首页 > 文献资料
-
男性年龄与精液常规参数及精子CFTR表达的关系研究
目的 探讨男性年龄与精子质量及精子中CFTR表达的关系.方法 选取2011年3月～8月于笔者医院生殖中心门诊就诊的精液常规参数正常的健康可育男性293例,按照年龄分为3组,A组20～29岁,105例;B组30 ～ 39岁,156例;C组≥40岁,32例.进行精液常规分析及精液形态学分析,精子CFTR免疫荧光染色.分析男性年龄与精子质量及CFTR表达间的关系.结果 3组精液:体积分别为A组2.56 ±0.95ml,B组2.45±0.98ml,C组2.28±0.85ml,前向活动力分别为A组77.91％±17.42％,B组77.71％±14.94％,C组77.68％ ± 15.71％,正常形态率分别为A组7.04％±4.52％,B组6.36％±4.31％,C组5.40％ ±4.22％,精子浓度分别为A组(106.78 ±65.33)×106/ml,B组(111.85±65.70)×106/ml,C组(134.59±75.30)×106/ml,精子总数分别为A组(291.3±187.9)×106,B组(256.9±143.4)×106,C组(264.4±170.4)× 106,CFTR表达率分别为A组34.58％,B组28.32％,C组23.15％,所有常规参数3者间比较差异均无统计学意义(P＞0.05),组间两两比较差异亦无统计学意义(P＞0.05);相关分析显示精子体积、向前活动力、正常形态率、浓度、总数及CFTR表达率均与年龄无关(P＞0.05).结论 随着年龄的增长,精液体积、前向活动力、正常形态率呈下降趋势,精子浓度呈升高趋势,精子总数无明显变化,但均与年龄无相关性.
-
先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因启动子区域基因突变检测
目的 探讨先天性双侧输精管缺如患者囊性纤维化跨膜转导因子(CFTR)基因启动子区域的基因突变情况.方法 采用PCR技术结合DNA直接测序的方法检测2013年5月至2015年1月于中山大学附属第三医院诊断明确的11例先天性双侧输精管缺如汉族患者及50名健康已生育汉族男性的CFTR基因5'端ATG上游3.8 kb的启动子区域的突变情况,并在NCBI和Cystic Fibrosis Mutation Database在线比对,利用Transfac在线预测及系统发生足迹法联合已经报道的转录因子作用元件,探讨所检测之碱基变异与启动子调控作用的关系.结果 11例汉族先天性双侧输精管缺如患者中发现c.-8G＞C(1例)、c.-966T＞ G(7例)2个已知CFTR启动子区域的多态性位点及c.-195C＞A(1例)1个单核苷酸位点变异,其中,c.-195C＞A位于物种间启动子保守区域.结论 除外多态性位点,在中国汉族先天性双侧输精管缺如患者CFTR基因启动子区域检测到一个单核苷酸变异,其与疾病发生的关系仍需进一步行生物学实验验证.
-
苯丙氨酸-508介导胞质膜结构域与CFTR三维结构的相互联系影响结构组装和通道功能
囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)是ATP结合盒(ABC)转运体家族的一员,其在多种动物上皮细胞的离子转运方面起重要的调节作用,为盐的分泌和重吸收提供了限速的一步.当CFTR在人体中缺失或存在功能缺陷时,上皮组织的水盐代谢失衡,从而导致呼吸道上大分子分泌物的积聚和慢性感染,引起囊性纤维病.
-
冠心康对大鼠缺血再灌注损伤心肌氯通道ClC-2、ClC-3、CFTR表达的影响
目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血再灌注损伤(MIRI)心肌细胞氯通道ClC-2、ClC-3、CFTR表达的影响.方法 40只SD雄性大鼠随机分为4组:假手术组、MIRI模型组、冠心康组、盐酸地尔硫卓组.冠心康按生药13 g/(kg·d)灌胃给药,盐酸地尔硫卓按30 mg/(kg·d)灌胃给药,假手术组和MIRI模型组分别于相同时间给予等容积的生理盐水灌胃,术前灌胃7 d,每日1次.采用结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30 min,再灌注2 h复制大鼠MIRI模型,造模成功后,在MIRI结扎线以下区域至心尖取材,运用RT-PCR法检测ClC-2、ClC-3、CFTR mRNA表达水平和蛋白质印迹法检测ClC-2、ClC-3、CFTR蛋白的表达.结果氯通道相关基因ClC-2、ClC-3、CFTR mRNA相对表达量在MIRI模型组明显升高,冠心康组和盐酸地尔硫卓治疗组mRNA相对表达量则明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.01);氯通道相关基因ClC-2、ClC-3和CFTR蛋白相对表达量在MIRI模型组明显升高,冠心康组和盐酸地尔硫卓治疗组蛋白表达量则明显下降,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论冠心康对大鼠MIRI心肌组织具有明显的保护作用,其作用机制可能与调控心肌细胞氯通道相关蛋白的表达有关.
