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石杉碱甲治疗阿尔茨海默病SOD、LPO浓度变化
目的:用石杉碱甲胶丸治疗阿尔茨海默病(AD),观察其红细胞和血浆内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)浓度变化与药物疗效之关系. 方法:门诊患者30例,每日服石杉碱甲胶丸共2月,于疗前、疗后1月、2月分别测定认知功能水平及红细胞和血浆内SOD、LPO浓度. 结果:该药有效率达63.33%,能一定程度的改善记忆障碍和痴呆症状,治疗1、2个月后,红细胞和血浆内SOD、LPO浓度都较疗前有明显改善(P<0.001),并与药物疗效和病程之间无明显关系(P>0.05). 结论:SOD和LPO可作为石杉碱甲胶丸治疗中的观察指标,但与疗效缺乏直接关系,推测AD与SOD和LPO之间存在着复杂的内在联系.
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石杉碱甲联合银杏叶治疗血管性痴呆
本文对血管性痴呆引起的认知功能障碍患者应用银杏叶联合石杉碱甲治疗并与单用石杉碱甲和银杏叶治疗进行了对照研究,报告如下.
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石杉碱甲、尼莫地平及其联合治疗增龄相关记忆障碍的效果及其对血浆总抗氧化能力和血小板钙离子浓度的影响
目的 探讨石杉碱甲、尼莫地平及其联合治疗增龄相关记忆障碍(AAMI)的效果及其对血浆总抗氧化能力(TAC)和血小板钙离子浓度的影响方法 AAMI患者140例,随机分为4组(每组35例),石杉碱甲(双益平)组口服石杉碱甲100 μg 3/日,尼莫地平组口服尼莫地平30 mg 3/日;联合治疗组口服石杉碱甲100 μg 2/日及尼莫地平30 mg 3/日;对照组口服维生素B6 10 mg 3/日;各组均连服6周.在治疗前、治疗后分别进行记忆功能[韦氏记忆量表(WMS)],血浆TAC和血小板游离钙浓度检测结果 治疗后,石杉碱甲组、尼莫地平组和联合治疗组WMS各项评分、血浆TAC水平及血小板钙离子浓度显著高于治疗前及对照组(均P<0.05),联合治疗组又明显高于石杉碱甲组和尼莫地平组(均P<0.05)结论 石杉碱甲、尼莫地平及其两者合用对AAMI有显著改善作用,以两者合用效果好;并且都能提高血浆TAC水平及血小板钙离子浓度.
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石杉碱甲生物合成与代谢调控关键基因的差异表达分析
目的 选择并比较L-赖氨酸脱羧酶、CYP450(CYP450-71A1和CYP450-72A1)、加双氧酶、N-甲基转移酶等石杉碱生物合成途径可能的关键基因(酶)在华南马尾杉(Phlegariurus austrosinicus (ching)L.B.Zhang)和有柄马尾杉(Phlegariurus petiolatus (C.B.Clarke) H.S.Kung et L.B.Zhang)中差异表达的情况.方法 以相同生境但石杉碱甲含量差异明显的一对石杉科马尾杉属植物华南马尾杉与有柄马尾杉为试材,提取总RNA并进行总RNA的反转录,根据文献分别设计引物,开展荧光定量PCR实验并对2者的差异表达结果进行分析.结果加双氧酶基因在高含量石杉碱甲的有柄马尾杉中表达,但在华南马尾杉中表达量极低或者不表达;在有柄马尾杉植体中相对高表达的基因有L-赖氨酸脱羧酶基因(约180倍),CYP450-71 A1基因(约33倍),CYP450-72A1基因(约223倍);N-甲基转移酶基因在2种材料中表达量接近.结论 加双氧酶基因极有可能编码石杉碱生物合成限速酶和关键酶,导致2种植物中石杉碱甲的含量明显差异;L-赖氨酸脱羧酶基因、CYP450-71 A1基因、CYP450-72A1基因编码的蛋白对石杉碱甲的积累具有促进作用;N-甲基转移酶基因应是编码定位于石杉碱生物合成途径下游石杉碱与石杉碱甲之间转换的催化酶,但非关键限速酶.
