石杉碱甲新剂型研究进展

石杉碱甲是一种高效、高选择性的中枢乙酰胆碱酯酶抑制剂,其作用时间长、易透过血脑屏障、口服生物利用度高,在国内已广泛应用于阿尔采末病的治疗.目前上市的剂型主要为口服或注射的普通制剂,需多次使用,因此对于患有认知功能缺失的老年患者存在用药不便的问题.此外,多次给药还容易引起血药浓度大幅度波动,导致机体产生不良反应,因此对其新剂型的开发势在必行.本文综述了石杉碱甲新剂型相关研究进展,主要根据药物体内外释放特征、安全性、有效性等对现有的石杉碱甲口服缓控释制剂、长效缓释注射剂、缓释贴片、鼻用原位凝胶等剂型进行了比较,同时结合脑内乙酰胆碱变化水平与学习记忆关系的理论提出了新的剂型设计思路,以期为进一步开发安全、疗效可控和依从性高的新产品提供参考.

常压柱色谱组合法制备石杉碱甲

目的 寻求一条经济实用、便于产业化的石杉碱甲制备工艺路线.方法 以薄层色谱法选择柱色谱分离系统后,以回收率和含量为考察指标,对影响柱色谱分离效果的各因素进行选择与优化,寻找佳工艺路线.结果 采用碱性氧化铝柱和硅胶柱的组合进行分离纯化,碱性氧化铝柱的工艺参数为∶填料粒度100 ～ 200目,干法装柱(径高比1∶10),干法上样(上样比例1∶50),三氯甲烷-甲醇(47∶3,V/V)洗脱；硅胶柱的工艺参数为∶填料粒度200～300目,湿法装柱(径高比1∶10),湿法上样(上样比例1∶30),三氯甲烷-甲醇(48∶2,V/V)洗脱.所得产物溶于丙酮,静置过夜后,即可获得符合《中国药典》要求的结晶产物,本工艺条件下的石杉碱甲总回收率达到76.1％.结论 本工艺设备要求简单,样品处理量大,生产成本低,适合工业化生产.

石杉碱甲注射用缓释微球制备方法的比较及其体内外评价

以石杉碱甲为模型药物,制备了注射用生物降解缓释微球.对比研究了o/w型和o/o型乳化-液中干燥法制得微球的形态、粒径和药物体内外释药情况.结果表明,o/o型乳化.液中干燥法更适用于制备石杉碱甲缓释微球注射剂.

药物经鼻-脑转运的离体牛嗅黏膜模型及体内外相关性

分离牛嗅黏膜,以石杉碱甲和盐酸锥双净为模型药物,用Franz扩散池,建立评价药物经鼻-脑转运的体外模型.通过测定药物透牛嗅黏膜的累积扩散率,考察药物亲脂性、浓度、pH、剂型和促透剂对其透黏膜扩散的影响,并通过测定鼻腔给药后大鼠脑脊液的药物浓度评价本模型的体内外相关性.结果表明药物透牛嗅黏膜转运以被动扩散为主,亲脂性是影响扩散的关键因素.药物透牛嗅黏膜累积扩散率与大鼠脑脊液药时曲线下面积线性相关.本研究建立的离体牛嗅黏膜模型实验手段简便,适用于经鼻脑靶向给药系统的体外评价.

石杉碱甲的解离常数、表观溶解度和表观油/水分配系数的测定

分别采用电位滴定法、平衡溶解度法和摇瓶法,测定了石杉碱甲的解离常数、表观溶解度和表观油/水分配系数.结果表明石杉碱甲为一元弱碱,解离常数pKTα为6.18±0.02.随溶液pH的增加,表观溶解度下降,而表观油/水分配系数增大.

石杉碱甲缓释片含量和均匀度的HPLC测定

建立了HPLC法测定石杉碱甲缓释片的含量和均匀度.采用C18柱,流动相为甲醇-水-三乙胺(60:40:0.02,冰乙酸调至pH 6.0),检测波长307nm.平均回收率为98.0%,RSD为1.3%.含量均匀度符合中国药典规定.

闽浙马尾杉内生真菌炭团菌NX9产石杉碱甲的发酵条件优化

采用单因素法和均匀设计法优化了闽浙马尾杉内生真菌炭团菌(Hypoxylon investiens) NX9的摇瓶发酵条件及培养基配方,以提高石杉碱甲的产量.优化后的发酵条件为:种龄60 h、接种量8％.培养基配方(g/L)为:马铃薯200、丙酮酸钠1、乙酸钠0.2、甘露醇50、葡萄糖50、硫酸镁0.5、硫酸铵10、硝酸钠5、维生素B6 0.1;pH 6.4.在上述条件下,石杉碱甲的摇瓶发酵产量为16.93 μg/L,较优化前提高了14倍.以优化后的培养基作为种子培养基制备种子液,发酵液中石杉碱甲的含量进一步提高至27.48μg/L.

石杉碱甲微乳鼻腔给药对蟾蜍上腭纤毛和大鼠鼻黏膜纤毛的安全性评价

采用在体蟾蜍上颚模型考察石杉碱甲(1)微乳鼻腔给药对蟾蜍上腭纤毛存活时间和输送能力的影响,并利用扫描电镜观察1微乳对大鼠鼻黏膜纤毛形态的影响.结果表明,与生理盐水组比较,1微乳对蟾蜍上腭纤毛存活时间无显著影响(P＞0.05);与给药前相比,1微乳对蟾蜍上腭纤毛输送能力无显著改变(P＞0.05).扫描电镜结果表明,大鼠鼻黏膜纤毛与1微乳作用2h,形态无明显改变,但灌流4h时纤毛形态略有改变.提示1微乳鼻腔给药对鼻黏膜纤毛刺激性较小.

石杉碱甲注射用缓释微粒在大鼠体内的药动学

以石杉碱甲(1)为模型药物,聚左旋丙交酯为载体,制备了注射用生物降解缓释微粒.所得微粒粒径小于120μm,1含量为6.27％,在pH 7.4磷酸盐缓冲液(含0.02％ Tween-80)中72 h累积释放率约为5％,30 d累积释放可达93％.用LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的药物浓度.结果表明,本品注射首日内血药浓度快速下降,24 h后又缓慢上升,至11d达极值(1.94±-0.01)ng/ml.结果提示所得1缓释微粒体内外均有良好的缓释效果.

石杉碱甲原位凝胶及片对记忆损害小鼠和大鼠的药效学研究

考察了石杉碱甲片及不同剂量原位凝胶对记忆获得障碍、记忆巩固不良和记忆再现障碍小鼠及记忆获得障碍大鼠的影响.结果显示,17.5、35和70μg/kg的石杉碱甲原位凝胶(日服1次,连续7d)对上述记忆损伤小鼠均有明显改善作用,70μg/kg的石杉碱甲原位凝胶药效略优于同剂量片剂,且对东莨菪碱所致大鼠记忆获得障碍也有一定疗效.

石杉碱甲鼻用原位凝胶喷雾剂

石杉碱甲药源植物研究进展

石杉碱甲(Huperzine A)从石杉科(Huperziaceae)石杉属(Huperzia)植物蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.ex Murray)Trev.)中分离得到,其临床治疗阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)疗效显著.由于石杉碱甲的化学合成在短时间内难以克服合成步骤繁琐、成本高、活性低等特点,自然资源的挖掘和开发成为解决石杉碱甲短缺的有效途径之一.故对近年来石杉碱甲药源植物研究所取的成果和难点进行总结,以期为今后的研究提供一定参考.

HPLC测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物石杉碱甲的含量

目的:采用HPLC法测定九龙山国家自然保护区石杉科4种植物中石杉碱甲的含量.方法:以2%酒石酸溶液提取总碱,用高效液相法测定4种植物全草和不同器官石杉碱甲的含量.结果:石杉碱甲在采集的4种植物及其不同器官中均有分布,其中柳杉叶马尾杉的石杉碱甲含量很高,达到1981.27μg/g,远远大于其他植物,石杉碱甲在不同器官中含量不同,总体表现为:叶>茎>根.结论:九龙山自然保护区4种石杉植物石杉碱甲含量较高;植物不同器官中石杉碱甲含量存在差异.

4种石杉科植物中产生石杉碱甲的内生真菌的分离及初步鉴定和HPLC测定石杉碱甲的含量

目的 从4种石杉科植物中得到产生石杉碱甲(Huperzine A)的内生真菌,改进筛选内生真菌的培养条件.方法 消毒后的材料在培养基上培养和分离其内生真菌,HPLC检测代谢产物,显微形态鉴定菌种.结果 从蛇足石杉,长柄石杉,伏贴石杉,柳杉叶马尾杉中分离得到32株内生真菌,其中从柳杉叶马尾杉分离出的2株内生真菌能够产生石杉碱甲,分别是HA15.(芽胞菌属)和HA23.(葡萄孢属).结论 首次从柳杉叶马尾杉中分离出能产生石杉碱甲的内生真菌.

用高效液相色谱-质谱-质谱法测定小鼠血浆和大脑中的石杉碱甲及药动学

目的建立小鼠血浆和大脑中石杉碱甲的液质联用测定法,测定灌胃给药后小鼠血浆和大脑中石杉碱甲浓度的动态变化以及药动学参数.方法小鼠血浆及大脑样品经液液萃取,用高效液相色谱-质谱-质谱(LC-MS-MS)联用法检测.色谱柱:PHENOMENEX C18柱,100 mm×2 mm, 5 micron ;流动相为甲醇∶水(1%甲酸溶液)= 60∶40;用于定量的离子为m/z 243→ 154 (石杉碱甲)和m/z 278→ 203 (内标:克仑特罗).结果所建立的血浆的方法线性范围为 1～1 000 ng/mL,脑的方法线性范围为 1～1 000 ng/mL,它们低检测限为1 ng/mL,(r=0.999 0),RSD<7%,可以检测小鼠灌胃后石杉碱甲在血和脑中的浓度;血浆石杉碱甲浓度-时间变化可用一室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=6 min,Cmax =281 ng/mL, AUC(0→tn)=35 266 ng·L-1·min-1,AUC(0→∞)=38 056 ng·L-1·min-1,t1/2=99 min;在大脑中的药物浓度-时间变化用非房室模型拟合,主要药动学参数分别为Tmax=60 min,Cmax =224 ng/mL,AUC(0→tn)=44 344 ng·L-1·min-1,AUC(0→∞)=58 571 ng·L-1·min-1.结论该方法灵敏度高,简便快速,可用于药代动力学及相关研究;石杉碱甲在小鼠大脑中的消除速度比血浆缓慢.

石杉碱甲和卡巴拉汀治疗中重度阿尔茨海默病临床分析

目的 比较石杉碱甲和卡巴拉汀治疗中重度阿尔茨海默病(AD)患者的疗效和药物副反应.方法 30例住院的中重度痴呆AD患者首先应用石杉碱甲100 mg bid,3月后改用卡巴拉汀,开始3 mg qd,1月后加到3 mg bid.在应用石杉碱甲和卡巴拉汀3月后分别给予简易精神状态检查量表(MMSE)、总体衰退量表(GDS)和日常生活能力量表(ADL)量表评定,比较两药的疗效,并观察药物副反应.结果 30例中重度痴呆AD患者以石杉碱甲治疗3个月后MMSE与GDS评分无改善(P均＞0.05),ADL评分降低(P＜0.01)；改卡巴拉汀组治疗3个月后MMSE评分明显提高(P＜0.01),GDS和ADL评分明显降低(P＜均0.01).两药用后均无严重不良反应发生.结论 石杉碱甲治疗中重度痴呆AD患者疗效欠理想,改用卡巴拉汀后疗效提高.两药副反应轻且相似.

石杉碱甲与尼莫地平治疗轻中度血管性痴呆的疗效及安全性

血管性痴呆(VD)目前已成为仅次于阿尔茨海默病(AD)的导致精神及躯体残疾的主要病因[1-2].有研究[3]称该病的主要原因为脑血管病变造成胆碱能功能异常,进而导致患者发生认知功能障碍.因此,胆碱酶抑制剂可能对该病具有一定治疗效果.为了探讨石杉碱甲与尼莫地平联合用于该病治疗的临床效果及安全性,作者对84例血管性痴呆(VD)患者的临床资料进行了分析,现将结果报告如下.

中药有效成分石杉碱甲治疗阿尔茨海默病的研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种与年龄相关的,以进行性记忆损伤、认知功能障碍、行为障碍和人格改变为特征的慢性神经退行性疾病.据世界卫生组织估计,全球目前有近3560万AD患者,其中一半以上的患者居住在低收入和中等收入国家[1].AD是一种多因素介导的疾病,其病因及发病机制尚不明确,迄今临床实践中仍未找到十分有效的治疗策略[2].

石杉碱甲预处理对老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能的影响

目的 探讨石杉碱甲(huperzine A,Hup A)预处理对老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能的影响. 方法 24只健康SD大鼠,采用随机数字表法分为两组:对照组(C组),HupA组(H组),每组12只.H组老年大鼠每日1次经口灌胃0.15 mg/kg剂量的Hup A,C组经口灌胃等量蒸馏水,两组大鼠均吸入3％七氟醚100 min/d,连续5d.采用Morris水迷宫实验及旷场试验测定大鼠认知功能,记录逃避潜伏期、穿越平台次数、跨格次数、直立次数及中央格停留时间. 结果 H组老年大鼠逃避潜伏期较C组缩短,穿越平台次数[(2.3±0.8)次]较C组[(2.0±0.5)次]增多,差异均有统计学意义(P＜0.05);H组老年大鼠跨格次数[(66±18)次]较C组[(38±9)次]增多,中央格停留时间[(15±4)s]较C组[(35±8)s]明显减少,直立次数[(8.2±2.1)次]较C组[(4.0±1.3)次]明显增多,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 Hup A预处理可以改善老年大鼠七氟醚麻醉后认知功能.

石杉碱甲预处理对七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆的影响

目的 探讨石杉碱甲预处理对七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆的影响.方法 7日龄SD大鼠80只,雌雄不拘,体重15～20 g,采用随机数字表法分为五组(n=16):对照组(C组)吸入30％的氧气6h,3％七氟醚麻醉2h组(S1组),预处理3％七氟醚麻醉2h组(AS1组),3％七氟醚麻醉6h组(S2组),预处理3％七氟醚麻醉6h组(AS2组),AS1组和AS2组麻醉前30 min给予石杉碱甲0.2 mg/kg腹腔注射.麻醉结束24 h后,每组随机取8只大鼠断头取血,ELISA法检测血清S100β蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度.五组余大鼠14日龄行Morris水迷宫实验.结果 与C组比较,AS1组第1～6天逃避潜伏期、平台象限滞留时间、穿越平台次数无明显变化;AS2组第1～6天逃避潜伏期明显延长(P＜0.05),平台象限滞留时间、穿越平台次数无明显变化;余四组大鼠血清S100β及NSE浓度明显升高(P＜0.05).与S1组比较,AS1组第1～6天逃避潜伏期无明显变化,平台象限滞留时间、穿越平台次数明显增加(P＜0.05),血清S100β和NSE浓度均明显降低(P＜0.05).与S2组比较,AS2组第1～6天逃避潜伏期明显缩短、平台象限滞留时间、平台穿越次数明显增加(P＜0.05),血清S100β和NSE浓度均降低(P＜0.05).结论 石杉碱甲预处理能有效改善七氟醚麻醉新生大鼠学习记忆,对大脑神经细胞有一定的保护作用.