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蛞蝓提取物对肺癌细胞P53及端粒酶基因hTERT表达的影响
目的:了解蛞蝓提取物对肺癌细胞P53、端粒酶基因hTERT表达的影响.方法:体外培养肺癌细胞株,用免疫组化SP法进行检测.结果:蛞蝓提取物可抑制肺癌A549细胞端粒酶基因hTERT表达,并改变突变型P53表达.结论:蛞蝓提取物对肺癌细胞的抑制作用有可能是通对抑制突变型P53及端粒酶基因hTERT表达而实现的.
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二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体抑制人肺癌细胞生长的作用研究
目的 研究二硫键稳定的人源性抗bFGF双链抗体(ds-Diabody)对人肺癌A549细胞的体内外增殖抑制作用.方法 利用镍离子亲和层析和离子交换层析的方法纯化得到ds-Diabody,间接ELISA检测其抗原结合活性,CCK-8法检测ds-Diabody对人肺癌A549细胞的增殖抑制作用,Western blot分析其作用于肿瘤细胞的机制,Transwell检测其对肿瘤细胞迁移侵袭的影响.建立裸鼠皮下移植瘤模型,记录各处理组裸鼠皮下移植瘤的体积及裸鼠体质量变化.免疫组化法检测肿瘤组织CD31和LYVE1的表达情况,初步探讨抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体的抗肿瘤机制.结果 成功纯化得到具有抗原结合活性的ds-Diabody.CCK-8结果显示,纯化的ds-Diabody可剂量依赖性地抑制人肺癌A549细胞株的增殖.Western blot结果表明ds-Diabody能有效阻断与bFGF相关的MAPK和Akt通路.Transwell结果表明ds-Diabody可以显著抑制A549细胞的迁移及侵袭.裸鼠体内试验中,ds-Diabody抗体显著地抑制了肿瘤的生长,抑制率为86.54％.免疫组化的结果显示ds-Diabody抗体处理组肿瘤组织中微血管密度和淋巴管密度均有下降.结论 抗bFGF的人源性ds-Diabody抗体可有效地抑制人肺癌A549细胞的生长.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 二硫键稳定的双链抗体 人肺癌细胞 血管新生 淋巴管新生 -
异鼠李素对肺癌的影响及其抗肿瘤机制的初步探讨
目的:探讨异鼠李素体外对人肺癌细胞A549、体内Lewis肺癌增殖的影响及初步研究其抗肿瘤机制.方法:以不同浓度异鼠李素加入体外培养的A549细胞中,用MTT比色法,细胞计数法,细胞生长曲线的测定、细胞形态学变化、克隆形成、3H-TdR掺入实验等观察测定体外抗肿瘤活性,用流式细胞仪、基因组DNA片段分析,彗星电泳、免疫组化等观察其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;采用Lewis细胞C57BL/6鼠移植瘤,观察药物对移植瘤的影响.
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托盘根醇提物的抑瘤作用和对免疫功能的影响
肿瘤患者均有不同程度的免疫功能低下.提高患者的免疫力有利于肿瘤治疗,且可防止恶生肿瘤的愈后复发.托盘为蔷薇科悬钩子属植物,其根具有祛风利湿之功效.本研究旨在探讨托盘根醇提物(RCE)的抗肿瘤作用和对免疫功能的影响.体外抑瘤实验表明,RCE对S 180及人肺癌细胞SPC-A-1均有杀伤作用,IC50分别为257.7和293.7ug /ml.电镜观察,RCE可使S180细胞核缩小,胞质增加,细胞膜模糊不清.体内实验表明,一定剂量RCE对小鼠移植型肿瘤S180,EAC,HepA及Lewis肺癌四种实体型瘤株均有明显抑制作用,抑制率与剂量呈明显相关.并且RCE可延长EAC及HepA腹水型肿瘤小鼠生命率(P<0.01).另外,RCE 400,800mg/kg对小鼠Lewis肺癌肺转移有抑制作用,可减少转移癌结节数目,抑制转移后肿瘤生长(P<0.01).免疫研究,有效剂量的RCE对荷瘤小鼠, 可增加其炭粒廓清能力和DNCB反应,提高溶血素水平及溶血空斑形成能力,表明RCE对肿瘤机体细胞免疫和体液免疫均有提高作用.以上结果显示,一定剂量的RCE具有抗癌作用,且能增强机体免疫力,这有助于肿瘤患者的治疗和康复,因此可望做进一步的研究开发.
