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125I标记消脂素的制备研究
以间接碘标记法与直接碘标记法标记消脂素(leptin,LEP),并分别建立LEP的RIA进行方法学的比较.间接碘标记法先以氯胺T法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(BH试剂)制备125I-BH,并与LEP进行联结制备125I-LEP.125I-LEP放射性比活度为1.43 MBq/μg,125I的总标记率为37.8%,125I-LEP的大结合率(Bmax)为97.5%.所建立的RIA的NSB为6.7%,零计量管(B0)的结合率(B/T)为43.7%,灵敏度为0.25μg/L,高、中、低三种浓度的样品批内CV为7.8%,批间CV为12.9%,回收率为96.4%~103.2%,与TSH、LH、FSH、PRL、GH及Ins等均无交叉反应,与Linco的药盒进行临床测试对比亦显示良好的线性关系,r为0.951,以间接碘标记法标记的125I-LEP在45天内其标准曲线的稳定性较直接法标记的125I-LEP有较大的提高,能满足临床工作的需求.
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中国人群血清胰岛素参考区间的建立
目的 建立符合中国人群的血清胰岛素参考区间.方法 对10027名南京市鼓楼区流行病学调查个体进行问卷调查、身体指标测量及血清学检测.后,以纳入的1433名表观健康人群为参考人群,建立符合中国人群的血清胰岛素参考区间.结果 血清胰岛素水平与年龄无明显相关性,男性餐后30min和120min血清胰岛素水平均低于女性,空腹血清胰岛素水平在男性和女性间没发现明显差异.男性空腹、餐后30min、120min血清胰岛素参考区间分别为3.3~22.0 μIU/mL、13.6~164.9μ IU/mL、7.6 ~ 140.4μIU/mL,女性分别为3.4 ~ 28.2 μIU/mL、16.6 ~ 183.0μIU/mL、10.0~120.0μIU/mL,总体分别为3.3 ~ 26.1μIU/mL、16.2 ~ 179.5 μIU/mL、9.1~122.7μIU/mL.结论 人血清胰岛素水平与性别有关,建立符合中国人群的按性别区分的血清胰岛素参考区间对临床检测和诊断有重要的意义.
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β-类淀粉样蛋白放免分析法及其在老年痴呆症中的初步应用
本文利用β-类淀粉样蛋白(β-AP)片断与甲状腺球蛋白经戊二醛偶联为免疫原,免疫新西兰兔,6个月后获得抗体,建立了高灵敏度的β-AP放射免疫分析法。批内和批间CV分别为8%和14%。平均回收率为96%。41名正常人血清β-AP浓度为39±5.5pg/mL。60例老年痴呆症患者,血清β-AP浓度明显高于对照组(P<0.01)。本文结果表明,测定血清β-AP浓度,可作为一项检查老年痴呆症的指标。
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化学发光免疫分析、放免分析和磁珠酶免疫分析测定血清甲状腺激素的评价
为比较化学发光免疫分析(CLIA)、放射免疫分析(RIA)和磁珠酶免疫分析(MSP -ELISA)测定血清TT3、TT4、FT3、FT4和TSH的方法学特性,分别用CLIA、RIA和MSP-ELISA测定标准品、质控品及40份患者血清中TT3、TT4、FT3、FT4和TSH含量, 进行线性、相关性、精密度、回收率等实验结果分析评价.结果显示: CLIA、RIA和MSP-ELISA检测TT3、TT4、FT3、FT4和TSH的线性和相关性无显著性差异, CLIA检测的精密度、回收率优于RIA、MSP-ELISA,且具有快速的特点.
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改进的人Ⅲ型前胶原放射免疫分析法
本文建立了一种经改进能特异的、敏感的测定人Ⅲ型前胶原(hPCⅢ)含量的RIA法, 并用于诊断肝硬化的临床评价.从人工流产胎皮中分离、纯化hPCⅢ,免疫家兔获取高效价抗血清.hPCⅢ标记125I, 使用双抗体+PEG分离技术, 平衡法加样, 建立RIA.结果表明, 标准曲线测定范围为40-640μg/L.与hPCⅠ的交叉反应率为0.81%、与CⅣ、CⅢ、CⅠ无交叉反应.灵敏度为6μg/L.精确度: 批内CV为4.2%; 批间CV为8.2%.平均回收率为99.9%.血清hPCⅢ正常参考值为87.5±16.2μg/L, 正常上限值为120μg/L.本文建立的改良法操作更简便、快捷.
