军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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大肠杆菌-链霉菌穿梭型BAC载体的构建及功能验证
目的 构建可由大肠杆菌接合转移至链霉菌并整合至其基因组的穿梭型BAC载体,以实现大片段基因簇在大肠杆菌中完成遗传操作后,转移至链霉菌中进行异源表达.方法 从原始B载体pBeloBAC11出发,利用pKD46介导的Red同源重组技术,将一段包含接合转移元件oriT、定点整合元件attp-int和安普霉素抗性基因Am的DNA片段替换其上的氯霉素抗性基因,该DNA片段通过PCR扩增得到,两端为待替换氯霉素抗性基因上下游55 bp的同源臂,替换后的载体通过酶切连入链霉菌组成型启动子ermEP1P2和绿色荧光蛋白(GFP)基因以验证其接合和整合功能.结果 原载体pBeloBACll的氯霉素抗性基因被成功替换,得到载体pBTIBAC1,利用该载体可在变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)TK24和1326中表达GFP,在pBTIBAC1上插入新的多克隆位点(MCS)后得到载体pBTIBAC11.结论 pBTIB AC11载体可通过接合转移携带外源基因片段进入链霉菌并整合至其基因组中,同时保留了原有BAC载体的功能元件,为大片段在链霉菌中的并源表达奠定了基础.
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用大肠杆菌制备O157多糖-菌毛蛋白结合物的研究
目的 以大肠杆菌O157型多糖与菌毛蛋白PilE为模型,在大肠杆菌中重构脑膜炎奈瑟球菌的O-糖基化修饰系统,为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗技术提供基础.方法 用Red重组技术敲除大肠杆菌W3110的O抗原连接酶基因waaL,构建CLM24菌株.在该菌株中共表达脑膜炎奈瑟球菌菌毛蛋白基因pilE、寡糖转移酶基因pglL,构建O-糖基化修饰系统.分别转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL与大肠杆菌O157型多糖表达载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,再利用Western印迹检测菌毛蛋白PilE的修饰情况.结果 利用抗His-tag单抗进行Western印迹检测,16℃ IPTG诱导条件下,转化大肠杆菌鼠李糖转移酶基因wbbL于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66 EH-pilE-his/ pETtac28-wbb L-pglL与其他对照菌相比,不仅在相对分子质量为19×103处有特异性条带,而且在相对分子质量(40 ~60)×103处也出现了特异的梯状条带;转化大肠杆菌O157的O多糖基因簇克隆载体于构建了O-糖基化修饰系统的大肠杆菌,重组菌CLM24/pMMB66EH-pilE-his/ pETtac28-pglL/ pACY C184-O157用抗O157多抗和抗His-tag单抗进行Western印迹检测,在相对分子质量(40 ~60)×103处均产生特异的梯状条带.结论 在大肠杆菌中重建的O-糖基化修饰系统可以利用自身的O16型O多糖或异源的O157型O多糖修饰菌毛蛋白PilE,获得多糖-蛋白结合物.本研究为建立一步生物交联法制备多糖-蛋白结合疫苗提供了技术基础.
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HLA-A/B/C/DRB1/DQB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病关联分析
目的 探讨人类白细胞抗原(HLA)-A/B/C/DRB1/DQB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)的关联性.方法 采用聚合酶链反应序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术对277例ALL患者以及1370例健康无血缘关系对照组进行HLA-A/B/C/DRB1/DQB1基因分型,并将结果采用病例对照研究方法进行基因频率、单倍型频率以及疾病发生相对危险率(RR)的研究.结果 ALL患者Cw7的基因频率较对照组升高(P<0.05),其RR为6.0202;而HLA-A30、B13及Cw4基因频率较对照组降低(P<0.05);其RR分别为0.5181、0.6907和0.4769.两位点单倍型B13-Cw6在疾病组较对照组频率显著性升高(P<0.05),其RR为4.7861.两位点单倍型A30-B13、A30-DR7、B13-DR7以及扩展单倍型A30-B13-Cw6-DR7-DQ2在疾病组均较对照组频率显著性降低(P< 0.05),其RR分别为0.3566、0.4933、0.4824和0.4052.结论 我们在中国汉族人群中通过大样本量的病例对照研究来探寻HLA基因多态性与ALL之间的关联性,并取得了初步结果.HLA-Cw7与ALL的易感性相关;HLA-A30、B13、Cw4基因频率则与ALL发生呈负相关,可能是ALL的保护性基因;某些HLA单倍型亦与ALL的发生有关.
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5-羟色胺与褪黑素在母婴分离致腹泻型肠易激综合征模型大鼠中的表达
目的 探讨母婴分离致腹泻型肠易激综合征(IBS-D)大鼠血浆中5-羟色胺(5-HT)及褪黑素(MT)的表达.方法 建立新生期母婴分离致IBS-D大鼠模型,采用糖水偏嗜实验评价模型动物精神行为学的改变;对动物排便情况进行观察与计数分析,并进行结直肠扩张(CRD)和腹壁撤退反射(AWR)实验,研究IBS-D模型大鼠肠道感觉运动功能的变化;采用ELISA试剂盒检测大鼠血浆5-HT和MT含量.结果 与对照组相比,IBS-D模型大鼠糖水偏嗜度显著降低,粪便颗粒含水量增多且数量增加,大鼠腹部抬起和弓背的容量阈值显著降低,血浆中5-HT及MT的含量较对照组显著升高.结论 IBS可导致大鼠快感消失以及肠道运动及感觉功能异常,这种改变可能与血浆中的5-HT和MT的表达升高有关.
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温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控研究
目的 研究温度和酸度对田鼠型鼠疫耶尔森菌psa位点的转录调控作用.方法 首先设计相关跨基因引物,用RT-PCR方法验证sa位点的相关操纵子结构.扩增操纵子首基因上游启动子区500 nt序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,将重组质粒转入鼠疫菌中,通过测定β-半乳糖苷酶活性差异来判断不同温度(26和37℃)和酸度(pH 6.0和pH 8.0)对psaE和psaA的调控关系.后提取鼠疫菌在上述不同温度和酸度条件下的总RNA,采用引物延伸实验进一步明确温度和酸度对psaA的调控关系.结果与结论 RT-PCR结果证实了田鼠型鼠疫菌的psa位点由操纵子psaEF和psaABC构成;半乳糖苷酶和引物延伸实验结果显示在37℃、pH 6.0培养条件下psaABC的转录水平高,而psaEF的转录水平无明显变化,提示psaA的表达水平在37C酸性条件下表达量高,psaE则不受温度和酸度的调控.
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西藏林芝地区蚂蟥的药物现场防治效果观察
目的 寻找适用于野外作业、边防部队巡逻时针对蚂蟥的个人防护措施与驱避药物并观察其驱避效果.方法 对西藏林芝地区的蚂蟥,即斑纹山蛭[Haemadipsa zeylanica zeylanica(Moquin-Tandon,1826)]进行危害调查,同时选择药物做现场驱避与杀灭效果试验观察.采取人体引诱捕捉蚂蟥,计算密度;采用回顾性调查与心理学问卷相结合的方式,了解部队人员受蚂蟥侵害状况;采用药物现场试验评价药物对蚂蟥的驱避率和致死率.结果与结论 初步鉴定西藏林芝地区蚂蟥种类为斑纹山蛭.吡啶生物碱、苦参碱和联苯菊酯3种药物对蚂蟥的驱避均有效;用药对作训服进行喷雾处理后,与对照相比,用药人员对蚂蟥的驱避率分别为87.2%,74.4%和66.7%;30 min后对吡啶生物碱、苦参碱处理组的衣物上附着的蚂蟥进行观察,24 h死亡率分别为100%和50%.以吡啶生物碱防治蚂蟥效果佳,具有较好的开发前景.
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洛铂抑制胃癌SGC-7901细胞增殖及其机制的初步研究
目的 观察洛铂对胃癌细胞SGC-7901细胞增殖的影响,并探讨其作用机制.方法 将对数生长期的SGC-7901细胞分阴性对照组(不加药物)和实验组(加入不同浓度洛铂),采用倒置显微镜观察不同浓度下细胞生长状态;MTT法观察对细胞的增殖抑制;Western印迹方法分析不同浓度洛铂对SGC-7901细胞内Bcl-2蛋白表达水平的影响.结果 倒置显微镜下观察,洛铂能抑制细胞增殖,出现明显的凋亡学形态特征.MTT法显示洛铂能抑制细胞增殖,并呈浓度及时间依赖关系.Western印迹结果显示洛铂能使SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达水平下降.结论 洛铂能明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,诱导凋亡,可能与调节SGC-7901细胞Bcl-2蛋白表达水平相关.
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军事医学中文图书出版现状分析
目的 分析军事医学中文图书出版现状,探讨军事医学图书出版的规律和趋势.方法 采用信息检索及统计学方法对我国军事医学中文图书的出版情况进行数据处理,得到军事医学图书出版机构分布、学科分布和作者所在机构分布的特点及其之间的相互关系.结果与结论 军事医学图书的出版对学科发展有促进作用,提出了军事医学图书选题策划的学科和作者机构策略及构建军事医学中文图书数据库的设想.
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小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证
目的 制备小鼠源性A20结合核因子KB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-KB activation 1,mABIN1)的多克隆抗体并进行功能验证,利用该抗血清对大鼠脑区ABIN1的分布进行验证.方法 利用mABIN1片段与钥孔铖血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦联得到的肽段为免疫原,免疫新西兰大耳白兔3次,共35 d,获得抗血清,分别用ELISA、蛋白免疫(Western)印迹和免疫组织荧光化学法对抗体的特异性进行验证;使用上述验证所得的特异性抗血清,通过Western印迹检测ABIN1在大鼠各脑区的分布;对所得到的特异性抗血清进行纯化.Western印迹证明,纯化后的抗体杂带较纯化前明显降低,但效价也有所下降.结果与结论 成功制备了兔抗小鼠ABIN1抗血清并对抗血清进行纯化,经该抗血清首次验证ABIN1在大鼠嗅球、皮质、海马、纹状体、伏隔核、丘脑、下丘脑、小脑、脑干及脊髓等中枢神经系统不同部位均有广泛分布,为在动物体内进行ABIN1生物学功能研究提供了有利工具.
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HLA-B*2705分子结构对其在原核细胞可溶性表达影响的研究
目的 研究人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-B*2705分子结构对其在原核细胞可溶性表达的影响.方法 采用RT-PCR法将HLA-B * 2705基因的全长、胞外区和α1、α2功能区分别进行克隆并连接到pET-32a(+)表达载体.经IPTG诱导表达,并经超声破碎、层析和透析纯化蛋白,再经体外微量细胞淋巴毒反应检测蛋白质活性.结果 成功构建3种pET-32a(+)表达载体,经IPTG诱导后,HLA-B* 2705基因全长和胞外区主要以包涵体的形式表达,可溶性蛋白的量较低;而α1和α2功能区则以高效可溶性形式表达,通过体外微量细胞淋巴毒实验证实,HLA-B* 2705的α1和α2功能区可溶性蛋白可与HLA-B27抗体特异性结合,并成功阻断补体介导的细胞毒作用.结论 α1和α2功能区能够在原核细胞中高效表达可溶性蛋白,并具有蛋白功能,而HLA-B* 2705基因全长和胞外区主要以包涵体的形式表达,表明蛋白质的大小和空间结构对于其可溶性表达具有重要影响.
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抗精神分裂症药物的研究进展
精神分裂症是一种严重影响患者及家属生活质量的致残性精神障碍.目前对精神分裂症的治疗仍以药 物疗法和电惊厥疗法为主,尽管心理疗法和康复疗法也是不容忽视的治疗手段,但在临床上抗精神分裂症药物的应用仍然占据核心地位.典型抗精神病药能减少精神分裂症的阳性症状,却伴发锥体外系不良反应;而非典型抗精神病药尽管临床效应谱更广,锥体外系不良反应有所减少,但仍伴随其他不良反应,因此,迫切需要寻找和开发更为安全有效的药物.该文综述了典型和非典型抗精神分裂症药物的优势与问题及研发趋势.
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高致病性禽流感H5N1病毒基因改造引发争议案例剖析
高致病性禽流感(HPAI) H5N1病毒基因改造研究及美国国家生物安全科学咨询委员会(NSABB)的监管建议引起广泛争议.旨在通过对HPAI H5N1病毒基因改造及监管相关信息的分析,探讨有关两用性研究发展和监管的趋势.通过研究,梳理并总结出三大核心争议问题:禽流感H5N1病毒基因改造风险、实验室生物安全等级及研究论文是否应该全文公开发表.
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蛋白SUMO化修饰与疾病关联性的研究进展
类泛素化修饰蛋白(small ubiquitin-related modifier,SUMO)是一类重要的类泛素蛋白,SUMO化修饰对底物蛋白功能的发挥起着重要的调节作用.SUMO化修饰的异常与人类许多重大疾病密切相关,如肿瘤、神经退行性病变、脑损伤、糖尿病以及家族性扩张型心肌病等.
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以5-HT1A受体为靶标的抗抑郁药物研究进展
5-HT1A受体是含量丰富的5-HT受体亚型,广泛分布于脑内,与抑郁症关系密切.抑郁症患者的5-HT1A受体表达异常,改变5-HT1A受体表达则影响抗抑郁治疗的效果;联合应用5-HT1A受体激动剂与选择性5-HT重摄取抑制剂(SSRIs)能够增强SSRIs的抗抑郁作用,缩短起效时间.近年研究发现,5-HT1A受体转录调控区C(-1019)G 基因多态性与抑郁症的发病相关,并影响抗抑郁药物的效应.该文综述了5-HT1A受体在抑郁症发生和治疗中的作用及其作为药物研发新靶点的研究进展.
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重度贫血在老年心肌梗死患者中的意义探讨
1 临床资料患者男性,66岁,主因霍奇金淋巴瘤4年7个月、右下肢肿胀1个月、胸闷憋气2d入院.入院第3日凌晨患者自觉胸闷憋气明显,急查床旁心电图(图1)显示,V3~V6导联的T波明显高尖;入院时心电图检查显示V5、V6导联的T波稍低平.两份心电图相比较,考虑为心内膜下心肌缺血.急查心肌肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)为1.75 ng/ml,显著高于正常,结合此时患者的临床症状,诊断为急性非ST段抬高型心肌梗死.给予硝酸甘油泵入后症状有所好转.
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承德地区785例变应性鼻炎患者过敏原调查结果与分析
变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是临床上常见的鼻部疾患,是发生在鼻黏膜的变态反应性疾病,鼻黏膜反应性增高是其主要特点[1].其机制主要为IgE介导的Ⅰ型变态反应.在此反应过程中,有多种细胞因子、炎性介质等参与[2].正常人血清中IgE水平很低,仅占血清免疫球蛋白总量的0.03/万,而AR患者血清IgE可高于正常人1000 ~ 10 000倍[3].承德地区地处燕山山脉,属温带大陆性季风型山地气候,植被丰富,由此导致AR的过敏原种类繁多,许多患者常因难以找到病因而致反复发作,因此,发现过敏原并采取有效措施避免与之接触,是治疗该类疾病的关键.
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基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌
目的 建立快速检测结核分枝杆菌环介导的恒温扩增法.方法 针对结核分枝杆菌特异性保守靶序列IS6110,采用环介导的恒温扩增法(LAMP)引物设计原则设计6条引物,特异性识别靶基因序列上8个独立区域.LAMP反应过程中会产生焦磷酸镁白色沉淀,可以通过实时监测反应液浊度来判断反应结果.结果 试验表明,在60~ 65℃恒温条件下,LAMP反应60 min内即可完成;如果在反应前添加钙黄绿素,可通过反应液颜色的变化来判断反应结果;LAMP方法的低检出核酸浓度为101 pg/μl,其灵敏度是PCR方法低检出浓度1.01 ng/μl的10倍,且具有良好的特异性.结论 LAMP方法检测结核分枝杆菌具有简单、快速、价廉、特异性强、灵敏度高等特点,适用于疾控工作及临床筛查或快速检测结核杆菌.
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可再生滤毒通风装置研究与设计
目的 为应对战场核化生武器威胁、生化恐怖袭击和突发公共卫生事件,针对现有卫生装备三防系统需要定期更换、防护时间短等问题,研制一种可再生滤毒通风装置.方法 分析现有滤毒通风装置的不足,应用变压吸附技术,研制可再生滤毒通风装置.结果 可再生滤毒通风装置可以过滤净化空气中的污染物,为舱室内人员提供洁净的空气.结论 可再生滤毒通风装置能够满足不同车辆的需求以及民用核化生防护的要求,提高了三防技术水平.
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一种通用型颤振珠磨式微生物快速裂解系统的设计与实现
目的 开发一种结构简单、操作方便、运行平稳、成本较低的通用型颤振珠磨式微生物快速裂解系统,解决临床检验和诊断对微生物快速裂解的迫切需求.方法 设计分析了传动机构和控制电路,然后加工装配制作系统样机.选择金黄色葡萄球菌作为裂解对象,通过平板培养统计裂解率,并探索裂解率与浓度、裂解时间和电机转速之间的关系.结果 相同裂解条件下,低浓度的金黄色葡萄球菌的裂解率高于高浓度;电机转速相同时,不同浓度的金黄色葡萄球菌的裂解率均随裂解时间的增加而提高,呈“S”型变化;随着电机转速的增加,金黄色葡萄球菌的终裂解率逐渐提高.结论 裂解释放DNA的定量检测结果证明所设计系统能够有效裂解微生物样本,其裂解效能优于实验室常用裂解方式.
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三维液力聚焦的计算设计及其在血细胞分析仪中的应用
目的 研究三维液力聚焦的分析和计算设计方法,并应用该方法设计实现血细胞分析仪的液力聚焦流动室.方法 利用势流理论和层流模型对液力聚焦进行理论分析,推导共轴圆柱环式三维液力聚焦直径的预测公式,再结合数值仿真探讨加速段收缩角、进样管出口与加速段相对位置等流动室结构参数和鞘液/样本液速率比对聚焦效果的影响,并以此为基础构建血细胞分析仪的液力聚焦流动室系统.结果 由仿真结果可知,在保证层流的前提下,鞘液/样本液平均速率比越大,聚焦的过渡越短,稳定聚焦液流的直径也越小;加速段收缩角、进样管出口与加速段相对位置的变化通常不会改变终的聚焦液流直径,但增大加速段收缩角、令进样管出口与加速段较大直径端平齐均有助于聚焦尽快完成过渡而达到稳定状态.基于仿真结果和工程实际设计构建的血细胞分析仪液力聚焦流动室系统在模拟运行中获得了与理论预测相一致的结果.结论 三维液力聚焦的计算设计方法可为血细胞分析仪的流动室设计提供指导,但在实际应用时必须考虑工程的可实现性,根据需求综合确定三维液力聚焦的各项参数.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |