结论 雷公藤和昆明山海棠在临床疗效上具有相似性,主要原因是这两种植物具有相同的化学成分.
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昆明山海棠总生物碱提取新工艺的研究
目的:昆明山海棠总生物碱提取新工艺的研究.方法:采用大孔吸附树脂法.结果与结论:用0.5%酸水提取,H型大孔吸附树脂吸附昆明山海棠总生物碱,提取量可以达到500 mg*kg-1,生物碱在50,25 mg*kg-1对正常大鼠棉球肉芽肿有明显的抑制作用(P＜0.001),对角叉菜胶致正常大鼠足跖肿胀在6 h后有抑制作用.
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昆明山海棠的研究概况
对昆明山海棠的化学成分、药理研究、临床应用以及不良反应等作了较为详细的综述报道.
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应用昆明山海棠预防小鼠急性移植物抗宿主病
移植物抗宿主病(GVHD)是影响异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)患者长期生存和生活质量的重要因素之一,而临床常用的环孢素A、糖皮质激素等免疫抑制剂的不良反应大,费用高.昆明山海棠(THH)是一种中药制剂,具有肾上腺皮质激素类疗效,但无激素类不良反应.本研究将其应用于小鼠清髓性异基因骨髓移植模型中,观察其是否有预防急性GVHD(aGVHD)的作用.
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基质分散固相萃取法同时检测13种不同产地昆明山海棠中有机磷和拟除虫菊酯类农药残留
目的:建立了基于基质分散固相萃取技术的昆明山海棠中氯氰菊酯、溴氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、敌敌畏、马拉硫磷、对硫磷、乐果、甲拌磷、毒死蜱、甲胺磷、甲基对硫磷等13种农药的多成分残留分析方法.方法:前处理中以乙腈为提取溶剂、采用弗罗里硅土为分散净化剂的固相萃取方法,并利用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)在多反应离子监测模式(MRM)下进行检测,外标法定量.结果:在0.25～250 ng·mL-1添加水平范围内,13种农药的平均回收率为76.2％～105.5％;相对标准偏差(RSD,n=5)为1.1％～13.1％;方法检出限(LOD)在0.02～7.60μg·kg-1范围内;定量限(LOQ)在0.05～25.95 μg·kg-1范围内.结论:该方法快速简便、稳定可靠,适用于有昆明山海棠中机磷和拟除虫菊酯类农药残留的检测.
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昆明山海棠总生物碱体外抗肿瘤作用的研究
目的:探讨昆明山海棠(THH)总生物碱对10种不同肿瘤细胞系的抑制作用,并筛选出敏感的肿瘤细胞系.方法:采用XTT法和SRB法对THH总生物碱体外抗肿瘤作用进行初步筛选.结果:THH总生物碱对10种不同肿瘤细胞系生长均有明显的抑制作用,而且对不同肿瘤细胞系抑制作用存显著差异和选择性.尤其是对人T细胞白血病细胞系MOLT-4、人T淋巴母细胞白血病细胞系Jurkat、小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10、人结肠腺癌细胞系SW-480抑制率均＞80%,其对应的IC50分别为13.59,24.10,30.05,31.39 mg·L-1.结论:THH总生物碱体外具有广泛,高效的抗肿瘤活性,可进一步探讨其作为抗肿瘤药物研究开发的价值.
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2005-2013年云南省蜂蜜中毒事件时空聚集性分析
目的 分析2005-2013年云南省蜂蜜中毒事件的时空分布特征,为开展针对性控制措施提供科学依据. 方法 对2005-2013年云南省各县(区)蜂蜜中毒事件报告数据进行描述性分析,并使用SaTScan软件进行空间聚集性分析.结果 2005-2013年云南省共报告蜂蜜中毒事件12起,导致75人中毒,18人死亡;所有中毒事件均发生于5-8月,其中11起发生在西部地区,仅1起发生在东部地区.所有中毒事件中,仅2013年西部地区的一起经孢粉学鉴定确认中毒原因为昆明山海棠毒蜜,其余11起事件原因均不明确;SaTScan单纯空间扫描探测到一个在云南西部以北纬24.8度、东经97.9度为中心,半径为251.2 km的聚集区,该聚集区发生蜂蜜中毒的危险性显著高于其他地区(RR=49.85,LLR=15.57,P＜0.05). 结论 云南西部地区存在季节性蜂蜜中毒的高发区,中毒原因可能与昆明山海棠等有毒蜜源植物有关,应采取针对性措施.
