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五味子甲素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞毒性作用的影响
目的 初步探讨不同浓度的五味子甲素(SchA)对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞毒性的影响.方法 体外培养多巴胺能神经细胞SH-SY5Y,四唑盐比色法(MTT法)观察不同浓度的MPP+对SH-SY5Y细胞增殖的影响后,检测不同浓度的SchA对SH-SY5Y细胞的影响,筛选其无毒剂量后形态学及MTT法进一步观察一定浓度的SchA对MPP+引起的SH-SY5Y细胞毒性作用是否具有保护作用.结果 与对照组相比,0.1～1.5 mmol/L MPP+染毒48 h均可引起SH-SY5Y细胞生长增殖抑制；0.5 ～5 μmoL/L SchA对SH-SY5Y细胞没有毒性作用,其中2～5μmol/L SchA均可明显抑制MPP+对SH-SY5Y细胞的毒性作用.结论 MPP+对SH-SY5Y细胞增殖有明显的抑制作用,而一定浓度的SchA能有效抑制MPP+的细胞毒性.
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五味子甲素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的影响
目的 初步研究不同浓度的五味子甲素(Schisandra A,SchA)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP+)引起的SH-SY5Y细胞凋亡的影响.方法 体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,1 mmol/L MPP+染毒同时分别给予1、3和5μmol/L SchA处理48 h,MuseTM细胞分析仪检测凋亡细胞数的变化;hoechst 33342染色后激光共聚焦显微镜进一步观察各组细胞形态的改变;Western-blot检测各组细胞中cleaved caspase-3蛋白表达水平的变化.结果 与对照组相比,1 mmol/L MPP+染毒48 h可引起SH-SY5Y细胞凋亡细胞数明显增多;1、3和5 μmol/L SehA干预可明显抑制1mmol/L MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,且随着SchA浓度的升高,凋亡细胞数明显减少.Western-blot实验结果显示,MPP+组细胞中cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高,而SchA于预组cleaved caspase-3蛋白表达明显降低(P＜0.05).结论 1 mmol/L MPP+可诱导SH-SY5Y细胞凋亡,而一定浓度的SchA能有效抑制MPP+引起的SH-SY5Y细胞凋亡,且该作用可能是通过抑制caspase-3蛋白活化实现的.
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牵正散合大补阴丸对MPP+诱导的SH-SY5 Y细胞帕金森病模型线粒体的保护作用
目的：探讨牵正散合大补阴丸（ QZS&DBYW）对1-甲基-4-苯基吡啶（ MPP+）诱导的帕金森病（ PD）细胞模型线粒体的影响，为深入探讨中药防治PD提供实验依据。方法选择人多巴胺能神经母细胞瘤SH-SY5Y，用MPP+处理建立PD细胞模型，采用QZS&DBYW干预。CCK-8法检测各组细胞存活率，MitoTracker Red CMXRos（ MTR）对活细胞线粒体标记，共聚焦显微镜观察，ImageJ软件测量线粒体形态因子和长宽比。结果 MPP+处理后细胞存活率有明显下降， QZS&DBYW干预不会明显改变细胞存活率。相较于空白对照组，模型组细胞出现大量空泡，线粒体长宽比显著降低，线粒体碎片明显增多。单独施用低浓度QZS&DBYW后线粒体分支增加，而高浓度中药使线粒体更为短小。低浓度QZS&DBYW治疗组可增加PD细胞的线粒体长度。结论牵正散和大补阴丸两方合用可减少线粒体的碎裂，在一定程度上对PD细胞模型线粒体有一定保护作用。
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肉苁蓉对1-甲基-4-苯基吡啶离子致多巴胺能神经元凋亡的影响
目的:建立1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methy14-phenylpyridinium,MPP+)诱导的原代培养新生鼠中脑多巴胺能神经细胞凋亡模型,并探讨肉苁蓉对中脑多巴胺能神经细胞的保护作用和机制.方法:采用血清药理学的方法,肉苁蓉含药血清孵育多巴胺能神经细胞,经MPP+处理后,用TUNEL染色、流式细胞仪检测.结果:浓度为200μmo1/L的MPP+使多巴胺能神经细胞发生典型的凋亡,流式细胞仪结果显示等效剂量肉苁蓉含药血清(动物灌胃浓度1.6g原药材/kg)培养液组多巴胺神经细胞凋亡率为6.3%,空白模型组的凋亡率为30.2%,光镜下计数每视野凋亡阳性细胞数显示:含等效剂量肉苁蓉含药血清及2倍等效剂量肉苁蓉含药血清培养液组明显低于模型组(P＜0.05).结论:肉苁蓉含药血清对神经毒素MPP+诱发的多巴胺能神经细胞凋亡具有一定的保护作用.