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异鼠李素及黄酮对人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7的影响
目的:探讨新药异鼠李素及黄酮能否抑制人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7增殖及其初步研究其机制.方法:以不同浓度异鼠李素、黄酮加入体外培养的A549、MCF-7细胞中,用MTT比色法,细胞计数法,细胞形态学等观察测定体外抗肿瘤活性,用流式细胞仪等观察其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用.结果:新药异鼠李素及黄酮对人肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7有明显抑制作用,其作用与肿瘤细胞凋亡有关.结论:异鼠李素及黄酮是一种有较好前景的抗肿瘤的新型中药,诱导细胞凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一.
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IκBα基因转染抑制人肺癌细胞株H460成瘤性的实验研究
背景与目的核因子κB(NFκB)参与多种肿瘤的发生发展,抑制其活性可能抑制肿瘤细胞生长.本研究旨在观察抑制NFκB对人肺癌细胞株H460生长的影响,探讨其抑制或杀伤肿瘤的分子机制.方法体外实验:用表达抑制性κB(IκBα)或LacZ的腺病毒(AdIκBα或AdLacZ)转染H460细胞,测定其生长和凋亡情况,并检测细胞培养上清液中caspase 3和TNFα表达.体内实验:用预先转染AdIκBα/AdLacZ的H460细胞建立肿瘤模型,以观察基因转染对成瘤性的影响;对未转染的H460肿瘤小鼠,于瘤内注射AdIκBα/AdLacZ/PBS,观察小鼠肿瘤的生长.留取小鼠肿瘤标本进行免疫组化染色,检测p65、p53和VEGF表达.结果①转染AdIκBα可抑制肿瘤细胞生长,促进凋亡发生;②成瘤性抑制实验显示接种30 MOIAdIκBα转染的H460细胞的小鼠中77.8%在6周内无肿瘤形成,而30 MOI AdLacZ转染组仅12.5%(P=0.012);③对已建立的H460肿瘤,瘤内注射30 MOI AdIκBα可明显延缓肿瘤生长(P＜0.05);④免疫组化染色提示各实验组的p53表达无显著性差异,而VEGF表达在30 MOI AdIκBα转染组明显减少,转染AdIκBα抑制了H460细胞的p65活性.结论AdIκBα转染阻滞人肺癌细胞H460的NFκB活性,抑制肿瘤细胞的成瘤性,并延缓肿瘤生长.体内外实验显示AdIκBα转染不仅通过诱导凋亡而控制细胞生长,同时可下调血管形成相关基因如VEGF表达而抑制肿瘤发生发展及可能的转移.
关键词： 核因子κB 癌形成 凋亡 血管内皮生长因子p53基因 人肺癌细胞 -
蛞蝓提取物对人肺癌细胞凋亡的影响
目的:了解蛞蝓提取物对人肺癌细胞凋亡的影响.方法:运用流式细胞光度术检测细胞凋亡,分析蛞蝓提取物对人肺癌细胞A549凋亡的影响.结果:蛞蝓提取物能够诱导肺癌A549细胞发生凋亡,其凋亡率达5.3 ～15.1％,细胞凋亡率与药物浓度成正相关.结论:蛞蝓提取物可诱导人肺癌细胞凋亡.
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α5和β1整合素亚基在肺腺癌细胞系凋亡中的作用
整合素作为细胞外基质蛋白(ECM)的受体,参与细胞的生长、增殖及凋亡的调节.当其被ECM激活后, 则可刺激细胞产生生存信号并抑制细胞凋亡.如果整合素与ECM的结合导致细胞内原癌基因的持续激活,肿瘤细胞则可不需要黏附于ECM而生长,因此, 其与肿瘤细胞的侵袭性生长及转移等密切相关 [1].
