军事医学杂志
Military Medical Sciences 군사의학
- 主管单位: 军事医学科学院
- 主办单位: 军事医学科学院
- 影响因子: 0.58
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1674-9960
- 国内刊号: 11-5950/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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7种立克次体甄别检测基因芯片方法的建立
目的:建立一种能同时检测7种立克次体的化学发光基因芯片法。方法根据NCBI公开发表的7种立克次体的序列设计引物和探针,制备立克次体甄别检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增立克次体靶基因片段,标记的产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、化学发光显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏度、重复性。用实时荧光PCR法与芯片法分别检测莫氏立克次体梯度稀释的核酸,比较两种方法的灵敏度。制备双盲模拟样本,进一步评价芯片方法的准确性。结果该研究共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条立克次体属通用探针、9条特异性检测探针。该芯片检测质粒DNA的灵敏度为1.5×102~3×103拷贝/反应,检测模拟样本的灵敏度为103~104拷贝/μl。实时荧光PCR法与芯片法检测结果一致,实时荧光PCR法比芯片法灵敏度高10倍。双盲模拟样本检测符合率为100%。结论成功建立了可同时检测7种立克次体的化学发光基因芯片检测方法,为立克次体病的临床诊断和流行病学调查提供了一种新的高通量检测手段。
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陆军士兵自尊水平与应对方式的关系研究
目的:探讨陆军士兵自尊水平、应对方式的状况及两者的关系。方法采用随机抽样方法,从某军区5个陆军单位抽取士兵507名,使用自尊量表( SES)和应对方式问卷( CSQ)进行测查。结果陆军士兵的自尊水平在不同年龄组上存在显著差异(F=3.207,P<0.05);家庭经济状况一般组的自尊水平、解决问题方式显著高于贫困组(t=2.157,P<0.05;t=2.507,P<0.05);担任骨干组士兵的自尊水平显著高于非骨干组(t=3.700,P<0.001)。在不同学历上,士兵在自责、求助以及合理化因子上的得分存在显著差异(F=3.560,P<0.05;F=3.169, P<0.05;F=4.317,P<0.05)。自尊水平与解决问题、求助呈显著正相关(r=0.459,P<0.001;r=0.353,P<0.001),与自责、幻想、退避、合理化呈显著负相关(r=-0.471,P<0.001;r=-0.316,P<0.001;r=-0.381,P<0.001;r=-0.267,P<0.001)。结论陆军士兵的自尊水平在年龄、家庭经济状况上差异显著;其应对方式在学历、是否担任骨干上差异显著,二者具有显著的相关性。
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肺功能分析在放射性肺损伤防治药物药效评价中的作用
目的:探讨肺功能分析在放射性肺损伤防治药物药效研究中的意义。方法采用30只C57BL/6小鼠以20 Gy的X线行小鼠胸部单次照射,照射后给予地塞米松[给药组按4.5 mg/( kg· d)的剂量给予地塞米松磷酸钠注射液,2周后减半维持至1个月],对照组和模型组给予等体积生理盐水。照射后1个月,使用EMKA肺功能分析系统在清醒状态下行肺功能测试,随后活杀取材,HE染色观察肺组织结构变化,应用Image-pro图像分析软件分析肺泡腔面积。结果给药1个月后,模型组及地塞米松组小鼠肺功能部分指标,如50%呼气流量、每分通气量、呼气峰值、吸气峰值、潮气量较对照组明显降低,但地塞米松组较模型组降低程度有所减轻。肺组织病理变化示,地塞米松组小鼠肺泡腔面积减小程度、肺间质中性粒细胞浸润程度均较模型组有所减轻,与肺功能分析结果相符。结论地塞米松对放射性肺损伤具有一定治疗效果;肺功能分析与肺组织病理变化相结合印证,可以有效评价放射性肺损伤防治药物的药效。
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2型糖尿病合并血管并发症患者一氧化氮和内皮素水平评价