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伴侣自吞噬在MPP+损伤的SH-SY5Y细胞中的影响及葛根素的干预作用
目的:研究葛根素通过分子伴侣自吞噬途径保护MPP+损伤的SH-SY5Y细胞.方法:以1 mmol·L-1 MPP+损伤SH-SY5Y细胞建立帕金森病细胞模型.采用CCK-8染色检测不同浓度的葛根素对MPP+损伤的SH-SY5Y细胞存活率的影响;透射电镜、AO染色观察自噬体的形成及检测溶酶体活性的变化;RT-PCR检测Lamp2a,Hsc70 mRNA表达的变化,Western blotting法检测细胞内Lamp2a,Hsc70,α-synuclein蛋白的表达.结果:在12.5 ～ 50.0 μmol·L-1,预先30 min加入葛根素可以保护SH-SY5Y细胞抵抗MPP+诱导的损伤,并呈一定的量效关系;AO染色和电子显微镜检测25.0,50.0μmol·L-1葛根素作用于1 mmol · L-1MPP+损伤的SH-SY5Y细胞,细胞内出现自噬体,并且随着葛根素剂量的增加,胞质中形成的自噬体增多;流式细胞术检测结果显示50.0 μmol·L-1葛根素可以拮抗1 mmol·L-1 MPP+诱导的SH-SY5Y细胞内ROS水平的增加,阻止氧化损伤的发生;RT-PCR和Western blotting结果表明在12.5～50.0 μmol·L-1葛根素通过上调细胞内Hsc70,Lamp2a mRNA和蛋白水平保护MPP+造成的SH-SY5Y细胞损伤并抑制MPP+诱导的SH-SY5Y细胞α-synuclein蛋白的积聚.结论:葛根素可以拮抗MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤,其保护机制可能与干预分子伴侣自吞噬途径有关.
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注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞增殖与MPP+诱导的氧化损伤的影响
目的探究注射用脑蛋白水解物对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（PC12）细胞增殖与1-甲基-4-苯基吡啶（MPP+）诱导的细胞氧化损伤的影响，为建立评价脑蛋白水解物活力检测方法提供科学依据。
方法通过 MPP+损伤 PC12细胞后，采用 MTT 法测定不同厂家、不同浓度的注射用脑蛋白水解物对 PC12细胞的修复作用，通过测定其吸光度与正常细胞吸光度的比值来计算样品对 PC12细胞损伤的修复率，以此作为注射用脑蛋白水解物活力考察的指标。同时还对注射用脑蛋白水解物对于 MPP+损伤的不同亚型的 PC12细胞作用进行了研究。
结果注射用脑蛋白水解物作用时间为48 h、浓度为60μg/ml 时对 MPP+诱导的 PC12细胞的氧化损伤具有较好保护作用，并且对低分化型的 PC12细胞具有更明显的保护作用。
结论注射用脑蛋白水解物可促进低分化型 PC12细胞的增殖，并减轻 MPP+的损伤作用。研究建立的活力测定方法已经被国家标准采纳。 -
MPP+重新启动多巴胺能神经元细胞周期的作用及机制
目的研究1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)重新启动多巴胺能神经元细胞周期的作用及机制.方法使用MPP+处理神经元样分化的PC12细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,流式细胞仪检测早期凋亡细胞和细胞周期分布,免疫细胞化学检测ERK/MAPK通路活化水平.结果经MPP+处理后,细胞活力呈浓度依赖性下降,经25、50、75、100、150 mmol/L MPP+处理24 h后细胞存活率分别下降至对照组的(97.32±2.41)%、(67.69±3.03)%、(56.00±3.12)%、(47.23±2.55)%、(40.00±2.46)%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).经75 mmol/L MPP+处理后出现早期凋亡细胞,随处理时间延长,细胞凋亡率逐渐增加,其处理4、8、16和24 h后细胞凋亡率分别为(7.26±3.43)%、(8.34±3.55)%、(20.04±2.64)%和(28.46±2.35)%(P＜0.01).同时细胞周期中G0/G1期细胞减少,S期和G2/M期细胞增多(P＜0.01),细胞内ERK1/2通路活化.结论MPP+可通过活化ERK1/2通路重新启动多巴胺神经元的细胞周期,并诱导多巴胺能神经元凋亡.
