首页 > 文献资料
-
IVF助孕中卵母细胞成熟率对ICSI临床结局的影响
目的 研究影响HCG日卵母细胞成熟度的临床因素,及卵母细胞成熟度对胚胎发育潜能及妊娠结局的影响.方法 回顾性分析本院生殖中心2014年3月至2015年4月行ICSI治疗的不孕患者427例,根据取卵日脱颗粒细胞后卵母细胞成熟度(成熟卵母细胞数与卵母细胞数的比例)分为A、B、C三组,A组为成熟度≥80％,283例;B组成熟度为60％～79％,124例;C组成熟度＜60％,20例.比较三组患者的年龄、不育年限、促性腺激素(Gn)天数、Gn用量、人绒毛膜促性腺激素(HCG)注射日血清LH,E2,孕激素(P)、每成熟卵母细胞E2水平、每卵母细胞E2水平、成熟卵母细胞数、获卵数、MⅡ卵数、获卵率;2PN受精率、卵裂率、可移植胚胎率、优胚率、囊胚形成率、累积妊娠率、卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率. 结果 三组的年龄、不育年限无统计学差异(P＞0.05).A组和B组Gn天数、用量[(12.46±2.27)d,(2 713.96±976.55)U][(12.23±1.78)d,(2 779.23±1 098.21)U]少于C组[(13.65±3.08)d,(3 365.00±1 125.93)U],差异有统计学意义(P＜0.05).HCG日血清E2:A组[(14 662.80±1 157.38)pmol/L]＞B组[(13 556.60±1 200.66)pmol/L]＞C组[(10 560.56±1 338.43)pmol/L],两两比较有统计学差异(P＜0.05).HCG日血清LH、P水平、每成熟卵母细胞E2水平、每卵母细胞E2水平,三组无统计学差异(P＞0.05).成熟卵泡数、获卵数、MⅡ卵数:A组＞B组＞C组,差异有统计学意义(P＜0.05).A组获卵率(获卵数/≥14 mm卵泡数)∶(99.28％)大于B组(96.24％)、C组(95.21％),差异有统计学意义(P＜0.05).正常受精率、卵裂率:A组(86.55％;99.17％)大于B组(78.19％;97.91％)和C组(79.82％;95.60％),有统计学差异(P＜0.05).优胚率、累积妊娠率:A组(48.03％;51.59％)和B组(44.58％;48.38％)大于C组(39.62％;35.00％),有统计学差异(P＜0.05).三组中重度OHSS发生率间无统计学差异(P＞0.05). 结论 卵母细胞成熟率低可能与卵巢反应不良或对Gn敏感性下降有关;卵母细胞成熟率低可能影响受精及胚胎发育潜能,导致可供移植的胚胎数减少,妊娠率下降.
-
卵母细胞代谢及其调节
卵母细胞发育与成熟过程依赖大量ATP,因此物质代谢旺盛.卵母细胞以葡萄糖和/或其中间产物丙酮酸为底物,在线粒体内氧化磷酸化,产生大量ATP,是卵母细胞主要的供能形式.但是,卵母细胞糖代谢模式有种属特异性差异.同时,卵母细胞也存在脂肪酸和氨基酸的代谢.除提供能量外,这些代谢产物在细胞信号传导、渗透压调节等方面也有重要作用.卵母细胞代谢的精确调控受多方面因素的影响如卵母细胞胞内、胞间、胞外的调控等.研究卵母细胞代谢及其机制,对探寻改善卵母细胞质量、提高卵母细胞体外成熟效能具有重要的意义.
-
细胞内Ca2+及其在卵母细胞成熟中的作用
Ca2是重要的第二信使,与多种蛋白结合,调节蛋白质的定位、活性及功能.细胞膜及细胞器上的钙通道严格控制细胞质和细胞器的Ca2+浓度,以保证细胞内信号的正常传导.在卵母细胞成熟和受精的过程中,Ca2+控制卵母细胞的成熟过程,维持受精并启动胚胎发育.卵母细胞体外成熟技术(IVM)是目前临床上不孕不育的重要治疗手段,但它的低成功率一直是IVM不能广泛应用的主要因素.Ca2+拮抗剂能抑制细胞核的提前成熟,使得细胞核与细胞质成熟同步,成为现在IVM的研究热点.本文主要介绍Ca2+的通道,如何介导Ca2+的平衡,Ca2+调控卵母细胞减数分裂的机制和IVM中Ca2的作用.