关键词: Ⅲ型前胶原(PCⅢ) 放射免疫分析 肝纤维化 -
TR-FIA与RIA法检测HBV标志物的比较分析
铕(Eu)标记时间分辨荧光免疫技术(TR-FIA)是新近推出的一种非放射性标记微量检测技术, 将其与RIA比较分析, 结果表明: TR-FIA法较RIA法灵敏度高, 测量范围宽, 准确度相近; 在乙型肝炎病毒标志物(HBV M)常见的8种组合模式中, 有7种完全符合(符合率为100%),只有HBSAg+抗-Hbe+抗-HBc组合模式符合率为73.3%,而HBeAg值差异较大.
关键词: 铕 时间分辨荧光免疫分析 放射免疫分析 肝炎病毒 乙型 -
不同方法检测肿瘤标志物的比较研究
采用化学发光免疫分析法(CLIA)和放射免疫分析法(RIA)测定36例肿瘤患者血清肿瘤标志物CA19-9、CA-125、CA15-3、AFP、CEA.结果表明,这两种分析法测定值相关性良好,其相关系数(r)分别为0.983、0980、0.984、0.983和0.833.研究结果提示:CLIA的灵敏度、特异性和RIA完全相似,实现了分析程序自动化,并具有试剂稳定、标志物有效期长、对人体没有危害和适宜临床肿瘤标志物大批量样品检测等优点.
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老年性甲亢左心功能及肝脏功能相关性研究
甲亢是一种自身免疫性疾病, 常发生多系统改变, 极易危害人体健康. 本文应用γ心功能仪及放射免疫分析观察老年性甲亢患者左心功能主要参数射血分数(EF)、平均射血率(ER)、相对心排量(RCO)、平均充盈率(FR)、高峰充盈率(PFR)、高峰充盈时间(TPFR)及血清分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、甘胆酸(CG)、酸性铁蛋白(AIF)浓度变化, 发现极大部分老年性甲亢患者左心功能均有不同程度损伤, 且心脏功能损伤与肝脏功能损伤程度呈规律性变化.研究结果报道如下:
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血绒毛膜促性腺激素与彩色多普勒血流显像在恶性滋养细胞肿瘤诊治中的应用
用彩色多普勒血流显像(CDFI)与放射免疫分析(RIA)技术检测绒毛膜促性腺激素(β-HCG)均为近年来应用于临床的检测手段.我院将两者联合应用于恶性滋养细胞肿瘤的诊断及化疗后的疗效观察,旨在探讨其在鉴别良、恶性滋养细胞肿瘤的价值以及化疗后的疗效评价.资料与方法1 一般情况选自1995年1月至1998年6月我院住院恶性滋养细胞肿瘤患者共32例作为观察组(以下简称观察组),其中侵蚀性葡萄胎20例,绒癌12例.年龄19~45岁.所有病例均在入院后及每次化疗后测血β-HCG并作CDFI检查.以同期住院的20例良性葡萄胎作为对照.
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肺癌患者NSE、CYFRA21-1、CEA RIA水平变化的分析研究
近年来肺癌发病率呈上升趋势,血清学肺癌标志物检测成为令人感兴趣的指标,目前一般将血清癌胚抗原(CEA)和鳞状细胞癌(SCC)抗原作为生化指标,其敏感性和特异性均欠佳[1].近报道一种新的小细胞肺癌和非小细胞肺癌的标志物神经元特异性烯醇化酶(NSE)和CYFRA21-1,其水平检测对小细胞和非小细胞肺癌的诊断、疗效评估和预后监测等都很有意义[2].本文通过对98例肺癌患者血清和胸水中的NSE、CYFRA21-1、CEA放射免疫分析,旨在探讨肺癌的发病机理,为临床诊断治疗提供依据..
