分子诊断与治疗杂志
Journal of Molecular Diagnosis and Therapy 분자진단여치료잡지
- 主管单位： 中山大学
- 主办单位： 中山大学
- 影响因子： 0.65
- 审稿时间： 1个月内
- 国际刊号： 1674-6929
- 国内刊号： 44-1656/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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直接快速多色荧光PCR技术在高危型HPV分型中的应用探讨
目的 探讨直接快速多色荧光PCR技术在高危型人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染分型检测中的应用.方法 对2014年3月至2014年10月794例患者宫颈粘液样本,采用直接快速多色荧光PCR技术与传统荧光PCR技术同步进行HPV分型检测,并对比分析.对于检测试剂与对比试剂检测结果不一样的样本,采取测序法复核.选择中国生物制品检定研究院HPV标准品进行18种HPV型别低检出量和特异性分析.同时测试直接快速多色荧光PCR技术在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等多种荧光扩增仪上的扩增效果并进行比较.结果 794例样本中,检测试剂检出高危型HPV阳性患者600例,阴性样本194例.对比试剂检出HPV阳性患者595例,阴性样本199例.直接快速多色荧光PCR技术检测HPV的18个型别的低检测量在100~1000 copies/mL之间;在AB7500FAST、Bio-Rad CFX96、Roche480、AGS9600等仪器的比对分析中,Bio-Rad CFX96检测结果表现佳.Roche480反应时间长,本底相对较高.国产安杰思AGS9600仪器检测与AB7500持平居中.结论 直接快速PCR技术无需核酸提取,样本直接进行快速PCR扩增,检测时间短,反应速度快,特异性高,重复性好,试剂本身带有颜色示踪,对于解决我国临床HPV检测的普及具有重要意义.
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中药对多重耐药铜绿假单胞菌外排泵的作用研究
目的 研究中药与常用抗生素的相互作用和对多重耐药铜绿假单胞菌(multi drug resistant Pseudomonas aeruginosa,MDR-PA)外排泵的作用.方法 采用外排泵抑制剂联合纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)筛选外排泵阳性MDR-PA,并用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)确认外排泵基因高表达菌株.检测10种常用中药对抗生素的作用和对外排泵阳性MDR-PA外排泵基因表达的影响.结果 从34株MDR-PA中筛选到5株外排泵阳性菌,qPCR法检测到这5株菌外排泵基因的表达水平是野生型铜绿假单胞菌PAOl的2倍或2倍以上(P<0.05).黄芩、金银花和夏枯草对环丙沙星有较强的拮抗作用,穿心莲和五倍子对庆大霉素的拮抗作用强,穿心莲和夏枯草对美罗培南的协同作用强.穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子具有促进外排泵基因表达的作用.结论 中药穿心莲、金银花、夏枯草和五倍子可通过促进外排泵基因的表达拮抗抗生素的抗菌作用,临床抗感染治疗时需谨慎使用.
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人乳头状瘤病毒基因分型在宫颈病变中的临床价值
目的 了解人乳头状瘤病毒(HPV)分型在宫颈病变患者中的分布情况,分析不同型别的HPV感染与宫颈病变的关系.方法 回顾2008年7月至2016年5月间,在乌海市妇幼保健院妇科就诊的符合入组条件的1825例妇女,根据其宫颈活检组织学诊断结果分成3组:正常子宫颈组909例;低级别鳞状上皮内病变(LSIL)组668例;高级别鳞状上皮内病变(HSIL)及以上病变组248例.比较3组间HPV感染、亚型分布、多重感染的差异,分析HPV基因分型结果在高级别鳞状上皮内病变及以上病变的作用.结果 与正常子宫颈组比较,年龄是LSIL、HSIL及以上病变的保护因素,OR值为分别为0.951(P=0.000)、0.981(P=0.014).与LSIL组比较,年龄是HSIL及以上病变患病的危险因素,OR值为1.033(P=0.000).HPV感染是HSIL及以上病变患病的危险因素,HSIL及以上病变组与正常子宫颈组比较,HPV感染的OR值52.672(P=0.000),HSIL及以上病变组与LSIL组比较HPV感染的OR值为10.038(P=0.000).与正常子宫颈组比较,HPV6、HPV11、HPV51是LSIL的危险因素(OR值分别为11.041、7.665、2.590,P<0.05);与LSIL组比较,HPV6、HPV11、HPV51是HSIL及以上病变患病的保护因素(OR值分别为0.083、0.342、0.660,P<0.05).HPV16、HPV58、HPV31与HSIL及以上病变患病高风险有关(与正常子宫颈组比较,OR值分别为26.990、6.135、3.315,与LSIL组比较,OR值分别为7.937、2.264、2.426,P<0.05);除此外,HPV59、HPV33、HPV18也与HSIL及以上病变患病高风险有关(与正常子宫颈组比较,OR值分别为3.342、3.178、2.634,P<0.05);此6种亚型除HPV31外均与LSIL的患病高风险有关(P<0.05).结论 HPV基因分型结果可以预测患HSIL及以上病变的风险,有助于宫颈病变患者的分层管理,具有较高的临床应用价值.
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HCV RNA水平与HCV基因型别的相关性研究
目的 探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)载量水平与HCV基因型别的相关性.方法 选取255例丙型肝炎患者,采用实时荧光定量逆转录PCR(reverse transcription quantitative real time PCR,RT-qPCR)检测HCV病毒载量水平,采用PCR-反向点杂交法(polymerase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)进行HCV基因分型检测.结果 255例样本中,PCR-RDB法成功分型的246例(96.47%),未明确分型的9例(3.53%);其中,1b型121例(47.45%),2a型107例(41.96%),3a型16例(6.27%),3b型6例(2.35%),6a型5例(1.96%);5种HCV基因亚型中3b型和6a型病毒载量较高,显著高于其他3个亚型(P<0.05).结论 采用PCR-RDB法进行HCV基因分型时需参考样本定量结果,低病毒载量会影响基因分型成功率;HCV RNA水平与HCV基因型别可能具有相关性.
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激素6项化学发光试剂盒性能比较
目的 对广州市达瑞生物技术股份有限公司与贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司的激素6项化学发光试剂盒进行性能比较,为国产的商品化激素类化学发光法定量测定试剂盒替换进口激素类化学发光法定量测定试剂盒提供依据.方法 用国产的和进口的激素6项化学发光试剂盒分别检测低检测限、精密度、准确度及进行样本比对试验,对样本的检测结果进行相关性和一致性分析.结果 国产的促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,PROG)、催乳素(prolactin,PRL)、睾酮(testosterone,TES)试剂低检测限均低于或等于进口的相应试剂的低检测限;国产的激素6项试剂盒的精密度都<8%,进口的激素6项试剂盒精密度都<12%;各项目的线性相关系数r均大于或等于0.9,相关性很好.结论 国产的激素6项试剂盒与进口的激素6项试剂盒均具有良好相关性及较高的一致性,可替代国外昂贵试剂应用于临床检测和基础医学的研究.
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上皮性卵巢癌血浆中microRNA-30a-5p含量与分级及分期的关系
目的 研究上皮性卵巢癌患者血浆中microRNA-30a-5p与卵巢癌分级、分期的关系,探讨其在卵巢癌中的诊断价值.方法 选取111例上皮性卵巢癌患者,患者病理分级为低级上皮性卵巢癌52例,高级上皮性卵巢癌59例,根据国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期标准:Ⅰ期24例,Ⅱ期27例,Ⅲ期32例,Ⅳ期28例;同期健康女性体检者20例,采用实时荧光定量PCR检测血浆中microRNA-30a-5p的表达,分析microRNA-30a-5p表达与上皮性卵巢癌分级及分期的关系.结果 与正常对照组比较,上皮性卵巢癌患者血浆中microRNA-30a-5p明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),高级上皮性卵巢癌患者血浆中microRNA-30a-5p表达量明显低于低级(P<0.05);随着肿瘤分期恶性度的升高,microRNA-30a-5p相对表达量下降,但Ⅰ期与Ⅱ期结果差异无统计学意义(P>0.05),其余各组差异均有统计学意义(P<0.05).结论 microRNA-30a-5p的表达与上皮性卵巢癌发生、发展以及肿瘤的恶性度有关,为肿瘤的靶向治疗提供了依据.
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系统性红斑狼疮患儿外周血IL-6、IL-10、IL-17水平变化及其在单个核细胞中的表达研究
目的 研究系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患儿外周血中白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(IL-10)、白介素-17(IL-17)水平的变化情况及其在外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达情况.方法 选取46例SLE患儿及20例健康儿童分别为病例组(SLE组)和对照组(Control组),采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测外周血中IL-6、IL-10、IL-17蛋白水平,采用实时荧光定量PCR(quantitative real time polymerse chain reaction,qPCR)技术检测PBMCs中IL-6、IL-10、IL-17的mRNA表达水平,分析比较2组的蛋白和mRNA表达量的差异.结果 SLE组IL-6、IL-10、IL-17蛋白及mRNA表达水平均高于Control组,差异均具有统计学意义(P<0.05).结论 SLE患儿外周血中IL-6、IL-10、IL-17蛋白及mRNA表达水平升高,提示其可能参与SLE患儿的发病过程.