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石杉碱甲对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子的表达及氧化应激水平的影响
目的 探索石杉碱甲(huperzine A)对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophicfactor,GDNF)的表达及氧化应激水平的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、石杉碱甲组,每组12只.模型组和石杉碱甲组采用大脑中动脉永久性缺血模型,造模后7d石杉碱甲组开始给药,0.1 mg/(kg·d),每天1次,连续灌胃给药30 d,正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水.观察各组动物行为学变化、检测脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(ace@eholinesterase,AChE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;观察脑组织病理形态学变化;原位杂交法检测GDNF mRNA的含量.结果 石杉碱甲可以缩短模型大鼠学习反应时间,延长记忆时间,减少错误次数(P＜0.05);增强大鼠脑组织中SOD活性,降低胆碱酯酶活性,MDA和NO含量减少(P＜0.05);形态学观察结果显示:石杉碱甲对血管痴呆大鼠海马区神经元有一定的改善作用;与模型组比较,石杉碱甲组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 石杉碱甲可显著改善血管性痴呆大鼠的学习记忆障碍,其机制可能与石杉碱甲能增强脑组织SOD活性,降低胆碱酯酶活性,减少MDA和NO含量,从而提高了脑组织的抗氧化水平,发挥其神经保护作用有关.
关键词： 石杉碱甲 血管性痴呆 胶质细胞源性神经营养因子 -
石杉碱甲对氯胺酮致小鼠记忆障碍的影响
目的 研究石杉碱甲(huperzine A)对氯胺酮(ketamine)所致小鼠记忆障碍的影响.方法 将小鼠随机分为3组:生理盐水组(NS组),氯胺酮35mg·kg-1组(K组)和石杉碱甲0.2mg·kg-1+氯胺酮35mg·kg-1组(HK组),每组10只.在避暗实验中,小鼠腹腔注射氯胺酮建立记忆障碍模型,观察石杉碱甲对记忆障碍小鼠潜伏期和错误次数的影响.结果 与NS组相比,K组和HK组的错误次数明显增多,潜伏期明显缩短(P均<0.01);与K组相比,HK组错误次数明显减少,潜伏期明显延长(P均<0.01).结论 石杉碱甲能部分改善氯胺酮所致的小鼠记忆障碍.
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石杉碱甲对急性重复缺氧小鼠耐受力和记忆力的影响
目的 观察石杉碱甲(Hup)对急性重复缺氧小鼠耐受力和记忆力的影响.方法 将30只小鼠随机分成3组(n=10):正常组(C组),缺氧组(NS+A组),石杉碱甲组(Hup+A组).在小鼠急性重复缺氧实验中,分别记录NS+A组和Hup+A组小鼠3次标准缺氧耐受时间;在避暗实验中,观察上述3组小鼠的步入潜伏期(STL)和错误次数(ETs).结果 在小鼠急性重复缺氧实验中:与NS+A组相比,Hup+A组3次标准缺氧耐受时间均延长(P均<0.01).在避暗实验中:与C组相比,NS+A组STL缩短(P<0.05)、ETs增加(P<0.05);与NS+A组相比,Hup+A组ETs减少(P<0.05).结论 Hup可提高小鼠对急性重复缺氧的耐受力,改善急性重复缺氧所致的小鼠记忆损害.
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内生真菌YD-01次生代谢产物的研究Ⅰ
目的:研究交链孢霉属真菌(Alternaria sp.) YD-01次生代谢产物的化学成分.方法:应用多种色谱方法进行分离和纯化,并用NMR、IR和MS 等方法解析其化学结构.结果:从交链孢霉属真菌YD-01次生代谢产物中分离到3个化合物,它们的结构分别被鉴定为:石杉碱甲(1),6-甲氧基-7,4'-二羟基异黄酮 (2),4-羟基苯基-(-D-葡萄吡喃糖苷(3).结论:微生物发酵是生产石杉碱甲一条新途径.
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高效液相色谱法测定石杉碱甲片的含量及有关物质
目的:采用HPLC方法测定石杉碱甲及其制剂的含量.方法:采用C18(25 cm×4.6 mm)色谱柱,0.02%三乙胺的甲醇-水(50∶50)溶液为流动相,柱温40 ℃,流速1 ml/min,检测波长310 nm.结果:在1.0～51.0 μg·ml-1范围内,色谱峰面积与对照品浓度呈现有良好的线性关系,r=1.000;平均回收率为99.9%(RSD为0.6%,n=9).结论:该方法简便准确,重现性好,在本色谱条件下,石杉碱甲与其降解产物能很好的分离,可以准确测定石杉碱甲的含量,也可以用于原料及其制剂有关物质的限度检查.
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高效液相色谱-质谱-质谱联用法测定Beagle狗血浆中石杉碱甲
目的:建立狗血浆中石杉碱甲的液质联用测定法.方法:血浆样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱联用法检测.色谱柱为Nucleocil ODS柱,50×2.0 mm I.D.,5 μm,流动相为乙腈-甲醇-水-甲酸(20∶40∶40∶0.1,v/v).采用多反应监测,用于定量的离子为m/z 243→210(石杉碱甲)和m/z 257→226(内标N-甲基石杉碱甲).结果:线性范围为0.1～12 ng/ml,低定量浓度为0.1 ng/ml,可以检测到Beagle狗静注和口服100 μg石杉碱甲后12 h的血药浓度.结论:该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学研究.
关键词： 石杉碱甲 高效液相-质谱-质谱联用法 血药浓度 -
石杉碱甲并高压氧治疗血管性痴呆效果观察
目的:观察石杉碱甲并用高压氧治疗血管性痴呆的效果.方法:对72例血管性痴呆患者,分为观察组和对照组各36例,观察组用石杉碱甲并高压氧,对照组单用石杉碱甲片,均治疗80天,用长谷川痴呆量表评定疗效.结果:观察组改善率88.9%,对照组改善率61.1%.结论:石杉碱甲并用高压氧疗效更佳.
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石杉碱甲联合尼莫地平治疗血管性痴呆80例
血管性痴呆(vascular dementia,VD)是老年痴呆的主要类型之一,主要为脑血管病反复发作导致皮质及皮质下痴呆的一种综合征,是威胁我国高龄人群生命及生活质量的主要疾病之一.尼莫地平是一种高选择性钙通道阻滞剂,对脑血管有较强的抗痉挛及扩张作用,同时可作用于神经元稳定并增强脑细胞的功能,常用于血管性痴呆的治疗,而石杉碱甲由石杉科植物千层塔中提取的一种生物碱,具有多靶点作用,除抑制乙酰胆碱酯酶活性,还可通过抗氧化应激和抗细胞凋亡途径对神经元产生保护作用,对多种实验性记忆损害均有改善作用.
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中西医结合治疗老年血管性痴呆25例
血管性痴呆(vascular dementia,VD)是指出血、缺血、急性或慢性缺氧性脑血管病等一系列脑血管因素导致脑组织损害而引起的痴呆综合征,以记忆、认知功能缺损为主,或伴有语言、视觉空间技能及情感或人格障碍的获得性智能的持续性损害[1].笔者观察传统中药和针灸疗法配合西药治疗老年血管性痴呆的临床疗效,报道如下.
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石杉碱甲联合针刺治疗血管性痴呆疗效观察
血管性痴呆(VD)是发生在脑血管病基础上的以记忆、认知功能缺损为主或伴有语言、视觉空间技能及情感或人格障碍的获得性智能的持续性损害[1].在亚洲及许多发展中国家,由于中风的发病率较高,VD已成为常见的痴呆类开型[2],亦是老龄化社会主要致残和致死疾病之一,给家庭和社会带来沉重负担.本研究应用石杉碱甲联合针刺治疗VD,观察其对认知功能的作用.
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石杉碱甲联合尼莫地平治疗轻中度血管性痴呆的临床观察
目的:观察石杉碱甲联合尼莫地平治疗轻中度血管性痴呆的临床疗效.方法:120例患者随机分为2组.60例对照组口服尼莫地平30rag.每日3次;60例治疗组口服尼莫地平30mg,每日3次,石杉碱甲150ug,每日2次.连服24周为一疗程.结果:治疗组患者认知功能评分(MMSE)及日常生活能力评分(ADL)较对照组有明显改善,P
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石杉碱甲保护人脑微血管内皮细胞损伤的体外实验研究
目的 体外实验研究石杉碱甲对人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)损伤的保护作用和机制.方法 在培养的HBMEC上,利用丙酮醛诱导细胞损伤,通过MTT检测细胞活力,LDH、SOD活性试剂盒及caspase-3活性试剂盒检测细胞损伤情况,观察石杉碱甲的作用和机制.结果 石杉碱甲呈浓度依赖地保护MGO诱导的细胞损伤,在10-5 mol·L-1时呈大保护作用.丙酮醛能诱导HBMEC的SOD活性下降,而石杉碱甲(10-6,10-5mol·L-1)能逆转这种作用.进一步研究发现石杉碱甲能抑制丙酮醛诱导的caspase-3活性上升.结论 石杉碱甲对丙酮醛诱导的HBMEC的损伤具有保护作用,这可能与其抗自由基和抗凋亡作用有关.
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石杉碱甲免疫层析试纸条的研制
目的 利用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测石杉碱甲的方法.方法 采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗石杉碱甲单克隆抗体并于4℃保存.石杉碱甲和羊抗鼠二抗分别结合于硝酸纤维膜上,依次将硝酸纤维素膜、金标垫、样品垫、吸水纸组装于PVC底板上,切割成胶体金试纸条.结果 石杉碱甲快速检测试纸条的灵敏度为15 μg·mL-1,检测时间为5min,特异性高,批内和批间重复性良好.结论 该法操作简单,使用方便,可用于现场快速检测石杉碱甲.
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珍稀药源植物蛇足石杉中石杉碱甲的免疫学快速检测
目的 制备石杉碱甲单克隆抗体,分析其免疫学特性,建立蛇足石杉中石杉碱甲的ELISA检测方法.方法 用石杉碱甲人工抗原免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术筛选获4株单克隆抗体3E02、4B01、5D03和4C04,对单克隆抗体纯度、亚型、灵敏度、特异性等进行鉴定,建立ELISA检测方法.结果 4株抗体亚型分别为IgG2b,IgG2b,IgG1和IgG1.ELISA检测方法的标准曲线方程为Y=0.373 6X-0.236,r=0.996 5,线性范围为5～1 000 ng·mL-1,检测限4.387 ng·mL-1.石杉碱甲的平均回收率为99.5％,RSD为0.68％(n=6).结论 ELISA法快速灵敏,可用于蛇足石杉中石杉碱甲的含量测定.
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石杉碱甲的大鼠鼻黏膜吸收研究
目的 研究治疗早老性痴呆症药物石杉碱甲的鼻黏膜吸收特性.方法 采用石杉碱甲进行大鼠鼻腔灌流实验,测定循环液中药物浓度.结果 随着石杉碱甲的浓度增加(0.125～0.75mg/mL),其吸收速度呈线性增加(r=0.995).在pH值5.5～7.5内,随pH值的升高,其吸收速度增加.结论 石杉碱甲的鼻黏膜吸收良好,其吸收程度与药液的浓度和pH值有较好的相关性.
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石杉碱甲透皮控释贴片对小鼠学习记忆的改善作用
目的:观察石杉碱甲透皮控释贴片(Hup-A TDDS)对正常小鼠及记忆障碍模型小鼠学习记忆功能的影响.方法:跳台试验测定Hup-A TDDS对正常小鼠学习成绩的影响;建立东莨菪碱记忆获得障碍模型及亚硝酸钠记忆巩固障碍模型,采用一次性训练的空间辨别反应实验-电迷宫实验和一次性学习的回避性条件反射试验-跳台试验测定小鼠记忆功能,观察Hup-A TDDS对其影响.结果:Hup-A TDDS 53.4μg/只对正常小鼠跳台试验有促进学习成绩作用,对1mg/kg东莨菪碱引起的记忆获得障碍及120mg/kg亚硝酸钠产生记忆巩固障碍有明显的反转作用.结论:石杉碱甲透皮控释贴片具有较好的促进正常小鼠及记忆障碍小鼠的学习记忆功能作用.
