首页 > 文献资料
-
稀土对镍所致豚鼠肺巨噬细胞产生活性氧的抑制作用研究
在镍的开采、冶炼和精炼中,职业人群接触大量镍的硫化物、镍的氧化物后可以引起肺癌和鼻癌.已被大量的人群流行病学调查和动物实验所证实,为此IARC(1987)已将镍化合物列为第一类致癌物[1].其致癌机理之一是被吞噬的镍在细胞内产生活性氧类(主要是羟自由基)间接引起癌症[2,3].90年代以来,从分子、细胞、整体动物和人群流行病调查发现一定剂量的轻稀土化合物(RE)可以抑制肿瘤发生,并能提高机体抗氧化酶的活性,降低脂质过氧化,抑制活性氧自由基(如羟自由基和超氧阴离子)的产生[4,5].为此本实验首先观察了黑色氧化镍对肺泡巨噬细胞产生活性氧的作用,并观察了氯化稀土对其作用的影响.
-
2-10 SiO2刺激PAM上清液对Ⅰ型肺上皮细胞的增殖效应
目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激肺巨噬细胞(PAM)上清液在Ⅰ型肺上皮细胞损伤中的作用.方法分别用体积分数为5%和10%不同剂量的SiO2刺激大鼠(SD)肺泡PAM上清液作用于貂肺上皮细胞(CCL-64),采用四唑盐(MTT)比色法测定其增殖效应.结果在0、50、100、200、500μg/m1SiO2浓度范围,5%SiO2刺激的PAM上清液引起细胞增殖,500 μg/m1剂量组(0.30±0.02)与对照组(0.26±0.04)差异有显著性,并存在剂量-效应关系(r=0.975,P＜0.01).10%SiO2刺激PAM的上清液表现为细胞损伤作用,50 μg/m1剂量组(0.21±0.04)与对照组吸光度值差异有显著性.结论随着作用剂量的增加,SiO2刺激PAM分泌活性物质将加重Ⅰ型肺上皮细胞的损伤,促进矽肺纤维化的进程.
-
用SCGE技术研究氡及氡子体对大鼠血淋巴细胞及肺巨噬细胞DNA的损伤
目的:用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)研究氡及氡子体对大鼠血淋巴细胞及肺巨噬细胞DNA损伤.方法:4组大鼠,每组6只置于HD-3型多功能生态氡室吸氡,分别达0,10,20,30工作水平月(WLM)的剂量水平,用SCGE分析大鼠外周血淋巴细胞及肺巨噬细胞DNA损伤情况.结果:大鼠外周血淋巴细胞及肺巨噬细胞DNA迁移长度随剂量水平的增高而增长.结论:SCGE可作为低剂量的生物剂量计和研究氡及氡子体引起细胞DNA损伤的手段.
关键词： 单细胞凝胶电泳(SCGE) 氡及氡子体 淋巴细胞 肺巨噬细胞 DNA损伤 -
桑菊饮含药血清对小鼠巨噬细胞Toll样受体表达的影响
目的:研究桑菊饮对小鼠肺巨噬细胞株RAW264.7表达Toll样受体(TLR)的影响.方法:用桑菊饮含药血清作用于正常RAW264.7细胞,24 h后以荧光定量PCR方法测定TLR-1～TLR-9 mRNA的表达,探讨桑菊饮对Toll样受体表达的影响.结果:桑菊饮含药血清在一定剂量(7.7 g·kg-1·U-1)时,可以促进TLR-4和TLR-7的表达,而对TLR-1,TLR-2,TLR-3,TLR-5,TLR-6,TLR-8和TLR-9的表达没有明显影响.结论:桑菊饮的药效学作用可能与促进Toll样受体某些亚型表达有关.
-
黄连解毒汤含药血清对Toll样受体3、4型及其下游信号转导通路的影响
目的:研究黄连解毒汤含药血清对细菌脂多糖和双链RNA病毒核酸类似物聚肌胞刺激的小鼠巨噬细胞株RAW264.7 Toll样受体(TLR)及其下游主要信号转导通路的影响.方法:用脂多糖、聚肌胞分别刺激RAW264.7细胞,同时给予黄连解毒汤含药血清进行干预,24 h后,取细胞培养上清液,ELISA法测定炎症因子TNF-α和IFN-β的含量,荧光定量PCR方法测定TLR3、TLR4和下游信号转导通路髓样分化因子88(MyD88),肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6),TOLL样受体相关分子(TRAM)和TOLL样受体相关的干扰素活化子(TRIF)mRNA的表达,Western blotting法分析TLR3、TLR4蛋白的表达,同时用细胞免疫荧光法分析MyD88,TRAF-6蛋白表达的强弱,在mRNA水平和蛋白水平探讨黄连解毒汤对Toll样受体的作用机理.结果:黄连解毒汤含药血清显著降低LPS诱导的TLR4、MyD88、TRAF-6、TRAM和TRIF的高表达(与单纯LPS刺激组比较.P＜0.05或P＜0.01);Poly(I:C)刺激后,黄连解毒汤含药血清仅对TRAM利TRIF的表达有明显的降低作用(P＜0.01).结论:黄连解毒汤能阻断TLR4高表达,阻断TLR4胞内信号转导的MyD88依赖和非依赖两条途径(以阻断非依赖途径为主),抑制相关基因表达产物TNF-αIFN-β过度分泌,具有TLR4拮抗剂样作用.黄连解毒汤也可直接作用于接头蛋白TRAM和TRIF,影响TLR3信号转录的MyD88非依赖性途径,抑制IFN-β的过度分泌.
-
柴芩承气汤对急性坏死性胰腺炎犬肺巨噬细胞白细胞介素1β表达的影响
目的 探讨柴芩承气汤对急性坏死性胰腺炎(ANP)犬肺巨噬细胞白细胞介素1β(IL-1β)表达的影响.方法 将15只比格犬随机分成对照组、模型组及柴芩承气汤组各5只,模型组及柴芩承气汤组采用50 mg/kg牛磺胆酸钠逆行胆管注射制作ANP模型.造模成功后,对照组及模型组经胃管注入生理盐水10 mL/kg,柴芩承气汤组经胃管注入柴芩承气汤10 ml/kg,各组均2h注入1次,共3次.第6h取各组犬血清检测IL-1β水平,并取肺组织分离巨噬细胞检测IL-1β mRNA及蛋白表达.结果 模型组、柴芩承气汤组肺组织巨噬细胞IL-1β mRNA表达水平均较对照组明显下调(P＜0.05);模型组肺组织巨噬细胞IL-1β蛋白表达及血清IL-1β水平显著高于对照组,柴芩承气汤组IL-1β蛋白表达及血清IL-1β水平显著低于模型组(P＜0.05).结论 柴芩承气汤可下调ANP犬肺组织巨噬细胞IL-1β蛋白表达,降低血清IL-1β水平.
-
IL-18在抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用
IL-18是活化巨噬细胞产生的IFN-γ诱导因子.IL-18可增加脑实质中IFN-γ产生细胞数,增强活化小神经胶质细胞的功能[1].体外实验证明肺巨噬细胞能选择性识别和杀伤被流感病毒感染的组织细胞,抑制流感病毒的增殖[2].本研究利用IL-18基因缺陷鼠流感病毒感染模型,探讨IL-18在调节肺巨噬细胞抗流感病毒感染早期免疫应答中的作用.
-
运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞吞噬活性的影响
目的:探讨运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞(BAMs)吞噬活性的影响.方法:选择300只8-10周龄的雄性BALB/c纯系小鼠为实验对象,随机分为对照组(CE)、急性中度组(ME)或剧烈运动组(SE),每组100只,在传动式跑步机上持续跑步.CE组不运动,ME组和SE组速度由9m/min开始,每隔3min增速1次,ME组强度为17m/min,SE组运动直至体力耗尽为止.各组小鼠经由重复的肺部沖洗收集巨噬细胞(BAMs),应用荧光显微镜及流式细胞分析仪分析BALB/c小鼠巨噬细胞吞噬活性的变化,比较各组肺巨噬细胞吞噬活性之间的差异.结果:急性中度运动与剧烈运动分别造成约40％及100％以上的白细胞增加.剧烈运动后白细胞计数呈两相式增加,剧烈运动刚结束时淋巴细胞和性粒细胞分别比运动前增加24.9％和21.6％.中度运动组以及剧烈运动组吞噬细胞百分比(％P)和平均吞噬颗粒数(PI)分别为:34％、79％和1.92、5.09,与对照组比较剧烈运动可促进肺泡巨噬细胞吞噬失调颗粒的能力,而中度运动则否.剧烈运动结束后(Post-SE 0h)的肺巨噬细胞(BAMs)吞噬活性强,且随休息时问增加而渐减,Post-SE 1h仍有显著的促进作用,而在4h后回到基值,一直到16h后不再变化.Post-SE 0h组％P和PI与同组对照组比较增加明显(P＜0.05),而吞噬IgG和IgG/c1颗粒活性只稍微增加,与同组对照组比较差异未达到显著水平(P＞0.05).结论:急性剧烈运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞吞噬无调理颗粒的能力具有促进作用.
关键词： 运动 Balb/c小鼠 C57BL/6纯系小鼠 肺巨噬细胞 吞噬活性 -
胆红素干预对阻塞性肺气肿大鼠肺泡巨噬细胞分泌白细胞介素-10的影响
慢性阻塞性肺气肿表现为肺实质以中性粒细胞、肺巨噬细胞、淋巴细胞为主的炎症反应,肺泡巨噬细胞作为支气管肺泡腔内丰富的细胞类型,在氧化一抗氧化失衡、蛋白酶-抗蛋白酶失衡的发生发展过程中起关键作用.
-
罗红霉素治疗儿童急性呼吸道感染80例疗效观察
儿童急性呼吸道感染是儿童常见病、多发病,主要由病毒、细菌、支原体、嗜肺军团菌导致.罗红霉素是大环内酯类抗生素,对革兰阳性球菌抗菌作用强,尤其对呼吸道病原菌抗菌效果好,对支原体有强大的杀灭作用,低有效抑菌浓度低,组织和细胞渗透力强,肺、支气管粘膜药物浓度高于同期血药浓度的10倍,肺巨噬细胞药物浓度为血药浓度的25倍,对呼吸道致病菌清除率强.因此,我院采用罗红霉素治疗儿童急性呼吸道感染80例,疗效显著,现报道如下.
-
西北地区沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞毒性的实验研究
目的 探讨和田沙漠尘和民勤沙漠尘对大鼠肺巨噬细胞的毒性作用.方法 用50、100、200、400、800、1 600μg/ml的和田沙漠尘、民勤沙漠尘和SiO2的混悬液培养肺巨噬细胞,用DMEM培养液培养肺巨噬细胞作为对照组,24 h后用MTr法测定肺巨噬细胞的存活率.并收集细胞及上清液,检测肺巨噬细胞内丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,上清液中LDH活力和转化生长因子(TGF-β1)含量.结果 与对照组比较,和田沙漠尘400 μ/ml以上组、民勤沙漠尘100μg/ml以上组和SiO2组的大鼠肺巨噬细胞存活率降低(P<0.05,P<0.01);随染毒剂量增加.大鼠肺巨噬细胞内MDA含量、GSH-Px活力,上清液中LDH活力、TGF-β1含量均有增高趋势,和田沙漠尘和民勤沙漠尘浓度200μg/ml以上组MDA含量和GSH-Px活力高于对照组(P<0.05,P<0.01),和田和民勤沙漠尘浓度100μg/ml以上组和SiO2组LDH活力高于对照组(P<0.01),两地沙漠尘浓度200μg/ml以上组和SiO2组TGF-β1含量高于对照组(P<0.01).结论 民勤沙漠尘和和田沙漠尘对肺巨噬细胞有一定的损伤作用.使肺巨噬细胞脂质过氧化作用增强,并能引起纤维化因子TGFβ1的释放.
-
肺巨噬细胞在矽肺肺纤维化发生发展中的作用
矽肺是由于长期吸入大量含游离二氧化硅粉尘引起的以肺间质纤维化为主要病变的全身性疾病.肺巨噬细胞作为与矽尘作用的第一道防线,在矽肺的早期炎症和肺组织纤维化中发挥着重要的作用.肺巨噬细胞具有活跃的吞噬能力.吸入体内的矽尘,绝大部分经纤毛-黏液系统排出体外,一部分由肺巨噬细胞吞噬排出,极少数滞留于肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)内,诱导AM的活化,释放大量的自由基、细胞因子、生长因子、趋化因子、溶酶体酶,终导致细胞的凋亡或坏死,释放矽尘颗粒.游离的矽尘又可被其他的AM再吞噬.矽尘摄取和再摄取伴随着AM、中性粒细胞、淋巴细胞的补充,导致持续的细胞聚集和慢性炎症.
-
汽油和甲醇燃烧尾气对肺巨噬细胞免疫功能影响的比较
目的 比较汽油汽车燃烧尾气和甲醇汽车燃烧尾气对肺巨噬细胞免疫功能的影响,为筛选清洁能源提供依据.方法 利用肺巨噬细胞受体能与致敏的绵羊红细胞反应形成玫瑰花环并有一定的结合率,将灌洗出的兔肺巨噬细胞培养一定时间后再按0.500、0.250、0.125、0.062、0.031 L/ml浓度将汽油和甲醇燃烧尾气的提取物对巨噬细胞染毒,在37℃、5％ CO2孵箱中培养3h后加入致敏的绵羊红细胞,放入冰箱内反应2h.取出后计数玫瑰花环形成率.并进行了抗体介导的细胞毒作用试验.结果 汽油和甲醇燃烧尾气作用都使巨噬细胞花环形成率降低,未染毒组的结合率为85.7％,汽油和甲醇在低试验浓度0.031 L/ml时花环结合率分别为47.0％和70.0％,汽油燃烧尾气结合率明显低于甲醇燃烧尾气；汽油尾气提取物对抗体介导的细胞毒作用有显著的抑制作用,汽油燃烧尾气使其降低的幅度明显大于甲醇燃烧尾气.结论 甲醇燃烧尾气对巨噬细胞的免疫功能的影响明显小于汽油燃烧尾气,所以更适合做清洁能源.
-
大承气冲剂对腹腔感染致急性肺损伤患者巨噬细胞的作用
目的：研究大承气冲剂对腹腔感染致急性肺损伤（ALI）患者肺泡巨噬细胞（AMs）的影响。方法：观察严重腹腔感染合并ALI成年患者60例，随机分为中药组(30例)和对照组（30例），对照组给予西医常规治疗合用安慰剂，中药组给予西医常规治疗合用大承气冲剂，疗程为5 d，分别于第1、3、5 d记录患者排气排便时间、尿乳果糖/甘露醇比值（尿L/M）、氧合指数（OI），并采集肺泡灌洗液，利用流式细胞仪定量检测肺泡灌洗液中AMs水平及其亚型M1、M2的百分比。结果：中药组和对照组尿L/M值均随时间延长下降，第5 d分别为3.97±1.53，7.01±2.44，中药组患者较对照组下降更明显(P＜0.05)；第5 d中药组和对照组OI分别为255.44±18.18，222.76±15.15，中药组明显升高(P＜0.05)。在两组患者随治疗进展腹腔感染所致肠功能障碍与ALI严重程度不断减轻的同时，中药组其肠功能、肺功能改善的程度优于对照组，且有明显的差异（P＜0.05）。比较治疗5 d后两组患者数据，AMs百分比分别为（92.65±1.06）%和（94.82±0.90）%，M1百分比为（42.17±6.99）%和（55.49±6.26）%，中药组均较对照组明显降低(P＜0.05)，M2百分比则为（44.72±5.36）%，（35.09±7.37）%，中药组患者较对照组明显升高（P＜0.05）。各组内AMs、M1及M2比例随肠功能、肺功能改善而分别见回落及升高趋势，均充分提示了AMs水平、M1比例下降及M2升高在严重腹腔感染合并ALI患者病理生理过程中的重要作用。结论：在腹腔感染致ALI的早期，应用大承气冲剂可有效减少AMs激活、聚集，降低M1比例，促进M2生成，从而减轻炎症反应，减轻肺损伤，保护肠黏膜屏障功能。
-
巨噬细胞刺激蛋白及其受体酪氨酸激酶RON在慢性阻塞性肺疾病炎性机制中的作用
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一种以气道炎症为特征的慢性炎症性疾病,肺泡巨噬细胞在其中的作用正逐渐被人们所重视.巨噬细胞刺激蛋白(MSP)及其受体酪氨酸激酶RON是近年来倍受关注的一类细胞因子,本文就MSP/RON对巨噬细胞的调节及其在COPD的炎性机制中的作用作一综述.
关键词： 慢性阻塞性肺疾病 肺巨噬细胞 巨噬细胞刺激蛋白 受体型酪氨酸激酶RON -
肺巨噬细胞研究的现状及进展
肺是人体的一个重要器官,负责气体交换功能.肺的另一个特点,在于其与外界相通,每天都有大量的空气中的无机和有机颗粒进入肺内.因此肺部具有一个完善而且特殊的免疫环境.在这个环境中,肺的巨噬细胞扮演着重要的角色.本综述将对肺巨噬细胞的分类、发育、功能、获取的一些进展进行论述.
-
维生素D对烟曲霉感染的肺巨噬细胞自噬机制的初步研究
目的 探究维生素D在鼠肺细胞感染烟曲霉后对细胞自噬的影响.方法 用一定量的烟曲霉活化孢子感染细胞后, 一组细胞加入维生素D (维生素D组), 一组细胞加入生理盐水, 感染一定时间后用溶酶体探针检测自噬相关分子的表达;收集各组细胞并裂解细胞, 离心取上清, 用Western-blot法检测上清液中的LC3BII、Dectin-1及ROS的表达水平.结果 活化的孢子感染肺巨噬细胞后, 维生素D组自噬体与溶酶体共定位减少、吞噬孢子的速率在减少以及ROS水平降低, 其对应的胞内Dectin-1、ROS、LC3BII减少且差异有统计学意义.结论 烟曲霉感染肺巨噬细胞后, 维生素D可通过减弱细胞自噬体与溶酶体的融合并下调自噬信号通路蛋白的表达以达到抵抗烟曲霉感染的作用.
-
失血性休克诱导小鼠肺组织巨噬细胞TLR4原位表达的变化
目的 复制失血性休克致急性肺损伤(ALI)模型,原位观察其肺组织巨噬细胞TLR4表达的变化及其意义.方法 32只C57BL/6雄性小鼠随机分为两组:NCG组为空白对照组,PCG组为单纯失血性休克组,分别于失血性休克后1、2、4、6 h处死小鼠.观察肺组织病理变化,EMSA检测肺组织核转录因子-κB(NF-κB)活性,ELISA检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,激光共聚焦观察肺巨噬细胞TLR4原位表达的变化.结果 失血性休克诱导的ALI肺组织病理显示,随时间变化肺部损伤逐渐加重,NF-κB活性及TNF-α水平均随时间变化逐渐增加,与NCG组比较差异有统计学意义(P<0.05),原位观察肺巨噬细胞TLR4的表达亦随时间变化逐渐增加.结论 失血性休克诱导小鼠肺部的炎症反应,肺巨噬细胞TLR4的表达随时间变化逐渐增加,调控肺巨噬细胞TLR4的表达可能成为早期治疗失血性休克诱导ALI的一个新的途径.
-
三甲基腺嘌呤和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬及凋亡的影响
[目的]观察三甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素对染尘大鼠肺巨噬细胞自噬活动的调控以及对细胞凋亡的影响. [方法] 120只雄性Wistar大鼠均采取非暴露气管滴注的方法一次性灌注50 mg/mL SiO2粉尘进行染毒,然后随机分为3组:对照组、3-MA组和雷帕霉素组.其中后两组以1.5mg/(kg·d)和2μg/(kg·d)的剂量腹腔注射3-MA或雷帕霉素,隔日给药持续28d,3-MA组和雷帕霉素组大鼠分别在染毒7、14、28、60、90d处死,收集其肺灌洗液,离心获取肺巨噬细胞,测定其凋亡率.采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及自噬调控蛋白Bediin1. [结果]雷帕霉素组大鼠染尘不同时间LC3蛋白表达均增加且比对照组高;5个观察时点大鼠肺巨噬细胞凋亡率分别为(1.74±0.73)％、(1.25±0.35)％、(1.44±1.24)％、(3.70±1.51)％、(36.98±11.91)％与对照组(5.63±1.01)％、(4.95±0.63)％、(4.10±0.43)％、(6.75±4.19)％、(30.23±11.05％)相比,除90d高于对照组低(P＜0.05),其他各时期均比对照组低;3-MA组在给药期间LC3蛋白表达比对照组低,停药后蛋白表达有所增高,90d时蛋白表达水平与对照组接近;而该组肺巨噬细胞的凋亡率为(2.86±1.13)％、(8.80±0.28)％、(6.84±1.29)％、(2.54 ±1.65)％、(37.22±16.22)％,7d时凋亡率低于其他时期;14d和28d时凋亡率增加且比同时期对照组高(P＜0.05);60d时凋亡率再次降低;90d时凋亡率与对照组无明显差异. [结论]3-MA和雷帕霉素干预后,染尘大鼠自噬活动强弱不同,且与肺巨噬细胞的凋亡率呈负相关.
-
室内PM10与气传真菌对大鼠肺巨噬细胞吞噬功能的影响
[目的] 以体外培养SD大鼠肺泡巨噬细胞(AM)为靶细胞,研究PM10与气传真菌单独和联合染毒对它的非特异性免疫功能的影响,并阐明剂量-反应关系.[方法]采集室内PM10、气传真菌,配制成染毒溶液.用不同浓度的PM10、气传真菌,以及PM10和气传真菌联合染毒液染毒大鼠肺泡巨噬细胞,分别测定培养液中肺泡细胞存活率、吞噬率和吞噬指数以及细胞因子TNF-α,观察PM10与气传真菌单独和联合染毒对肺巨噬细胞存活率及其吞噬功能的影响.[结果]PM10和真菌均能引起AM存活率降低,且有一定剂量-效应关系,剂量越高,存活率越低(P<0.05).联合染毒组存活率低于相应单独染毒组.2×2析因试验设计的方差分析结果显示,与对照组相比,联合染毒组存活率下降,且具有显著性意义(P<0.01).提示PM10和真菌对巨噬细胞存活率的影响存在联合作用.单独和联合染毒组的吞噬率、吞噬指数也均呈剂量依赖性下降.高剂量组的吞噬率、吞噬指数远远低于阴性对照组(P<0.05).2×2析因试验设计方差分析结果表明,联合染毒组的吞噬率、吞噬指数与对照组相比,差异均有显著性意义(P<0.01),提示PM10和真菌对AM吞噬功能具有一定联合效应.结果还表明,阴性对照组培养上清液中未检测到TNF-α.染毒组TNF-α活性则随剂量上升而上升(P<0.05).但PM10和真菌单独染毒时的高剂量组TNF-α活性反而降低了,这提示在适当增高剂量时,可使细胞合成与分泌TNF-α增加,但过高剂量时,细胞受损以至功能受抑.2×2析因试验设计的方差分析结果显示,与对照组相比,联合染毒组TNF-α活性改变有显著性意义(P<0.05).联合染毒组TNF-α活性约等于相应单独染毒组的TNF-α活性之和.[结论]室内PM10和气传真菌有细胞毒性,并能损害肺泡巨噬细胞的吞噬功能,并且能增加肺泡巨噬细胞产生TNF-α.提示在作用终点上,PM10和气传真菌有相加作用.
