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蚌埠地区124例RhD阴性献血者的RHCE表型及DEL型的分布与基因研究
目的 研究蚌埠地区RhD阴性献血者的RHCE表型,DEL的表型、分布和RHD基因的外显子存在情况.方法 通过使用抗-D (IgM)试剂筛查出RhD(IgM)阴性献血者;再使用3个厂家或不同批号的抗-D(IgG)试剂,经间接抗人球蛋白试验(IAT)确认RhD阴性样本;然后采用吸收放散试验筛选其中的DEL型,同时检测其表现型,并对15份DEL型样本采用PCR方法进行基因扩增和产物分析.结果 124例RhD阴性献血者中ccee表型为77例(62.1％),Ccee为38例(30.6％),CCee为8例(3.3％),ccEe为1例(0.1％);DEL型共15例占RHD阴性样本的12.1％,其中ccee 2例,Ccee 11例,Ccee 2例;并检测出15例DEL型样本的3、4、5、6、7、9、10共7个特异性外显子.结论 蚌埠地区RhD阴性献血者中Rh表型存在多态性,ccee表型的比例达62.1％;DEL型的比例低于相关报道,DEL型具有全部RHD基因外显子.
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RhD初筛阴性患者RhD变异体检测分析
目的 对本地区RhD初筛阴性患者进行RhD变异体检测分析.方法 随机收集直接抗人球蛋白试验的RhD初筛阴性标本63例,按其血浆中是否含有抗D分成抗体阳性组和抗体阴性组,然后采用三批抗D-微柱凝胶抗人球蛋白法进行弱D确认试验和Del鉴定试验.结果 抗体阴性组的弱D确认试验阳性率为3.3％(2/60),其中弱D型占1.7％(1/60),部分D型占1.7％(1/60);抗体阳性组的弱D确认试验阳性率为0(0/3),未发现弱D型与部分D型.抗体阴性组Del鉴定总阳性率为95.0％ (57/60),其中三批抗D试剂的阳性率分别为88.3％(53/60)、91.7％(55/60)和68.3％(41/60),批间差异有统计学意义(P＜0.01);抗体阳性组Del鉴定总阳性率为100％(3/3),其中三批抗D试剂的阳性率分别为66.7％(2/3)、100.0％(3/3)、33.3％(1/3).结论 本地区部分RhD初筛阴性患者实际为弱D型或部分D型,临床有必要对RhD初筛阴性患者进行弱D确认;绝大多数RhD初筛阴性患者实际属于Del型,但不同来源的单克隆试剂对Del的检出情况差异较大;三批抗D试验均阳性的Del患者仍有可能产生免疫性抗D可能,临床患者似无进行Del型鉴定的必要.
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20例输注Del型红细胞的RhD阴性受者的回顾性分析
目的 探讨Del型红细胞是否诱导RhD阴性受者产生同种免疫反应.方法 用吸收放散试验鉴定Del型血液,对临床输注Del型红细胞的患者进行追踪,采集输血后1周~1年的患者血液标本,RhD抗原初筛阴性的标本采用间接抗球蛋白试验(IAT)进行阴性确认.对患者血清采用凝聚胺法、间接抗球蛋白试验和微柱凝胶法筛查不规则抗体,然后对筛查阳性标本用谱细胞进行不规则抗体鉴定,并进行效价测定.结果 采集到输注Del红细胞的RhD阴性受血者样本20例,男性10例,女性10例,女性均有孕产史.Del型受血者5例,男性2例,女性3例,输注Del红细胞后未发生输血反应,不规则抗体筛查阴性.真实RhD阴性受血者15例,男性8例,女性7例,8例男性和5例女性患者输注Del红细胞后未发生输血反应,不规则抗体筛查阴性;2例妊娠女性抗-D为阳性,未出现输血反应.结论 Del型个体未检出抗-D,产生抗-D的个体未检出Del型.Del红细胞导致RhD阴性受者产生同种免疫反应的概率可能很低.
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1例Rh弱D15型基因型分析
Rh血型系统是目前被国际输血协会确认的30个红细胞血型系统中具复杂性和多态性的血型系统,在临床输血中的重要性仅次于ABO血型.RhD抗原表型除正常D阳性和阴性表型外,还存在多种D变异型.D变异体主要包括弱D(weak D)、部分D(partial D)和DEL型[1].为避免在血清学上RhD变异体被误定Rh阴性,采用DNA基因分型技术鉴定D变异型变得越来越重要.