-
中国健康人群CFTR基因多态性研究-长春和南京两个地区人群的比较
目的 研究和比较了长春和南京两个不同地区健康人群中囊性纤维化跨膜调节因子(CFTR)基因的多态性,并进一步探讨了中国健康人群中CFTR的功能特点以及对于CFTR相关疾病的易感性.方法 基因组DNA从全血中提取出来.CFTR基因的DNA片段采用PCR的方法进行扩增.Poly-T和TG重复序列直接用自动测序仪(ABI300)进行测定.M470V由HphI限制性内切酶检测.结果 等位基因T7的分布频率在长春(0.938)和南京(0.927)人群中是高的.T5仅在7个长春人和3个南京人中出现.等位基因TG11和TG12,在长春(TG11 0.5,TG12 0.453)和南京(TG11 0.345,TG12 0.609)人群中多见.等位基因V470的分布频率,长春人群(0.633)高于南京(0.500)(P＜0.05).在研究的两组人群中有三种主要的单倍型T7-TG11-V470,T7-TG12-M470和 T7-TG12-V470,其中T7-TG11-V470在长春(0.439)人群中是常见的,而T7-TG12-M470在南京(0.5)人群中是常见.结论 长春和南京分别属于我国南北两个不同地区,他们的CFTR基因多态性背景存在着一定的差异.这两个人群的CFTR基因型均可造成CFTR功能的下降.
-
CFTR在小细胞肺癌中表达及其意义的研究
目的 探讨CFTR在小细胞肺癌中的表达及其意义.方法 取吉林省肿瘤医院的手术标本15例,患者均为男性,术前均未进行过放射治疗和化学治疗,年龄为30～60岁.所取标本入10%甲醛固定,常规石蜡包埋和切片,切片厚度为5 μm,进行HE染色和CFTR免疫组织化学染色.结果 癌细胞排列成条索状,大部分癌细胞不表达CFTR,少部分癌细胞表达CFTR,且这些癌细胞体积相对癌巢周边的癌细胞体积大.具有细胞分裂相的癌细胞不表达CFTR.结论 CFTR的表达可能参与小细胞肺癌细胞的生长和分化.
-
CFTR突变基因l不影响先天性梗阻性无精子症患者ICSI治疗的成功率
为探讨囊性纤维化跨膜转运调节物(Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator,CFTR)基因突变是否影响先天性梗阻性无精子症患者单精子卵浆内注射(Intracytoplasmic Sperm Injection,ICSI)治疗的成功率,本文对3例先天性梗阻性无精子症CFTR突变基因携带者和18例CFTR突变基因非携带者进行了ICSI的治疗.结果表明:先天性梗阻性无精子症CFTR突变基因携带者与CFIR突变基因非携带者ICSI治疗时受精率、卵裂率和妊娠率无显著性差异.结论:CFTR突变基因并不影响先天性梗阻性无精子症患者ICSI治疗的成功率,故这些患者在ICSI治疗前夫妻双方更有必要行CFTR突变基因的筛查.
-
用于治疗囊性纤维化的药物Lumacaftor
囊性纤维化(CF)是一种严重威胁生命的遗传性疾病,该病系由CF跨膜传导调节蛋白(CFTR)的缺陷所引起.正常的CFTR为1种存在于细胞膜上的氯离子通道蛋白,氯离子可通过此通道蛋白自由进出细胞,细胞也可分泌1层稀薄的黏液以保护气道上皮.若cftr基因出现G551D突变,CFTR的通道就不能正常开放,氯离子也就无法自由地进出细胞;而90％的CF患者的cftr基因存在另1种突变,即F508del突变(CFTR中508位苯丙氨酸的缺失),若发生这种突变,CFTR就不能正常折叠,其在合成之后极易被降解,导致细胞上的CFTR数量大幅减少,使得氯离子同样不能自由进出细胞.