目的:探讨合并血管并发症的2型糖尿病患者血清一氧化氮( nitric oxide,NO)和内皮素( endothelin,ET)水平的变化,并分析各危险因素与两者之间的关系。方法入选2型糖尿病患者98例,根据分组条件分为糖尿病合并血管并发症组( A组,49例)和糖尿病无血管并发症组( B组,49例),同期选择年龄、体质指数相匹配的健康对照44例( C组)。所有受试者记录身高、体质量、血压、病程,抽血检测空腹血糖( fasting blood-glucose,FBG)、糖化血红蛋白(hemoglobin A1c,HbA1c)、血脂各项指标,以及血清NO和ET-1水平。结果与C组比较,A组及B组的NO水平均显著降低[(43.87±12.05)和(53.29±11.75)μmol/L vs (66.08±16.48)μmol/L,P<0.01],而ET-1水平显著升高[(100.25±20.34)和(77.55±14.84)ng/L vs (53.62±8.40)ng/L,P<0.01]。 A组NO水平显著低于B组[(43.87±12.05) vs (53.29±11.75)μmol/L,P<0.01],而 ET-1水平显著高于B组[(100.25±20.34) vs (77.55±14.84)ng/L ,P<0.01]。在糖尿病两组之间,收缩压、舒张压、HbA1c及病程,A组明显高于B组(P<0.01)。相关分析显示,舒张压、收缩压、空腹血糖、HbA1c与NO之间存在负相关;HDL-C与NO之间存在正相关。HDL-C与ET-1存在负相关;收缩压、LDL-C、血尿酸、空腹血糖、HbA1c与ET-1之间存在正相关。结论糖尿病患者血清NO和ET水平明显异常,存在血管内皮功能损伤;有血管并发症者损伤更严重,且与血糖、血压、血脂的控制水平具有相关性。
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简易肾癌及膀胱癌原位肿瘤模型的建立与应用研究
目的:建立一种操作简单、稳定可靠的肾癌及膀胱癌原位癌模型,并运用于抗癌药效评价工作。方法将人肾癌肿瘤组织块穿刺接种到肾实质组织中,建立肾癌原位肿瘤模型;用留置针机械摩擦损伤膀胱黏膜,人膀胱癌细胞悬液暴露法建立膀胱癌原位肿瘤模型。通过小动物B超和荷瘤组织的HE染色确定模型建立的可靠性,并采用该模型对硝羟喹啉( nitroxoline,NTX)的体内抗肿瘤药效进行初步药效评价。结果术后2周通过B超可见肿瘤发生;组织病理HE染色显示肾癌原位模型肿瘤呈现浸润性生长,膀胱癌模型可见明显突向膀胱腔的癌组织团块。 NTX体内药效评价中,60 mg/kg NTX对肾癌原位肿瘤抑制率为57.5%,30 mg/kg NTX对膀胱癌原位肿瘤抑制率为48.8%。结论利用上述方法建立的肾癌及膀胱癌原位肿瘤模型简单、实用,是评价治疗肾癌和膀胱癌抗癌药物的可靠方法。
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DEK基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其功能鉴定
目的:构建DEK基因的RNA干扰( RNAi)慢病毒表达载体,并对其生物学功能进行初步检测。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的序列,确定其有效靶序列,合成DEK基因的Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到经BamHⅠ与EcoRⅠ酶切后的小干扰RNA( siRNA)表达载体PSIH-H1上,产生PSIH-H1-DEK慢病毒载体,筛选阳性克隆并测序鉴定。与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染乳腺癌细胞ZR75-1,经嘌呤霉素( puromycin,puro)筛选2周后,收集部分细胞利用实时聚合酶链反应( real time-PCR,RT-PCR)和Western印迹分别检验DEK在信使RNA ( mRNA )和蛋白水平的敲低效果,并通过细胞生长实验检测DEK对人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞生长的影响。结果 PCR和DNA测序结果证实,DEK siRNA慢病毒表达载体PSIH-H1-DEK构建成功。 RT-PCR和Western印迹结果显示,构建的DEK siRNA可有效抑制DEK基因的表达,并由此建立了敲低DEK的稳定克隆。生长曲线实验表明, DEK siRNA可抑制人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞的生长。结论成功构建了DEK基因的RNAi慢病毒表达载体,感染人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞后,有效沉默了ZR75-1细胞中的DEK基因的表达,为进一步研究DEK基因在乳腺癌中的作用奠定基础。
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布美他尼对肿瘤细胞增殖的抑制作用及其与NKCC1表达的相关性
