军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位： 军事医学科学院
- 主办单位： 军事医学科学院
- 影响因子： 0.58
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1674-9960
- 国内刊号： 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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华南马尾杉生物碱成分的研究
目的:研究石杉科华南马尾杉[Phlegmariurus fordii(Baker) Ching]中的生物碱成分.方法:应用多种色谱技术对华南马尾杉总碱部分进行分离纯化,依据四大光谱数据解析鉴定化合物结构.结果:从华南马尾杉中分得1个单体生物碱.结论:该化合物为一个新结构生物碱,命名为异福定碱(isofordine).
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二苯乙烯类化合物E1对2型糖尿病大鼠心肌病变的影响
目的:观察灌胃给予二苯乙烯类化合物(E1)对实验性非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)大鼠血糖、血脂及心肌并发症的影响.方法:通过尾静脉注射小剂量链佐星(链脲佐菌素,streptozotocin,STZ)损伤大鼠胰岛细胞造成其糖耐量异常,继而喂以高糖_高脂饲料,诱发动物肥胖形成的2型糖尿病大鼠模型;电镜技术.结果:灌胃给予二苯乙烯类化合物(E1)能明显降低NIDDM大鼠空腹血糖及血清甘油三酯、胆固醇含量,减轻NIDDM大鼠心肌病变程度.结论:二苯乙烯类化合物(E1)具有显著的降血糖、降血脂作用,并可减轻NIDDM大鼠心肌病变程度.
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应用组织工程化人工软骨修复羊关节软骨缺损的实验研究
目的:探索以多孔磷酸三钙生物陶瓷材料为支架构建组织工程化软骨修复羊关节软骨缺损的可行性.方法:实验分3组.实验组(n=12):分离培养羊自体关节软骨细胞,采用微载体技术在旋转生物反应器内进行扩增,扩增后的软骨细胞接种到预制的β_磷酸三钙(β_TCP)多孔生物陶瓷材料上,细胞_材料复合体经体外孵育后,无菌条件下植入预制的羊前肢肱骨头关节面缺损处;单纯材料组(n=12):采用单纯β_TCP材料修复羊关节软骨缺损;空白对照组(n=4):制备的羊关节软骨缺损区未做任何修复.术后3和6个月分别取材,进行缺损区组织学、组织化学和免疫组织化学分析.结果:在实验组羊关节软骨缺损处表面肉眼可见透明软骨样组织形成.组织学检查发现,术后3个月时材料降解明显,未降解吸收的材料孔洞内广泛分布着新生软骨组织,软骨细胞外基质丰富,Ⅱ型胶原染色阳性.至术后6个月,支架材料几乎完全降解,缺损区被新生软骨组织所取代.在单纯材料组羊关节软骨缺损处术后3个月时,可见从缺损区边缘有新生软骨组织向支架材料内长入,支架材料吸收明显.至术后6个月,可见从缺损区边缘长入到支架材料内的新生软骨组织逐渐增多,但材料的中心部位未发现新生软骨形成.空白对照组羊关节软骨缺损区至术后6个月,仅见少量软骨组织从缺损区边缘向缺损区内长入,缺损中央大部分区域仍未得到修复.结论:β_TCP多孔生物陶瓷是一种理想的软骨组织工程支架材料,以其为支架构建的软骨组织工程产品有望不久获得临床应用.
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丙型肝炎病毒第一高变区代表序列重组肽的交叉性研究
目的:研究丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)第一高变区(hypervariable region 1,HVR1)抗原的交叉反应性,获得适合我国HCV感染株的高交叉反应性HVR1序列及其组合. 方法:对我国报道的HVR1序列,用计算机进行同源性分析,从中选出可能具有高交叉反应的代表性HVR1序列,也选择文献报道的具有高交叉反应性的HVR1序列或HVR1模拟肽序列.用合成基因及重组表达技术,获得一系列重组HVR1肽,并用间接ELISA法研究这些重组HVR1对我国HCV阳性血清的交叉反应性.结果与结论:本研究获得了12条重组HVR1肽抗原,用随机选择的27份我国HCV阳性血清进行交叉反应性检测,发现每条重组HVR1均和不止一份的阳性血清有反应.选择其中4条适合我国的交叉反应性较好的重组HVR1,其交叉反应率可覆盖27份阳性血清的25份(92.5%),对解决HCV疫苗研究中存在的变异问题具有重要意义.