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血管活性肠肽的RIA诊断Vernner- Morrison综合征1例报告
Vemner- Morrison综合征,亦称血管活性肠肽(VIP)瘤,是一种罕见病.至目前为止国内仅报告10例,其中8例是根据临床表现和肿瘤病理推测为VIP瘤的.本例是以血浆VIP的放射免疫分析(RIA)确诊为VIP瘤的,并在诊治的全过程中(术前、术中及术后)先后监测了一个多月血浆VIP水平.为明确诊断、监测病情、判定疗效起了重要作用.
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电化学发光免疫分析和放射免疫分析检测血清TGAb结果对比分析
随着中国经济的快速发展,人们的生活节奏越来越快,承担的社会压力也越来越大,甲状腺疾病的发病率也越来越高.甲状腺球蛋白抗体(TGAb)在诊断甲状腺疾病及其预后判断中有重要的临床意义.目前测定血清TGAb含量的方法主要是RIA和电化学发光免疫分析(ECLIA).应用RIA测定TGAb含量,虽然成本低廉,但是存在试剂有放射性污染,操作过程烦琐等缺点,已逐步被ECLIA所替代.作者在科室测定TGAb方法改变时,对RIA和ECLIA检测血清TGAb的符合情况以及ECLIA的优势做了比较,汇报如下.
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6种清洗液对γ计数器试管架的清洗效果对比
放射免疫分析检测环节复杂,影响因素很多,质量控制尤为重要.在影响检测结果的各环节中,试管架被放射性核素污染是极容易被忽略,但对结果影响很大的基础的一环,所以经常清洗试管架以消除高本底对结果的影响非常重要.本次试验特选用几种常见的清洗液清洗被污染的试管架,以选出既高效又经济简便的清洗液.
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糖尿病尿蛋白定性阴性患者血清β2-微球蛋白水平的研究
近年来有关β2-MG定量测定在生物学、免疫学和临床医学中应用日益受到重视,已被认为是肾脏疾病的一种早期灵敏的诊断指标[1-5],并被作为其他疾病的辅助诊断[6-8].为建立本地区的正常参考值的范围,我们在进行β2-MG正常值调查时,发现尿蛋白定性阴性血糖升高患者与健康对照组之间有显著差异,说明糖尿病患者虽然尿蛋白定性阴性,血清肌酐和尿素氮正常,但大部分患者已有肾小球功能的损害.
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化学发光免疫分析法和放射免疫分析法检测血浆甲状腺球蛋白的结果对比分析
甲状腺球蛋白(thyroglobulin,TG)是甲状腺中的一种碘化糖蛋白,人TG由2767个氨基酸残基组成,是甲状腺的特异性合成产物.TG是能够以定量水平反映甲状腺功能的重要的蛋白.在生理条件下,血循环有少量的TG.TG的分泌机制十分复杂,目前还有待于详细阐明.重要的TG生理性释放的刺激因子是TSH[1].TGAb阳性时,用RIA法测定TG可以引起假阳性,用化学发光免疫分析(CLIA法)则可以引起假阴性[2].有学者指出用TG mRNA测定代替TG测定,以提高诊断敏感性[3].但其可操作性及其与TG是否有良好相关性还有待商榷.本文介绍RIA法和CLIA法测定TG的符合情况进行对比,以及对CLIA法的优势做了比较,报道如下.
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放射免疫分析测定胰岛素及C-肽在诊断2型糖尿病中的价值
随着社会经济的发展和人们饮食结构的改变,糖尿病的发病率呈现逐年上升趋势[1].临床上常见的是2型糖尿病,患者体内存在胰岛素抵抗以及胰岛β细胞胰岛素分泌功能缺陷,以慢性高血糖为特征.患者由于体内血糖升高以及胰岛素抵抗的存在,导致分泌功能缺陷的胰岛β细胞持续性地分泌胰岛素,从而加重了胰岛β细胞的损伤,形成恶性循环而加重病情[2].在临床症状上,糖尿病患者的典型表现为多食易饥、口干多饮、多尿以及消瘦.但是很多2型糖尿病患者,尤其是大多数早期糖尿病患者在临床上并不出现明显的"三多一少"的症状,容易引起漏诊或者误诊,从而耽误了2型糖尿病的治疗,影响患者的预后.
