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婴幼儿流行性出血热3例报告
流行性出血热(EHF),儿童发病较少,尤其婴幼儿病例报告更为少见,现将我院收治的3例3岁以下幼儿出血热病例报告如下.例1 男,2岁,因发热、腹泻水样便夹有粘液每日10次、伴有腹痛及轻度里急后重3 d.经检查大便粘液(+),白细胞(++)/HP,红细胞(+)/HP,脓细胞(+)/HP.诊为急性菌痢入院.体查:体温38.6℃,轻度脱水貌,心肺无异常,腹部轻压痛.经抗感染治疗2 d后体温正常,但精神差,烦躁嗜睡,消化道症状加重.考虑鼠伤寒沙门菌感染,改用抗生素后,仍无明显效果.住院第6天出现少尿、全身大量出血点及瘀斑.查尿蛋白(+++),尿红细胞满布视野.血小板54×109/L,BUN 31.8 mmol/L,酶标SPA组化法金葡萄蛋白A(HRP-SPA)检测阳性,确诊为EHF,次日死于肾功能衰竭和弥散性血管内凝血(DIC).
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大鼠胃伤害性刺激后胃壁一氧化氮合酶的变化
目的:探索胃在受到外源性酸、碱伤害性刺激后,胃壁内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的数量和染色强度的变化.方法:分别用0.6%乙酸和0.2%NaOH造成大鼠胃伤害性刺激,按不同时程,以还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组化法对胃壁NOS阳性神经元的数量和染色强度的变化进行了观察.结果:胃壁皮区的粘膜下层中都没有观察到NADPH-d阳性神经元,胃壁腺区(特别是泌酸区)粘膜下层中都观察到阳性神经元.两实验组泌酸区此层内的阳性神经元数约是对照组的1.4倍,P<0.05,灌酸组此层内强染色阳性神经元与弱染色阳性神经元的比例由对照组的1:1.5变为1:2.5;灌碱组泌酸区此层内的阳性神经元数强弱比约为1.5:1.结论:胃的外源性酸、碱刺激影响胃粘膜下层中氮能神经元的表达.
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卵巢恶性肿瘤雌、孕激素受体分布的免疫组化探讨
卵巢癌是恶性度高,预后差,由于肿瘤组织类型繁杂,对于卵巢恶性肿瘤雌、孕激素受体的研究尚处于探讨阶段,无一致性结论,研究方法多采用生化法.本文采用亲和组化法,可在光镜下直接观察受体存在的部位,为探讨雌、孕激素受体在肿瘤组织中的分布情况以及与肿瘤组织类型和分化程度的关系,于1991年4月~1996年7月本院及150等医院观察住院卵巢恶性肿瘤30例,积累一些实验资料.
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测定直肠粘膜胆碱酯酶活性诊断先天性巨结肠症的初步探讨
先天性巨结肠症是常见的常染色体隐性遗传病.临床诊断除应用X线和肛门测压等检查手段外,国内外还建立了一些酶学指标及化验指标;如直肠粘膜胆碱酯酶活性的组化法及比色法,无神经节细胞肠段组织中乙酰胆碱含量测定,以及红细胞真性胆碱酯酶活性测定等.
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脊髓中间外侧神经元NOS与FAS和NT3共存
目的:研究表明,脊髓中间外侧神经元含有NOS.但是,这些神经元是否含有Fas和NT3并不清楚.方法:取成年猫脊髓L3节段制作20 μm厚冰冻切片并分两组,两组切片均先以NADPH-d酶组化法染片,NBT兰色反应显色显示脊髓中间外侧NOS阳性神经元,而后各组切片分别再用Fas和NT3(1∶1500, Santa Cruz)兔抗血清以免疫组化ABC法染片,DAB棕色反应呈色,观察NOS与Fas和NT3在脊髓中间外侧神经元是否共存.结果:在脊髓中间外侧神经元观察到双标反应物,Fas主要位于细胞核,胞浆弱阳性反应,NOS的阳性反应物则主要位于细胞核,胞浆弱阳性反应,NOS的阳性反应物则主要位于细胞浆.相对之,NOS和NT3的阳性反应物则均位于细胞浆.神经突起内均见双标染色.结论:脊髓中间外侧神经元内NOS、Fas和NT3共存.由于NOS、Fas和NT3分属酶、凋亡基因和神经营养因子家族成员,提示脊髓中间外侧神经元至少可能含有上述三个家族的某一成员,进而也提示这些成员可能与脊髓中间外侧神经元的某些生理功能有关.
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双重组化法在一氧化氮合酶与糖元显示中的应用
一氧化氮合酶(NOS) 为一含铁的单氧化酶,可催化左旋精氨酸转化为瓜氨酸和NO.而阿霉素(ADR)是一种有效的广谱抗肿瘤药物,由于其心脏毒性作用,使临床应用受到限制.我们在探讨阿霉素对心脏损伤病理机制的实验研究中,用双重组化法同时显示心室肌NOS与糖元获得成功,现报道如下:1.材料和方法:1.1 动物模型新西兰纯种白兔于耳缘静脉注射ADR,每次2mg/ kg,ADR以生理盐水稀释成1mg/ml,每周一次,共八周,做心室肌损伤模型.取心室肌组织做冰冻切片,厚12μm.1.2主要试剂(1)还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d);(2)四唑仑硝基兰(NBT);(3)0.5%过碘酸氧化液;(4)Schiff液:先将200ml双蒸水煮沸,微火,加入1g碱性复红,再煮沸1min.冷却至50℃加入20ml 1N盐酸,待35℃时加入1g偏重亚硫酸钠. 室温中静置5小时,变为无色液体后装入棕色瓶内并封口,放入冰箱避光保存待用.1.3 双重组化法.(1)将冰冻切片置入丙酮固定1min;(2)经pH7.4 PBS液清洗三次,每次5min;(3)入NADPH-d与NBT配制的孵育液,37℃恒温孵育 1h;(4)经pH7.4 PBS液清洗三次,每次3min;(5)入0.5%过碘酸氧化10~20min;(6)经pH7.4 PBS液充分清洗;(7)入Schiff 液10min液10min;(8)流水冲洗10min;(9)无水乙醇脱水;(10) 二甲苯透明,中性树胶封片.1.4单一组化法显示NOS.(步骤参照双重组化法1~4 步)1.5单一组化法显示糖元.(步骤参照双重组化法5~8步).2.实验结果:2.1双重组化法显示心室肌中NOS呈蓝色、糖元呈红色.2.2单一组化法显示心室肌中NOS呈蓝色.2.3单一组化法显示心室肌中糖元呈红色.结论:通过三组切片的比较,发现使用两种方法所显示NOS与糖元的颜色及其深浅无明显变化.3.意义3.1用双重组化法可以同时显示心室肌NOS和糖元.此法与单一显示NOS组化法和单一显示糖元组化法进行比较,结果显示NOS与糖元的颜色均无明显改变.此结果说明两组试剂的染色过程不产生交叉影响.3.2 使用双重组化法能够同时显示NOS与糖元,不仅节省时间、试剂,还可减少工作量.此方法在实验过程中易于操作、便于观察、利于对比,具有实用性.可以在医学研究中使用和推广.
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CD34 组化法在研究瘢痕微血管构筑中的应用
尽管对瘢痕研究颇多,但很少涉及瘢痕的微循环,而研究瘢痕的微血管构筑对瘢痕的临床防治具有重要价值.笔者利用血管内皮细胞可靠的标记CD34内皮细胞抗原来显示瘢痕的微血管,效果满意.
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浅谈男性学检验方法进展
男性学检验使精液分析从简单显微镜形态学检查发展到多学科实验参数分析,使临床能从生精细胞、睾丸、附睾、精囊、前列腺、尿道多部位分析病因与病理进行不育症的诊断与治疗.包括:(1)精子活力从目测法发展为质量分析仪自动法,精子活率从目测法改为组化法.