-
续断种子方干预无精子症模型小鼠睾丸的精子发生
目的 观察续断种子方对无精子症模型小鼠睾丸精子发生发育过程中c-kit/CFTR表达的影响,探索中药干预睾丸生精功能的影响.方法 按照随机数字表法分为对照组,模型组,麒麟丸组,续断种子方高、中、低剂量组.采用白消安和环磷酰胺建立无精子症小鼠模型.各治疗组给予相应药物灌胃,对照组和模型组小鼠给予等体积生理盐水,每日1次,连续8周.检测小鼠附睾的精子质量、睾丸组织显微超微结构、睾丸组织c-kit/CFTR蛋白的表达.结果 模型组偶见散在精子,睾丸生精上皮不同程度破坏,精原细胞、精母细胞线粒体空化明显,部分线粒体脊消失,核膜局部破损,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞散在;续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组小鼠附睾精子浓度较高,睾丸生精上皮见精子、精子细胞、精母细胞,线粒体空化少,可见丰富的高尔基体、内质网结构,c-kit/CFTR免疫组化棕黄色阳性表达的细胞辉度大.与对照组相比,模型组α一葡糖苷酶、果糖浓度明显有差异性(P＜0.05);与模型组相比,续断种子方高剂量组、麒麟丸组、对照组丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、α-葡萄糖苷酶的活性、果糖浓度与模型组有差异性(P＜0.05).结论 续断种子方可以有效促进睾丸生精上皮的精子发生,增加精子的数量,达到“以通为用,和营生精”之效.
-
双侧输精管缺如等三种不育患者CFTR基因突变筛查
目的 探讨国人先天性双侧输精管缺如(CBAVD)、特发性少精子症(idiopathic oligospermia,IO)及特发性无精子症(idiopathic azoospermia,IA)患者CFTR基因有无突变,从而为患者行辅助生殖胚胎种植前是否需行常规的遗传学诊断提供依据.方法 运用银染聚合酶链-单链构象多态性技术对25例CBAVD, 40例IO, 25例IA患者周围静脉血白细胞DNA的CFTR基因的2、3、4、5、7A、8、9、10、11、12、13A、14a、14b、15B、19B、 20、21、23共18个外显子进行检测. 结果 上述患者CFTR基因的18个外显子均未发现异常单链条带或位移.结论 本组所检测的CFTR基因突变与国人精子发生尚无明确的相关性,国人在实施辅助生殖胚胎种植前是否需常规行CFTR基因突变检测有待进一步研究.
-
CFTR对前脂肪细胞增殖和分化的影响
[目的]探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用.[方法]分别采用CFTR基因敲除小鼠(CFTR KO)4、8周龄及同周龄野生型对照鼠,分离内脏脂肪组织前脂肪细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测增殖分化转录因子表达变化.采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素(DMI)诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型,采用免疫印迹(Western blot)技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化;并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒,采用免疫印迹,实时荧光定量PCR技术,MTT检测和油红O染色,观察基因干预CFTR后对DMI诱导3T3-L1细胞增殖及分化的影响.采用高脂饮食肥胖小鼠模型,荧光定量PCR技术检测内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子和CFTR基因水平表达.[结果]CFTR基因敲除鼠内脏前脂肪细胞指标Pref-1,增殖因子CyclinD1,分化转录因子PPARγ,C/EBPα表达明显降低(P<0.05).DMI诱导3T3-L1细胞分化早期,CFTR的表达增加(P<0.05);转染CFTR沉默病毒后,抑制DMI诱导的3T3-L1细胞增殖(C/EBPβ,C/EBPδ,CREB,KLF4)及末端分化指标(SREBP-1,PPARγ,C/EBPα)表达,而转染CFTR过表达病毒后,促进DMI诱导的3T3-L1细胞增殖及末端分化.高脂饮食喂养小鼠2,4周,高脂饮食组内脏前脂肪细胞增殖分化转录因子(PPARγ,C/EBPα,C/EBPβ,C/EBPδ,SREBP-1,FABP4)表达升高,CFTR基因表达升高(P<0.05).[结论]CFTR可能通过调控前脂肪细胞增殖及分化影响脂肪组织功能.
