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睾丸酮丛毛单胞菌的分离和鉴定及3α-羟类固醇脱氢酶在大肠杆菌中的克隆表达
目的:从自然界中分离鉴定产3α-羟类固醇脱氢酶(3α-hydroxysteroid dehydrogenase,3α-HSD)的睾丸酮丛毛单胞菌,并在大肠杆菌(E.coli.)中克隆表达3α-HSD.方法:将池塘泥浆样品接种到以雄酮为唯一碳源的培养基中,对分离到的菌株根据形态学和生理生化特征进行初步鉴定.为进一步鉴定该菌株,根据睾丸酮丛毛单胞菌中的3α-HSD的基因设计引物,PCR扩增细菌基因组DNA,将扩增片段插入到载体pET15b中,构建重组质粒pET15b,并在E.coli. BL21(DE3)pLysS中进行诱导表达,对表达得到的蛋白进行鉴定并测定其酶活力.结果:一系列生化反应和培养特征证实,该菌与睾丸酮丛毛单胞菌的符合率为85%,适生长pH值为7.0,佳生长温度为30 ℃.在E.coli. BL21(DE3)pLysS中经诱导表达得到了相对分子质量约为29×103 具有酶活性的融合蛋白,可催化雄酮(3α-羟类固醇)脱氢.结论:从池塘泥浆中分离到一株产3α-HSD的睾丸酮丛毛单胞菌,并在E.coli.中表达得到了具有酶活性的融合3α-HSD.这为利用金属螯和亲和层析纯化融合3α-HSD,并进一步建立以其为工具酶的血清总胆汁酸酶循环测定方法奠定了基础.
关键词： 睾丸酮丛毛单胞菌 3-α-羟类固醇脱氢酶 聚合酶链反应 胆汁酸 -
血清总胆汁酸(TBA)测定在各种肝病中的临床意义
目的 探讨血清总胆汁酸(TBA) 测定在各种肝病中的诊断意义.方法 采用MINDRAY BS-420全自动生化分析仪对健康组100例、肝病组138例及非肝病组40例进行胆汁酸水平和其它肝功能项目的 测定.结果 肝病组TBA显著高于健康组和非肝病组(P<0.01).急性肝炎平均值(153.9±114.8) μmol/L,高值达586.5μmol/L,与其他各组相比差异有显著性(P<0.01),肝病组中以急性肝炎、肝癌、肝硬化升高为明显.急性肝炎时TBA与ALT、AST阳性率相同,均为100%;而在肝硬化、肝癌TBA的阳性率则明显高于ALT、AST,也高于ALP、r-GT; 在慢性活动性肝炎中,TBA阳性率也不同程度地高于ALT、AST、ALP、r-GT,而在慢迁肝中TBA与ALT、AST、ALP、r-GT一样,阳性率均较低.结论 胆汁酸的检测是肝脏损伤的一项灵敏指标,TBA特异性高,敏感性在不同肝病患者中表现不一致,它在监测各种肝病中的意义重大.
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检测新生儿高胆红素血症患儿血清TBIL及TBA的临床意义
目的 探讨检测新生儿高胆红素血症患儿血清总胆汁酸(TBA)水平在疾病诊断治疗中的意义.方法 采用全自动生化分析仪定量检测50例新生儿高胆红素血症患儿治疗前后血清总胆红素(TBIL)和血清总胆汁酸(TBA)水平变化,与40例健康新儿生对照.结果 治疗组血清治疗前TBA明显高于对照组,差异有统计学意义；治疗后血清TBA、TBIL均较治疗前明显降低,差异有统计学意义.结论 TBA、TBIL测定在新生儿高胆红素血症诊断中具有良好的特异性和灵敏性,可为临床诊断和治疗提供理论依据.
