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Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞定向诱导分化中的甲基化状态
目的 研究Oct-4在小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)定向诱导分化中的甲基化状态.方法 全骨髓贴壁筛选法培养小鼠BMSCs,通过形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定.骨块接种培养法培养小鼠成骨细胞,采用碱性磷酸酶(AKP)及茜素红进行鉴定.诱导小鼠BMSCs向成骨细胞分化,采用间接免疫荧光染色和RT-PCR法观察Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达情况,甲基化特异性PCR检测Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的甲基化状态.结果 分离培养的小鼠BMSCs在体外能大量增殖,形成形态均一的细胞集落,培养细胞的CD29、c-Kit和CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达.诱导10d后的细胞及从小鼠颅骨中分离、培养出的成骨细胞,AKP及茜素红染色呈阳性.间接免疫荧光染色和RT-PCR结果显示,Oct-4在小鼠BMSCs定向诱导分化中表达下调.小鼠BMSCs定向诱导分化中Oct4基因启动子区的CpG岛出现了甲基化.结论 成功在体外培养了小鼠BMSCs及小鼠成骨细胞,Oct-4基因可能参与了成体干细胞多潜能性的维持,Oct-4基因在小鼠BMSCs定向诱导分化中的表达下调可能是其启动子区CpG岛甲基化的缘故.
关键词： Oct-4 小鼠骨髓间充质干细胞 分化 甲基化 -
OCT-4在肿瘤干细胞中的研究进展
人体各种组织都存在干细胞,肿瘤组织也存在肿瘤干细胞,随着医学技术的不断发展,人们对肿瘤组织认识也逐渐深入,目前认为肿瘤干细胞能够引起恶性肿瘤早期转移、浸润、放化疗抵抗以及治疗后复发等现象,Oct-4(POU5F1)为POU同源结构域转录因子家族中的成员之一,属于第V类POU蛋白，有学者认为Oct-4由于其具有自身的特点，可能会成为肿瘤的一个敏感性、特异性的标志物和治疗靶,现对于OCT-4基因在肿瘤干细胞中的研究进展做一综述。
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Oct-4在骨髓基质细胞定向诱导分化中表观遗传学研究
目的 检测Oct-4基因在BMSCs定向诱导分化中表现遗传学变化(即甲基化变化).方法 体外分离培养小鼠BMSCs,用成骨诱导剂(地塞米松,维生素C和β-甘油磷酸钠)诱导其向成骨细胞分化,通过间接免疫荧光染色和RT-PCR,检测OCT-4在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达；运用甲基化特异性PCR检测Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前和分化后10 d的甲基化变化.结果 Oct-4在小鼠BM-SCs诱导前有表达,诱导10 d后表达下降；Oct-4在小鼠BMSCs诱导前未发生甲基化改变,诱导10 d后检测到其甲基化状态.结论 Oct-4在小鼠BMSCs诱导分化前后有甲基化状态的改变,且甲基化水平与表达呈负相关,提示Oct-4基因在小鼠BMSCs定向诱导分化中的表达下调可能是由于其启动子区高度甲基化的缘故.
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干细胞相关标志物Oct-4在宫颈癌组织中的表达及临床意义
目的 探讨干细胞相关标志物Oct-4在宫颈癌组织中的表达并分析其在宫颈癌发生、发展中的作用和意义.方法 选取宫颈癌患者的组织检查标本50例,正常宫颈组织标本20例,采用免疫组织化学法和反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测正常宫颈组织和不同分化宫颈癌组织Oct-4 mRNA的表达量,比较两者Ocv-4蛋白表达阳性率以及宫颈癌患者在不同病理情况下Oct-4蛋白表达的阳性率.结果 RT-PCR检测显示Oct-4 mRNA在宫颈癌组织中的表达明显高于正常宫颈组织,免疫组织化学染色显示正常宫颈鳞状上皮组织不表达Oct-4蛋白,宫颈癌组织中阳性表达率为56.0％ (P＜0.01).Oct-4蛋白表达在宫颈癌患者的不同年龄和不同病理类型之间差异无统计学意义(P＞0.05),但在低分化的宫颈癌组织中明显高于中高分化的宫颈癌组织,在宫颈癌复发转移者明显高于临床治愈者(P＜0.01).结论 Oct-4基因在宫颈癌组织中表达增加,表达程度随着宫颈癌细胞的分化而降低,可能在宫颈癌放疗抵抗中起重要作用.
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Octamer 4基因在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
目的：检测 Octamer 4（Oct-4）基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达，探讨 Oct-4在 NSCLC 发生、发展中的作用。方法采用流式细胞仪分选出肺癌细胞系 A549中 Oct-4＋及 Oct-4-的细胞群，用免疫荧光法检测分选后的细胞亚群中 CD133的表达情况；采用体外侵袭实验检测 Oct-4＋细胞群和 Oct-4-细胞群的侵袭能力。结果①以标记 Oct-4通过流式细胞仪分离后，成功获得肺癌细胞株 A549中 Oct-4＋细胞群和 Oct-4-细胞群。且Oct-4＋细胞群中 CD133的表达明显高于 Oct-4-细胞群，差异有统计学意义（P<0.05）。②Oct-4＋细胞群的侵袭细胞数显著高于 Oct-4-细胞群，差异有统计学意义（P<0.05）。③Oct-4在 NSCLC 中的表达率为83％（50/60），且 Oct-4＋细胞群中 CD133的表达明显高于 Oct-4-细胞群，两者比较差异有统计学意义（P<0.05）；且 Oct-4的表达与NSCLC 组织的分化程度、肿瘤的临床分期及是否已经发生淋巴结转移有关，差异有统计学意义（P<0.05）。结论干细胞标志物 Oct-4在 NSCLC 干细胞亚群中呈高表达，可能与肺癌的发生、发展及转移密切相关，为肺癌治疗提供新的靶点。
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羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞向血管内皮细胞的体外诱导分化
背景:已证实将血管内皮细胞与具有良好组织相容性的生物材料复合,并移入体内后可增殖分化形成血管.但由于获取内皮细胞时创伤较大,所以细胞来源是一个急需解决的问题.目的:探讨羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞分化为内皮细胞的可行性.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-06/2009-03在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心完成.材料:羊水标本来自孕16-22周行产前诊断的孕妇,在超声引导下行羊膜腔穿刺取得60 mL羊水.方法:采用免疫磁珠细胞分选法去除人羊水细胞中CD44和SSEA-4阳性细胞,使OCT-4阳性胎儿间充质干细胞间接得到分离,并在体外进行培养扩增.取第3代羊水来源OCT-阳性胎儿间充质干细胞,诱导组换用含体积分数为15%胎牛血清的内皮细胞生长培养液,对照组持续用原培养液培养细胞.主要观察指标:倒置相差显微镜观察诱导过程中细胞形态变化,采用间接细胞免疫荧光法、内皮细胞吞噬Dil-acLDL法检测诱导效果.结果:诱导30 d后,镜下观察细胞集落相互连接,呈典型的"鹅卵石"样外观,经诱导的羊水来源OCT-4阳性胎儿间充质干细胞可在体外保持良好的增殖活力.诱导后的贴壁细胞eNOS和、vWF呈阳性表达,细胞胞浆内可见发出红色荧光的Dil阳性细胞;对照组细胞免疫荧光染色eNOS和vWF均呈阴性,且无红色荧光细胞出现.结论:羊水来源的OCT-4阳性的胎儿间充质干细胞在适当的体外微环境下,可诱导分化为血管内皮细胞.
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白细胞介素1β预处理骨髓间充质干细胞可影响骨髓瘤细胞株干细胞基因及趋化因子受体基因的表达
背景:既往多项研究提示多发性骨髓瘤患者间充质干细胞的细胞因子分泌、免疫调节、成骨分化等生物功能异常.目的:观察白细胞介素1β单次或多次预处理的正常间充质干细胞后,其再与多发性骨髓瘤细胞株共培养,对骨髓瘤细胞干细胞相关基因、趋化相关受体等表达的影响.方法:实验分为无白细胞介素1β预处理的骨髓间充质干细胞对照组、白细胞介素1β预刺激1d及白细胞介素1β预刺激7d组,各组分别培养7d后,均加入骨髓瘤细胞株H929直接接触共培养.3d后收集各组中骨髓瘤细胞株H929细胞,分别采用Western blot方法检测各组细胞NANOG、SOX2和OCT-4蛋白的表达水平,RT-PCR方法检测各组细胞趋化因子受体CCR1、CCR2、CCR6和CXCR4的基因表达水平.结果与结论:①与对照组比较,H929细胞株和单次白细胞介素1β处理组及多次白细胞介素1β处理组共培养后,SOX2蛋白表达水平升高(P＜0.05);②与对照组、单次白细胞介素1β处理组比较,多次白细胞介素1β处理组CCR1和CCR2基因的表达水平均增高(P＜0.05);③实验结果显示,正常骨髓间充质干细胞经炎症因子白细胞介素1β单次或多次刺激后,在与骨髓瘤细胞的相互作用中,对骨髓瘤细胞的干细胞基因表达、细胞趋化因子受体表达等均产生影响.这提示骨髓微环境中异常水平炎性因子,除了直接作用于骨髓瘤细胞之外,很可能通过影响间充质干细胞等非骨髓瘤细胞后,间接参与骨髓瘤疾病的发生和发展,并且其对骨髓瘤细胞的影响效果与白细胞介素1β作用间充质干细胞的时间长短有关.
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YAP蛋白对C6胶质瘤干细胞特性的影响
背景:YAP蛋白能够促进与干细胞特性相关蛋白基因的活化,因此推测YAP在维持C6胶质瘤干细胞特性中发挥重要作用,且暂无此方面研究报道.目的:探讨YAP蛋白在胶质瘤干细胞干性维持中发挥的作用.方法:使用无血清培养基培养C6胶质瘤细胞获取C6胶质瘤干细胞,细胞免疫荧光染色检测干细胞标志物CD133和Nestin蛋白表达;Western blot、qRT-PCR和细胞免疫荧光染色观察胶质瘤干细胞和胶质瘤细胞YAP表达差异.进一步使用慢病毒转染将C6胶质瘤细胞YAP蛋白过表达,使用shRNA慢病毒转染将C6胶质瘤干细胞YAP蛋白敲低,Western blot检测CD44、Nanog和Oct-4蛋白表达,干细胞克隆球形成实验鉴定细胞成球能力.结果与结论:①C6胶质瘤干细胞同时表达CD133和Nestin;②C6胶质瘤干细胞与C6胶质瘤细胞相比,YAP蛋白和mRNA表达升高;③YAP过表达后C6胶质瘤细胞的干细胞标志物CD44、Nanog和Oct-4表达明显上调,肿瘤干细胞克隆球体积明显增大、数量明显增多;④YAP敲低后C6胶质瘤干细胞的干细胞标志物CD44、Nanog和Oct-4表达明显下调,肿瘤干细胞克隆球体积明显减小、数量明显减少;⑤结果表明,C6胶质瘤细胞中存在肿瘤干细胞,YAP蛋白在胶质瘤干细胞中高表达并且与胶质瘤干细胞特性的维持密切相关.
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粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖和干性基因表达的影响及作用机制
背景:研究发现粉防己碱能通过下调β-catenin表达抑制神经胶质瘤干细胞特性,然而其对神经母细胞瘤干细胞的影响未见报道.目的:探讨粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞增殖及干性标志物表达的影响,并探究其分子机制.方法:使用无血清悬浮法从神经母细胞瘤SK-N-SH细胞中获取肿瘤干细胞,给予粉防己碱干预,通过MTT法检测粉防己碱对神经母细胞瘤干细胞的增殖抑制作用,细胞免疫荧光染色检测粉防己碱干预后Nestin蛋白水平变化,克隆球形成实验检测粉防己碱干预后肿瘤干细胞成球能力变化,qRT-PCR法检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin mRNA表达,Western blot检测粉防己碱干预后CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白表达.结果与结论:与未干预组比较,粉防己碱干预后SK-N-SH干细胞增殖能力降低(P＜0.05),CD133、Oct-4和Nestin mRNA表达降低(P＜0.05),Nestin蛋白荧光强度减弱,克隆球形成能力减弱(P＜0.05),CD133、Oct-4、Nestin、p-GSK3β和β-catenin蛋白减少(P＜0.05).结果表明,粉防己碱抑制神经母细胞瘤干细胞增殖并降低干性标志物表达,可能与其抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.
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Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中的表达及意义
背景:干细胞特异性基因Oct-4在维持干细胞功能和调节干细胞的分化过程中起着关键性作用,了解前列腺癌干细胞中Oct-4的表达,对前列腺癌的预后、复发和耐药的评估具有重要意义.目的:观察Oct-4在激素非依赖性前列腺癌干细胞中的表达.设计、时间及地点:观察性实验,于2008-02/10在南吕大学第一附属医院中心实验室完成.材料:取12例前列腺癌患者手术后组织标本,其中6例在手术前没有经过化疗和激素治疗,另外6例患者经过激素治疗出现抵抗而手术.方法:制备前列腺癌组织单细胞悬液,流式细胞仪分选未经治疗前列腺癌和治疗后出现耐药的前列腺癌干细胞,RT-PCR和Western blot榆测激素非依赖件前列腺癌Oct-4基因和蛋白的表达.主要观察指标:激素依赖和非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+以及CD133-/CD44-细胞的比例;Oct-4基因和蛋白在激素非依赖性前列腺癌CD133+/CD44+、CD133+/CD44-、CD133-/CD44+、CD133-/CD44-细胞的表达.结果:流式细胞仪检测显示未经过治疗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞占(0.83±0.21)%,而CD133-/CD44-细胞多达(95.62±1.35)%;治疗出现激素抵抗的前列腺癌CD133+/CD44+细胞为(54.62±0.86)%,而CD133-/CD44-细胞为(9.56±0.47)%;与其他亚群细胞相比,激素非依赖性前列腺癌CD133-/CD44-细胞Oct-4基因和蛋白显著降低(P＜0.01);CD133+/CD44+细胞Oct-4基冈和蛋白表达显著升高(P＜0.01):而CD133+/CD44-和CD133-/CD44+细胞之间Oct-4基因和蛋白表达无显著差异(P＞0.05).结论:Oct-4在激素非依赖件前列腺癌干细胞中高表达,可能与前列腺癌的预后和耐药有关.
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Oct-4在ⅢB期结肠癌组织中的表达及与CD45RO+细胞浸润相关性研究
目的 观察转录因子Oct-4在ⅢB期结肠癌患者癌组织中的表达,并探讨Oct 4表达水平、部位同CD45RO+淋巴细胞浸润密度之间的相关性,为结肠癌的诊断和判断预后提供依据.方法 选取佳木斯大学附属第一医院65例经外科手术治疗切除的ⅢB期结肠癌患者的癌组织标本、36例癌旁组织标本及24例正常结肠组织标本.采用免疫组织化学染色法检测Oct-4,比较各组组织中Oct-4水平以及分布状况.同时,分析其与CD45RO+淋巴细胞浸润密度的关系.结果 (1) Oct-4在结肠癌组织中高表达,在结肠癌旁组织中表达较弱,在正常结肠组织中无表达.(2) Oct-4蛋白表达中、强阳性的结肠癌组织中CD45RO+细胞浸润密度低于Oct-4水平阴性、弱阳性表达的组织.细胞核中表达Oct 4蛋白的结肠癌组织中CD45RO+T淋巴细胞浸润密度高于核浆共表达的结肠癌组织.结论 Oct-4在ⅢB期结肠癌肿瘤细胞中表达,可作为诊断的参考指标;且Oct 4表达水平的高低可作为判断预后的标准.
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转录因子Oct-4在肺癌中的表达及对其生长、增殖的影响
目的 观察Oct-4蛋白在肺癌组织及肺癌细胞系中的表达,探讨Oct-4对肺癌细胞生长、增殖的影响.方法 比较正常组织、肺癌组织,正常肺细胞系和肺癌细胞系中Oct-4的表达水平;选取高表达Oct-4的肺癌细胞系,运用siRNA技术降低Oct-4表达,通过MTT实验、BrdU掺入实验等技术检测肺癌细胞的生长、增殖,并检测PI3K分子的表达变化.结果 Oct-4在肺癌组织及肺癌细胞中表达上调,分别与正常组织及HBE比较差异有统计学意义(P＜0.05);降低Oct-4表达后,细胞BrdU掺入率明显降低(P＜0.05),生长速度减慢(P＜0.05),PI3K水平明显降低.结论 Oct-4在肺癌组织及肺癌细胞中表达升高,并通过PI3K促进肺癌细胞生长及增殖.
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老年胃腺癌患者癌组织Nanog、Oct-4和Furin的表达及意义
目的：观察老年胃腺癌患者癌组织Nanog、Oct-4和Furin的表达特征及相关性。方法140例老年胃腺癌患者术后标本及临床资料作为观察组，以95例老年人正常胃黏膜组织作为对照组，采用流式细胞学检测Nanog、Oct-4和Furin的表达。结果观察组Nanog、Oct-4和 Furin的表达量明显高于对照组（ P＜0.005），观察组Nanog、Oct-4和Furin的表达量与肿瘤的浸润深度、临床分期、分化程度、肿瘤大径均密切相关。观察组Nanog和Oct-4的表达呈正相关。结论老年胃腺癌患者癌组织中Nanog、Oct-4和Furin高表达对肿瘤的发生和进展有重要作用，Nanog和Oct-4具有协同正向作用，术后联合检测Nanog、Oct-4和Furin的表达可能对判断患者的预后有一定价值。
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丙戊酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化中对Oct-4的影响
目的 探讨丙戊酸诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成神经样细胞分化中对Oct-4的影响.方法 体外分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,将其分为两组:对照组,不加丙戊酸,细胞加入预诱导液(含1μmol/L β-ME,10％ FBS的DMEM/F12)培养24h,然后换诱导液(含200umol/L BHA,2％ DMSO的DMEM/F 12)诱导5h.实验组,诱导前12 h,在细胞培养液中加入丙戊酸.用倒置相差显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学法检测NSE、GFAP、Oct-4蛋白的表达.Western blot检测细胞内NSE及GFAP蛋白Oct-4的表达.结果 倒置显微镜下观察可见骨髓间质干细胞呈纺锤状,诱导后出现突出,向周围伸出明显突起,呈现神经细胞样形态,且实验组的细胞突起数量和长度多于对照组;Western blot检测实验组的NSE、GFAP蛋白表达高于对照组,Oct-4的表达实验组高于对照组.结论 丙戊酸能诱导骨髓问充质干细胞分化成神经样细胞,同时其增强了Oct-4在BMSCs体外定向诱导分化中的表达.
关键词： 丙戊酸 骨髓间充质干细胞(BMSCs) Oct-4 -
转录因子Oct-4和SOX-2在宫颈癌组织中的表达及其意义
目的:研究转录因子Oct-4和SOX-2在宫颈癌及正常宫颈组织中的表达情况,阐明二者作为宫颈癌干细胞标记物的可能性.方法:采用免疫组织化学SP法检测Oct-4和SOX-2在52例宫颈癌组织和28例正常宫颈组织中的表达,分析二者在不同类型宫颈癌患者中的表达情况.结果:Oct-4在宫颈癌组织中表达率(46.1％,24/52)显著高于其在正常组织中的表达率(7.1％,2/28),二者比较差异有统计学意义(P＜0.05);SOX-2在宫颈癌组织中的表达率(59.6％,31/52)显著高于其在正常组织中的表达率(10.7％,3/28),二者比较差异有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌组织中Oct-4和SOx-2的表达与患者年龄、病理类型和FIGO分期均无关联性(P＞0.05);与宫颈癌的分化程度有关联,随分化程度的降低,Oct-4和SOX-2表达水平升高,不同分化程度宫颈癌患者表达频数比较差异均有统计学意义(P＜0.05);宫颈癌组织中Oct-4与SOX-2的表达频数呈正相关关系(r=0.753,P＜0.05).结论:Oct-4和SOX-2在宫颈癌组织中频数较高,且随宫颈癌分化程度降低表达频数升高,提示Oct-4和SOX-2可作为宫颈癌干细胞的标记物.
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Oct-4在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用
目的 应用RNA干扰方法抑制胚胎来源神经前体细胞Oct-4基因表达,以观察Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中的作用.方法 采用“五步法”诱导小鼠胚胎干细胞向神经元分化,进入扩增期后给予Oct-4干扰RNA,采用Real-time PCR方法检测干扰后细胞Oct-4表达情况,进行分化计数,免疫组化鉴定分化后的细胞,计数分化后的新生神经元比例.结果 Oct-4干扰RNA使神经前体细胞Oct-4表达下降约40％,正常未干扰胚胎干细胞分化的神经元为(75.5±5.2)％,GFP组为(73.8±4.7)％,Oct4干扰RNA组为(33.8±2.9)％,与正常组和GFP组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 采用RNA干扰方法可以有效降低神经前体细胞Oct-4的表达,使分化后新生神经元生成减少,证实了Oct-4基因在胚胎来源神经前体细胞向神经元分化中发挥着重要作用.
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Oct-4及生殖细胞核因子在精原干细胞体外分化前后的表达
目的:检测Oct-4和生殖细胞核因子(GCNF)在小鼠精原干细胞(SSCs)诱导分化前后的表达.方法:体外分离培养小鼠SSCs,用于细胞因子(SCF)诱导其向精母细胞方向分化,通过间接免疫荧光显色和RT-PCR,检测Oct-4和GCNF在小鼠SSCs诱导分化前后的表达.结果:Oct-4在小鼠SSCs诱导前有表达,诱导2d后表达下降；而GCNF在小鼠SSCs诱导前呈阴性表达,向精母细胞诱导2d后呈阳性表达.结论:GCNF可能通过抑制Oct-4的表达促使SSCs分化.
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传代培养人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定
目的:通过对传代培养至第5代细胞分子标记物的表达分析,鉴定传代培养的细胞为人胚胎生殖干细胞(embrgomc germ stem cells,EGCs).方法:取5～10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人EGCs,挑选传代培养至第5代生长良好的细胞,采用免疫细胞化学法分别检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT的表达.结果:组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT.结论:组织块体外传代培养第5代所获得的细胞,为未分化的人EGCs.
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p63蛋白在鼠口腔黏膜干细胞中的时相表达和意义
目的:检测p63蛋白及其5种亚型在鼠口腔黏膜组织和口腔黏膜干细胞分化前后的表达特点,探讨p63作为口腔黏膜干细胞标记的可能.方法:以鼠抗人/鼠p63蛋白和兔抗人/鼠Oct-4蛋白为一抗,分别采用免疫细胞荧光和免疫组织化学技术检测p63蛋白在口腔黏膜上皮干细胞克隆、鼠上腭黏膜以及Oct-4在鼠腭黏膜中的表达情况;采用RT-PCR法检测口腔黏膜于细胞在培养5d和14d时,p63蛋白5种亚型的时相表达及变化特点.结果:免疫荧光显微镜观察,培养细胞胞核中发出p63蛋白的绿色荧光和DAPI蓝色荧光.免疫组化显示,p63蛋白主要表达在鼠腭黏膜基底层并部分表达于棘层,但Oct-4只表达于基底层.RT-PCR显示,细胞在培养5d时,表达p63蛋白的TA、△N、α和β亚型,不表达γ亚型;在培养14d时,表达p63蛋白的TA和γ亚型,不表达△N、α和β亚型.结论:p63蛋白可在口腔黏膜干细胞和次分化细胞中表达,单独标记尚不足以精确示踪口腔黏膜十细胞,但是其亚型ANp63α和(或)△Np63β可能是口腔黏膜十细胞的特异性标记.
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Oct-4在胃癌组织中的表达及临床意义
目的 研究干细胞相关标志物Oct-4在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 收集1996年6月～2006年3月胃癌手术石蜡标本63例,免疫组化法检测组织中Oct-4表达,分别以58例癌旁正常组织和10例正常胃黏膜组织标本作为对照.回顾63例患者的临床病理学指标,并分析各项指标与Oct-4表达的关系.对63例中的50例患者进行为期8年的生存随访,Kaplan-Meier法和Log-rank检验分析Oct-4表达与患者生存的关系;构建Cox回归模型,评估Oct-4作为胃癌患者预后的独立影响因素的可能性.结果 Oct-4在胃癌组织中阳性表达率为80.95%(51/63),显著高于癌旁正常组织的5.2%(3/58)和正常胃黏膜组织(0)(P<0.01).Oct-4表达的阳性程度与胃癌的临床分期呈正相关(P<0.01).Oct-4表达在不同分化程度胃癌组织及不同年龄和性别患者间比较,差异无统计学意义(P>0.05).Oct-4表达阳性程度高的患者生存时间明显短于Oct-4表达阳性程度低的患者(P<0.05).Oct-4表达水平与胃癌患者预后无明显相关性(RR 0.554,95% CI 0.209～1.466).结论 Oct-4在胃癌组织中表达的阳性程度与肿瘤临床分期及患者生存期有关,但不是胃癌患者预后的独立影响因素.