-
高胆固醇饮食致石大鼠胆囊黏膜和平滑肌囊性纤维化跨膜传导因子蛋白表达的改变
目的 观察胆固醇结石形成过程中胆囊黏膜和平滑肌囊性纤维化跨膜传导因子(CFTR)蛋白表达的改变,探讨CFTR蛋白在胆固醇结石形成过程中的作用.方法 28只雄性豚鼠随机分为正常饮食30 d组(A组,n=7)、正常饮食60 d组(B组,n=7)和高胆固醇饮食30 d组(C组,n=7)、高胆固醇饮食60 d组(D组,n=7).A、B组给予正常饮食喂养,C、D组给予2％的高胆固醇饲料喂养.实验动物剖腹后,测量胆囊大长径(L)和相互垂直的两横径(W,H),以Dodds公式V=0.52 × L × W × H(cm3)计算空腹胆囊体积(FV),穿刺抽吸胆囊内全部胆汁,测量空腹胆囊胆汁量(FB),并留取部分胆囊胆汁测定胆汁中胆固醇(TC)含量.切开胆囊,观察豚鼠胆囊的结石形成情况,于胆囊体部切取适量胆囊组织,用免疫组化S-P法和免疫荧光法检测胆囊组织CFTR氯通道的表达,用Western blot法检测胆囊组织CFTR的表达变化.结果 A、B组豚鼠无胆囊结石或胆泥形成,C组有2只豚鼠观察到有胆泥或胆囊结石形成,D组有4只豚鼠观察到有胆泥或胆囊结石形成.C组FV、FB、TC均高于A组;D组FV、FB、TC均高于B组;D组FV、FB、TC均高于C组,差异有统计学意义(P＜0.05).C组CFTR蛋白的表达量低于A组;D组CFTR蛋白的表达量低于B组;D组CFTR蛋白的表达量低于C组,差异有统计学意义(P＜0.05).CFTR蛋白表达于胆囊黏膜及平滑肌,黏膜上皮细胞顶膜表达多;阳性表达率正常组高于胆固醇组,并随致石时间的延长而降低.结论 高胆固醇饮食致石过程中胆囊黏膜及平滑肌CFTR的表达量降低,CFTR可能通过影响胆囊黏膜分泌、吸收及平滑肌运动而参与了胆囊结石的形成过程.
-
基因芯片筛选的CFTR基因作为雌激素依赖型子宫内膜癌预后标志物的研究
目的 探讨雌激素依赖型(I型)及非雌激素依赖型(Ⅱ型)子宫内膜癌的治疗和预后判断的指导意义.方法 为了进一步明确两型子宫内膜癌在基因表达上的水平差异,找到雌激素调节基因,6张Affymetrix全基因组基因芯片被利用分析两者之间在表达谱上的差异,结合生物信息分析.结果 CFTR(ABCC7),一个ABC家族多药耐药(MDR)基因,明显在I型子宫内膜癌中高表达.而且,该基因是一个雌激素调节基因,其主要受雌激素诱导表达.结论 CFTR基因可以作为该型的生物学标志物之一,区分Ⅱ型子宫内膜癌.另外,CFTR作为一个多药耐药基因,涉及了多药耐药.因此,cFTR表达的变化可以作为治疗预后的标志之一.
-
CFTR基因在鼻息肉发病机制中的研究进展
有关鼻息肉发病机制的研究已由过去感染、变态反应延续为以鼻腔外侧壁微环境,或称诱发空间,为基础,从基因水平上研究单个细胞肥厚,某些细胞不同于恶性肿瘤的有限性增殖,腺上皮囊性纤维化,神经缺如,血管活动失调控等.
-
CFTR对大鼠急性肺动脉梗塞时急性肺损伤的调节作用
目的:探讨CFTR对大鼠急性肺动脉栓塞时急性肺损伤肺脏水清除率的影响.方法:SPF级SD大鼠30只,建立大鼠左肺急性肺动脉阻塞模型.随机分为对照组,急性肺动脉梗阻4h和24h组,每组10只,分别测定左右肺的肺水容量,肺水清除率(AFC),应用CFTR激动剂和抑制剂进一步调节发生变化的肺水清除能力,real-time PCR方法测定CFTR蛋白mRNA在大鼠肺组织的表达.结果:急性肺动脉阻塞4h和24h组的左肺肺水清除率(AFC)明显升高,肺动脉阻塞24小时后,肺水容量上升.但保持血液灌流的右肺无明显变化.CFTR激动剂NS004调节阻塞的左肺,各组肺水清除率升高不明显,但是CFFR特异性抑制剂CFTR-inh172可降低各组已经升高的肺水清除率.Real-time PCR证实4h和24h组的左肺CFTR mRNA水平轻度升高.结论:CFTR可能参与在大鼠急性肺动脉栓塞时肺水清除率的变化.
关键词： 肺动脉栓塞 肺水清除率(AFC) 肺水肿 CFTR -
姜黄素对急性肺动脉栓塞大鼠肺损伤及CFTR表达的影响
目的：观察姜黄素对急性肺栓塞大鼠肺损伤的保护作用及对CFTR表达的影响。方法：大鼠分为假手术组，模型组，姜黄素（150mg/kg）﹢APE组。制备左肺动脉结扎模拟急性肺动脉栓塞模型。进行血气分析，检测AFC及肺湿干比，real-time PCR方法检测肺组织的CFTR的表达。结果：与模型组比较，姜黄素升高PaO2水平，减轻AFC下降趋势，及减少肺湿干比的增加。姜黄素能提高肺组织的CFTR的表达。结论：姜黄素对急性肺动脉栓塞大鼠的急性肺损伤有保护作用，并上调CFTR的表达。