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昆明山海棠对实验性肾炎的干预作用及机制
目的 探讨昆明山海棠治疗大鼠系膜增生性肾小球肾炎模型的有效性及作用机制.方法 应用兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清(ATS)复制大鼠MsPGN模型,将实验大鼠分为对照组(A组)、模型组(B组)、昆明山海棠治疗组(C组)、泼尼松治疗组(D组)、昆明山海棠与泼尼松联合治疗组(E组),分别于第1、2及4周测定肝肾功能.并采用免疫组织化学、RT-PCR技术及计算机图像分析系统,观察各组肝肾功能变化、系膜区TGF-β1蛋白及肾皮质mRNA表达以及Smad3mRNA表达的变化.结果 各组在观察期间均无明显肝肾功能不良.模型组系膜区TGF-β1蛋白表达及肾皮质TGF-β1,Smad3 mILNA表达增高,3个治疗组TGF-β1蛋白表达及肾皮质TGF-β1和Smad3mRNA表达均较模型组显著降低(均P＜0.01),以联合治疗组降低明显.结论 昆明山海棠可能是通过抑制TGF-β1的表达,改善肾小球系膜的增殖,达到减少蛋白尿,延缓肾功能的进展.其作用机制可能通过TGF-β1/Smads通路.昆明山海棠与泼尼松有协同作用,两种药物合用治疗效果更明显,且不增加肝肾损害的发生.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 昆明山海棠 转化生长因子-β1 smad3 -
类风湿关节炎大鼠模型的构建及昆明山海棠对大鼠佐剂性关节炎的干预研究
目的:制作和比较佐剂性关节炎大鼠模型及胶原性关节炎大鼠模型,选择外观及病理变化更明显的模型来观察昆明山海棠制剂对其的干预作用.方法:构建AA和CIA大鼠模型,采用肿胀度评分法观察造模前后大鼠关节变化情况,造模后28 d分离关节滑膜、切片HE染色,观察滑膜炎症,ELISA方法检测血清中细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)水平;观察昆明山海棠对大鼠关节肿胀度、血清细胞因子(IL-1β、TNF-α、TGF-β)及关节滑膜组织炎症的影响.结果:从造模后16 d开始AA组和CIA组的关节肿胀度升高(P＜0.01);AA组在出现肿胀的时间及程度上与CIA组比较有显著差异(P＜0.01);造模后28 d,两个模型组血清中IL-1β、TNF-α水平升高,TGF-β水平下降(P＜0.01),同时,两个模型组间也存在显著差异(P＜0.05);造模后,AA组滑膜组织有大量炎性细胞浸润、纤维素样渗出及出现丰富的血管翳;经过昆明山海棠的干预,高、中剂量组关节肿胀得到明显改善(P＜0.01);昆明山海棠高、中剂量能抑制血清中IL-1β、TNF-α水平及提高TGF-β水平(P＜0.01).结论:AA大鼠模型与CIA模型比较出模时间更早,症状更明显;昆明山海棠能改善AA大鼠关节肿胀度,抑制血清中细胞因子的水平,对AA大鼠有明显的治疗作用.
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昆明山海棠根皮化学成分研究
目的:对昆明山海棠根皮进行化学成分研究.方法:利用各种色谱方法进行化学成分分离,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构.结果:分离得到11个化合物,分别鉴定为:4’-O-(-)甲基-表没食子儿茶素(1)、3,4-二甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷(2)、3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷(3)、(2R,3R)-3,5,7,3’,5’-五羟基黄烷(4)、2-O-deacetyleuonine (5)、tripfordine C(6)、peritassine A(7)、hypoglaunine C(8)、雷公藤春碱(9)、雷公藤晋碱(10)、雷公藤碱(11).结论:化合物1～6为首次从该植物中分离得到.
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HPLC法同时测定昆明山海棠中雷公藤吉碱和雷公藤次碱的含量
目的:建立HPLC法同时测定昆明山海棠中雷公藤吉碱和雷公藤次碱的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法测定含量,使用Phenomsil C18色谱柱,检测波长230 nm,以乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钾水溶液(42∶58)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温25℃.结果:通过方法学考察,雷公藤吉碱进样量在164.96～1649.60 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,r1 =0.9997;雷公藤次碱在81.76 ～2044.00 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,r2 =0.9998,两者的平均回收率分别为97.8％ (RSD =4.9％,n =6)、93.7％ (RSD =3.6％,n=6).结论:该方法准确、重复性好,适用于昆明山海棠中两种生物碱的含量测定.
