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亚硫酸钠对章氏肝细胞TG含量和VLDL分泌的影响
目的 观察食品添加剂亚硫酸钠(Na2SO3)对章氏肝(Chang's liver)细胞甘油三酯(TG)含量和极低密度脂蛋白(VLDL)分泌的影响,进一步探讨其致肝损伤作用的机制.方法 经不同浓度的Na2SO3染毒24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性；油红O染色法观察肝细胞脂肪变性；甘油三酯GPO-POD酶法测定试剂盒检测染毒24 h后细胞内甘油三酯(TG)含量；Western Blotting检测细胞外培养上清中VLDL的分泌.结果 (1)Na2SO3染毒组能够降低细胞存活率,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P＜0.05)；(2)油红O染色结果显示,染毒24 h后,10、2.5和0.5 mmoL/LNa2SO3处理组细胞内均未出现红色脂滴,即未见细胞出现脂肪变性；(3)染毒24 h后,10 mmoL/L Na2SO3处理组细胞内TG含量明显增加,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；(4)染毒24 h后,Na2SO3各处理组胞外培养上清中VLDL水平与阴性对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Na2SO3染毒24 h虽不能诱导肝细胞出现脂肪变性,但高浓度可引起肝细胞中TG含量增加.
关键词： 亚硫酸钠 甘油三酯(TG) 极低密度脂蛋白(VLDL) -
亚硫酸钠对人胚肾293细胞的毒性作用与胞内蛋白水平变化的关系
目的 研究食品添加剂亚硫酸钠(Na_2SO_3)对人胚肾293细胞(HEK293)的毒性作用与胞内重要蛋白质p53、增殖细胞核抗原(PCNA)和三磷酸腺苷(ATP)结合转运子G_2(ABCG_2)含量改变之间的关系.方法 采用细胞毒性试验(MTS)法观察Na_2SO_3对HEK293细胞的毒性作用,用蛋白印记法检测HEK293细胞中p53、PCNA和ABCG_2蛋白水平.结果 0.625～10 mmol/L NaSO_3处理组的细胞活性与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),说明NaSO_3对HEK293细胞有明显的毒性作用;蛋白印记分析发现高剂量组10 mmol/L Na_2SO_3可同时降低细胞内p53、PCNA和ABCG_2蛋白水平,而其余剂量组0.039～2.5 mmol/L Na_2SO_3对HEK293细胞内p53、PCNA和ABCG_2蛋白的水平无明显影响.结论 在本试验条件下,当Na_2SO_3的接触浓度达到一定水平时对人胚肾293细胞具有明显的毒性作用,这种毒性作用很可能与其降低肾细胞内的蛋白水平,干扰肾细胞的正常功能相关.
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食品添加剂亚硫酸钠对肝细胞蛋白合成功能的影响
目的 探讨食品添加剂亚硫酸钠对肝脏蛋白合成功能的可能影响.方法 以不同浓度的亚硫酸钠(Na2SO3)作用于正常人二倍体肝细胞株HL-7702(简称L-02)细胞,终浓度分别为0.039、0.156、0.625和2.5 mmol/L,并设阴性对照组和阳性对照组(体积分数为0.3%的乙醇).采用生化分析法检测不同接触时间后各染毒组肝细胞培养上清中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总蛋白和白蛋白含量.结果 ①Na2SO3染毒24 h,随着染毒浓度的增加,各组肝细胞培养上清中AST活性逐渐升高,0.625和2.5 mmol/L组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).而在染毒48和72 h后.各染毒组与对照组比较,无统计学差异;当作用24和48 h后,随Na2SO3浓度增加,各组肝细胞培养上清中ALT活性逐渐升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);染毒72 h后,各染毒组与对照组之间的ALT活性无差异.②Na2SO3染毒24、48和72 h后,各染毒组肝细胞培养上清中白蛋白和总蛋白的含量与阴性对照组比较无统计学差异(P>0.05).结论 亚硫酸钠染毒不同时间后可能对肝细胞膜结构造成一定影响使培养上清中转氨酶活性明显增加,但对肝细胞的蛋白合成功能无明显影响.
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住院病人使用的菜票细菌污染与消毒效果检测
对本医院住院病人使用中的菜票,抽取180张,随机分为3组,每组60张.第1组不消毒,检测细菌污染;第2组加热蒸发40%甲醛溶液(25 ml/L)熏蒸12 h;第3组用1:200稀释的"84"消毒液(含有效氯250 mg/L)浸泡30 min.检测第2、3组消毒效果.检测时,以沾有采样液的无菌棉拭在菜票正反面分别来回涂抹10次采样.然后,将第1组棉拭头剪入装有10 ml无菌生理盐水的试管内,第2组者为含0.5%亚硫酸钠(中和剂)生理盐水的试管内,第3组者为含0.2%硫代硫酸钠(中和剂)生理盐水的试管内.振荡试管约1 min,以洗脱棉拭上菌.取洗脱液或其稀释液1 ml接种平皿,倾注普通营养琼脂并混匀.置37℃温箱内培养24 h,计数菌落数,计算细菌总数.
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四种方法对医院室内空气消毒效果的比较
对本院约90 m3的房间,于人员撤出后分别用下列方法进行空气消毒:①层流净化,净化系统处理洁净度为1000级,换气相当于500次/h;②甲醛熏蒸,福尔马林用量为30 ml/m3,加热蒸发90 min,密闭熏蒸至12 h,机械通风30 min;③臭氧熏蒸,使用功率为50 W,臭氧产量为700mg/h的臭氧消毒机,开机1 h;④紫外线照射,第10～15 m2悬挂1支辐照度值>70μW/cm2的紫外线灯,照射1 h.于消毒前、后(甲醛为熏蒸并通风后),分别于室内5点用平板沉降法采样,检测空气中细菌总数.于甲醛、臭氧消毒后采样时,琼脂平板中分别含0.1%亚硫酸钠与0.1%硫代硫酸钠作为中和剂.
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复方甘草口服溶液制备的工艺改进
目的 通过添加亚硫酸钠、EDTA作稳定剂,吐温80作增溶剂,解决复方甘草口服溶液中吗啡含量不稳定问题,得到澄清、质量合格的制剂.方法 在复方甘草口服溶液原制备工艺中添加了稳定剂亚硫酸钠4 g、EDTA 0.6 g和增溶剂吐温803 g,调节pH值至8.0,用100 ml棕色聚酯瓶灌装,即得复方甘草口服溶液成品药液.结果 制剂澄清,质量合格,吗啡含量稳定.结论 该方法可行,工艺简单,制剂稳定,适合大规模生产.
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化学发光法快速测定盐酸文拉法辛
目的:建立盐酸文拉法辛含量快速检测的化学发光法.方法:Ce4+-Na2SO3-H2SO4氧化还原体系能产生微弱的化学发光,在此体系中加入盐酸文拉法辛后发光强度有显著的提高,据此建立了一种测定盐酸文拉法辛的化学发光分析方法.结果:发光信号的增强值与盐酸文拉法辛的质量浓度在1.0×10-7～8.0×10-5g·mL-1的范围内,呈良好的线性关系,平均回收率为100.0%～100.2%.对2.0×10-6g-mL-1的盐酸文拉法辛溶液,连续11次平行测定,RSD=1.9%.根据国际纯粹与应用化学联合会(International Union of Pure and Applied Chemistry,简称IUPAC)规定,其检测限为3.8×10～g·mL-1(3σ),RSD为1.9%.结论:本方法快速、简便、且有较高的灵敏度,可用于胶囊中盐酸文拉法辛的含量测定.
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离子色谱法测定硫酸依替米星注射液中抗氧剂亚硫酸钠的含量
目的 建立离子色谱法测定硫酸依替米星注射液中抗氧剂亚硫酸钠含量的方法.方法 采用DionexIonPac AS11-HC(4mm×250 mm)色谱柱,DionexIonPac AG11-HC(4mm×50mm)保护柱,以氢氧化钾溶液为淋洗液进行梯度淋洗,流速1.0 mL·min-1,抑制电流99mA,电导检测器检测,电导池温度35℃,柱温30℃.结果 亚硫酸钠在8～80 μg·mL-1内线性关系良好;检测限为0.02 μg·mL-1 (S/N =3),定量限为0.09 μg·mL-1(S/N=10).结论 本实验建立的方法快速、准确、重现性好,有助于制剂中亚硫酸钠的用量控制.亚硫酸钠作为抗氧剂有其使用的合理性,但样品中浓度过高,其处方量尚待进一步研究降低.
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亚硫酸钠对人正常二倍体肝细胞的损伤作用程序性坏死相关蛋白受体相互作用蛋白1表达的影响
目的 探讨亚硫酸钠对人正常二倍体肝细胞(HL-7702)的损伤作用及程序性坏死相关蛋白受体相互作用蛋白1(RIP1)表达的影响.方法 将处于对数生长期的HL-7702细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、0.01、0.1、1、10 mmol/L亚硫酸钠的培养基中培养2、4、12、24、48 h.采用CCK-8法检测细胞活性,采用全自动生化分析仪检测细胞上清液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)以及乳酸脱氢酶(LDH)的活力,采用Western Blot法检测细胞RIP1蛋白的表达水平.结果 与对照组相比,1、10 mmol/L亚硫酸钠染毒不同时间的HL-7702细胞存活率降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着亚硫酸钠染毒浓度的升高,HL-7702细胞的存活率呈下降趋势.与对照组相比,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24、48 h HL-7702细胞上清液中的ALT活力较高;1 mmol/L亚硫酸钠染毒4、24 h及10 mmol/L亚硫酸钠染毒2、4 h HL-7702细胞上清液中的AST活力较低,而10 mmol/L亚硫酸钠染毒24、48 h HL-7702细胞上清液中的AST活力较高;10 mmol/L亚硫酸钠染毒2、4 h HL-7702细胞上清液中的LDH活力较低,而染毒24、48 h HL-7702细胞上清液中的LDH活力较高,差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,各浓度亚硫酸钠染毒组HL-7702细胞中RIP1蛋白的表达水平均较高,差异多有统计学意义(P＜0.05).结论 程序性坏死可能参与了亚硫酸钠引起的肝细胞死亡,但其可能机制还有待于进一步研究.
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亚硫酸钠对人正常二倍体肝细胞内二酰甘油酰基转移酶1和载脂蛋白E mRNA和蛋白表达的影响
目的 通过研究亚硫酸钠对人正常二倍体肝(HL-7702)细胞内二酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)和载脂蛋白E(apoE)mRNA和蛋白表达的影响,探讨亚硫酸钠诱发肝细胞脂肪积累效应及作用途径.方法 将处于对数生长期的HL17702细胞株分别暴露于终浓度为0(阴性对照)、10、2.5、0.5、0.1 mmol/L的亚硫酸钠溶液,并设立阳性对照(1.0 mmol/L油酸)组.分别于染毒24、48 h时,采用油红O染色法观察肝细胞内脂滴沉积,采用免疫沉淀和Western Blot法检测细胞内apoE和DGAT1蛋白的表达水平,采用qRT-PCR法检测肝细胞内apoE和DGAT1mRNA的表达水平.结果 与阴性对照组比较,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24h时HL-7702肝细胞内DGATlmRNA表达水平明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).与阴性对照组比较,染毒24h、48 h时,10 mmol/L亚硫酸钠染毒组HL-7702肝细胞内DGAT1蛋白表达水平以及各浓度亚硫酸钠染毒组HL-7702肝细胞内apoE蛋白表达水平均明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).阳性对照组可见明显的脂滴沉积,但亚硫酸钠染毒组均未见明显脂滴.结论 一定剂量的亚硫酸钠可引起肝细胞内DGAT1、apoE蛋白表达增高,导致肝细胞内甘油三酯分泌增加,从而引起肝细胞的脂肪蓄积.
关键词： 亚硫酸钠 载脂蛋白E 二酰甘油酰基转移酶1 免疫沉淀 -
亚硫酸钠对HepG2细胞毒性的实验研究
目的 观察食品添加剂亚硫酸钠对人肝肿瘤细胞( HepG2)的细胞毒性作用和脂肪变作用.方法向HepG2细胞悬液中分别加入终浓度为0(阴性对照)～ 10 mmol/L亚硫酸钠溶液染毒24、48和72 h,并设空白对照(无细胞)组和阳性对照组(含1％Tritonx -100的DMEM),每组6个复孔.采用乳酸脱氢酶(LDH)活力测定法检测肝细胞膜的通透性变化,采用CCK-8法检测肝细胞的活性改变,采用油红O染色法观察肝细胞内脂肪沉积情况.结果 与阴性对照组相比,仅10 mmol/L亚硫酸钠染毒24h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率增加(P＜0.05)；而各剂量亚硫酸钠染毒48和72 h后HepG2细胞培养上清中LDH活力的释放率无显著变化.与阴性对照组相比,各剂量亚硫酸钠染毒24、48、72 h后(除0.039 mmol/L染毒72 h外)HepG2细胞的存活率均显著下降(P＜0.05),且细胞存活率随着亚硫酸钠染毒剂量的升高而降低.染毒24、48 h后,部分亚硫酸钠染毒组HepG2细胞内出现了极少量的脂滴,而阴性对照组却未发现；染毒72 h后,10 mmol/L亚硫酸钠染毒组出现明显脂滴.结论 一定剂量的亚硫酸钠染毒可增加HepG2细胞膜的通透性,对肝细胞活性有明显的抑制作用,并且可引起肝细胞内甘油三酯的蓄积.
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亚硫酸钠和甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞活力及p53蛋白表达的影响
目的 研究亚硫酸钠与甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞株(HL-7702细胞)的毒性作用及对肝细胞内抑癌基因p53蛋白表达的影响.方法 分别加入终浓度为0(阴性对照),0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L甲醛以及0.1 mmol/L甲醛+0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用MTT试验检测肝细胞的活性.分别加入终浓度为0(阴性对照)、0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5mmol/L甲醛,10 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠以及0.1 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5mmol/L亚硫酸钠进行染毒24h,采用蛋白杂交法(Western blot)检测肝细胞内p53蛋白的表达水平.结果 与阴性对照组比较,2.5 mmol/L亚硫酸钠及0.1～12.5 mmol/L甲醛单独染毒肝细胞的活性均明显降低(P＜0.05),且肝细胞活性均随着染毒浓度的升高而下降；0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞的活性均高于0.1 mmol/L甲醛单独染毒组(P＜0.05),且0.1 mmol/L甲醛+2.5 mmol/L亚硫酸钠联合染毒组肝细胞活性也明显高于2.5 mmol/L亚硫酸钠单独染毒组(P＜0.05).各浓度亚硫酸钠单独染毒对肝细胞内p53表达水平无明显影响,而0.5～12.5 mmol/L甲醛单独染毒可引起肝细胞内p53表达水平明显下降(P＜0.05)；10 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白表达水平均低于阴性对照组和10 mmol/L甲醛单独染毒组及相同剂量亚硫酸钠单独染毒组(P＜0.05)；而0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白的表达水平与阴性对照组比较,均无明显变化.结论 亚硫酸钠和甲醛联合染毒对肝细胞活性的抑制作用有所减弱.较高浓度(10mmol/L)甲醛可抑制肝细胞内p53蛋白的表达水平,亚硫酸钠可加强这种抑制作用.
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亚硫酸钠对人胚肾293细胞炎性因子表达的影响
目的 探讨亚硫酸钠(Na2SO3)对人胚肾293(HEK293)细胞炎性因子表达的影响.方法 采用改进的单溶液噻唑兰(MTS)比色法观察0、0.002 5、0.01、0,039、0.156、0.625、2.5、10mmol/L亚硫酸钠对人胚肾293细胞株(HEK293)的毒性作用,并观察0、0.039、0.156、0.625、2.5、10 mmol/L亚硫酸钠染毒致HEK293细胞的形态学改变,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HEK293细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和白介素8(IL-8)的mRNA水平的改变.结果 细胞毒性实验显示,当亚硫酸钠浓度为0.625、2.5、10mmol/L时,OD值分别为(0.35475±0.021 24),(0.600 50±0.012 77),(0.784 75±0.009 85),均低于对照组(2.514 5±0.202 265),差异有统计学意义(P＜0.05);当亚硫酸钠浓度≤0.156mmoL/L时,OD 值范围为(2.473 75±0.069 99)～(2.625 00±0.12029),与对照组比较,差异无统计学意义.形态学观察发现,当接触亚硫酸钠浓度≥0.625 mmol/L时,细胞数量明显降低,细胞比较细长,突起较少;当亚硫酸钠浓度≤0.156mmol/L时.细胞数量和形态基本无变化.RT-PCR检测结果显示,0.039～10 mmol/L的亚硫酸钠对TNF-α、MCP-1和IL-8的mRNA表达无明显诱导作用.结论 亚硫酸钠对人胚肾细胞具有一定的抑制损伤作用,但对TNF-α、MCP-1和IL-8基因表达水平无影响,二者之间无明显关联.
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空气中二氧化硫和氮氧化物检测用标准物质的研制与应用
目前检测空气中二氧化硫、氮氧化物所用标准物质分别采用容量法、重量-容量法配制.前者配制标准溶液需标定,后者标准物质需干燥称重,两标准物质保存周期短,稳定性差,操作步骤繁琐,故笔者研制了亚硫酸钠和亚硝酸盐溶液标准物质,作为空气中二氧化硫和氮氧化物检测的标准物质.
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吃增白食品会生癌
如今,许多市售的馒头、花卷、包子、粉丝、银耳和其它水浸食品,色泽洁白,感官性状良好,这是为什么呢?原来这是不法商贩在制作工艺中添加了一种叫做吊白块的食品增白剂.吊白块的化学名字叫甲醛合亚硫酸钠,它在食品加工过程中分解为二氧化硫和甲醛.亚硫酸钠在食品加工中具有还原漂白作用,而使食品增白.
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糖参片的加工方法
介绍一种糖参片的加工制备方法.1 处方组成参片(鲜或干参片水分小于14%)500 g 冰糖粉(100 目)1 000 g 山梨酸 50 g 亚硫酸钠 50g
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二氧化硫衍生物对大鼠离体主动脉环收缩影响
目的研究二氧化硫衍生物对大鼠离体胸主动脉的舒张作用及其可能的作用机制.方法将离体大鼠胸主动脉环固定于营养液浴槽中,给药后记录血管环张力变化.结果二氧化硫衍生物对有无内皮的血管均有舒张作用.二氧化硫衍生物对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KCl)和钙离子(Ca2+)引起的血管收缩呈非竞争性拮抗作用,其拮抗系数分别为0.43,2.03,2.49.在无钙液中NE引起的细胞内外钙流增加可被二氧化硫衍生物抑制.作用与同条件下的维拉帕米相似.结论二氧化硫衍生物的舒张作用与内皮无关,能抑制电压依赖性钙通道和受体依赖性钙通道,并能抑制内钙的释放.对此尚需进一步研究证实.
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cAMP-PKA信号转导在SO2衍生物舒张血管中作用
目的 研究环腺苷酸单磷酸-蛋白激酶A(cAMP-PKA)信号转导系统在SO2衍生物舒张血管中的作用.方法 当SO2衍生物诱发该血管环舒张时,采用放射免疫法检测血管环组织环腺苷酸单磷酸(cAMP)、环鸟苷酸单磷酸(cGMP)、前列环素(PG12)和血栓素(TXA2)的稳定代谢产物6-酮-前列腺素F1a(6-keto-PGF1a,6-keto)和血栓素B2(TXB2)的含量,并用32P掺入底物法测定组织中的蛋白激酶A(PKA)活性.结果 SO2衍生物可引起血管组织中cAMP、6-kceto(即PG12)含量及PKA活性增加,其增加程度与内皮无关;SO2衍生物不能引起血管环cGMP和TXB2含量的变化,但可引起cAMP/cGMP和6-keto/TxB2比值显著升高.结论 SO2衍生物可使PG12-cAMP-PKA信号通路活化,这可能是SO2导致血管舒张的机制之一.
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国标法中发酵酒二氧化硫残留量测定的讨论
二氧化硫、亚硫酸钠作为食品添加剂,具有漂白、抗氧化和抑菌防腐等作用,在发酵酒中主要是作为一种防腐剂使用.
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极谱法测定自来水中六价铬
我省的自来水源水一般是用江水或溪水,而天然水中铬(Ⅳ)含量一般很低,大致在0.002～5μg/L范围内[1].用二苯碳酰二肼比色法[2]测Cr(Ⅳ)灵敏度显然不够.本文在文献[3]基础上提出在乙二胺-氨水-亚硝酸钠-亚硫酸钠体系中,极谱法测自来水中Cr(Ⅵ),其检出限为0.036μg/L.Cr(Ⅳ)含量在0.1～20μg/L范围内与峰电流呈良好的线性关系,相关系数优于0.995.现介绍如下.