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α-Synuclein与MPP+细胞毒性协同作用的研究
目的 模拟与帕金森病发病密切相关的遗传因素与环境因素,研究α-synuclein与MPP+对细胞的毒性作用.方法 RT-PCR方法扩增α-synuclein基因片段;分子克隆技术构建哺乳动物细胞表达载体;脂质体法转染;Western blot,MTT方法,双报告基因检测法和显微镜观察,研究过表达α-synuclein和MPP+对细胞存活率及NFκB信号通路的影响.结果 MPP+和α-synuclein均能够显著抑制细胞存活率,二者共同作用时抑制作用更加明显;而且研究发现α-synuclein能够抑制由转录因子NFκB介导的基因表达,MPP+能够进一步增强其抑制作用.结论 在遗传背景发生改变时,细胞对外界环境中的毒素更加敏感,提示帕金森病的发病存在某种遗传易患性.
关键词： 帕金森病 α-synuclein MPP+ NFκB -
Ndfip1对Mpp+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
目的 探讨Ndfip1对MPP+(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)诱导的帕金森病(Pkarkinson's disease,PD)细胞模型(人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞)的保护作用.方法 利用已建立好的Ndfip1内源性表达(野生型,WT-SY5Y)、过表达(4HT诱导,SY5Y-N)、显性负表达(显性负载体,SY5Y-D)及抑制表达(Ndfip1 shRNA载体瞬时转染,SY5Y-Ⅰ)四种不同SH-SY5Y细胞模型,采用Mpp+诱导上述细胞形成PD细胞模型,利用MTT法在酶联免疫检测仪上测量OD490吸光值以计算细胞的存活率,采用Annexin V凋亡检测试剂盒和流式细胞仪测定细胞的凋亡率.结果 0.3 mmol/L浓度的Mpp+可降低WT-SY5Y细胞存活率,增加细胞凋亡率,其他细胞模型的细胞存活率及细胞凋亡率也与此类似;当加入4HT时,SY5Y-N细胞中因Ndfip1大量表达可明显增加细胞存活率,抑制细胞凋亡率,与WT-SY5Y相比,差异有统计学意义(P＜0.05);而此时SY5Y-D和SY5Y-Ⅰ细胞中因Ndfip1的表达被抑制不能明显增加细胞存活率,降低细胞死亡率(P＞0.05).结论 Ndfip1对Mpp+诱导的PD细胞模型具有明显的神经保护作用及抗凋亡作用,研究结果有助于对PD发病机制的研究,为PD的临床治疗开辟了新的思路.