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南昌地区RhD阴性献血者DEL型检测及分析
目的 分析南昌地区RhD阴性献血者中DEL表型的分布及RhD基因情况.方法 对经间接抗人球蛋白试验确认的RhD阴性献血者进行抗原分型;采用酸吸收放散方法从中筛选DEL型进行分型,并与其它地区进行比较;应用PCR-SSP技术检测DEL献血者RhD基因.结果 107例RhD阴性献血者中ccee 53例(49.53％),Ccee 37例(34.58％),CCee 11例(10.28％),CcEe 3例(2.80％),ccEe 3例(2.80％);检出DEL型30例,占比为28.04％,除上海外与其它地区检出比例无统计学差异;表型分布为Ccee 23例(76.67％),CCee 7例(23.33％),与各地区DEL型献血者表型分布无统计学差异;送检的5例DEL型标本第9外显子均有1227G>A突变,其中杂合子4例(DEL/d),纯合子1例(DEL/DEL).结论 南昌地区DEL型献血者表型分布与其它地区相似,RhD 1227A是南昌地区DEL表型个体的重要遗传标记.
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RH放散D血型RHD1227A的鉴定
目的:对1例孕妇的Rh血型进行鉴定.方法:应用血清学方法鉴定该例样本的Rh血型及红细胞血型抗体鉴定.PCR-SSP进行RHD基因检测.结果:该孕妇RhD抗原盐水介质阴性,经3批间接抗人球蛋白方法确认1批RhD弱阳,其余2批RhD为阴性.Rh表型为Ccee.PCR-SSP检测RH基因含有10个外显子,含有RHD1227A基因.结论:RHD1227G＞A突变导致先证者红细胞D抗原表达减弱,因而表现为放散D型.
关键词： Rh血型 RHD1227A基因 DEL型 -
恩施土家族苗族自治州RhD阴性患者DEL型调查分析
目的:对本地区RhD阴性患者的DEL型分布情况进行调查分析.方法:采用Rh血型抗原检测卡对患者进行RhD初筛,改良间接抗球蛋白试验(IAT)进行RhD阴性确认,吸收放散-微柱凝胶法检测DEL型,采用单克隆的IgM类C、c、E、e抗血清进行RhCE表型的检测.结果:初筛和IAT确认为RhD阴性的192例标本中,吸收放散-微柱凝胶法检出DEL型阳性36例(18.75％).192例患者RhCE表型以ccdee为主,占54.69％(105/192);其次为Ccdee,占31.25％(60/192).其中,DEL阳性患者以Ccdee为主,占69.44％ (25/36),CCdee次之,占25％ (9/36);DEL阴性患者以ccdee为主,占66.67％(104/156),Ccdee次之,占22.44％(35/156).DEL阳性和DEL阴性患者间RhCE表型经x2检验分析,x2=74.111,P＜0.01,二者间差异有统计学意义.结论:本地区RhD阴性人群中存在一定比例的DEL阳型,并且DEL阳性和DEL阴性人群间RhCE表型也存在明显差异,为保障临床输血安全,对RhD阴性的献血者进行DEL型鉴定有重要意义.
关键词： 吸收放散-微柱凝胶法 RhD血型 DEL型 RHCE表型 -
洛阳地区无偿献血者Rh血型临床相关高频抗原分布调查
目的:准确估计洛阳地区Rh血型系统Rh表型频率和估算Rh单倍型频率.方法:回顾性统计356 041例献血者的RhD检测数据,采用血清学检测10 373例RhD阳性献血者的CcEe抗原,Rh基因频率和单倍型频率的计算采用方根法[1].结果:洛阳地区献血者中RhD阳性率为99.54％,其中弱D检出率约为0.02％；阴性率为0.46％,其中Del检出率约为0.03％.Rh抗原基因和单倍型频率为:D:0.932 4,d:0.0676,DCe:0.615 4,DcE:0.2704,dce:0.051 5,Dce:0.034 3,dCe:0.0122,DCE:0.013 2,dcE:0.002 3,DCE:0.000 6.弱D以表型Dc-cEe、DCcee为主,Del型以表型DccEe、DCCee为主,RhD阴性献血者表型以dccee、dCcee为主.结论:精确地估算出了献血者中RhD抗原阴性分布频率,并准确计算出RhDCcEe抗原的基因频率和Rh单倍型频率,对一些稀有的Rh弱D型,Del型其D抗原弱表达与C、E抗原有关联.需要制定标准的弱D定型方法和合理的输血策略,来减少抗球蛋白试验对弱D抗原的漏检.