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妊娠期肝内胆汁淤积症胆汁酸、肝酶指标对妊娠结局的影响
目的 探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)不同胆汁酸和肝酶水平对围生儿妊娠结局的影响.方法依据胆汁酸和肝酶水平将本院的163例ICP患者分为轻度组、中度组和高度组,分析3组的分娩方式、常规指标(新生儿体重、胎龄、Apgar评分及并发症)和妊娠结局,并与正常孕妇作对照.结果 ICP中度组和重度组的剖宫产率均高于正常孕妇组和轻度组(P < 0.01),常规指标差于其余两组,且新生儿死亡、小于胎龄儿、早产和低体重的发生率均高于其余两组(P < 0.05);除重度组的常规指标差于中度组外,其余均差异无统计学意义;除1 min Apgar评分外,轻度组的常规指标、分娩方式和妊娠结局均与正常孕妇组差异无统计学意义(P ＜ 0.05).结论中重度妊娠期肝内胆汁淤积症行剖宫产的机率较大,新生儿常规指标及妊娠结局较差,应加强预防及治疗.
关键词： 妊娠期肝内胆汁淤积症 胆汁酸 肝酶 妊娠结局 -
妊娠期肝内胆汁淤积症78例临床分析
目的:探讨妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)对妊娠结局的影响.方法:总结78例ICP患者的胆酶值,按数值分为两组:A组10～20μmol/B,B组>20 μmol/,比较两组妊娠结局.结果:胆汁酸升高A组50例,B组28例,其中B组患者发生胎膜早破、早产、羊水粪染,胎儿窘迫的机会较A组差异有统计学意义(P<0.05).结论:ICP患者中实验室检查胆汁酸是较重要的指标,故ICP患者中,胆汁酸升高明显者,应严密监护,及时终止妊娠.
关键词： 妊娠期肝内胆汁淤积症 胆汁酸 妊娠结局 胆酶值 -
血清前白蛋白和总胆汁酸的检测在慢性肝病中的诊断意义
目的:研究慢性肝病患者血清前白蛋白、总胆汁酸检测的临床意义.方法:采用免疫透射比浊法和循环酶终点法检测90例慢性肝病与42例非肝病患者血清前白蛋白、总胆汁酸含量.结果:慢性乙型肝炎轻、中、重组、肝硬化代偿期组、失代偿期组较对照血清PAB、TBA水平差异均有统计学意义,P<0.05.慢性乙型肝炎轻、中度组与重度、肝硬化代偿期组、失代偿期组比较血清PAB差异均有统计学意义,P<0.01.慢性乙型肝炎轻、中度组与重度、肝硬化代偿期组、失代偿期组比较血清TBA差异均有统计学意义,P<0.05,慢性乙型肝炎重度与轻、中度、肝硬化代偿期组比较血清TBA差异均有统计学意义,P<0.01.轻度组与中度组之间血清PAB及TBA水平无显著性差异.结论:联合检测血清PAB、TBA有助于慢性肝病患者肝功能评估与预后判断.
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妊娠期肝内胆汁淤积症120例分析
目的 了解妊娠期肝内胆汁淤积症的临床表现和妊娠结局,探讨妊娠期肝内胆汁淤积症对母儿的危害.方法 回顾性分析2008年1月-2009年12月期间住院治疗的120例妊娠期肝内胆汁淤积症临床表现、治疗及结局.结果 妊娠肝内胆汁淤积症相关危害因素中,首要危害为早产,发生率高达18.3%,其次为胎儿窘迫为10.0%,低体重儿为9.2%,新生儿窒息为6.7%、胎儿生长受限为5.8%,羊水过少为4.2%,产后出血为2.5%等.肝功转氨酶均有不同程度的升高.分娩方式中以剖宫产为主,其中早产剖宫产率高于足月产,以单纯胆淤为首要手术指征,占80.9%.结论 妊娠肝内胆汁淤积症可引起早产、胎儿宫内窘迫及新生儿窒息,增高了剖宫产率及产后出血量,对母儿危害较大,但经过积极治疗,预后良好.
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婴儿巨细胞病毒性肝炎血清总胆汁酸测定的临床意义
目的阐明空腹血清总胆汁酸(TBA)测定在婴儿巨细胞病毒性肝炎诊治中的临床意义.方法采用全自动酶法分析技术对80例婴儿巨细胞病毒性肝炎和20例健康婴儿进行空腹血清胆汁酸测定,同时对患儿进行其他肝功能相关项目的测定,数据用SPSS 10.0统计软件进行分析.结果 (1)巨细胞病毒性肝炎患儿血清TBA浓度与正常对照组差异有显著性意义(P<0.01);(2)巨细胞病毒性肝炎轻、中、重、特重,TBA差异有显著性意义(P<0.01),TBA是反映肝功能损害的敏感指标;(3)TBA是反映疗效的敏感指标(P<0.01).结论 TBA对婴儿巨细胞病毒性肝炎病情的判断及疗效评定,有重要的参考价值.
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妊娠肝内胆汁淤积症胆汁酸水平与胎儿宫内缺氧的关系
目的探讨妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)胆汁酸(TBA)水平与胎儿宫内缺氧的关系.方法分别采用胆汁酸特异酶法比色测定30例正常妊娠及60例ICP胎儿脐静脉血及孕妇静脉血的TBA 水平.结果 (1)ICP组脐血TBA水平及孕妇静脉血TBA水平明显高于正常妊娠组.(17.60± 8.40,60.10±26.90;9.27±4.38,9.90±4.38) μmol/L,P<0.05.(2)ICP组中 Apg ar低评分者的脐血TBA水平明显高于Apgar评分正常者(32.18±11.97,19.79±6.72,14.79±5 .62) μmol/L,P<0.05;(3)ICP组,羊水胎粪污染者(Ⅱ度、Ⅲ度)的脐血TBA 水平及母血TBA水平,高于羊水清亮者(22.09±9.63,70.00±25.07;13.87±4.55,50.31±22.9 7) μmol/L,P<0.05.结论 ICP胎儿宫内缺氧可能与母体循环、胎儿循环及羊水高浓度胆汁酸有关,可能是胆汁酸刺激胎盘绒毛血管及脐静脉收缩所致.
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胆汁酸及受体TGR5/FXR参与肝细胞癌和胆管细胞癌的发生与发展
目的 探讨胆汁酸与胆汁酸受体TGR5/FXR在肝细胞癌和胆管癌发生、发展中的作用和可能的机制.方法 通过免疫组化检测胆汁酸受体FXR与TGR5在癌旁组织、肝细胞癌组织和胆管细胞癌组织中的表达水平;采用MTS实验检测不同胆汁酸(石胆酸、鹅脱氧胆酸、牛磺胆酸钠、熊去氧胆酸及胆酸)对人胆管癌细胞系HCCC-9810以及人肝癌细胞系HepG2的增殖凋亡影响;采用流式细胞检测石胆酸和鹅脱氧胆酸对人胆管癌细胞系HCCC-9810和人肝癌细胞系HepG2凋亡的影响.结果 TGR5在肝细胞肝癌和胆管细胞癌组织中呈高表达,与之相反,FXR在肝细胞肝癌和胆管细胞癌中呈现低表达水平;胆汁酸能够促进癌细胞的凋亡,而不同种类的胆汁酸其抑制细胞增殖的效力不同.结论 胆汁酸受体FXR和TGR5参与肝细胞癌和胆管细胞癌的发生、发展;胆汁酸能够抑制HepG2和HCCC-9810增殖与促进HepG2和HCCC-9810凋亡,为研究胆汁酸抗肿瘤作用机制奠定了基础.
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血清总胆汁酸测定在重型肝炎肝功能衰竭的临床意义
目的观察重型肝炎肝功能衰竭患者血清总胆汁酸(TBA)水平变化,探讨其在病情发展过程中的作用.方法循环酶速率法,检测重型肝炎肝功能衰竭患者TBA水平.结果①重型肝炎肝功能衰竭患者TBA水平高于对照组,经统计学检验差异有显著性意义(P＜0.01).②重型肝炎患者进展期血清TBA异常率与其他肝功能指标异常率比较,TBA与ALT(丙氨酸氨基转移酶)、TBIL(血清总胆红素)异常率均为100%.③恢复期血清TBA及其他肝功能指标值下降幅度比较,血清TBA与ALT下降幅度均大于90%,而AST(天冬氨酸氨基转移酶)、ALP(碱性磷酸酶)、GGT(谷氨酰氨转移酶)及ALB(血清白蛋白)指标在45%～54%之间.结论重型肝炎肝功能衰竭患者存在胆汁酸代谢异常;血清TBA也是肝功能严重受损敏感的指标;血清TBA与ALT一样是反应肝细胞功能恢复及病情好转的敏感指标.血清TBA测定在重型肝炎肝功能衰竭的病情进展的判断、疗效观察方面有重要意义.
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关于Caroli综合征引起新生儿胆汁淤积症的研究进展
新生儿胆汁淤积症是由于肝细胞不能正常地合成胆汁酸,或由于胆管系统功能异常,不能有效将胆汁排泄而导致的胆汁物质例如胆红素、胆酸及胆固醇在血液及肝外组织蓄积的临床过程,临床表现为高直接胆红素血症、黄疸持续时间延长、白陶土样大便和尿色加深等.黄疸是新生儿常见的症状,当生后黄疸持续时间延长,超过2～4周时,应考虑胆汁淤积症的可能[1].
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加斯清与思密达合用对胆汁反流性胃炎疗效及胃内胆汁的影响
胆汁反流性胃炎(BRG)是幽门括约肌功能失调或胃肠吻合术后使含胆汁酸的十二指肠液反流入胃引起的胃黏膜充血、水肿、糜烂等炎性病变[1].BRG是常见的消化道疾病,占慢性胃炎的16.03%,胆汁反流是导致消化性溃疡、慢性胃炎尤其是萎缩性胃炎的主要原因之一,也是引起胃黏膜癌前变化的原因之一,有效治疗本病对防止胃黏膜萎缩并阻断其癌变有积极的临床意义.近年来随着胃镜工作的普遍开展,BRG的诊断逐渐增多.我院自2001～2004年以来以加斯清合用思密达治疗胆汁反流性胃炎60例,并用24小时胃内胆汁连续监测法研究其对胃内胆汁的影响,现报告如下.
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胆汁酸与肠道菌群在体内代谢的作用
目的 人类的肠道是比较复杂的生态系统.肠道菌群通过影响肠道内分泌细胞(如L细胞、EC细胞、PP细胞)等,激活特异性的G蛋白偶联受体表达(如GPR41、GPR43、GPR119和TGR5),引起GLP-1、GLP-2和PYY等多种肽类和激素的分泌,从而维持糖脂代谢、胆汁酸的代谢和免疫炎症系统的平衡.改变肠道微生物的生态会影响宿主内环境的稳定,引起代谢性疾病.胆汁酸是胆固醇代谢的产物.胆汁酸作为信号分子与TGR5结合,激活法尼醇衍生物X受体的表达,并通过肠肝循环来发挥它的生物调节作用.胆汁酸与肠道菌群对体内的代谢有着重要的作用.
关键词： 肠道菌群 胆汁酸 法尼醇衍生物X受体R 成纤维细胞生长因子19 -
胆汁淤积与胆汁酸转运蛋白关系的研究进展
胆汁不仅能够帮助消化和吸收脂肪,还能将某些代谢产物从肝脏排出体外,对正常的代谢活动起了至关重要的作用.机体内的胆汁在正常生理状况下处于肠肝循环的动态平衡之中,当胆汁的生成或是流动受到影响时就会引起胆汁淤积.胆汁酸作为胆汁主要成分之一,它的合成、转运、分泌以及重吸收的任何一个环节出现差错,胆汁的肝肠循环都会受到影响.
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肠道菌群与肥胖发病机制的关系
肥胖作为威胁大众健康的全球性问题,不仅会导致包括2型糖尿病、冠心病、高血压、骨关节炎等在内的诸多疾病,也给社会造成了严重的经济负担.肠道菌群作为携带人体"第二基因"的"隐形器官",参与了人体的营养和能量的代谢过程,不仅可通过影响机体的能量代谢吸收、肠壁通透性介导肥胖的发生、发展,也可以通过参与机体碳水化合物、胆汁酸、胆碱等的代谢过程,产生小分子化学物质,与人体的组织器官相互作用,形成肠道菌群-肠-靶器官轴,介导肥胖症的发生发展.
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成纤维细胞生长因子15与肝再生
肝切除术后,由细胞因子、生长因子及代谢性因子诱发的众多互联信号转导通路反应参与了肝再生的发生、发展及终止.近来研究发现,胆汁酸作为信号分子,通过激活相关受体在肝再生过程中发挥重要作用,其是目前肝再生研究的热点.胆汁酸通过激活肠道法尼酯X受体诱导产生的成纤维细胞生长因子15参与调节胆汁酸代谢,促进了肝再生.
关键词： 成纤维细胞生长因子15 法尼酯X受体 胆固醇7α-羟化酶 胆汁酸 肝再生 -
妊娠肝内胆汁淤积的发病机制研究进展
妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)是妊娠期特有的症状,患者临床表现为血清胆酸升高以及皮肤瘙痒,同时伴有肝酶升高及黄疸症状.大部分患者症状发生在妊娠晚期,也有少部分患者发生在妊娠中期,分娩结束后症状自行缓解消失.ICP可导致胎儿出现早产,增加胎儿宫内窘迫症状发生风险及胎儿病死率.目前该疾病的发病机制尚不明确,可能与环境、雌激素、孕激素以及遗传因素有关.该文将对影响ICP发生的相关因素以及该病的发病机制予以综述.
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新生儿黄疸期血清总胆汁酸测定的临床价值
目的 通过检测血清总胆汁酸(TBA),确定总胆汁酸在新生儿黄疸诊断和治疗中的应用意义.方法 采用循环酶速率法,对40例晚发母乳性黄疸(LBMI)患儿、40例生理性黄疸患儿、42例正常新生儿血清TBA及其肝功能相关项目进行测定.同时测定生理性黄疸组黄疸消退前后TBA及总胆红素(TBIL);晚发母乳性黄疸(LBMI)组不停母乳光疗前后TBA及TBIL的测定.并进行比较分析.结果 ①正常对照组血清TBA为(9.2±5.5)μmol/L,生理性黄疸组血清TBA为(9.8±4.8)μmol/L,LBMI组血清TBA为(31.4±12.8)μmol/L.LBMI组与对照组及生理性黄疸组比较差异具有显著性(P＜0.01).②生理性黄疸组黄疸消退后TBA仍高,与TBIL产生分离现象.③LBMI组不停母乳光疗TBA及TBIL均显著降低.结论 血清TBA测定在新生儿黄疸的诊断中具有较好的特异性和灵敏性,可为临床提供诊断和治疗的依据.LBMI组不停母乳光疗治疗结果 显示光疗有促进胆汁分泌作用,不停母乳光疗可用于作为治疗LBMI方案.
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胆汁酸对糖脂及能量代谢调节作用的研究进展
胆汁酸由胆固醇在肝内合成，是胆汁的主要有机成分。以往对胆汁酸功能的认识主要是其在促进脂类营养物质的消化和吸收方面的作用。近年来研究发现，胆汁酸还是一种有效的内分泌代谢调节因子，能够激活多种核受体和膜受体介导的信号通路，在调节其自身代谢、糖脂代谢的稳态以及能量代谢方面发挥着重要作用。深入研究胆汁酸及其代谢调节通路可为肥胖、糖尿病等代谢性疾病的治疗提供新的方向。
关键词： 2型糖尿病 肥胖 胆汁酸 法尼酯衍生物X受体 胆汁酸G-蛋白偶联受体
