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儿童严重急性呼吸综合征死亡1例临床特征分析
严重急性呼吸综合征(SARS)由冠状病毒引起,是一种新型传染病,具有传染性强,成人病情严重,儿童病情相对较轻等特点.广州地区已有33例儿童SARS病例报道[1],但无儿童SARS死亡病例报告,我院儿科在2003年1~5月先后收治20余例疑似SARS患儿,其中临床诊断1例转院后3 d死亡,就其临床特征和传染性特点报告如下.
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SARS-CoV E、M和N蛋白克隆、表达及抗原性的研究
目的 获得大量SARS-CoV E、M和N重组蛋白,研究其抗原性.方法 应用基因工程技术构建pGEX4T-1/SARS-CoV E、M和N大肠杆茵工程茵,表达、纯化重组蛋白,通过Western blot分析其免疫反应性.结果 通过PCR扩增获得SARS-CoV E、M、N片断;以原核表达质粒pGEX4T-1为载体,构建了原核表达重组质粒pGEX4T-1/E、pGEX4T-1/M和pGEX4T-1/N.重组N蛋白在大肠杆菌系统中以可溶性形式大量表达,分子量约为71.97 kDa.Western blot分析证实,重组N蛋白可与pVAX1-N基因疫苗免疫的小鼠血清产生免疫反应.重组E蛋白和重组M蛋白表达量极低,分子量约为35kDa和46kDa. 结论成功地构建了SARS-CoV N大肠杆菌基因工程菌,能以可溶性形式高水平地表达重组N蛋白;该蛋白具有较好的免疫反应性和抗原特异性,可能成为SARS血清学诊断的候选抗原之一.
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SARS-CoV基因疫苗的构建及免疫原性初步研究
目的 构建SAKS病毒E、M、N基因疫苗,研究其免疫原性.方法 通过PCR扩增获得SARS-CoV E、M、N基因片断,将其分别克隆入真核表达载体pVAX1,将所得真核表达质粒pVAX1-E、pVAX1-M和pVAX1-N分别肌肉注射小鼠和兔子,用ELISA法检测血清抗体,观察实验期间动物的体重变化,处死后对重要脏器进行病理检查.结果 pVAX1-E、pVAX1-M和pvAX1-N基因测序结果与基因库中公布的一致.3种基因疫苗肌肉注射免疫小鼠和兔子后均能诱导产生特异性抗SARS-CoV抗体:动物一般状况和体重变化与对照组差异无显著性;重要脏器无明显病理改变.结论 pVAX1-E、pVAX1-M和pVAX1-N疫苗能够诱导机体产生特异的体液免疫应答,具有较好的免疫原性和安全性,为SARS疫苗的研制奠定了良好基础.
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广州地区传染性非典型肺炎病原体分离结果和特性分析
目的分析从传染性非典型肺炎(SARS) 患者标本中分离到的病原体及其特性.方法将采集的SARS患者的咽漱液、咽拭子、尸解组织或尸解组织液分别接种到人胚肺细胞(HL)、狗肾细胞(MDCK)和人咽喉癌上皮细胞(Hep-2),37℃、34℃二氧化碳培养箱培养.样本原液、细胞培养阳性的上清液分别接种9日龄鸡胚羊膜腔、尿囊腔各0.2 ml,3 d后分别收集尿液、羊膜液.用1%鸡红细胞、0.75%豚鼠红细胞、人"O"型红细胞和鹌鹑红细胞做血细胞凝集试验.病变细胞用0.2%豚鼠红细胞做红细胞吸附试验.制备的病毒抗原片用恢复期患者血清做免疫荧光抗体检测,尸解肺组织作电镜检测,分离的病原体用RT-PCR方法检测,用ELISA方法检测患者急性期、恢复期双份血清IgG抗体.结果 75份样本细胞分离到13株病原体,分离阳性率为17.3%.病原体在34℃环境中生长繁殖较37℃好,而且HL较Hep-2敏感,MDCK不敏感.病原体可使人"O"型红细胞和鹌鹑红细胞凝集,而不能使鸡红细胞和豚鼠红细胞凝集.病变细胞用免疫荧光试验检测病人的血清,结果呈阳性.尸解肺组织电镜检查找到一种冠状病毒样颗粒.分离的病原体用RT-PCR方法检测可分别扩增出冠状病毒的特异基因片段.用ELISA方法检测患者恢复期血清IgG抗体阳性率为85.7%(48/56).结论近期在广州地区暴发的传染性非典型肺炎(SARS)的病原体为一种新型的冠状病毒.
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广东省传染性非典型肺炎病例的SARS冠状病毒分离株的分子生物学鉴定
目的对广东省部分传染性非典型肺炎(SARS)病例的SARS冠状病毒分离株进行鉴定,并初步建立SARS冠状病毒PCR检测方法.方法采集临床诊断为SARS病例的咽漱液标本,进行多种细胞分离培养,对出现病变的细胞分离物采用冠状病毒特异引物通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)进行扩增,并对部分扩增片段进行序列测定,应用DNASTAR软件分析比较.同时采用间接免疫荧光(IFA)和ELISA法检测上述患者血清中SARS冠状病毒IgG抗体.结果对21例SARS患者的细胞分离物进行PCR扩增,结果均阳性,其中12份患者咽漱液标本PCR扩增结果也阳性,序列测定及基因分析表明,广东省SARS病例的病毒分离株为冠状病毒,其基因序列与WHO公布的SARS基因序列一致,氨基酸序列与目前已知的冠状病毒同源性为58%~76%.同时对21例患者进行血清学检测,其中IFA检测有9例阳性,ELISA检测有12例阳性.结论从广东省部分SARS病例标本中分离的病毒株是一种新的冠状病毒,PCR检测具有早期、快速的优点.
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21世纪新发传染病--严重急性呼吸综合征
严重急性呼吸综合征(Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)又称传染性非典型肺炎(Infectious Atypical Pneumonia,IAP)是由一种新病毒--SARS冠状病毒引起的严重威胁人类健康的新发传染病,具有全球大流行的潜在可能.
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SARS的预防与控制
严重急性呼吸综合征(Severe acute respiratory syndrome,简称SARS,国内称为传染性非典型肺炎)是指由新型冠状病毒引起反肺炎为主要表现的呼吸道传染病.
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SARS实验室诊断技术
SARS的实验室诊断技术分为常规的临床检验、病原学诊断和血清学诊断.临床检验是SARS诊断的辅助手段,血清学诊断和病原学诊断为临床提供早期或确诊SARS的依据.血清学诊断是检测SARS感染后病人血清中抗SARS冠状病毒抗体反应的情况,病原学诊断是检测SARS病人体内感染病毒的情况.目前应用于检测SARS抗体的血清学方法主要有间接免疫荧光试验、酶联免疫吸附试验、中和试验、胶体金技术和斑点酶免疫技术等;用于检测SARS的病原学方法主要有组织培养技术分离SARS冠状病毒、分子生物学技术检测SARS冠状病毒核酸、电镜和间接免疫荧光技术检测病人组织或细胞培养物中的病毒等.
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SARS的流行病学特征
1 国内外流行概况1.1 全球SARS流行概况传染性非典型肺炎是一种由SARS冠状病毒引起的急性呼吸道传染病,是21世纪人类遭遇的第一种能引起世界范围内流行的新发传染病.
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中国首例中东呼吸综合征病例的实验室检测与商品化诊断试剂盒的评价
目的 对广东省首例中东呼吸综合征(MERS)病例进行实验室快速诊断,并比较2种不同品牌商品化试剂盒对中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测效果.方法 于2015年5月28日采集首例韩国输入疑似MERS病例的3份咽试子和1份血清样本,以及陆续采集50份密切接触者的咽试子样本,根据WHO和国家MERS实验室检测技术指南推荐的荧光定量PCR方法,分别使用针对upE、ORF1a、ORF1b 3个目的基因的3对引物探针开展检测.利用首例MERS病例的阳性核酸提取物分别对A、B2种商品化MERS-CoV RNA荧光定量PCR检测试剂盒的灵敏度和特异度进行评估.结果 疑似MERS病例的3份咽拭子样本同时检出upE、ORF1a、ORF1b 3个目的基因和1份血清样本同时检出upE、ORF1a 2个目的基因,均证实为MERS-CoV核酸阳性.A、B2种试剂盒检测病例的3份咽拭子样本均为MERS-CoV核酸阳性,并能检测到经10倍稀释的MERS-CoV核酸提取物,但均未能检测出病例血清样本阳性.使用国家推荐荧光定量PCR方法及A、B2种商品化试剂盒检测50份病例密切接触者的咽拭子样本的MERS-CoV核酸,结果均为阴性.结论 首次对1例输入性MERS病例进行了实验室快速诊断;WHO和国家MERS实验室诊断技术指南中的荧光定量PCR的病毒检测方法,以及A、B2种商品化试剂盒均可用于MERS-CoV感染的实验室诊断.
关键词: 中东呼吸综合征 冠状病毒 实时逆转录聚合酶链式反应 试剂盒 诊断 -
重组SARS冠状病毒N蛋白纯化与鉴定
目的分析重组 SARS- CoV N蛋白的表达,并予以纯化.方法 SDS- PAGE分析 N蛋白的表达,于自动蛋白层析系统上,用 His· BindTM柱亲和层析纯化.结果重组表达的 N蛋白存在于裂解细菌上清中,分子量大小约 49 000 u, N蛋白经亲和层析获得纯化,纯化蛋白能与病人血清反应.结论表明自动层析获得了纯化良好抗原性的 N蛋白.
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冠状病毒具有免疫原性的抗原
SARS(severe acute respiratory syndrome)冠状病毒 (CoV,coronavirus)是冠状病毒的一种新变体.对 11株 SARS-CoV的核苷酸序列和翻译的氨基酸序列分析表明均有典型的 CoV基因组结构.研究 SARS-CoV具有免疫原性的抗原对于研制疫苗、新药和了解其致病机制十分重要.
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SARS冠状病毒的形态结构与功能
本文综述了冠状病毒和 SARS-CoV的形态特点、分子结构及基本功能,描述了 SARS-CoV的生态特点,初步介绍 SARS病毒的一般概况.
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血清新蝶呤水平对SARS病情严重程度的早期评估
目的 探讨血清新蝶呤水平与SARS病程及严重程度的关系.方法 应用ELISA方法检测129例SARS病人和156例健康献血者的血清新蝶呤含量.结果 SARS病人血清新蝶呤水平在症状出现的首日即升高,129份急性期血清中新蝶呤含量平均值为(34.2±20.0)nmol/L,SARS恢复期病人及健康献血者血清中新蝶呤含量在正常范围,急性期血清新蝶呤含量是恢复期的5倍以上.SARS病人血清新蝶呤水平与发热期的长短及疾病的严重程度呈正相关.结论 血清新蝶呤水平可作为SARS严重程度的早期指征之一.
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SARS冠状病毒的病原生物学分析及其启示
严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syn-drome,SARS),俗称非典型肺炎,根据世界卫生组织(WHO)2003年5月26日的统计,全世界28个国家有SARS病例8202宗,死亡725人.
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054 新近发现的冠状病毒为严重急性呼吸综合征的主要原因
关键词: 冠状病毒 -
182 冠状病毒是严重急性呼吸综合征的一个可能原因
据报道严重急性呼吸综合征(SARS)已在香港地区流行,本研究旨在确定香港患者此病的病原体.
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冠状病毒相关性SARS肺炎社区暴发的临床发展和病毒载量的前瞻性研究
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复方感冒药物组方原则和功效
感冒通常由病毒引起,包括鼻病毒、冠状病毒、呼吸道合孢病毒及一些腺病毒等.其中鼻病毒所占比例约为1/3~1/2,造成感冒难治的原因在于感冒通常是由多个鼻病毒引起的,而非单一毒株.科学家们目前已经发现的感冒病毒株有99种,并且这些鼻病毒还在不断地变异,很难研发出感冒治愈药或疫苗,普通感冒无特效药.因此,缓解症状是治疗普通感冒的唯一有效途径!中华医学会呼吸病学分会2009年颁布的<中国咳嗽诊治指南>和ACCP推荐,感冒以对症治疗为主,多采用含有解热镇痛药、减充血剂、第一代抗组胺药及镇咳祛痰药等成分的复方制剂.
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几多抗病毒药物浮出"市"面(上)
病毒感染引起的疾病严重危害人类的健康和生命.随着艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎等危害大、发病率高、难于治愈的病毒性疾病在全球广泛蔓延以及这些疾病对现有的抗病毒药物产生耐药性,给临床治疗增加了新的难度;此外,流感病毒、冠状病毒等呼吸道病毒基因的变异,出现新的变种病毒或病毒株,多次暴发全球局部区域大范围流行,都迫切需要新的预防和治疗药物,这也促进了新药的研制与开发.