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柳州地区Rh(D)阴性无偿献血者表型分布情况的调查
目的:为了了解柳州地区Rh阴性无偿献血的情况,确保临床输血安全.方法:通过直接抗球蛋白试验和间接抗球蛋白试验,分别检测无偿献血者红细胞上有无D抗原,利用吸收放散试验检测Rh阴性无偿献血者弱Del型,用IgM抗-E、抗-e、抗-C、抗-c分型血清分别检测Rh(D)阴性者红细胞的Rh表型.结果:抗-D血清检测阴性的无偿献血者中仍能检出44例Del型,占Rh(D)阴性无偿献血人群的18.03％.200例Rh阴性无偿献血者中ccdee的表型频率为63％、Ccdee的表型频率为26％、CCdee的表型频率为5.50％；ccdEe的表型频率为4.50％,ccdEE的表型频率为1％.结论:排除Rh阴性无偿献血中的Del型,并对Rh阴性个体开展C、c、E、e抗原筛查工作,建立完整的Rh阴性无偿献血者资料库,确保临床用血安全.
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Del孕妇的家系调查1例
在输血领域中,Rh血型是除了ABO血型外十分重要的血型系统,Rh血型系统十分复杂,已发现有49种抗原,与输血关系为密切的抗原主要有D、C、c、E、e.Del是D抗原的变异体,具有极弱的D抗原性,不能够通过间接免疫球蛋白试验检出,而只能够通过吸收放散试验检出.笔者对我院发现的1例Del孕妇进行了家系调查,现报告如下.
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52例RhD阴性患者D变异型和抗-D抗体检测分析
Rh血型系统是人类红细胞血型中复杂的血型系统,主要包括D、E、C、c、e 5种抗原,D抗原的免疫原性强,其在红细胞上质和量的改变可导致弱D、部分D和DEL型,统称为D变异型.
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Rh阴性孕妇产前抗-D抗体阳性率分析
目的 综合分析不同状况Rh阴性孕妇抗-D抗体的发生率.方法 采用微柱凝胶卡方法鉴定Rh(D)血型以及测定孕妇血清抗-D抗体,PCR方法检测RHD1227A等位基因鉴别我国汉族Rh阴性个体中的一种变异体"DEL型"和真实Rh阴性表型.结果 共观察196例Rh阴性孕妇,抗-D检出率14.3%(28/196);其中56例病历记录无妊娠史,抗-D阳性率5.4%(3/56);77例有妊娠史(有生育史除外),抗-D阳性率7.8%(6/77);余63例有生育史,抗-D阳性率30.2%(19/63).所有样本中检出变异体DEL型41例,均未检测到抗-D抗体.排除DEL按真实Rh阴性计算(155例),抗-D阳性率18.1%(28/155);无妊娠史者阳性率6.4%(3/47);有妊娠史者阳性率上升为9.7%(6/62);有生育史者抗-D阳性率则达41.3%(19/46).结论 近半数有生育史的真实Rh阴性孕妇发生D抗原同种免疫反应,DEL型孕妇不因妊娠和生育产生抗-D抗体.
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RhD（－）无亲缘关系献血者Du和Del变异型分布调查
目的：调查RhD（－）无亲缘关系献血者Du和 Del变异型分布情况。方法对盐水法初筛为RhD （－）无亲缘关系献血者采用间接抗球蛋白试验检测Du型，采用吸收放散法检测Del型。结果初筛为 RhD （－）327例标本中，检出Du 20例，占6．12％，Del型51例，占15．59％，确证 RhD （－）256例，占78．29％。确证 RhD （－）献血者中ccee表现型多，占48．32％，其次是Ccee ，占23．55％；Du型中 ccEe占3．98％，其次是Ccee ，占1．53％；Del型中Ccee占10．70％，CCee占1．83％。结论常规检测 RhD （－）的献血者应采用更为敏感的试验确证是否为Du型或Del型。为保障输血安全，Du型和Del型献血者应作 RhD阳性看待，而作为受血者则应视为RhD阴性。
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献血者Rh(D)阴性DEL表型调查研究
目的 通过对Rh(D)阴性献血者的试验检测,了解DEL表型.方法用盐水法、木瓜酶法3家试剂检测RhD(-)及其RhCcDE 4个因子;阴性者用谱细胞进行抗体筛查;红细胞用抗-D作吸收放散试验,观察试验结果;吸收前、后抗-D抗体检测其效价.结果无偿献血者16 935例,其中Rh(D)阴性75例,占4.42%;吸收放散试验:75例经吸收放散试验检测,阳性标本47例、占62.67%, 阴性28例;吸收前、后抗体效价比较:吸收后抗体效价不变的53例,效价下降的有22例.结论在鉴定Rh(D)阴性中,DEL表型应用血型血清学吸收放散的方法正确鉴定;在临床输血中,含有弱D与DEL的个体,反复多次输血后就有产生抗体的可能.含有弱D与DEL的个体,作为供者应该当成阳性,作为受者应该当成阴性,防止因输血产生免疫性抗体,引起输血反应.