-
卵丘细胞在卵母细胞发育过程中的作用
卵母细胞能否正常发育成熟是影响女性生育能力的重要因素,目前人们普遍认为,人类卵母细胞和卵丘细胞之间的相互交流,对于卵母细胞发育是不可或缺的.在卵泡窦腔形成过程中,颗粒细胞分化为壁颗粒细胞和卵丘细胞,卵丘细胞与其他卵泡细胞不同,具有本身独特的功能、促进排卵前卵母细胞的生长和成熟及支持排卵后卵母细胞功能的作用.本文主要对卵丘细胞的功能及在卵母细胞发育过程中的作用进行论述.
-
超排卵方案中HCG日的确定
利用HCG模拟内源性黄体生成素峰是超排卵过程中重要的环节之一.对卵泡经线大小和卵母细胞质量相关性的研究证实卵泡的大小可预测卵母细胞的发育潜能.因此,主导卵泡或主导卵泡簇的经线大小仍然是超排卵方案HCG日确定的重要参数.其它参数,包括雌二醇水平、孕酮水平和避免周末取卵等也需要考虑在内.
-
分泌型卷曲相关蛋白家族成员在多囊卵巢患者不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞中的基因表达
目的 探讨在多囊卵巢综合征(PCOS)患者与非PCOS患者中,分泌型卷曲相关蛋白(sFRPs)家族成员基因在不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞上的表达差异. 方法 收集27例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕治疗的不育女性患者(其中11例PCOS患者,16例非PCOS患者),通过控制性促排卵治疗后,采用标准长方案促排卵,经阴道超声引导下穿刺取卵后,获得共198枚卵丘-卵母细胞复合体(PCOS患者98枚,非PCOS患者100枚);采用机械剥离法获取卵丘颗粒细胞,根据卵母细胞成熟度不同,将对应的卵丘颗粒细胞分为4组:非PCOS患者成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCN-MⅡ),非PCOS患者非成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCN-MⅠ+GV),PCOS患者成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCP-MⅡ)和PCOS患者非成熟卵母细胞周围的颗粒细胞组(CCP-MⅠ+GV).通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)技术检测部分sFRPs家族基因成员(sFRP1、sFRP2、sFRP3、sFRP4、sFRP5)在PCOS及非PCOS患者不同成熟度卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞上的表达情况. 结果 (1)PCOS患者中,在未成熟卵母细胞周围的颗粒细胞中sFRP4的表达显著高于在成熟卵母细胞周围的颗粒细胞中的表达,即sFRP4在CCP-MⅠ+GV组表达高于CCP-MⅡ组[(7.80±1.21) vs.(1.00±0.00)](P＜0.05);(2)在非PCOS患者中,sFRPs家族成员sFRP4和sFRP5在不同成熟度卵泡母细胞周围的卵丘颗粒细胞中表达变化显著,CCNMⅠ +GV组中的表达量均显著高于CCN-MⅡ组[sFRP4 (7.04±1.30)vs.(1.00±0.00)](P＜0.05)和[sFRP5(2.84±0.73)vs.(1.00±0.00)](P＜0.05);(3)sFRP4的表达在PCOS及非PCOS患者间成熟卵母细胞对应的颗粒细胞组间均无显著性差异. 结论 在PCOS患者中,仅sFRP4在卵丘颗粒细胞上的表达与卵母细胞的成熟度相关;而在非PCOS患者中,sFRP4和sFRP5的表达均与卵母细胞的成熟度相关,其表达量随卵母细胞成熟而降低.