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重组人蛋白C在CHO/dhfr+细胞中的表达与分析
目的:人蛋白C具有重要的抗凝功能,与复发性血栓性疾病、蛋白C缺陷症、创伤等有重要关系.血源蛋白C成本高、工艺复杂且存在纯度、稳定性、安全性等问题,研制重组人蛋白C具有必要性.目前尚无此类产品上市.本研究拟从人肝细胞中克隆蛋白C的cDNA,构建人蛋白C的哺乳动物细胞表达载体,实现重组人蛋白C在CHO/dhfr+中的表达.方法: 用RT_PCR从人胎肝细胞mRNA中扩增人蛋白C的全长cDNA片段,将之克隆入pGEM_T载体并测序.目的片段插入真核表达载体pIRESneo以构建重组表达质粒.磷酸钙共沉淀法转染CHO/dhfr+细胞,G418筛选抗性克隆.Western 印迹法检测细胞培养上清.Hitrap Q进行色谱纯化.表达产物经蛙蛇蛇毒激活后以APTT法测定抗凝活性.结果:RT_PCR扩增到长1*!386*!bp的DNA片段,序列与已报道的人蛋白C一致.所构建的表达质粒pIREShPC转染CHO/dhfr+细胞,经G418加压筛选得到7株表达细胞.Western印迹法检测发现表达产物能与抗人蛋白C单克隆抗体结合,相对分子质量与人蛋白C一致.Hitrap Q纯化重组蛋白回收率＞60%.表达产物抗凝活性略低于天然人蛋白C.
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幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合表达产物的初步纯化及其在小鼠体内免疫效应活性分析
目的:探讨幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合蛋白的免疫生物学活性.方法:采用亲和层析、离子交换和凝胶过滤对幽门螺杆菌热休克蛋白A与尿素酶B融合蛋白进行初步纯化,用粗纯化蛋白对小鼠进行免疫,然后分析其免疫活性.结果:采用亲和层析或离子交换和凝胶过滤后,融合蛋白的纯度分别可达到65.6%和90.2%.该融合蛋白可诱导小鼠产生抗幽门螺杆菌的胃肠黏液IgA和血清IgG抗体,并促使免疫小鼠脾脏T淋巴细胞CD4+/CD8+比值的增加.结论:重组热休克蛋白A与尿素酶B融合蛋白可以诱导在未来免疫预防中起积极作用的免疫应答反应.
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5种虫媒病毒的细胞培养及空斑试验
目的:选择一株对5种虫媒病毒:马雅罗病毒(MAY)、西门利克病毒(SFV)、墨累谷脑炎病毒(MVE)、伊利乌斯病毒(ILH)和布尼安姆韦拉病毒(BUN)敏感的细胞用于这5种病毒生物学性状的研究.方法:将不同稀释度的乳鼠脑病毒悬液接种到BHK21,LLC_MK2,A549和C6/36传代细胞上,进行这5种病毒的敏感性试验,选出一株对5种病毒较敏感的细胞株;对敏感细胞株进行三因素三水平正交试验,探索细胞的佳培养条件;进行5种病毒的空斑试验.结果:BHK21细胞对5种病毒细胞病变特征明显,出现时间较早,滴度较高,适用于5种病毒的培养.在合适条件下,BHK21细胞单层可以维持7d以上,5种虫媒病毒在BHK21细胞上出现了大小、形态都不相同的空斑.结论:BHK21细胞在60% DMEM培养液、30%的0.5%水解乳蛋白、10%小牛血清、常量青、链霉素和50*!μg/ml卡那霉素,保持pH 7.2条件下生长好,能够满足5种虫媒病毒生物学性状研究的需要.
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端粒酶催化亚基基因表达激活人胚肺成纤维细胞端粒酶活性
目的:通过端粒酶催化亚基基因转入人胚肺成纤维细胞,激活人胚肺成纤维细胞端粒酶活性,探讨其在延缓细胞衰老中的作用.方法:用PCI_hTRT质G418筛选获得稳定表达端粒酶活性的人胚肺成纤维细胞,采用RT_PCRTRAP法mRNA和端粒酶活性表达情况.结果:获得了表达端粒酶活性的人胚肺成纤维细胞,其寿限长于正常人胚肺成纤维细胞.结论:端粒酶催化亚基异位表达可以激活人胚肺成纤维细胞的端粒酶活性,并延长人胚肺成纤维细胞的寿命.
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D,L-色氨酸对映体的环糊精手性识别荧光定量分析
目的:D,L_色氨酸对映体的荧光法同时测定.方法:在β_环糊精存在下,D,L_色氨酸对映体呈现显著不同的手性包络差异,并与酸度和温度密切相关,第一次成功地实现了该对映体的手性识别荧光测定.结果和结论:该方法在D_或L_色氨酸对映体互为50倍量的混合物中, 可以准确测定D_或L_色氨酸对映体.
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亚细胞定位及信号转导检测技术在hrnt_1基因功能研究中的应用
目的:hrnt_1是本实验室克隆的全长基因,GenBank Nr库中编号为AF223393.实验证实该基因与支气管上皮细胞恶性转化相关,但具体的生物学功能尚不清楚.本研究旨在建立一种功能研究的方法,为探索hrnt_1在细胞恶性转化过程中的生物学功能提供线索.方法:构建hrnt_1与pEGFP荧光素表达载体,通过融合蛋白的表达,观察hrnt_1基因产物在细胞中的位置分布;利用信号通路检测技术,观测hrnt_1对细胞内信号转导通路的影响.结果:hrnt _1产物主要分布在细胞核中,对Myc/Max,GR,NFκB, EIK_1/STAT等核转录因子活性有上调作用.结论:细胞定位与信号通路检测技术相结合的方法简便、快速,适用于新的疾病基因功能研究.
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α粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D癌变克隆的细胞遗传学分析
目的:分析α_粒子诱发人支气管上皮细胞BEP2D恶性转化细胞克隆的核型,探讨辐射致癌的细胞遗传学变化规律.方法:1.5*!Gyα粒子照射BEP2D细胞恶性转化后进行亚克隆,用G带显示法分析亚克隆细胞核型.结果:分析了5个恶性转化亚克隆细胞(BERP35T_1,_2,_4,_5,_6),基本核型与亲本细胞BEP2D相近,但有着明显的染色体缺失差异.BERP35T癌变细胞系缺失1条13号染色体和Y染色体;1条2号染色体的长臂增加;缺失正常的12号染色体,出现1条长臂增加的12号染色体.此外,2株癌变细胞(BERP35T_2和BERP35T_4)多倍体高达40%,明显高于BEP2D细胞.结论:染色体缺失(尤其是13号染色体缺失)是辐射致癌的一个显著遗传学特点,2号和12号染色体长臂增加可能导致某些肿瘤相关基因的扩增或激活,促进细胞的恶性转化.
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肌酸激酶-MB假性升高原因及与疾病的关系研究
目的:在生化检验中,明确某些非心源性疾病患者血清中心肌型肌酸激酶同工酶(CK_MB)活性升高的原因及与疾病的关系.方法:对常规检测中CK_MB活性异常,且CK_MB/CK比值超过30%的30例患者,进一步用CK同工酶琼脂糖凝胶电泳鉴定,并结合病情进行分析.结果:经CK同工酶电泳证实,此组患者CK_MB活性实际为正常,但出现脑型肌酸激酶同工酶(CK_BB)或异常CK同工酶带.结论:干化学测定CK_MB时,如果出现CK_BB或异常CK同工酶,常出现CK_MB假性升高,可用CK_MB/CK比率大于30%加以鉴别.
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东部马脑炎病毒E2基因的克隆与表达
目的:克隆表达东部马脑炎病毒(eastern equine encephalomyelitis virus,EEEV)E2基因HT5"H 方法:由病毒感染的鼠脑制备总RNA,利用RT_PCREEEV E2?pGEM_T easy载体E2基因克隆至谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX_5x_2中±Western blotting)和ELISA法分HT5"H 结果:经过RT_PCRE2基因片段的序列是正确的,并且在原核载体中得到表达,目的蛋白占总菌体蛋白的24.5%,主要以包涵体形式存在.WesternóGST_E2Triton X_100,1*!mol/L和2*!mol/L尿素E2融合蛋白作为包被抗原初步建立了间接ELISA法,结果表明与兔抗EEEV血清起特异反应,但与兔抗WEEV血清无交叉反应.结论:东方马脑炎病毒的E2基因在大肠杆菌中得到稳定表达,表达的GST_E2EEEV E2μEEEV基因工程诊断试剂奠定了基础.
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131I 治疗后48例甲亢未缓解患者的临床指标分析
目的:探讨第一次131I治疗后甲亢未缓解患者的临床指标变化情况.方法:比较了48例甲亢未缓解患者131I 治疗前后的甲状腺功能生化检查,24*!h内摄131I率峰值及甲状腺重量变化情况.结果:131I治疗前后TT3,TT4,TSH相对稳定,而131I治疗后的摄131I率峰值、甲状腺均较治疗前变小.结论:131I能回缩甲状腺,即使甲亢患者的临床症状未缓解;因131I治疗后患者的摄131I率峰值减低,说明敏感性可能降低,在计算第二次131I治疗剂量时,要调整给予的吸收剂量.
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不同靶标的噬菌体展示肽库筛选的研究新进展
噬菌体展示技术自建立以来,经过十几年的发展,逐渐成为一个强有力的筛选工具.用于筛选的靶标也越来越具有多样性,不仅是分子,新鲜分离或培养的细胞,甚至活体器官都可作为筛选的对象,使这一技术有了更广泛的应用前景.
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基于E2糖蛋白的丙型肝炎疫苗的研究进展与展望
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒感染所引起的一种严重的传染病,目前全世界约有1.7亿感染者,我国的感染率为3%～5%.HCV感染后在体内持续存在和被清除的机制仍不明确.由于缺乏有效HCV体外增殖系统及中和抗体活性的检测技术,使预防性疫苗研究十分困难.但近的研究发现,HCV膜糖蛋白E2可能具有中和性抗原表位,特别是它的高变区1(HVR1)更是较为明确的中和表位,而且该表位具有一定的交叉反应性,因此为疫苗的研究提供了新的希望.本文概述了当前基于HCV E2糖蛋白的预防性HCV疫苗和相关动物模型的研究现状与进展,并分析了疫苗研制中存在的问题和疫苗研制的策略.
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河豚毒素定量检测的研究进展
河豚毒素是钠离子通道阻断剂,是一种强海洋神经毒剂.由于其在医学、军事等领域有广阔的应用前景,一直受到国内外学者的关注.本文对河豚毒素检测手段方面的进展进行了综述.
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原子力显微镜在生物医学中的应用
原子力显微镜是观察样品表面结构的一种新的工具,它具有比传统扫描电子显微镜更高的分辨率,并且可以在生理条件下进行实时观察.同时在分子水平上它还是检测样品之间相互作用力的一个强有力的工具.近年来,原子力显微镜越来越多地应用到生物医学的各个方面,并且取得了很多令人鼓舞的结果.
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同步双侧乳癌1例报告
1 临床资料患者,女,40岁.因发现右乳肿物进行性增大7年入院.7年前发现右乳肿块,大小约为0.3cm×0.3cm,质硬,边界清楚,活动度好,无乳痛,无溢液,于当地行B超检查诊断为纤维瘤.后肿物进行性增大,2000年5月增大至4.8*!cm×2.4*!cm,于当地医院行穿刺活检术,病理示癌.既往史无特殊.父亲于1984年死于食管癌,母、姨、姑、姐、妹均无乳癌病史.
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海星多糖的分子量测定
海星酸性粘多糖除了作代血浆用外,还发现它能提高免疫功能,对血凝时间及血清胆固醇也有影响.为综合利用海洋资源,开发多用途海洋生物制品,海军某医院研制出陶氏太阳海星酸性粘多糖,本文就其分子量的蒸气压渗透法和超速离心法测定作一概述.
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肺癌转移相关基因的快速克隆
肿瘤细胞转移能力的获得是多种基因的结构、功能和表达情况改变积累的结果.Filder提出的肿瘤异质性学说以及Wessinman提出的将细胞表型与其基因结构及表达的特征相联系的表型克隆思想为认识这些差异基因提供了基础.因此,我们应用抑制消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH )这一表型克隆技术,以源于同一母系具有不同转移能力的一对肺巨细胞癌细胞株为模型,藉以找出与肺巨细胞癌转移促进相关的基因,以便为进一步研究肿瘤转移的分子机制打下基础.
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芥子气中毒的临床护理
芥子气是糜烂性毒剂的一种,属于致死性化学战剂之一.其渗透性强,能通过眼、呼吸道、皮肤伤口及消化道等途径直接吸收后中毒,并可引起机体多方面的中毒.在平时,防化兵用其作为侦检、消毒训练的对象;医药卫生界曾用其制成药膏用于银屑病的治疗.由于管理不善,偶有意外中毒发生.现将我院收治的98 例芥子气中毒后的临床护理体会介绍如下.