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中国汉族RHD1227A等位基因的频率分析
目的 了解中国汉族人群RHD1227A等位基因频率.方法 对890 403名汉族无偿献血者,通过盐水法和间接抗人球蛋白试验测定D抗原,PCR-序列特异性引物检测RHD1227A等位基因以及个体RHD基因数目或合子型,遗传统计方法分析基因频率.结果 Rh(D)表型检测,2385人为Rh阴性,108人为D抗原弱阳性表型(包括弱D型和部分D型),其余887 910人为Rh阳性.Rh阴性个体中,检测到516人携带RHD1227A,其中467人为RHD1227A/d,49人为RHD1227A/RHD1227A纯合子;D抗原弱阳性个体中,检出2人为RHD1227A/RHD+;随机抽检1073名Rh阳性样本,检出8人为RHD1227A/RHD+.RHD1227A在整体人群中的基因频率为0.004 036;根据其在Rh阴性个体中检出率,推算在整体人群的基因频率为0.006 682;根据报道的DEL表型频率,遗传分析RHD1227A等位基因的人群频率为0.007 884.结论 综合考虑RHD合子型测定、Rh阳性个体中RHD1227A的检出率、以及DEL表型血清学检测结果,对基因频率计算的影响,RHD1227A在中国汉族人群中的等位基因频率在0.004 036～0.007 884之间.
关键词： RHD1227A等位基因 DEL型 等位基因频率 -
人类RHD基因及RhD蛋白的研究进展
人类RHD基因及RhD蛋白多态性均较强,在输血医学中的重要性仅次于ABO血型抗原.RhD蛋白具有很强的免疫原性,能够引起新牛儿溶血病和溶血性输血反应.RhD蛋白存在多种变异体,主要包括弱D、不完全D和Del型.本文就人类RHD基因、RhD蛋白及其变异体的相关内容作一综述.
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血清学检测柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体结果分析
目的 研究柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体分布.方法 425例经盐水法初筛为RhD阴性献血者标本采用IAT试验确认弱D,对IAT阴性的血样进一步采用吸收放散试验检测D“型和真实D阴性.采用单克隆lgM抗-C,c,E和e血清以盐水法检测Rh表型.参照文献方法计算RhD阴性献血者Rh基因频率、单体型频率和Rh表型期望值,并进行Hardy-Weinberg吻合度检验.结果 425例RhD初筛阴性献血者中共检出D变异体99例(23.29％),其中弱D18例(4.24％),Del型81例(19.05％);确认真实D阴性326例(76.71％).18例弱D表型分布:Ccee 9例(50.00％) ＞CCee 4例(22.22％) ＞ccEe 3例(16.67％) ＞CCEe 1例(5.56％)=ccee 1例(5.56％).81例Del型表型分布:Ccee 47例(58.03％) ＞CCee 17例(20.99％) ＞ccee 11例(13.58％) ＞ccEe 5例(6.17％) ＞ccEE 1例(1.23％).326例真实D阴性表型分布:ccee 199例(61.04％) ＞Ccee 83例(25.46％) ＞CCee 22例(6.75％) ＞ccEe 16例(4.91％) ＞ccEE 3例(0.92％) ＞CcEe 2例(0.61％) ＞CCEe 1例(0.31％).本文Rh表型的观察值与期望值差异无统计学意义(P＞0.05),Hardy-Weinberg吻合度检验良好.单体型频率特点:cde(0.696 7)＞ Cde(0.261 6)＞ cdE(0.0417)＞ CdE(0.000 0).基因频率特点:c(0.739 5)＞C(0.260 5),e(0.960 7) ＞E(0.039 3).结论 柳州地区RhD初筛阴性献血者D变异体检出率较高,将弱D和Del型献血者认定为RhD阳性,可提高临床输血安全性.