目的:探索布美他尼在抑制肿瘤细胞增殖中的应用。方法采用免疫印迹杂交技术,验证不同肿瘤细胞中钠钾氯协同转运蛋白1(NKCC1)的表达情况;运用CCK-8法,测定布美他尼对不同肿瘤细胞的IC50值。结果肺癌细胞系(A549)、结直肠癌细胞系(HCT116)中靶蛋白NKCC1表达量显著高于慢性粒细胞白血病细胞系(K562)、食管癌细胞系(Eca109)、宫颈癌细胞系(HeLa)、T淋巴细胞白血病细胞系(Jurkat)和乳腺癌细胞系(MCF7);布美他尼对A549、HCT116的IC50值明显低于K562、Eca109、HeLa、Jurkat和MCF7,且其抑制率与靶蛋白NKCC1的表达量呈正相关。结论布美他尼能抑制肿瘤细胞增殖,NKCC1可作为潜在的抗肿瘤药物作用靶点。
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可用于TNT检测的新的生物传感元件topAp4的发现
目的:在大肠杆菌基因组中筛选可用于TNT检测的基因传感元件。方法利用随机酶切方法不完全酶切大肠杆菌K-12 MG1655基因组,构建基因组启动子文库,通过多轮筛选法获得可感应TNT的文库元件。通过数据库分析,并在灵敏度、特异性、起效时间各方面对新的传感元件在TNT诱导下的启动活性进行考察,进一步确证了文库元件中发挥作用的功能序列。结果和结论成功构建了大肠杆菌K-12 MG1655基因组启动子文库,并从中筛选得到了一个可感应TNT的文库元件,经过进一步分析确证了其发挥功能的序列topAp4,并在灵敏度、特异性、起效时间上都表现出较好的启动活性。上述研究工作发现了topAp4对TNT的感应作用,并验证了其具有较好的启动活性,为TNT检测生物传感器的构建打下了良好的基础。
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肝活素(HPS)--一种新的小鼠急性肝损伤标志物
目的:急性肝衰竭是目前临床上导致死亡的重要病因之一,研究具有肝特异性、灵敏度高的肝损伤标志物对于严重肝病的早期诊断以及预后预测具有重要的意义。肝活素( hepassocin,HPS)是一种具有高度组织特异性的促肝细胞增殖活性因子,在动物水平检测其在血清中的表达水平与肝损伤程度的相关性将为其开发成临床检测急性肝损伤的特异性标志物奠定基础。方法利用腹腔注射不同剂量CCl4处理诱导小鼠急性肝损伤模型,检测小鼠的存活率、转氨酶水平以及肝病理变化。通过ELISA检测小鼠血清的HPS水平;实时PCR法检测HPS mRNA水平;Western印迹法检测HPS的蛋白表达水平。结果随着CCl4处理剂量的增加,小鼠死亡率显著升高,肝损伤程度显著增加,在此过程中,HPS在小鼠血清及肝组织中的表达水平也显著上调,并与肝损伤程度密切相关。结论HPS可做为一种新的小鼠肝损伤标志物。
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辛二酰苯胺异羟肟酸联合紫杉醇对卵巢癌细胞OC3杀伤与自噬的影响
目的:研究辛二酰苯胺异羟肟酸( suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)与紫杉醇( paclitaxel,PTX)联合应用对人卵巢癌细胞OC3杀伤及自噬的影响,探讨两药联合是否具有协同作用。方法利用SAHA和(或) PTX处理OC3细胞后,倒置显微镜下观察细胞形态;四甲基偶氮唑蓝( MTT)检测细胞的生长状态; AO/EB双染色观察细胞是否出现自噬泡,析因方差法与金式公式法分析联合用药效果。结果 SAHA和PTX单独或联合用药处理后,倒置显微镜下可见联合用药组细胞形态较单独用药组发生显著改变,细胞大部分出现折光率差和死亡的现象;MTT法检测细胞增殖结果表明,联合用药组较单独用药组显著抑制OC3细胞的增殖与存活(P<0.05);析因方差分析显示,两药存在正交互作用,金式公式计算表明两药具有协同效应;AO/EB双染色发现各组细胞出现自噬现象,且联合用药组诱导自噬的发生率显著高于单独用药组。结论 SAHA联合PTX对人卵巢癌细胞OC3具有明显的协同杀伤作用,并可诱导其发生自噬。
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大红袍中一个新的香豆素和八个已知酚酸类化合物
目的:研究大红袍( RCH)的化学成分。方法利用重结晶、硅胶、ODS、Sephadex LH-20等色谱技术对大红袍60%乙醇提取物进行分离并纯化得到化合物,采用现代波谱技术阐明化合物结构。结果分离得到9个化合物,其中,1个新化合物1的结构根据波谱解析结果予以确定并命名为红花岩黄芪香豆雌酚Ⅰ(1),而8个已知化合物则分别鉴定为异槲皮酚(isotrifoliol,2)、红花岩黄芪香豆雌酚B(3)、伞形花内酯(4)、香豌豆酚(5)、槲皮素(6)、(+)儿茶素(7)、山奈酚(8)和二氢山奈酚(9)。结论化合物1为新化合物,化合物3~5首次从该植物中分离得到。抗H5N1病毒细胞活性筛选结果显示,化合物5在50.0μg/ml水平对H5N1有一定的抑制活性。
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耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证