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1,2,3,4,6-O-五没食子酰基葡萄糖对MPP+诱导PC12细胞凋亡的保护作用
目的：考察1,2,3,4,6-O-五没食子酰基葡萄糖（1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β-D-glucose，β-PGG）对MPP+诱导的帕金森病细胞模型中PC12细胞凋亡的保护作用及其机制研究。方法 PC12细胞孵育于高糖DMEM培养基中，在药物处理前1周，将神经生长因子（NGF）加入培养基中，使培养基中NGF的终质量浓度为50 ng/mL。将细胞分为对照组、MPP+组以及50μmol/Lβ-PGG预处理7、12、20、30 h组，观察预处理不同时间对MPP+中PC12细胞存活影响。采用台盼蓝染色法检测细胞死亡情况，MTT法检测细胞活力，免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、Fas、FasL、procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白表达情况，并检测caspase-3、caspase-8、caspase-9活力。结果对照组PC12细胞死亡率低，MPP+组PC12细胞死亡率高，从β-PGG预处理12 h起PC12细胞死亡率较MPP+组均明显降低（P＜0.01）。MPP+组PC12细胞活力低，50μmol/Lβ-PGG预处理12 h时PC12细胞活力进一步增高，预处理20 h时细胞活力高。β-PGG预处理5 h后即可见Bcl-2、procaspase-3、procaspase-8、procaspase-9蛋白含量增加，至15 h时增加达到高峰；与之相反的是，β-PGG预处理5 h后即可见Bax、Fas、FasL蛋白含量减少，至30 h时达少。50μmol/Lβ-PGG预处理PC12细胞15 h后caspase-3、caspase-8、caspase-9的活力分别为MPP+组的36.5%、40.2%、42.2%。结论β-PGG对MPP+诱导PC12细胞凋亡具有保护作用，其机制是通过增强Bcl-2的表达、抑制Bax、Fas、FasL的表达以及降低caspase-3、caspase-8、caspase-9的活力实现了抑制MPP+引起的PC12细胞凋亡，促进PC12细胞的存活。
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Tideglusib对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用及其机制研究
目的:研究特异性GSK-3β抑制剂Tideglusib对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium ion,MPP+)诱导SH-SY5Y神经细胞凋亡的保护作用及其可能的作用机制.方法:通过MPP+诱导SH-SY5Y细胞凋亡建立体外帕金森病细胞模型,采用MTT筛选出对SH-SY5Y起保护作用的Tideglusib有效浓度;采用免疫化学染色方法检测Tideglusib对SH-SY5Y的神经保护作用;分别采用Hoechst33258核染方法和流式细胞仪检测Tideglusib的抗凋亡作用;通过Western-blot检测经Tideglusib处理后,SH-SY5Y细胞中与神经元凋亡密切相关的磷酸化tau蛋白(p-tau)及其上游激酶磷酸化糖原合成激酶(p-GSK-3β)的表达水平.结果:300μmol·L-1的MPP+处理SH-SY5Y细胞48 h构建体外帕金森细胞模型,通过MTT及免疫化学染色方法筛选Tideglusib的有效保护浓度发现5μmol·L-1的Tideglusib可对SH-5Y细胞产生保护作用,细胞存活率与MPP+处理组相比差异具有统计学意义(P<0.01);通过Hoechst33258和流式细胞仪发现MPP+可导致SH-SY5Y产生凋亡,5μmol·L-1的Tideglusib可有效改善SH-SY5Y的凋亡情况,差异具有统计学意义(P<0.01);Western-blot结果显示MPP+可引起GSK-3β的活化并诱导tau的异常磷酸化;而Tideglusib可下调GSK-3β的活性,降低磷酸化tau的水平(P<0.05).结论:Tideglusib可抑制MPP+引起的SH-SY5Y神经细胞凋亡,作用机制可能是通过抑制GSK-3β从而降低tau蛋白的磷酸化水平,进一步发挥神经元保护作用.
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牙髓干细胞共培养改善1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导的神经元凋亡
背景:如何利用牙髓干细胞改善神经损伤对于神经退行性疾病的临床治疗具有重要的意义.目的:探讨牙髓干细胞共培养对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl pyridinium,MPP+)诱导的神经元凋亡的影响.方法:分离培养人牙髓干细胞,进行形态观察和成脂成骨诱导分化能力鉴定;分离中脑神经元细胞,利用Transwell小室进行牙髓干细胞和神经元共培养,然后加入MPP+干预48 h,通过Tunel染色和western blot法检测牙髓干细胞对MPP+诱导的神经元凋亡的影响.结果与结论:①牙髓干细胞形态呈梭形,且能够成功向成脂成骨方向诱导分化;②牙髓干细胞和神经元细胞共培养后,减轻了 MPP+诱导的神经元凋亡;③MPP+处理后降低了 Bcl-2的表达,促进了 Bax 和 cleaved caspase3的表达,而在牙髓干细胞共培养条件下,抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显上升,促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase3表达明显下降;④结果表明,人牙髓干细胞可以保护或修复体外MPP+诱导的神经元损伤,该保护作用可能是通过人牙髓干细胞的旁分泌作用来实现的.
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奥氮平对MPP+诱导PC12细胞凋亡的保护作用
目的 探讨非典型性抗精神病药物奥氮平对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的防护作用.方法 以不同浓度的MPP+作用于培养的PC12细胞,MTT法检测PC12细胞存活率,荧光染料吖啶橙(AO)染色观察MPP+作用PC12细胞后的凋亡变化.用不同浓度的奥氮平预处理细胞后,加入MPP+共孵育,测MTT并AO染色,观测奥氮平的防护作用.结果 在MPP+终浓度为250 μmol/L时,细胞存活率降低为60.14%,与对照组差异显著,而奥氮平(200 μmol/L)的高防护作用是79%.结论 奥氮平能拮抗MPP+诱导的PC12细胞的凋亡.该药具有的防护作用可能与抑制MPP+诱导的凋亡有关.
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14-3-3蛋白在PC12细胞的分布及MPP+对其表达的影响
目的 探讨14-3-3蛋白在PC12细胞中的分布及其与MPP+诱导PC12细胞死亡的关系.方法 用免疫荧光染色检测14-3-3蛋白的分布,并分别用免疫印迹技术与MTT法检测MPP+,对14-3-3蛋白表达及细胞活力的影响.结果 PC12细胞中β、γ、ε、ζ、η和θ亚型免疫反应阳性.14-3-3蛋白表达随着MPP+处理的时间延长呈下降趋势,在6h变化不明显,12h显著下降(P＜0.05),到48h后14-3-3蛋白的减少极其显著(P＜0.01).PC12细胞的存活率也呈现同样的变化趋势.结论 MPP+引起PC12细胞的死亡可能与细胞内14-3-3蛋白含量的下降有关.
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MPP+诱导PC12细胞损伤的蛋白质组学研究
目的 研究MPP+作用PC12细胞48h后蛋白质表达谱的改变,进一步在蛋白质水平上阐明帕金森病的发病机制.方法 建立MPP+诱导的PC12细胞帕金森病模型,提取对照组与实验组的细胞总蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(Differential Gel Electrophoresis,DIGE)系统构建双向电泳图,DeCyder软件分析蛋白表达差异信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白质.结果 与对照组相比,实验组共有32个蛋白点发生变化;鉴定了其中7种结构和功能各异的蛋白.结论 本研究鉴定出氧化应激和线粒体损伤相关的蛋白thioredoxin、MPPs,与细胞骨架相关的蛋白NF-L、ezrin,具有分子伴侣活性的蛋白NAC、crystaillin,与免疫炎症相关的蛋白gC1qBP.这些蛋白的显著改变可能与PD的发病机制密切相关.
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IGF-1通过PI3K/Akt通路抑制MPP+诱导PC12细胞凋亡机制的研究
目的 探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用及其潜在的作用机制.方法 以250 μmol/L的MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病(Parkinson disease,PD)细胞模型.实验分组如下:空白对照组、MPP+组、IGF-1组、IGF-1+ MPP+组、IGF-1+ MPP++LY294002组.孵育24h后采用AO-EB法检测细胞凋亡率;采用MTT法检测细胞存活率;孵育4h之后采用Western blot免疫印迹法检测Akt、磷酸化-Akt(phospho-Akt,p-Akt)蛋白表达.结果 (1) 100 nmol的IGF-1能够显著抑制MPP+所致的细胞凋亡,对PC12细胞具有保护作用;(2)总Akt含量蛋白表达水平各处理组之间差别无统计学意义(P＞0.05),但磷酸化的Akt在IGF-1+ MPP+组表达高于MPP+单独处理组(P＜0.05).结论 IGF-1可减少MPP+所致的细胞凋亡,其保护作用与上调磷酸化的Akt的表达相关.
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芦荟大黄素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用
目的 研究芦荟大黄素对MPP+诱导的人神经母细胞株SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用.方法 采用体外SH-SY5Y细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞MPP+损伤模型.通过观察细胞形态,测定细胞存活率(MTT法),检测芦荟大黄素对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用.结果 同正常对照组细胞相比,MPP+损伤模型组细胞活性明显降低;同模型组比较,浓度为2 μmol/L、4 μmol/L、6 μmol/L、8 μmol/L的芦荟大黄素能减轻MPP+引起的SH-SY5Y神经细胞的损伤,明显提高细胞的存活率.结论 芦荟大黄素对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有保护作用.
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红参皂苷Rg3对1-甲基-4-苯基吡啶离子所致神经细胞氧化应激损伤的保护作用
[目的]探讨红参皂苷提取物Rg3对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)所致神经细胞氧化应激损伤的保护作用.[方法]取SH-SY5Y细胞株培养1d后加入1,5,10 mg/L红参皂苷Rg3,4h后加入MPP+培养20 h.利用MTT法检测细胞活性,采用流式细胞术检测线粒体膜电位(△Ψm)及细胞内活性氧族(ROS)水平.[结果]与MPP+单独处理组比较,红参皂苷Rg3各剂量组的SH-SY5Y细胞损伤得到明显改善,ROS荧光强度值明显降低,△Ψm荧光强度值明显升高,酪氨酸羟化酶表达水平明显升高(P＜0.05).[结论]红参皂苷Rg3对MPP+诱导的细胞氧化应激具有保护作用.
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二苯乙烯苷通过抑制NF-κB的激活减轻MPP+诱导的PC12细胞凋亡
目的:探讨2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-o-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystibene-2-o-β-D-glucoside,TSG)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methy-4-phenylpyridinium,MPP+)诱导PC12细胞凋亡的影响及其可能机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色试验检测PC12细胞活性;Hoechst33258染色法测定细胞凋亡;Western blotting检测NF-κB (P65)和IK Ba蛋白的表达.结果:MPP+300μ mol/L)作用于PC12细胞24h后,与正常对照组比较,细胞存活率降低(53-3±3-4%)(P＜0.01);细胞染色质固缩,细胞核呈致密浓染.TSG(1,5,10μ mol/L)预处理24h后,细胞存活率增加(60.8±1.9%),(70.1±1.8%)(P＜0.01),(81.2±1.9%)(P＜0.01);细胞核凝聚明显减少,且具有量一效关系.另外,MPP+可使PC12细胞核中NF-κB (P65)蛋白表达升高,细胞浆中IK Ba蛋白表达降低:与MPP+处理组细胞相比,TSG预处理后,PC12细胞核中高表达的NF-κB (P65)蛋白水平明显降低,细胞浆中低表达的IK Ba蛋白水平升高.结论:TSG对MPP+诱导的PC12细胞凋亡具有浓度依赖性的抑制作用,其作用机制可能与抑制NF-κB 的激活有关.
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灯盏花素对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用
目的 观察灯盏花素对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用,并探讨其作用机制.方法 采用MTT法检测细胞相对存活率,流式细胞术检测凋亡率,DCFH-DA法检测细胞内活性氧水平;Rhodamine123染色法检测线粒体膜电位水平;Western blot法检测胞浆Cyt-C的表达;ELISA法检测caspase-3和caspase-9酶活性.结果 250 μmol/LMPP+处理PC12细胞,细胞存活率显著降低,并明显诱导细胞产生凋亡.而经灯盏花素(12.5、25、50μg/L)预处理,有效抑制MPP+诱导的细胞调亡,明显增加PC12细胞存活率,同时使细胞活性氧的增加和线粒体膜电位的降低;并明显抑制胞浆Cyt-C的释放和caspase-3和caspase-9的高表达.结论 灯盏花素预处理能明显提高MPP+诱导的PC12细胞损伤的细胞存活率,其机制可能与抑制细胞线粒体凋亡途径有关.