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临沂地区RhD初筛阴性献血人群分子遗传背景研究
目的 通过对临沂地区RhD初筛阴性献血者的研究,了解其分子遗传背景.方法 2011年1月～10月采集无重复54 458人份全血,其中盐水法初筛RhD阴性标本241份.对初筛RhD阴性标本运用本室建立的SSP-PCR作基因检测分型,并对未确定型别携带RHD的标本进行基因测序.结果 临沂地区献血人群中RhD阴性比例为0.44％,241例初筛RhD阴性标本检测到1～10外显子全缺失169例,2～9外显子缺失22例,1227G＞A突变38例,845G＞A突变5例,3～6外显子缺失5例,RHD(711DelC)1例,DVa (Hus)1例.分子生物学试验确定的Del型共38例,占初筛RhD阴性的15.77％(38/241).结论 临沂地区RhD初筛阴性献血人群中RHD基因存在多态性,其中RHD1227A等位基因为临沂地区Del型的遗传标志性基因.
关键词： RhD阴性 DEL型 RHD 1227A等位基因 -
成都地区献血人群RhD阴性个体遗传学背景研究
目的 RhD阴性存在多种变异体,通过研究成都地区RhD阴性献血者,了解其遗传背景.方法 2009年6-11月采集的74 947人份全血中获得盐水法初筛阴性标本318例,采用间接抗球蛋白试验(IAT)筛选部分D和弱D,对IAT阴性的标本采用吸收放散试验,筛查Del型,采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)检测各种变异D基因型.检测的Del等位基因包括RHD(M285)、RHD(IVS3+1)、RHD(IVS1+1)、RHD(1227A)、RHD(Del EX9)、RHD(M1I)、RHD(R1OW)、RHD(L84P).吸收放散试验阳性标本使用Del DNA分型试剂盒筛查,未分出型别的标本检测RHD基因1-7和9-10外显子,并对检测到的各种变异D以及疑难标本进行测序分析.结果 318份盐水法初筛阴性标本中检出IAT阳性标本3例,弱D15 2例,部分D(RhD ⅥⅢ)1例.成都地区献血人群中RhD阴性比例为0.42%,表型dccee(56.19%)和dCcee(32.06%)比例高.对可获得的303例IAT阴性标本进行微量吸收放散试验,发现阳性71例.通过Del DNA分型试剂盒检测,RHD(1227A)型57例、RHD(M11)型1例、无法确定为已知的Del型13例.无法确定的13例标本通过检测RHD基因1-7和9-10外显子,发现11例部分或全部缺失上述外显子,2例含有完整的RHD基因.34例吸收放散阴性含有C或E抗原标本,经检测RHD基因1-7和9-10外显子及1227A,发现RHD(1227A)型9例、部分或全部缺失型25例.血清学试验和分子生物学试验确定的Del型共69例,占IAT筛查RhD阴性的22.77%(69/303).结论 成都地区常规血清学筛查RhD阴性献血人群中RHD基因存在多态性,RHD 1227A等位基因是Del型的主要基因类型.吸收放散试验检测Del准确率偏低.
关键词： RhD阴性 IAT 吸收放散试验 DEL型 RHD(1227A)等位基因 -
德阳地区RhD初筛阴性献血者的分子遗传学研究
目的 分析德阳地区RhD初筛阴性献血者的分子遗传学背景.方法 采用血清方法对204例德阳市初筛RhD阴性标本进行C、c、E、e表型鉴定,并用间接抗球蛋白试验鉴定部分D和弱D表型.同时运用PCR-SSP作基因检测分型,并对未确定型别携带RHD的标本进行基因测序.结果 在204例初筛RhD阴性标本中,检测到RHD1～10外显子全缺失130例,2～9外显子缺失15例,1227G＞A突变52例,3G＞A突变2例,3～6外显子缺失1例,365 C＞T突变1例,内含子2上1 G＞A突变2例.经分子生物学试验确定的Del型占初筛RhD阴性的26.3％.结论 德阳地区RhD初筛阴性献血人群中RHD基因存在丰富的多态性,其中Del型所占比例较高.
关键词： RhD阴性 DEL型 RHD 1227A等位基因