目的:基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据GenBank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列( ddl)及万古霉素耐药基因( vanA,vanB)序列,设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针,制备耐万古霉素肠球菌(VRE)检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性,灵敏性可达103 CFU/ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致(8/10)。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法,利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。
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慢性肾脏病3~5期患者肾功能与蛋白结合类毒素相关性研究
目的:测定慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)3~5期(CKD3~5)患者血清马尿酸(hippuric acid, HA)、硫酸吲哚酚(indoxyl sulfate, IS)、硫酸对甲酚(p-cresyl sulfate, PCS)及3-羧基-4-甲基-5-丙基-2-呋喃丙酸(3-carboxy-4-methyl-5-propyl-2-furanpropionic acid, CMPF)4种蛋白结合类毒素的水平,分析肾功能与蛋白结合类毒素水平之间的关系。方法将112例CKD患者依据肾功能分为3组( CKD3~5),另外选取60例健康志愿者作为对照组。应用HPLS-MS/MS检测技术测定各组血清中HA、IS、PCS、CMPF的浓度,并对估测肾小球滤过率( eGFR)与4种毒素浓度进行相关分析。结果与健康对照组相比,CKD3~5患者体内HA、IS、PCS及CMPF浓度均明显升高(P<0.01)。各组CKD患者比较,HA、IS、PCS的水平随肾功能下降呈升高趋势(P<0.01),而CMPF血清浓度无显著变化(P>0.05)。相关分析显示,eGFR与HA、IS、PCS及CMPF之间呈明显负相关。曲线回归分析显示,HA与eGFR之间曲线回归拟合方程式为Y=-46.171 lnX+209.464(R2=0.601,P<0.01);IS与eGFR之间曲线回归拟合方程式为Y =-62.570 lnX +279.537(R2=0.633,P<0.01);PCS 与 eGFR 之间曲线回归拟合方程式为Y=-84.297 lnX+383.172(R2=0.529,P<0.01);CMPF与eGFR之间曲线回归拟合方程式为Y=-7.648 lnX+53.546(R2=0.172,P<0.01)。结论 CKD3~5患者体内HA、IS、PCS及CMPF水平均高于健康对照组,其中HA、IS、PCS的浓度随肾功能降低而逐渐升高,但CMPF浓度随肾功能进展变化不大。
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超声引导腋窝淋巴结穿刺活检在诊断乳腺癌腋窝淋巴结转移中的临床价值研究
目的:探讨超声及超声引导下穿刺活检( UNB)在判断乳腺癌腋窝淋巴结转移中的临床应用价值。方法回顾分析2008年6月~2014年8月期间连续收治454例乳腺癌,超声判断腋窝淋巴结异常行UNB患者临床资料,其中354例行新辅助化疗;100例腋窝淋巴结UNB后行手术治疗,评价超声及UNB判断乳腺癌腋窝淋巴结转移的敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值及假阴性率。结果454例超声影像学腋窝淋巴结异常乳腺癌患者UNB转移率为70.9%,阴性率为29.1%;100例腋窝淋巴结UNB后行手术治疗患者转移率为25%;13例淋巴结纵横径比值(L/T)≤1.5且淋巴结纵径>1 cm患者转移率为92.3%;UNB判断乳腺癌腋窝淋巴结转移的敏感性为64.1%、特异性为100%、准确性为86%、阳性预测值为100%、阴性预测值为81.3%、假阴性率为18.7%;UNB判断结果与术后病理诊断结果的一致性较好, Kappa值为0.685;其中UNB取材2针与3针的上述6项指标分别为50%与77.8%、100%与100%、77.8%与92.5%、100%与100%、71.4%与89.7%、28.6%与10.3%,UNB取材3针相比2针与术后病理一致性分析显示,Kappa值为0.822/0.526。结论超声判断乳腺癌腋窝淋巴结转移具有一定的临床价值;UNB可准确判断腋窝淋巴结转移状态;UNB取材3针相比2针有更高的准确性。