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33例中国型Gγ(Aγδβ)0地中海贫血病例的临床分析
目的 探讨惠州地区人群中国型Gγ(Aγδβ)0地中海贫血的检出率及临床特征,分析其意义及完善地贫防控内容.方法 2015年1月至2016年12月,对参加惠州市孕前和孕期优生健康检查育龄夫妇的24137例血液样本行血常规及血红蛋白电泳检测,并应用液相芯片、导流杂交技术对检出结果分析为可疑地中海贫血样本及产前363例羊水样本进行地中海贫血基因检测,对于疑为β地中海贫血但未检出者加用Gap-PCR技术检测中国型Gγ(Aγδβ)0地中海贫血缺失型基因.结果 在290例加测样本中检出中国型Gγ(Aγδβ)0杂合子29例,中国型Gγ(Aγδβ)0地中海贫血复合α地中海贫血4例,总检出率为0.14%.血常规结果显示血红蛋白正常为26例,轻度下降为7例;红细胞平均体积(mean corpuscular volume,MCV)及红细胞平均血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)均降低;血红蛋白电泳结果显示HbA2正常或轻度降低,HbF升高为(14.56±5.43)%.检出4例为夫妻同型β地贫携带者,行产前诊断,一例胎儿基因型为β-28杂合突变复合中国型Gγ(Aγδβ)0杂合缺失,其中国型Gγ(Aγδβ)0基因遗传自母方,β-28基因遗传自父方,终止妊娠.结论 惠州地区人群的中国型Gγ(Aγδβ)0携带率高,中国型Gγ(Aγδβ)0携带者的临床特征为MCV、MCH降低的基础上HbF值明显升高;中国型Gγ(Aγδβ)0属缺失型β地中海贫血类型,当其有可能与β地中海贫血复合存在时,应进行产前诊断,防止中重型地贫患儿出生.
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肇庆地区血小板供者库的建立及应用
目的 建立肇庆地区已知人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)基因分型及人类血小板抗原(human platelet alloantigen,HPA)HPA-1~6、9、15基因型的无偿机采血小板供者库,为临床血小板输注无效(platelet transfusion refractory,PTR)患者提供HLA及HPA相合的血小板.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸探针(polymerase chain reaction-sequence specific olignuliotide probe,PCR-SSO)检测血小板供者的HLA基因分型及聚合酶链反应-序列特异性引物(polymerase chain reaction-sequence specific primer,PCR-SSP)检测HPA-1~6、9、15基因型.对杂合度高的HPA-3、15随机抽样20个标本进行测序.对3例患者进行HLA-I分型.结果 成功检测出101名无偿血小板捐献者HLA及HPA-1~6、9、15基因型;HPA-3、15的测序结果与PCR-SSP一致.HLA-A位点等位基因共检出11个;HLA-B位点共检出等位基因20个.3例患者中的1例从已知的HLA血小板库中找到完全一致供者,另外2例也找到三位点吻合的血小板供者.结论 建立基于HLA-I类抗原及HPA基因分型的血小板供者资料库,有助于给PTR患者提供HLA和HPA相合的单采血小板.
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量子点作为荧光探针的生物应用进展
量子点作为一种新型的荧光纳米材料,因其量子效应,宽激发光谱及高摩尔消光系数等优点引起了广泛关注,近年来,随着水溶性量子点制备技术的发展,其生物学应用也愈发广泛.本文简述量子点的结构和特性,及水溶性量子点作为荧光探针在生物成像、体外诊断及其他方面的生物学应用,对磁珠量子点在体外诊断的应用、量子点在快速诊断中的应用、量子点的双标记、量子点在光激化学发光法的初步应用作重点论述.另外本文还对其应用的高通量、自动化、多元化作一展望.
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结直肠癌分子分型及其临床意义
结直肠癌在临床表现和治疗效果方面存在高度异质性,同样病理类型和临床分期的结直肠癌在疗效和生存期方面存在明显差异.这些特征增加了结直肠癌的治疗难度.但另一方面给结直肠癌的治疗带来希望的是,在分子水平上发现的一些结直肠癌分子亚型使人们能够更深入了解结直肠癌的异质性,并针对不同分子特征的结直肠癌实施个体化治疗.近年来,微卫星不稳定性已成为评估结直肠癌预后和治疗效果的重要因素.一些分子标记以及KRAS或BRAF基因的突变情况(预测抗EGFR)也已应用于结直肠癌的治疗决策和患者分层.结直肠癌的分子相关研究是结直肠癌研究的重要组成部分,其既可以为结直肠癌的发病机制提供证据,又可以发现和证明新的结直肠癌分子亚型,还可以使研究人员发现影响结直肠癌患者治疗效果和生存期的潜在因素,重要的是可以发现能应用于临床并指导临床的分子标志物.本文对结直肠癌分子分型研究进展进行综述.
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长链非编码RNA与乳腺癌耐药研究
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类转录本长度超过200个核苷酸功能性的RNA分子,本身不具有编码蛋白质的能力,在表观遗传学水平、转录水平、转录后水平上发挥重要的调控作用.以往研究者们对lncRNA与肿瘤发生发展的关系进行了大量的研究.目前,学者们聚焦于lncRNA与肿瘤耐药机制的研究,本文结合近几年国内外新报道,对lncRNA诱导乳腺癌耐药机制进行汇总,旨在为乳腺癌治疗寻找新的靶标和诊疗思路.
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人巨细胞病毒核酸标准物质研制与应用
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是威胁人类健康的重要病原之一.随着分子生物学技术的发展,HCMV核酸水平的检测逐渐得到了广泛的认可,这也就需要研制HCMV核酸标准物质来保证检验数据的真实可靠.本文简要介绍了国内外目前存在的HCMV核酸标准物质的研制情况,并对这些标准物质在应用中遇到的问题进行了阐述,旨在为人巨细胞病毒核酸检测诊断试剂的标准化,以及为其质量控制提供参考.
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浅谈医用电气设备电磁兼容标准在我国的进展及现状
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