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CDK4Fas在不同子宫内膜中的表达探讨
目的:探讨CDK4(cyclin dependent kinase 4)周期素依赖性激酶4,Fas/Apo-1蛋白在不同子宫内膜中的表达及意义.方法:采用免疫组织化学SP法,测定12例正常子宫内膜16例不典型增生子宫内膜及40例子宫内膜癌中的CDK4蛋白与Fas蛋白的表达情况.结果:CDK4在不典型增生子宫内膜和子宫内膜癌中的阳性表达率与正常组相比均有显著性差异(P<0.05),Fas蛋白在子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)中的表达明显低于正常子宫内膜,差异有显著性(P<0.05).结论:CDK4蛋白的过度表达可能在子宫内膜癌的发生、发展、浸润中具有一定作用,还可能作为一种有价值的肿瘤标志物.Fas蛋白在子宫内膜癌中的低表达提示其可能通过调控细胞凋亡参与了子宫内膜癌的发生和发展,可能与子宫内膜癌细胞的凋亡及免疫逃避等密切相关.
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寻常型银屑病表皮细胞中bcl-2、Fas、P53蛋白的表达
目的探讨bcl-2、Fas、p53蛋白在寻常型银屑病(psoriasis,PS)患者皮损中的表达.方法采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组化法(S-P法),检测30例PS患者皮损及10例正常皮肤组织中bcl-2、Fas、p53蛋白的表达.结果(1)bcl-2蛋白在30例PS表皮角质形成细胞(keratinocytes,KC)中均呈阴性表达;有26例部分黑素细胞(melanocytes,MC)和浸润的淋巴细胞呈阳性表达,表达强度为Ⅰ级(P＞0.05);10例正常皮肤组织中基底细胞呈Ⅰ级阳性表达.(2)Fas蛋白在30例PS中有26例呈阳性表达,其中3例呈Ⅰ级表达,8例呈Ⅱ级表达,15例呈Ⅲ级表达(P＜0.01);而10例正常皮肤组织均为阴性表达.(3)p53蛋白在30例PS中有12例在棘层、颗粒层少数KC中呈阳性表达,均为Ⅰ级表达(P＞0.05);10例正常皮肤表皮棘层、颗粒层KC未见阳性表达,仅在基底细胞有2例呈Ⅰ级阳性表达.结论推测Fas蛋白与寻常型银屑病发病机理可能有关,而p53、bcl-2蛋白与寻常型银屑病的发病机理无显著的相关性.
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Fas、FasL和Bcl-2在膀胱癌组织的表达及意义
目的研究Fas蛋白(CD95/Apol-1,Fas)、Fas配体(Fas ligand,FasL)及Bcl-2在膀胱癌组织中的表达,并探讨其临床意义.方法采用免疫组化LSAB法检测50例膀胱癌组织及6例正常膀胱黏膜中Fas、FasL和Bcl-2的表达.结果Fas、FasL及Bcl-2在膀胱癌组织中的阳性表达率分别为50%、38%、42%.膀胱癌组织FasL和Bcl-2的阳性表达率明显高于正常组织(P＜0.05),Fas明显低于正常组织(P＜0.05).Fas的表达与膀胱癌病理分级、复发有关(P＜0.05);FasL、Bcl-2表达与各项病理指标均无关(P＞0.05).结论Fas的表达降低与膀胱肿瘤的恶性化程度有关.
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葡萄籽提取物原花青素对皮肤急性光损伤Fas蛋白及Bcl-2蛋白表达的影响
目的:评估外用葡萄籽提取物原花青素对急性光损伤的Fas蛋白及Bcl-2蛋白表达的影响.方法:实验设计正常皮肤组、单纯2MED照射组、基质+2MED照射组、含葡萄籽提取物原花青素样品外用+2MED照射组共四组,连续3天同样处理24h后对皮肤取材,进行Fas蛋白及Bcl-2蛋白免疫组化染色.结果:含葡萄籽提取物原花青素样品外用+2MED照射组的Fas蛋白表达积分与单纯2MED照射比较明显下降,Bcl-2蛋白表达积分明显增加,接近正常皮肤.结论:葡萄籽提取物原花青素对日晒伤具有一定的防护作用,其机制可能是与Fas蛋白及Bcl-2蛋白表达相关.
关键词： 葡萄籽提取物原花青素 光损伤 Fas蛋白 BCL-2蛋白 -
RCS大鼠感光细胞凋亡与Fas蛋白表达
为了探讨遗传性视网膜变性时感光细胞凋亡及其基因调控机制,本研究对出生后9、15、20、25、30、35、40、60 d的RCS大鼠及同龄SD大鼠各4只的视网膜进行了TUNEL凋亡检测及Fas蛋白免疫组织化学反应.结果表明,出生后25～40 d,RCS大鼠视网膜外核层可见TUNEL阳性的感光细胞核,TUNEL阳性细胞数到35 d达高峰(P＜0.05).Fas蛋白免疫组织化学检测发现,RCS大鼠视网膜内核层在1 5～40 d可见Fas免疫阳性细胞,阳性细胞数以25 d为多(P＜0.05);外核层在25 d也可见Fas蛋白免疫阳性反应,一直持续到40 d;节细胞层在1 5～40 d可见Fas蛋白表达.到60 d时则各层又都不见明显的Fas蛋白阳性反应.本研究结果提示,在RCS大鼠视网膜变性过程中,感光细胞发生凋亡,Fas蛋白高表达可能与感光细胞的凋亡有关.
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Survivin蛋白和Fas蛋白在原发性翼状胬肉中的表达及其相关性研究
目的:探讨凋亡相关因子Survivin蛋白和Fas蛋白在原发性翼状胬肉组织的表达情况及其相互关系.方法:应用SP免疫组化法检测40例原发性翼状胬肉组织及20例正常结膜组织中Survivin,Fas蛋白的表达情况.所有数据应用SPSS 11.5统计软件进行分析.结果:Survivin在原发性翼状胬肉组织中的表达阳性率(37.5%)高于正常结膜组织表达阳性率(10.0%),两者之间有显著差异性(P＜0.05).Fas在原发性翼状胬肉组织中的表达阳性率(75.0%)高于正常结膜组织表达阳性率(15.0%),两者之间有显著差异性(P＜0.05);且Survivin和Fas两者的阳性表达率呈明显的正相关 (P＜0.01),表达强度具有一致性(P＞0.05).结论:Survivin可能与原发性翼状胬肉的发生密切相关;Survivin与Fas在原发性翼状胬肉组织中的表达关系密切,提示两者可能共同参与翼状胬肉的发生和发展.
关键词： Fas蛋白 Survivin蛋白 翼状胬肉 免疫组织化学 -
胎儿角膜深低温保存对FAS/FASL蛋白表达的影响
目的:研究细胞凋亡信号分子Fas和细胞凋亡因子FasL在新鲜及深低温保存后胎儿角膜的表达情况.方法:应用免疫组织化学SABC法对33例不同胎龄(5mo至足月)胎儿角膜石蜡标本切片后,分别进行了Fas和FasL蛋白染色.结果:胎儿角膜细胞Fas蛋白及FasL蛋白全为胞质和/或胞膜着色.33/33例角膜上皮细胞、基质细胞及内皮细胞Fas蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异.33/33角膜上皮细胞及内皮细胞FasL蛋白阳性表达,经统计学分析,未发现不同月龄间有差异,角膜基质细胞FasL蛋白的表达为0/33.新鲜角膜和冷冻保存后角膜的Fas,FasL蛋白阳性表达量经统计学分析无差别.结论:新鲜和深低温保存后的5mo至足月龄胎儿角膜均可见Fas,FasL蛋白的表达.其中Fas在角膜上皮、基质和内皮细胞均表达,FasL在角膜上皮、内皮细胞表达,而基质细胞不表达.深低温保存对胎儿角膜Fas/FasL蛋白表达无影响.
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白内障患者晶状体上皮细胞中Fas蛋白的表达
目的:了解不同类型白内障患者晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LECs)的凋亡情况及其与Fas蛋白(CD95)的关系.方法:取年龄相关性白内障、糖尿病性白内障及高度近视并发性白内障患者超声乳化手术中取下的前囊膜标本共73例.应用光镜、透射电镜及TUNEL标记法观察LECs的凋亡情况.同时应用免疫组化和流式细胞分别定性、定量检测Fas蛋白(CD95)在LECs中的表达.结果:光镜下3种白内障患者的LECs都呈透明样变性,细胞内有空泡.电镜下可见正常以及变性、坏死的LECs.部分LECs细胞内染色质凝集并边缘化,呈早期细胞凋亡改变.TUNEL检测发现3种白内障患者的LECs中均有TUNEL阳性细胞存在,LECs的凋亡率分别为(32.20±7.91)%、(31.00±9.43)%、(28.20±8.04)%,3种白内障间未见统计学差异.免疫组化结果表明在3种白内障患者的LECs中均有Fas蛋白(CD95)表达.流式细胞定量检测年龄相关性、糖尿病性及高度近视并发性白内障患者LECs中Fas蛋白(CD95)的表达量分别为(65.72±9.95)%、(63.46±13.30)%、(31.46±17.25)%,高度近视并发性白内障LECs中Fas蛋白(CD95)的表达与其他两种白内障间存在统计学差异(t检验,P<0.05).结论:年龄相关性白内障、糖尿病性白内障及高度近视并发性白内障患者的LECs均出现凋亡,LECs的凋亡很可能是非先天性白内障发病的细胞病理学基础.Fas蛋白(CD95)介导的LECs的凋亡在年龄相关性白内障及糖尿病性白内障的形成中起重要的作用,而在高度近视并发性白内障LECs凋亡中可能存在其他通路.
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野黄芩苷对人舌鳞癌Tca8113细胞周期及Fas蛋白表达的影响
目的:观察野黄芩苷对人舌鳞癌Tea8113细胞周期及Fas蛋白表达的影响.方法:用浓度为80、120和160 μg/ml的野黄芩苷处理体外培养的人舌鳞癌Tea8113细胞,用流式细胞技术观察细胞周期的变化；用蛋白印迹法定量检测Fas蛋白表达.结果:与对照组相比,加入不同浓度野黄芩苷后DNA合成前期(G1)细胞所占百分比(G1％)升高(P＜0.05),160 μg/ml野黄芩苷处理后DNA合成期(S)细胞所占百分比(S％)降低(P＜0.05).蛋白印迹法结果显示,随着药物浓度的增加,Fas蛋白表达量有增高趋势,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:野黄芩苷可能通过抑制肿瘤细胞增殖,提高人舌鳞癌Tca8113细胞Fas蛋白的表达而达到抗肿瘤的作用.
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Fas靶向RNA干扰质粒载体的构建及生物活性鉴定
目的构建Fas靶向的RNA干扰质粒载体,为探讨抑制Fas表达在急性再生障碍性贫血治疗中的意义奠定基础.方法 PCR法获得U6启动子序列以及产生siRNA的相应DNA模板序列,将其克隆入改造后的pcDNA3.1,获得RNA干扰载体pU6-siFas.脂质体法将pU6-siFas导入P815细胞,免疫组化法检测对P815细胞Fas表达的抑制情况.结果所构建的载体pU6-siFas能够干扰P815细胞中Fas的表达,并且具有新霉素抗性,能够用G-418筛选稳定转化的细胞株.结论成功构建了抑制小鼠Fas表达的RNA干扰质粒载体.
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Fas和Bcl-2蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达及意义
目的研究Fas及Bcl-2蛋白在人脑星形细胞瘤中的表达特点和相互关系,为预后评估及治疗提供理论依据.方法收集人脑星形细胞瘤标本51例,非肿瘤患者的正常脑组织10例.标本均行HE染色与SP免疫组织化学染色.分析Fas及Bcl-2蛋白表达程度与星形细胞瘤恶性分级的关系.结果正常脑组织未见Fas蛋白表达,只有1例表达Bcl-2蛋白,且表达程度非常弱.星形细胞瘤均有Fas及Bcl-2蛋白的表达,并且表达率及表达强度随着星形细胞瘤级别的增高而增强.Fas蛋白表达阳性的肿瘤中Bcl-2蛋白表达率(68.6%)显著高于Fas蛋白表达阴性的肿瘤(43.8%).结论 Fas和Bcl-2蛋白可能与星形细胞瘤的发生和发展有较密切的关系,且它们在星形细胞瘤的发生中可能存在相互作用的关系.Fas及Bcl-2蛋白在星形细胞瘤中的表达,对疾病预后评估及针对性免疫治疗具有一定的临床价值.
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青藤碱对肾缺血再灌注大鼠肾组织Fas/FasL蛋白表达水平影响的探讨
目的 探讨青藤碱对肾缺血再灌注大鼠肾组织Fas、FasL蛋白表达水平的影响.方法 选取健康雄性Wistar大鼠72只,体重180～220 g,随机分为假手术组(S组)、空白给药组(SS组)、肾缺血再灌注损伤模型组(I/R组)、青藤碱组(SIN组),每组18只.I/R组、SIN组游离双侧肾蒂,用无创动脉夹夹闭左肾肾蒂,使左肾缺血,45分钟后松开动脉夹再灌注,并即刻切除右肾,建立肾缺血再灌注损伤模型.S组、SS组仅游离双侧肾蒂,不夹闭左肾肾蒂.SIN组、SS组于缺血后15分钟(即再灌注前30分钟)向腹腔注射青藤碱注射液60 mg/kg,I/R组、S组于同一时间向腹腔注射等量生理盐水.再灌注后6小时(T1)、12小时(T2)、24小时(T3)穿刺心脏采血,用全自动生化分析仪检测血清Cr、BUN浓度;摘除左肾,光镜下观察肾组织病理学变化,用免疫组化法检测肾组织Fas、FasL蛋白表达水平,用TUNEL法检测并计算肾小管上皮细胞凋亡率.结果 S组与SS组大鼠在T1、T2、T3的血清Cr、BUN浓度,Fas、FasL蛋白表达水平,肾小管上皮细胞凋亡率比较,差异无统计学意义(P>0.05);与S组比较,I/R组、SIN组T1、T2、T3的血清Cr、BUN浓度升高(P<0.05),肾组织病理损伤加重,肾组织Fas、FasL蛋白表达水平升高(P<0.05),肾小管上皮细胞凋亡率升高(P<0.05);与I/R组比较,SIN组T1、T2、T3的血清Cr、BUN浓度降低(P<0.05),肾组织病理损伤减轻,肾组织Fas、FasL蛋白表达水平下降(P<0.05),肾小管上皮细胞凋亡率下降(P<0.05);与T2比较,I/R组和SIN组T3的Fas蛋白表达水平、 细胞凋亡率升高(P<0.05).结论 青藤碱可显著降低大鼠肾I/R病理过程中Fas、FasL蛋白的表达水平,从而减少肾小管上皮细胞的凋亡,有助于减轻I/R时肾脏的损伤.
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枸杞多糖对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响
目的 探讨枸杞多糖对心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制.方法 选取正常SD大鼠60只(雄性,体重200～ 250 g),随机分为空白对照组(n=15)、心肌梗死组(n=15)、枸杞多糖组(n=15)、氯沙坦组(n=15).心肌梗死组、枸杞多糖组、氯沙坦组大鼠通过结扎左冠状动脉前降支,建立大鼠心肌梗死模型;枸杞多糖组、氯沙坦组分别给予枸杞多糖120mg/(kg·d)及氯沙坦(20 mg/(kg·d))每日1次灌胃干预治疗4周;空白对照组、心肌梗死组给予等容量生理盐水灌胃.4周后用25％乌拉坦以4 mL/kg腹腔注射麻醉后处死大鼠,制备心肌病理标本及心肌匀浆,用TUNNEL法检测心肌凋亡细胞、Western blotting方法检测心肌Fas蛋白水平.结果 心肌梗死组细胞凋亡指数、Fas水平较空白对照组明显增加(P＜0.05),枸杞多糖组、氯沙坦组细胞凋亡指数、Fas水平较心肌梗死组明显下降(P＜0.05),两药物组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 枸杞多糖能够抑制心肌梗死大鼠心肌细胞的凋亡,其作用可能与降低心肌Fas蛋白表达有关.
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膀胱移行细胞癌中Fas、FasL蛋白表达的研究
目的探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)中凋亡相关基因Fas、FasL蛋白表达 .方法应用免疫组化链酶亲生物素-过氧化物酶法(SP法)检测Fas、FasL蛋白在BTCC中的表达.结果 BTCC中Fas蛋白阳性表达率中病理分级、临床分期、复发有显著性差异(P＜0.05).BTCC中FasL蛋白表达率中临床分期、复发有显著性差异(P＜0.05).结论 Fas和FasL蛋白表达可以反映BTCC恶性程度、侵袭深度和复发机率;Fas具有促凋亡作用;FasL则可抑制细胞凋亡.Fas和FasL可能成为预示BTCC生物学行为和预后的标记物.
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体外静水压力作用下SB203580对大鼠髁突软骨细胞FAS蛋白和凋亡率的影响
目的 观察静水压力作用下SB203580对大鼠髁突软骨细胞(mandibular condylar chondrocytes,MCCs) FAS蛋白表达量和凋亡率的影响,探讨P38通道与压力作用下软骨细胞凋亡的关系.方法 体外培养髁突软骨细胞,随机分为高剂量组、低剂量组和对照组.3组大鼠均给予30 kPa、12 h的静水压力;高剂量组和低剂量组分别给予高浓度(50μmol/L)和低浓度(10 μmol/L)的SB203580抑制剂进行干预处理.采用Western Blot方法检测FAS蛋白表达量,流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果 3组细胞中FAS蛋白表达量差异有统计学意义(P＜0.05),高剂量组、低剂量组FAS蛋白表达量均低于对照组,高剂量组低于低剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05)D3组细胞的凋亡率差异有统计学意义(P＜0.05),其中高剂量组、低剂量组细胞凋亡率均低于对照组,高剂量组亦低于低剂量组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 P38信号通道抑制剂SB203580可抑制压力作用下髁突软骨细胞FAS蛋白的表达和细胞凋亡,且抑制效果与剂量浓度大小相关,提示P38信号通道参与了压力作用下髁突软骨细胞的凋亡过程.
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胆红素诱导海马区神经细胞Fas蛋白过度表达的实验研究
目的探讨胆红素的神经毒性机制.方法制作高胆红素血症动物模型,观察海马区神经细胞的组织学变化,检测海马区神经细胞Fas蛋白表达率及神经细胞凋亡率,并探讨其间相关性.结果高胆红素血症时,海马区神经细胞出现凋亡的组织学改变,神经细胞Fas蛋白表达率在实验组1(T1 G,腹腔注射胆红素0.171μmol/g体重为(19.13±0.25)%,实验组2(T2G,腹腔注射胆红素0.342μmol/g体重)为(33.38±3.45)%,T1G神经细胞凋亡率为(6.13±0.37)%,T2G为(15.44±0.64)%,均较对照组差异有显著性(P＜0.001),二者与脑组织胆红素浓度均呈显著正相关.结论胆红素通过Fas系统的参与,传递凋亡信号,介导胆红素神经毒性,导致神经细胞凋亡.
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溴氰菊酯对PC12细胞Fas、FasL、TNFR1蛋白及凋亡的影响
背景与目的:探讨溴氰菊酯诱导神经细胞凋亡及其神经毒作用机制.材料与方法:用免疫细胞化学法定性检测给予不同剂量水平(10-4mol/L,10-5mol/L,10-6mol/L)的溴氰菊酯24h后,Fas、FasL、TNFR1蛋白在PC12细胞中的表达;流式细胞仪定量检测给予溴氰菊酯24 h和48 h后,Fas、FasL、TNFR1蛋白在PC12细胞中的相对表达量阳性细胞率(rate of positive cells,RPC)和平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)及PC12细胞的凋亡率.结果:①Fas、FasL、TNFR1蛋白在对照组和各剂量组均为阳性表达,但镜下未见各蛋白在各组之间的差异表达.流式细胞仪检测发现:染毒24h后,Fas、FasL蛋白在各组的表达没有差异,而TNFR1蛋白在中剂量和高剂量组的表达与对照组比较有升高;染毒48 h后,Fas、FasL、TNFR1蛋白在高剂量组表达(MFI分别为42.85±8.4、37.91±1.65、8.09±1.83)与各自对照组比较均有升高.②染毒24h后,各剂量组凋亡率没有升高;染毒48 h后,高剂量组凋亡率与对照组凋亡率比较有升高.③染毒48 h组细胞凋亡率与溴氰菊酯浓度、Fas、Fasl蛋白含量有直线相关关系.结论:溴氰菊酯可能通过死亡受体Fas诱导PC12细胞凋亡.
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扩张型心肌病心肌Fas蛋白表达
目的 探讨扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)心肌Fas蛋白的表达情况及其与DCM猝死的关系. 方法 用免疫组织化学法和图像分析技术定量检测本教研室1997-2007年间9例DCM猝死和11例暴力死或其他死者的心肌Fas蛋白表达情况.结果 DCM猝死组心肌Fas蛋白表达明显增多,阳性着色在心肌纵切面细胞膜上及胞浆内呈棕黄色颗粒状或条状分布,横断面细胞膜见环形棕黄色颗粒带；对照组未见明显变化或仅见小面积浅淡着色.定量检测结果显示其表达面积在两组间的差异有统计学意义(P=0.002),表达的平均光密度差异无统计学意义(P=0.675).结论 DCM猝死者心肌Fas蛋白表达明显增多,可能与DCM患者发生的因心律失常和心功能衰竭所致猝死有关.
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病毒性心肌炎和扩张型心肌病心肌Fas蛋白表达
目的 探讨病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)和扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)的发病机制及相互关系. 方法应用改良的免疫组织化学技术观察VMC、DCM和对照组(各20例)心肌Fas蛋白的表达,并对其阳性反应结果进行Ridit检验.结果 与对照组相比,VMC和DCM组Fas蛋白阳性表达明显升高,经Ridit检验,3组阳性结果差异有统计学意义(P<0.005);进一步采用两两比较Ridit检验,对照组和其他两组之间差异有统计学意义(P<0.05),而VMC和DCM组间差异无统计学意义(P<0.05).结论 VMC和DCM心肌组织中Fas蛋白表达明显高于对照组.提示vMC和DCM的发病都有细胞凋亡的参与:凋亡可能是VMC引起心肌损伤及演变为心肌病的一个发病机制.
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Fas蛋白在直肠癌中表达的临床意义
为观察Fas蛋白在直肠癌中表达规律及其与预后的关系,应用免疫组织化学S-P法,对62例有随访结果的直肠癌组织进行Fas蛋白检测.临床Ⅲ、Ⅳ期直肠癌Fas蛋白阳性率(41.0%)显著低于临床Ⅰ、Ⅱ期(69.6%)(P＜0.05);有淋巴结转移组Fas蛋白阳性率(40.5%)显著低于无淋巴结转移组(68.0%)(P＜0.05)Fas蛋白阳性组直肠癌患者术后5年生存率(68.7%)显著高于Fas蛋白阴性组(43.3%)(P＜0.05).结果显示,Fas蛋白表达状况可作为临床判断直肠癌生物学行为、转移潜能及患者预后的一项重要指标.