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高灵敏orexin A放免法的建立及其对大鼠缺血再灌注的应用
建立高灵敏orexin A放射免疫分析方法(RIA),探讨肠缺血再灌注损伤对血浆及下丘脑orexin A水平的影响.采用氯胺T法制备碘标记orexin A,抗原抗体反应采用平衡一步法,4℃温育24h后,经PR试剂分离结合和游离的标记抗原,并用该方法测量正常人、高血脂患者血浆orexin A水平及大鼠肠缺血再灌注损伤后血浆及下丘脑组织中orexin A浓度的变化.结果表明,本方法测定orexin A标准曲线范围为21-2000pg/mL,低检出量为21pg/mL,批内和批间变异系数均小于10%.30名正常人血浆orexin A水平为338.48±20.24pg/mL,30例高血脂患者为343.51±15.49pg/mL;大鼠肠缺血再灌注损伤前后及不同损伤时间点orexin A的变化差异亦无显著性.本文提示orexin A RIA方法灵敏度和特异性较高,可用于人血浆、大鼠血浆和下丘脑组织orexin A的检测.
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癌胚抗原工作标准品的制备
制备供免疫分析用的癌胚抗原工作标准品并标定其免疫效价。用4.6mg/L CEA纯品溶液和pH7.4的1%人白蛋白-50mmol Na2HPO4-NaH2PO4溶液配制浓度为320μg/L的工作标准品溶液。将该溶液按每安瓿(amp.)0.5mL(160ng/amp.)分装、冻干。以国产CEA RIA和CEA IRMA药盒现行标准品为对照品,标定工作标准品效价,并与国际参考制剂1st IRP CEA HUMAN 73/601进行对照实验。以药盒标准品为对照品,工作标准品平均免疫效价为163ng/amp.,95%可信限为159-168ng/amp.,工作标准品与国际参考制剂的剂量-反应曲线不显著偏离平行。CEA工作标准品与国际参考制剂1st IRP CEA 73/601在免疫学反应中是同质的,可以作为实验室间对照品使用。
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三碘甲腺原氨酸免疫分析工作标准品的研制
制备供免疫分析用的3,5,3-三碘甲腺原氨酸(T3)工作标准品并标定其免疫效价.用每升含193.27mg T3的40mol/L NaOH溶液和去激素血清,配制浓度为100μg/L的T3溶液.将该溶液按每1mL分装,冻干.以国产现行标准品为对照品,标定配制的T3工作标准品免疫效价为91.4ng/安瓿,95%的可信限为88-95ng/安瓿.并从T3药盒工作标准曲线上,读出本所1601-9703批低、中、高质控血清的T3值.在以相应的参考值为参照时,测定值的偏倚均小于10%.总之,配制的T3工作标准品适用于国产T3RIA药盒标准品的核对及其质控血清的标定.
关键词: 3 5 3'-三碘甲腺原氨酸 标准品 放射免疫分析 -
阳虚症小鼠环核苷酸系统反应性变化的研究
为了探讨阳虚症的发生、发展、转归与环核苷酸系统反应性变化的关系及论证某些助阳药的药理作用, 对阳虚症组和治疗组小鼠采用RIA测定了血浆cAMP、cGMP及其比值,结果表明:(1)阳虚症组:阳虚体征明显, 死亡率高,血浆cAMP、cAMP/cGMP比值明显升高, 提示阳虚症体内的环核苷酸系统反应性是失衡的.(2)治疗组: 外观阳虚体征明显改善, 死亡率下降, 血浆cAMP明显下降,cGMP有所增高, cAMP/cGMP比值趋于正常, 显示体内的环核苷酸系统发生了明显的变化.(3)测定cAMP及cGMP可作为阳虚症预后的参考指标.(4)助阳药四逆汤与纠正环核苷酸代谢失调有密切的内在联系.