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电磁辐射对猕猴中枢神经系统的影响
目前,电磁辐射已成为人们十分关注的一种特殊污染,受其影响的人数逐年增加[1].由于暴露在电磁辐射环境中可能影响到人们的健康,其潜在的危害已引起人们的高度重视,尤其对中枢神经系统的危害更是不容忽视.本文试图用高场强电磁脉冲(electromagnetic pulse ,EMP)辐照猕猴,观察其神经行为及脑电图在辐照前后变化的动态过程,并对辐照后136136d自然死亡的猕猴进行海马的超微结构观察,初步探讨EMP对中枢神经系统的影响.
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小鼠骨髓巨核系祖细胞集落(CFU_MK)培养方法的建立及染色方法的改进
目的:为深入探讨巨核系祖细胞增殖、分化的调控机制提供有效的技术途径.方法:建立了小鼠骨髓CFU_MK的培养方法,并对影响集落形成及染色等条件进行了改进.结果与结论:单因子rhIL_3,rhIL_6,rhGM_CSF,rhEPO,rhTPO和脾条件培养液及再障狗血清均具有不同程度的刺激CFU_MK生成的作用,尤以再障狗血清的刺激活性强;接种细胞数为(2～3)×105/ml,培养7～10d时CFU_MK的集落形成率较佳;采用改进后的不转移、不洗涤、原位复染并4℃放置24*!h的染色条件,可获得比常规染色更高的集落着色率.
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双抗体夹心ELISA检测生殖支原体抗原方法的初步建立及临床应用
目的:建立检测生殖支原体(Mycoplasma genitalium, Mg)抗原的双抗夹心ELISA方法,探讨其临床应用的可行性.方法:采用不同株Mg单抗用ELISA双抗夹心法检测Mg抗原,摸索该方法检测Mg抗原的佳实验条件.对Mg标准株及108份临床标本进行平行测定,观察双抗夹心ELISA方法的敏感性和特异性及该方法与PCR检测方法的符合率.结果:包被单抗量为20*!μg/ml,酶标记单抗1∶200稀释时,P/N值大;检测Mg抗原敏感度达2*!μg/ml;108份临床标本PCR检测阳性率8.26%(10/108);双抗夹心ELISA法检测阳性率7.41%(8/108),两者符合率达89.71%.结论:建立的双抗夹心ELISA法检测Mg抗原具有快速、敏感、经济、简便易行等优点.
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一种改进的用于测定细胞周期的细胞制备方法
目的:减少细胞的聚集数量,提高测试效率和结果的准确性.方法:在用酒精固定细胞时分别加入终浓度为0%,1.5%,3%,6%和12%的小牛血清,置-20℃分别固定细胞1d,3d和7d.比较了不同浓度的血清和保存不同时间粘连细胞的数量及对细胞周期分析结果的影响.结果:加入血清可明显减轻细胞的粘连,减少了细胞的聚集数量,尤以3%小牛血清组佳.样品可不必过滤,在上机测试时,进样针不堵塞,上样速度快,细胞周期分析更准确.随着保存时间的延长,聚集细胞的数量有增加的趋势.结论:在制备用于测定细胞周期的样品时,固定细胞的过程中加入终浓度为3%的小牛血清是一种简单的、能有效地保护细胞膜使细胞不易粘连的技术措施,且固定细胞的时间不宜超过7d.
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应用原位逆转录PCR 检测石蜡切片中HCV RNA
目的:检测石蜡包埋组织中的HCV RNA.方法:原位PCR是一种能够检测单拷贝、低拷贝(20bp)DNA或RNA序列的新技术,本研究应用原位逆转录PCR检测石蜡包埋人肝外胆管癌组织中的HCV RNA.结果和结论:(1)基因组DNA去除一定要彻底.(2)选择合适的逆转录酶.(3)用原位PCR仪专用的封片装置封好,以防扩增液流出.(4)无水乙醇后固定10*!min防止扩增产物扩散.(5)对于不同组织来源的DNA或RNA进行原位PCR扩增的次数不同,不是循环次数越多越好,次数增多有可能使扩增产物从细胞内溢出,增加非特异性.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