-
多囊卵巢综合征在卵母细胞发生中的影响
人卵泡发育始于始基卵泡募集到形成大量生长卵泡,随之从中选择一个发育成熟进行排卵.在生长发育过程中,复杂的内分泌和卵巢旁分泌信号通路使卵泡内激素发生变化.大量卵丘细胞—卵母细胞在这个微环境中调控卵母细胞的生长发育能力,卵母细胞的发育能力表现在完成减数分裂、受精、着床等.多囊卵巢综合征( PCOS)的甾体激素合成异常,糖、脂代谢机制受损,特征性表现为高雄激素血症、胰岛素抵抗致高胰岛素血症及不孕.除内分泌异常外,还表现为卵巢内转化生长因子-β (TGF-β)蛋白家族对卵泡发育的异常调节.
-
体外培养人卵巢黄素化颗粒细胞的鉴定及其分泌功能变化
人卵巢黄素化颗粒细胞(颗粒细胞)是卵泡内主要的体细胞成分,它介导促性腺激素对卵母细胞成熟的调节,通过自分泌或旁分泌作用,维持有利于卵母细胞成熟的微环境.因此,研究颗粒细胞的功能和调控,对于了解卵母细胞的成熟规律有重要意义.本研究的目的是探讨颗粒细胞的分泌功能,及其与胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)及表皮生长因子(EGF)的关系.
-
卵巢颗粒细胞中卵泡刺激素的受体后信号传导通路
卵泡刺激索(FSH)是下丘脑-垂体-性腺轴中的关键激素,通过与颗粒细胞的FSH受体(FSHR)结合,发挥卵泡募集、促卵泡生长和卵母细胞成熟的作用,并与黄体生成素(LH)一起,介导排卵过程,促进和维持正常的性腺发育和生殖功能.研究颗粒细胞中FSH与FSHR结合后的信号传导通路(即受体后信号传导通路)机制,对了解颗粒细胞在卵泡发育过程中的作用以及对治疗不孕、不育药物的研制具有重要意义.本文将对颗粒细胞中FSH的受体后信号传导及功能调节的分子学机制的研究进展做一综述.
-
内异症患者腹腔微环境对生殖功能影响的研究进展
内异症以具有生长功能的子宫内膜组织种植到子宫腔被覆内膜及子宫肌层以外的部位为特征,约30％～50％的患者合并不孕.目前多数学者认为,盆腔结构异常尤其是输卵管形态变化是导致重度内异症患者不孕的主要因素,但绝大多数的轻、中度内异症不孕患者腹腔内并无明显粘连,因而非解剖性因素尤其是腹腔微环境与不孕的关系引起了越来越多的关注.关于内异症的发病学说,国内学者提出了“在位内膜决定论”,即有内在差异的在位子宫内膜是内异症形成中的决定因素,而免疫反应、激素水平变化等可能只是继发表现[1].这些继发性变化诱发腹腔内炎症及氧化应激反应、细胞活性物质增加等一系列病理学变化,致使腹腔液的性质和量发生变化、内环境失衡、生殖功能异常,终导致内异症患者不孕.本文就内异症不孕患者腹腔液微环境变化对卵母细胞成熟、精子活性、受精卵形成及胚胎发育和植入的影响等综述如下.
-
抗真菌药物影响生殖细胞发育机理的研究
目的:探讨抗真菌药物对促性腺激素诱导的卵母细胞成熟的机理.方法:用小鼠卵母细胞体外培养模型,将小鼠卵母细胞培养在含有次黄嘌呤(HX ,卵母细胞成熟抑制物)的培养液中,观察促卵泡生成素(FSH)、两性霉素B、酮康唑对卵母细胞减数分裂恢复的影响.结果:①FSH(10～200 IU/L)显著刺激卵丘-卵母细胞复合体(CEO)克服HX的抑制而恢复减数分裂,该作用具有剂量依赖性(P＜0.05); ②两性霉素B(0.0025～250 μg/L)也能够明显诱导CEO恢复减数分裂,其作用具有剂量依赖性(P＜0.05);③酮康唑(10-7～10-3 mol/L)剂量依赖性抑制FSH(50 IU /L)诱导的卵母细胞减数分裂恢复(P＜0.05),但并不影响卵母细胞的自发成熟(P ＞0.05).结论:两性霉素B、酮康唑对卵母细胞减数分裂的恢复具有影响,其机理可能在于影响促性腺激素诱导的、卵丘细胞分泌的甾醇类物质(MAS)的产生.
-
NuMA和γ-tubulin在核移植克隆胚胎中的动态变化和作用
核有丝分裂器蛋白(NuMA)和γ-微管蛋白(γ-tubulin)在卵母细胞成熟、受精和核移植胚胎早期发育过程中起重要作用.供体细胞γ-tubulin和NuMA参与了核移植克隆胚有丝分裂纺锤体的组装,NuMA主要参与了纺锤体极的装配和维持,而供体中心体调节核移植胚初纺锤体的形成.核移植重构胚中心体结构异常经常伴随染色体异常排列、纺锤体结构异常,而中心体分布异常经常伴随异常卵裂.
-
细胞骨架在卵母细胞成熟、受精及核移植胚胎的作用
细胞骨架系统,不仅是活细胞的支撑结构,决定细胞的形状,赋予其强度,而且是对各细胞器乃至某些大分子进行空间的组织安排,并且参与细胞外信号向核的转导及核对整个细胞活动的调节.哺乳动物卵母细胞和早期胚胎细胞骨架具有其独特的分布和功能,使卵母细胞和胚胎呈现出精确的时空性变化特点.确保受精及胚胎发育按时有序地进行.本文综述了细胞骨架在卵母细胞成熟、受精、早期胚胎发育和核移植发育过程中的分布和作用.
-
未成熟卵体外成熟培养技术应用于多囊卵巢综合征不孕的治疗
近年来,未成熟卵体外成熟培养技术(in vitro maturation,IVM)的兴起为多囊卵巢综合征(PCOS)引起的不孕提供了新的治疗途径.IVM是指在不经超促排卵,或少量应用促性腺激素(Gn)后,从卵巢中获取未成熟卵,在体外经过适宜的条件进行体外成熟培养,使卵母细胞成熟并具备受精能力.
-
卵子成熟的基础和临床应用研究
卵母细胞成熟的过程被称为卵母细胞获能(oocyte capacitation),这一获能过程包括核恢复减数分裂至第二次减数分裂中期(MⅡ)静止和经历一系列复杂生理生化变化的细胞质的成熟.在临床上,比较理想的卵子成熟障碍的病理模型就是多囊卵巢综合征.它表现为卵巢皮质内多个小卵泡的发育停滞在不成熟的阶段,并伴有一系列高雄激素血症和胰岛素抵抗的病理生理学变化.
-
原癌基因c-erbB2和c-myb经丝裂原活化蛋白激酶和成熟促进因子途径调节卵母细胞的成熟
本研究探讨了原癌基因c-erbB:和c-myb对小鼠卵母细胞成熟的影响及其在调控卵母细胞成熟中与丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和成熟促进因子(mamration promoting factor,MPF)的上下游关系.c-erbB2反义寡脱氧核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)和c.myb ASODN均呈剂量依赖方式抑制卵母细胞的生发泡破裂(germinalvesicle breakdown,GVBD)率和第一极体(first polar body,PBl)排放率,并显著延迟其成熟时间.小鼠卵母细胞显微注射重组人c-erbB2蛋白和c-myb蛋白后,培养6 h其GVBD率分别比对照组上升了23.1%(P<0.05)和32.2%(P<0.05),.培养12 h其PBl排放率分别比对照组上升了17.3%(P<0.05)和23.5%(P<0.05).RT-PCR结果显示,小鼠卵母细胞中存在c-erbB2mRNA和c-myb mRNA表达;c-erbB2ASODN能明显抑制卵母细胞中c-erbB2mRNA和c-myb mRNA的表达,c-myb ASODN能明显抑制卵母细胞中c-myb mRNA的表达,对c-erbB2 mRNA无明显影响;MAPK抑制剂PD98059以及MPF抑制剂roscovitine在抑制卵母细胞成熟的同时,均能阻断显微注射重组人c-erbB:蛋白和重组人c-myb蛋白对卵母细胞成熟的促进作用,但对卵母细胞中c-erbB2mRNA和c-myb mRNA表达无明显影响.Western blot结果显示,c-erbB2ASODN、c-mybASODN、PD98059、roscovitine均使卵母细胞中MAPK磷酸化水平和cyclinB 1含量下降.结果提示,原癌基因c-erbB2、c-myb在卵母细胞成熟中起重要作用,可能是调控卵母细胞成熟中关键蛋白激酶如MAPK、MPF的上游激活物.
-
未成熟卵母细胞体外成熟培养技术研究进展
1935年,Pincus和Enzmanz[1]观察到兔的未成熟卵母细胞在体外培养条件下可以自发完成卵母细胞的成熟过程,自此在生殖领域引入了一个新的概念即卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM).自1991年Cha[2]等报道IVM技术取得第1例妊娠以来,IVM技术已应用于治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的不孕,预防卵巢过度刺激综合征(OHSS),并与体外授精-胚胎移植技术(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF -ET)结合治疗患有严重遗传病或者因病切除卵巢的患者.大量哺乳类及人类卵母细胞体外成熟的研究表明,卵母细胞体外发育潜能明显低于体内成熟,临床妊娠率低(20%～35%).目前我们对卵母细胞成熟和获得发育潜能方面的分子机理及生理生化过程了解尚不深入,这提示IVM技术还有待进一步的探索研究.
-
饮用水有机污染物对小鼠卵母细胞成熟的影响
工农业的快速发展对国民经济及人民生活水平提高起了巨大作用,但相应的环境保护工作却相应滞后,对生活饮用水的水源污染也日益严重,饮用水有机污染物对人体健康的影响越来越受到人们的关心和重视.其在致突变、致癌作用方面的研究较多,其生殖毒性现也引起人们的重视,有研究表明饮用水有机污染物对雄性小鼠精子活力及形态有明显的影响[1].
-
935 MHz微波电磁辐射对卵母细胞成熟的影响
目的:研究935 MHz微波电磁辐射对小鼠卵母细胞成熟的影响.方法:将促排卵小鼠暴露于不同强度、不同时间的935 MHz微波辐射,观察其对超排卵母细胞数以及不同时间间隔(0,8,24 h)生发泡破裂率、第一极体释放率及卵母细胞存活率的影响.结果:1 400 μW/cm2,4 h/d组与对照组相比,第一极体释放率显著降低(0 h,P＜0.01;8 h,P＜0.01),卵母细胞存活率也明显下降(0 h,P＜0.01;8 h,P＜0.05;24 h,P＜0.05);与1 400 μW/cm2,2 h/d组比较,第一极体释放率均显著降低(0 h,P＜0.01;8 h,P＜0.01;24 h,P＜0.05),卵母细胞存活率也均明显下降(P＜0.01).结论:935 MHz微波电磁辐射可抑制小鼠卵母细胞体内成熟,并具一定剂量反应关系及累积效应.
-
微波电磁辐射对小鼠卵母细胞钙离子浓度的影响
目的:探讨935 MHz微波电磁辐射对小鼠卵母细胞成熟过程中钙离子浓度的影响.方法:将7周龄昆明小鼠行腹腔注射促排卵药物,同时暴露于不同强度、不同时间的935 MHz微波连续辐射3d,应用激光扫描共聚焦显微镜下观察培养不同时间(0,2,4 h)的卵母细胞内钙离子浓度的变化.结果:1 400 μW/cm2,4 h/d组卵母细胞在培养0,2,4h与对照组相比钙离子浓度下降有显著性差异(P＜0.05),与1 400 μW/cm2,2 h/d组各培养时间段比较也均有显著性差异(P＜0.05),其余各组与对照组比较差异无显著性；在1 400 μW/cm2,4 h/d组内,培养0,2,4h分别观察时,4h观察组与0h、2h观察组比较有显著性差异(P＜0.05).结论:935 MHz微波电磁辐射可能通过增加小鼠卵母细胞钙离子释放来抑制小鼠卵母细胞成熟,并呈现出一定的剂量反应关系及累积效应.