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Ⅰ型干扰素的抗病毒机制研究进展
干扰素( interferon, IFN)在抗病毒感染中发挥着关键作用,根据结构及功能可分为不同的种类,其中Ⅰ型干扰素( typeⅠinterferon,IFN-Ⅰ)在抗病毒感染中的作用机制及意义越来越受到人们的重视。为更加深入地认识IFN-Ⅰ的调控机制及应用前景,该文拟对IFN-Ⅰ在抗病毒感染中的功能、信号通路及调控方面的研究进展进行综述。
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肠道病毒71型疫苗研究进展
肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是引起儿童手足口病的主要病原体之一,其感染可在少数患者中引起严重的神经系统综合征甚至导致死亡。自20世纪90年代后期在东南亚地区暴发以来,EV71感染已成为严重威胁全球,尤其是亚太地区儿童健康的公共卫生问题之一。尽管目前临床上尚无针对EV71的安全有效的疫苗,但多个灭活疫苗已进入或完成临床研究,减毒活疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗等新型疫苗也显示出良好的发展前景,该文综述了EV71疫苗的新研究进展。
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CRISPR系统与哺乳动物免疫系统的比较及其功能的研究进展
原核生物防御噬菌体入侵的机制与哺乳类免疫防御机制有很多相似之处,尤其是特异性免疫机制,原核生物的特异性免疫系统即成簇规律间隔短回文重复序列( clustered regularly interspaced short palindromic repeats, CRISPR)与哺乳类特异性免疫系统在很多环节体现了相似的规律。通过比较,能够加深对CRISPR的免疫功能的认识。近年发现,除了发挥特异性免疫功能,CRISPR系统还参与了许多细菌生长代谢过程的调控机制,调控基因表达的能力更是受到广泛的关注。 CRISPR系统功能的复杂程度远远超出免疫防御的范畴,值得深入研究。
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美国神经性毒剂救治研究进展
神经性毒剂除了在早期抑制乙酰胆碱酯酶( AChE)外,也导致长期的进行性神经炎和迟发神经退行性病变。近年来,美国国立卫生研究院资助了多项神经性毒剂中毒机制和治疗药物的研究,旨在快速高效对抗神经性毒剂急性中毒及远后效应。正在研制的治疗药物主要包括AChE靶向药物、广谱重活化剂和生物清除剂、抗炎及神经保护药。
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淋病奈瑟球菌国家参考品菌株的分子生物学特征分析
目的:对中国医学细菌保藏管理中心收集保藏的淋病奈瑟球菌( NG)国家参考品菌株进行分子生物学特征分析。方法对13株NG国家参考品菌株进行16S rRNA和隐蔽性质粒cppB基因扩增和分析,并采用多位点序列分型( MLST)、NG多抗原序列分型( NG-MAST)技术对菌株进行分子分型。结果13株菌种均扩增出预期大小的16S rRNA基因片段,与NG模式菌株参考序列( X07714.1)的相似性均>99%;13株菌种均扩增出预期大小的cppB基因;MLST结果显示,13株菌种共分为10个ST型,其中含7个新的ST型;NG-MAST结果显示,13株菌种含9个por等位基因和9个tbpB等位基因,配对后是10个不同的ST型,其中含6个新的ST型。结论该研究完善了NG国家参考品菌株的分子生物学方面的质控指标,为今后NG参考品候选菌株的选择提供了新的技术手段。
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关于投稿的统计学要求
作者在投稿时,应在研究方法中写明所用统计分析方法的具体名称(如成组设计资料的t检验、两因素析因设计资料的方差分析等)和统计量的具体值(如t=3.45),并尽可能给出具体的P值(如P=0.023);当涉及到总体参数时,在给出显著性检验结果的同时,再给出95%可信区间。对于符合偏态分布的定量资料,应采用M(QR)方式表达,不应采用x珋±s方式表达。对于定量资料和定性资料,应根据所采用的设计类型、资料所具备的条件和分析目的,选用合适的统计分析方法,前者不应盲目套用t检验和单因素方差分析,后者不应盲目套用χ2检验。要避免用直线回归方程描述有明显曲线变化趋势的资料。不宜用相关分析说明两种检测方法之间吻合程度的高低。对于多因素多指标资料,要在一元分析的基础上,尽可能运用多元统计分析方法,以便对因素之间的交互作用和多指标之间的内在联系作出全面、合理的解释。使用相对数时,分母不宜小于20;要注意区分百分率与百分比。统计学符号按GB 3358-82《统计学名词及符号》的有关规定书写,一律用斜体。
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |