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甲减及高碘大鼠海马组织神经生长相关蛋白的表达
目的研究高碘对甲状腺激素以及甲减、高碘对脑发育临界期大鼠海马组织神经生长相关蛋白表达的影响.方法分别选用他巴唑及碘化油诱导建立的甲减及高碘大鼠动物模型,用免疫细胞化学方法结合图像分析对正常、高碘及甲减大鼠脑发育临界期海马组织神经生长相关蛋白的变化进行定性、定量研究.结果(1)甲减及高碘脑发育临界期大鼠海马结构内神经生长相关蛋白的分布趋势与正常对照组相似.表现为腔隙层、放射层及始层梯度染色,神经元胞体一般不染色.图像分析显示:甲减鼠海马CA1区GAP-43灰度值与对照组比明显升高(P＜0.01);高碘鼠同一脑区其灰度值虽低于正常对照组,但经统计学分析无显著性差异(P＞0.05).(2)高碘可引起血清甲状腺激素紊乱(T3 ↓、T4↑、T3/T4↓).结论(1)高碘可引起甲状腺机能紊乱.(2)高碘及甲减在脑发育临界期可直接或间接影响神经生长相关蛋白的表达,进而影响Go蛋白信号转导系统及第二信号系统,导致学习、记忆障碍.
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补益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β1介导A549细胞MRP1表达影响随机平行对照研究
[目的]观测补中益气汤灌胃大鼠血清对TGF-β 1介导A549细胞MRP1表达影响.[方法]血清药理学法,制备灌胃大鼠血清:使用随机平行对照方法,将20只SPF级SD大鼠,按随机数字表法分为2组,10只/组,补中益气汤组以2mL生药量5.67g/kg灌胃,空白血清组等量生理盐水,1次/d,连续3d,末次灌胃1h后,腹主动脉取血,提取上清.血清干预:取人肺腺癌A549细胞,接种于培养瓶中,37℃,5％ CO2培养箱中培养;细胞密度达70％,饥饿12h,空白组(A组)加空白血清;TGF-β3 1组(B组)加空白血清及TGF-β 1;补中益气汤+TGF-β 1组(C组)加补中益气汤血清及TGF-β 1,培养48h.观测MRP1蛋白表达(免疫细胞化学法和Western blot法)、MRP1基因表达(Realtime PCR法).[结幂]MRP1主要在细胞膜表达,各组细胞中均可见棕黄色阳性产物表达,TGF-β 1组(B组)和补中益气汤+TGF-β 1组(C组)棕黄色颗粒阳性表达量均高于空白组(P＜0.05);补中益气汤+TGF-β 1组(C组)低于TGF-β3 1组(B组)(P＜0.05);Western blot结果与组化结果一致.Realtime PCR结果为TGF-β1组(B组)和补中益气汤+TGF-β 1组(C组)基因表达水平均高于空白组(P＜0.05);补中益气汤+TGF-β 1组(C组)低于TGF-β3 1组(B组)(P＜0.05).[结论]补中益气汤血清干预TGF-β 1诱导A549细胞EMT过程,细胞中MRP1在蛋白和基因水平均降低.
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P2X4受体在大鼠神经系统的分布
目的观察P2X4受体在大鼠神经系统的分布.方法 P2X4受体特异性抗体的免疫细胞化学染色.结果 P2X4受体阳性神经元主要分布于嗅球、前扣带回皮质、梨状皮质、内侧隔核、杏仁中央核、海马CA3区、乳头体上核、脚间核、三叉神经中脑核、三叉神经运动核、孤束核、后区、穹窿下器、小脑皮质的Purkinje细胞、延髓和脊髓后角Ⅰ层和Ⅱ层、背根神经节和三叉神经节.结论 P2X4受体阳性结构广泛分布于大鼠神经系统,为ATP发挥作用提供了位点.[关建词]三磷酸腺苷;P2X4受体;神经系统;免疫细胞化学;大鼠
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人脐血间充质干细胞培养及其生物学特性的研究
目的 建立人脐血间充质干细胞体外分离培养的佳条件,并观察其生物学特性.方法 在无菌条件下抽取人脐血,用密度梯度离心的方法获得脐血单个核细胞,接种含10%胎牛血清的IMDM培养基中.对单个核细胞行贴壁培养后,进行细胞形态学观察,细胞生长、细胞周期分析及细胞凋亡检测,免疫细胞化学鉴定.结果 采用Percoll(1.073g/ml)分离的脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)大小较为均匀,呈梭形或星形的上皮样细胞.传代培养后的细胞体积较大,成纤维样细胞逐渐增多.细胞生长曲线测定表明接种后第5d细胞进入指数增生期,至第9d进入平台期;流式细胞术证明G2+S期细胞为14.8%;免疫细胞化学染色结果表明42.0%细胞为CD45阳性.结论 体外分离培养脐血间充质干细胞生长稳定,可作为组织工程的种子细胞.
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人角膜缘干细胞的体外原代培养和生物学鉴定
目的建立人角膜缘干细胞体外培养方法,观察其生物学特性.方法用含20%胎牛血清1640培养液对人角膜缘干细胞进行体外培养,进行形态学观察和免疫细胞化学鉴定.结果植块3～4 d后细胞开始贴壁生长,10～15 d形成良好的单层,细胞呈圆形、卵圆形,类角膜上皮细胞;免疫细胞化学染色显示,培养第11d,少量细胞表达AE5,大量细胞表达p63.结论应用20%胎牛血清1640培养液组织培养的方法获得的原代培养细胞具有与正常角膜缘干细胞相一致的生物学特性.
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5-氟尿嘧啶对乳腺癌MCF7细胞中干细胞相关基因Oct4、Bmi-1表达的影响
背景:国内外研究证明乳腺癌干细胞可能是起始乳腺癌生长及辅助治疗后复发和远处转移的根源.目的:观察5-氟尿嘧啶对人乳腺癌MCF7 细胞Oct4、Bmi-1 表达的影响.方法:应用0.1 mg/L 5-氟尿嘧啶处理MCF7,RT-PCR检测处理前G0及处理后6 代细胞G1~G6中Oct4、Bmi-1 mRNA的表达,免疫细胞化学检测处理前G0、G1~G5中Oct4 的表达.结果与结论:5-氟尿嘧啶处理后,Oct4、Bmi-1 mRNA表达水平在G3和G5均较处理前明显增高,OCT4 蛋白表达呈现出降低-升高-更高-降低-升高的趋势.提示MCF7 中可能存在肿瘤干细胞样细胞;5-氟尿嘧啶可能诱导MCF7 中肿瘤干细胞样细胞的数量或比例增加.
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二甲基亚砜诱导成年大鼠骨髓基质细胞转分化为胰岛样细胞
背景:已有报道,二甲基亚砜可使骨髓基质细胞分化为神经元,那么可否用二甲基亚砜诱导骨髓基质细胞向nestin阳性细胞分化,继而向胰岛分化.目的:探讨二甲基亚砜对成年大鼠骨髓基质细胞定向诱导分化为胰岛样细胞团的作用.设计:以细胞为观察对象,随机对照,体外实验.单位:河北北方学院医学院组织学与胚胎学教研室.材料:实验于2006-05/2007-07在河北北方学院组胚教研室细胞审完成.选取6～8周龄Wistar大鼠10只,性别不拘,由解放军军事医学科学院实验动物中心提供.实验用分析纯二甲基亚砜购自北京市化学试剂厂,反转录聚合酶链反应系统为Promega公司产品(A3500),Taq酶和DNA marker DL2000购自北京天为时代生物技术有限公司,鼠抗人胰岛素单克隆抗体(ZM20155)、兔抗人胰高血糖素多克隆抗体(zA20119)购自北京中杉金桥生物技术有限公司,兔抗人nestin多克隆抗体(与大鼠组织有良好的交叉反应,可用于检测人、大鼠等哺乳动物组织)、SABC试剂盒购自武汉博士德公司,大鼠胰岛素放射免疫试剂盒,购自美国Linco公司.方法:骨髓基质细胞以含体积分数0.1胎牛血清的H-DMEM培养60 min,收集未贴壁细胞以含10 g/L二甲基亚砜的无血清H-DMEM作为诱导液,以109/cm2密度接种于6孔板,诱导3 d,继之用体积分数0.1胎牛血清的H-DMEM培养7 d.主要观察指标:用DTZ染色观察诱导细胞团的形态,免疫细胞化学染色检测巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、生长抑索的定位:反转录聚合酶链反应检测诱导细胞团的内分泌基因表达;放免分析检测细胞团的胰岛素分泌量.结果:①骨髓基质细胞分化的细胞团形态:骨髓基质细胞为典型的成纤维细胞样或葡萄样贴壁细胞,经二甲基亚砜诱导3 d后,出现胰岛样细胞团,经DTZ染色显示了和胰岛同样的特性.②免疫细胞化学染色显示:二甲基亚砜诱导后1 d骨髓基质细胞表达nestin蛋白,诱导10 d表达胰岛素和胰高血糖素;未经二甲基哑砜诱导的骨髓基质细胞则不表达胰岛素和胰高血糖素.③反转录聚合酶链反应结果显示:骨髓基质细胞经二甲基亚砜诱导后胰岛样细胞团表达insulin1,insulin2,glucagon和somatostain基因.④细胞团的胰岛索分泌量:胰岛样细胞团对葡萄糖刺激敏感,低糖(3.3 mmol/L)和高糖条件下(16.7 mmol/L)胰岛素分泌量分别为5.56和24.5μU/mL.结论:体外经二甲基亚砜诱导的大鼠骨髓基质细胞可定向分化为胰岛样细胞.
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新生大鼠海马区及室管膜下区神经干细胞的诱导分化:无血清培养条件下观察
背景:神经干细胞作为修复损伤神经组织的细胞源已引起学者的关注,如何有效的获取更多的神经干细胞逐渐成为重点解决的课题之一.目的:观察大鼠室管膜下区和海马回神经干细胞体外培养、传代和分化情况.设计:单一样本实验.单位:中山大学附属第三医院神经外科.材料:取出生后3d SD大鼠10只,雌雄不拘,由中山大学实验动物中心提供.巢蛋白抗体(兔抗大鼠)、神经微丝蛋白(NF-200)抗体(兔抗大鼠)、胶质纤维酸性蛋白抗体(小鼠抗大鼠)均购自Sigma公司.方法:实验于2006-09/12在中山大学基础医学院组织胚胎学实验室完成.实验过程中对动物的处置符合动物伦理学要求.从新生大鼠海马、室管膜下区分离神经干细胞,采用DMEM/F12无血清悬浮的条件培养,同时在培养基中加入碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子代替血清中含有的分裂原,进行体外扩增培养、传代观察.主要观察指标:采用免疫荧光检测技术,通过检测神经干细胞表达的nestin、神经元细胞表达的神经微丝蛋白和星形胶质细胞表达的胶质纤维酸性蛋白,鉴定神经干细胞及其分化结果.结果:分离获取的细胞具有自我更新和增殖能力,原代及传代培养20代后,在倒置显微镜下仍保留典型的"细胞克隆球"特征,神经克隆球通过nestin免疫荧光染色,呈阳性反应.经诱导后,细胞克隆球细胞外迁贴壁生长,可分化为神经微丝蛋白阳性的神经元细胞和胶质纤维酸性蛋白阳性的星形胶质细胞.结论:实验分离培养出具有自我更新和增殖能力的神经干细胞,其可诱导分化为神经元样细胞和星形胶质细胞.
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提供抗类风湿关节炎实验工具:人Janus激酶1单克隆抗体的免疫学特性
目的:制备人Janus激酶1单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性.方法:实验于2003-03/2005-04在湖南远泰生物技术有限公司免疫学实验室完成.用化学合成的部分人Janus激酶1多肽链与锁眼蓝蛋白偶联后的全抗原对BALB/c小鼠进行免疫,采用杂交瘤技术制备抗人Janus激酶1的单克隆抗体;同时采用酶联免疫吸附法和免疫印迹法进行筛选;免疫印迹法和免疫细胞化学分析鉴定单克隆抗体的特异性.结果:获得了一株可稳定分泌人Janus激酶1单克隆抗体的细胞株4E5D4,单抗的Ig亚类为IgG.通过免疫印迹法检测,发现其能够特异性识别人Janus激酶1蛋白.结论:成功制备了抗人Janus激酶1的单克隆抗体,为进一步研究其对类风湿关节炎的临床疗效提供了实验工具.
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体外诱导胎儿骨髓间充质干细胞向胰岛β样分泌细胞的分化
背景:体外诱导人骨髓间充质干细胞定向分化为胰岛样细胞,目前尚无成熟的鉴定方案.目的:探讨胎儿骨髓间充质干细胞在适当的条件下体外分化为胰岛样分泌细胞的可能性.方法:将胎儿骨髓间充质干细胞与胎儿胰岛素细胞分别接种于Transwell 双层细胞培养板上下层共培养.对照组中的骨髓间充质干细胞仅用胰岛细胞培养基培养.倒置相差显微镜观察胎儿骨髓间充质干细胞、胎儿胰岛细胞的形态,放射免疫分析法检测共培养刺激下胰岛素的分泌情况.结果与结论:未经诱导的骨髓间充质干细胞呈长梭形贴壁生长,与胰岛细胞共培养的骨髓间充质干细胞逐渐变圆,并聚集成团,共培养9 d后骨髓间充质干细胞经RAI检测分泌大量胰岛素,DTZ染色为阳性,细胞免疫化学检测阳性.而对照组无胰岛素释放.提示在适当的培养条件下,胎儿骨髓间充质干细胞具有向胰岛素分泌细胞分化的能力.
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人胚胎骨髓间充质干细胞的初步培养及鉴定
目的分离培养并鉴定人胚胎骨髓间充质干细胞。方法抽取流产胎儿股骨骨髓，梯度离心，取含有骨髓间充质干细胞的低密度血小板层进行培养；免疫细胞化学法鉴定细胞膜抗原；酶细胞化学法测定细胞碱性磷酸酶活性。结果培养的细胞呈现纺锤形外观；细胞膜抗原 CD29、 CD44有阳性表达， CD34、 CD45呈阴性表达；碱性磷酸酶检测呈阴性反应。结论培养的细胞不是骨髓中的造血干细胞，是处于未分化阶段的骨髓间充质干细胞。
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神经组织细胞特异性蛋白在大鼠羊膜上皮细胞中的表达
背景:有证据表明羊膜上皮细胞能够表达神经系统细胞的几乎全部特异性抗原,且可以分泌多种神经营养因子及递质.若羊膜上皮细胞能够代替神经细胞,其神经营养作用必将为治疗神经推行性病变带来广阔前景.目的:检测神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中是否表达?设计:重复测量设计.单位:吉林大学第二临床医学院,吉林大学基础医学院组织与胚胎学教研室.材料:实验于2004-10/2005-10在吉林大学基础医学院组织与胚胎学教研室完成.选取清洁级孕12～14 d的Wistar大鼠1只,将分离出的羊膜上皮细胞用于实验.小鼠抗大鼠神经元特异性抗原微管相关蛋白、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白、乙酰胆碱转移酶单克隆抗体、兔抗大鼠神经元特异性烯醇化酶和NT-3多克隆抗体(武汉博士德公司);大鼠抗大鼠Musashi抗体(日本庆应义塾大学岗野荣之教授惠赠).方法:取孕12～14d的Wistar大鼠胎盘,剥离羊膜获得上皮细胞,在37℃、体积分数为0.05的CO2环境下,胰蛋白酶消化5 min,加入DMEM/F12培养液,以5×109L-1的浓度接种于培养瓶中.培养3 d后,细胞以1×108L-1的浓度接种于预先涂有多聚赖氨酸的直径35 mm平皿中,用质量浓度为40g/L的多聚甲醛固定20 min.采用免疫细胞化学染色方法对神经元特异性抗原微管相关蛋白、神经元特异性烯醇化酶、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白、乙酰胆碱转移酶在羊膜上皮细胞中的表达情况进行检测.主要观察指标:①大鼠羊膜上皮细胞不同培养时间的形态观察.②神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中的表达情况.结果:①大鼠羊膜上皮细胞不同培养时间的形态观察:羊膜上皮细胞培养24 h后,细胞扁平呈成纤维细胞样.3～5 d后,胞体饱满,核大而圆,核仁清晰,突起发达,并互相连成网状.②神经组织细胞特异性抗原在大鼠羊膜上皮细胞中的表达情况:培养4 d后免疫细胞化学染色结果可见,羊膜上皮细胞表达Nestin、神经元特异性烯醇化酶、乙酰胆碱转移酶以及Musashi、神经元特异性抗原微管相关蛋白、星形胶质细胞特异性抗原胶质原纤维酸性蛋白.结论:羊膜上皮细胞与神经组织细胞具有一定的同源性,可望作为治疗神经系统疾病新的细胞来源.
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以交联透明质酸钠为支架体外构建组织工程软骨
背景：采用组织工程技术再生和重建软骨是目前修复软骨组织缺损效果好、有应用前景的方法。
目的：以体外培养的软骨细胞和交联透明质酸钠为支架材料，开发一套体外构建组织工程软骨的完整方案。方法：分离新西兰兔膝关节软骨细胞，制成细胞悬液滴加于交联透明质酸钠支架上，体外复合培养21 d，提取RNA进行RT-PCR检测，制备冰冻切片进行显微观察和免疫组织化学观察。
结果与结论：软骨细胞接种于交联透明质酸钠支架材料后，可贴附于支架上生长，并且大量细胞聚集成团，在支架材料的纤维间隙中生长或呈单层细胞附着于支架材料纤维。细胞-支架复合物表达软骨组织特异性蛋白聚糖基因和Ⅱ型胶原α1基因，以及软骨组织特异性蛋白Ⅱ型胶原蛋白，可维持软骨细胞表型。表明培养的细胞-支架复合物在体外培养可形成软骨细胞外基质，有望获得组织工程软骨组织。 -
大鼠骨髓间充质干细胞分离培养及其生物学特性观察
目的:分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞并观察其生物学特性.方法:实验于2004-05/2006-04在武装警察部队医学院细胞生物学实验室进行.在无菌条件下分离大鼠胫骨、股骨,用预冷磷酸盐缓冲液冲出骨髓,经Percoll梯度分离方法获得骨髓单个核细胞,接种含体积分数为0.10胎牛血清的IMDM培养基中.对单个核细胞行贴壁培养后,通过倒置光显微镜和透射电子显微镜进行细胞形态学观察,流式细胞术进行细胞周期分析,细胞计数法测定细胞生长曲线,免疫细胞化学染色显示c-kit表达.结果:①倒置光显微镜下观察采用Percoll(1.073 g/mL)分离的骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多.②透射电子显微镜下观察骨髓间充质干细胞的核质比例较大,核仁大而明显,细胞表面有微绒毛,胞浆内可见核糖体和线粒体,其他细胞器较少,表现出未分化细胞的特征.③细胞生长曲线测定表明接种后第4天细胞进入指数增生期,至第7天进入平台期.④流式细胞术证明G2+S期细胞为11.8%.⑤体积较大的多角形细胞为c-kit阳性,体积较小的成纤维样细胞为阴性细胞,阳性颗粒主要分布在细胞膜和细胞质,细胞核未见表达,阳性细胞比率为55.3%.结论:成功地建立了一种分离培养大鼠骨髓间充质干细胞的方法,获得的细胞生长稳定,增殖活跃,可作为组织工程的种子细胞.
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壳寡糖对肝癌细胞SMMC-7721中Bcl-2和Caspase-3表达的影响
目的 检测壳寡糖对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制效果及对凋亡调控蛋白Bcl-2和Caspase-3的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度壳寡糖对肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的抑制作用,并利用荧光Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡状况.后通过免疫细胞化学方法研究壳寡糖对肝癌细胞SMMC-7721中Bcl-2和Caspase-3表达的影响.结果 壳寡糖能够抑制SMMC-7721细胞增殖,并且促进SMMC-7721细胞的凋亡,并且壳寡糖能够上调促凋亡蛋白Caspase-3的表达和降低抑制凋亡蛋白Bcl-2的表达.结论 壳寡糖对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖有抑制作用,此作用可能是通过促进Caspase-3的表达和抑制Bcl-2的表达来实现的.
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胃癌病人腹腔脱落癌细胞检出率的研究
目的研究细胞角蛋白20(CK20)和癌胚抗原(CEA)单抗免疫细胞化学(ICC)染色方法在胃癌病人腹腔冲洗液脱落癌细胞检测中的临床应用价值.方法应用CK20和CEA两种标志物,对30例胃癌病人腹腔冲洗液细胞涂片进行免疫细胞化学染色及常规腹腔冲洗液细胞学检查(CY),检测腹腔内脱落癌细胞.结果 ICC阳性检出率(43.3%)明显高于CY(23.3%)(P<0.05);CK20单抗检出13例ICC阳性病例中的12例(92.3%),优于CEA(76.9%);腹腔内癌细胞的脱落与浆膜受侵、胃癌分化程度、有无淋巴结转移相关(P<0.05),并与临床分期密切相关(P<0.01).结论采用CK20单抗免疫细胞化学染色方法检测腹腔冲洗液中脱落癌细胞是一种简单有效的方法,有临床实用价值.
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急性白血病患儿维生素D受体表达研究
目的 通过检测急性白血病(AL)患儿维生素D受体(VDR)mRNA和蛋白质表达,从转录和翻译两个水平探讨VDR在AL中的表达和意义.方法 收集2009年1月至12月广西医科大学第一附属医院儿童血液科住院或门诊未经治疗的30例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿(ALL1组)、12例急性髓细胞白血病(AML)患儿(AML1组)、30例非肿瘤性血液病患儿(对照1组)的骨髓标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测3组骨髓细胞VDR mRNA表达.收集2009年9月至2010年4月广西医科大学第一附属医院儿童血液科住院或门诊未经治疗的30例ALL患儿(ALL2组)、10例AML患儿(AML2组)和30名健康体检儿童(对照2组)的外周血标本,提取外周血单个核细胞(PBMC),应用免疫细胞化学法和蛋白免疫印迹法检测VDR蛋白表达.结果 ALL1组、AML1组和对照1组骨髓均有VDR mRNA表达.ALL1组VDR mRNA表达量为(1.06±0.31)、AML1组VDR mRNA表达量为(1.13±0.34),均明显低于对照1组(3.10±0.18),3组差异有统计学意义(F=1701.00,P＜0.01)；而ALL1组与AML1组间VDR mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).免疫细胞化学法显示,ALL2组外周血VDR蛋白表达(27.82±1.78)％、AML2组外周血VDR蛋白表达(27.10±2.44)％,明显低于对照2组(59.02±3.46)％,3组间差异有统计学意义(F=1150.26,P＜0.01)；而ALL2组与AML2组VDR蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).蛋白免疫印迹法显示,ALL2组VDR蛋白表达(0.299±0.071)、AML2组VDR蛋白表达(0.290±0.094),明显低于对照2组(0.710±0.041),3组间差异有统计学意义(F=356.434,P＜0.01)；而ALL2组与AML2组VDR蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 所有检测的AL患儿骨髓及外周血单个核细胞中均表达VDR,但VDR表达可能与AL分类无关.
关键词： 实时荧光定量聚合酶链反应 免疫细胞化学 蛋白免疫印迹 维生素D受体 急性白血病 -
提高胸腹水肿瘤细胞检出率的方法探讨
目的 探讨一种提高胸腹水肿瘤细胞检出率的方法.方法 对257例胸腹水标本同时做常规细胞涂片,微量标本涂片,沉渣包埋切片,免疫细胞化学染色.结果 常规细胞涂片厚,背景不清晰;微量标本涂片细胞数量少;沉渣包埋切片细胞多而集中,背景清晰,免疫细胞化学染色效果好.结论 胸腹水沉渣包埋切片,免疫细胞化学染色,可提高胸腹水肿瘤细胞检出率,对肿瘤诊断和鉴别诊断有重要价值.
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慢性氟中毒大鼠中缝大核5-羟色胺神经元免疫细胞化学研究
目的探讨慢性氟中毒大鼠中缝大核5-羟色胺(5-HT)神经元的病理变化.方法以饮用含氟水的方法制造了雄性大鼠慢性氟中毒模型,对脑干中缝大核5-HT神经元进行了免疫细胞化学定性、定量研究.结果慢性氟中毒大鼠中缝大核5-HT神经元减少,胞质内5-HT阳性反应颗粒减少且界限不清,显微图像分析仪定量检测神经元内5-HT含量降低.结论高氟对中枢神经系统有直接损害作用.
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脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定
目的 分离培养脐带血间充质干细胞并检测其生物学特性.方法 在无菌条件下用密度梯度离心的方法获得脐血单个核细胞,接种含10%胎牛血清的DMEM培养基中.单个核细胞行贴壁培养后,进行细胞形态学观察,绘制细胞生长曲线,分析细胞周期,检测细胞表面抗原.结果 采用Percoll(1.073 g/mL)分离的脐血间充质干细胞大小较为均匀,梭形或星形的成纤维细胞样细胞.细胞生长曲线测定表明接后第5天细胞进入指数增生期,至第9天后数量减少;流式细胞检测表明50%～70%细胞为CD29和CD45阳性.结论 体外分离培养脐血间充质干细胞生长稳定,可作为组织工程的种子细胞.
