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电穿孔法和化学法在多药耐药胃癌细胞转染中的效果比较
目的:比较电穿孔法和化学法在多药耐药(MDR)胃癌细胞中转染效果.方法:将表达抑癌基因WTX的质粒分别用电穿孔法和两种化学法(Lipofectamine2000、Attractene)转染MDR胃癌SGC7901/VCR细胞,观察转染后细胞中增强型绿色荧光蛋白(eGFP)和目的基因WTX mRNA的表达情况.结果:eGFP分析结果显示,与无耐药的亲代SGC7901细胞比较,两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率明显降低(均P＜0.05),而电穿孔转染法未见明显降低(P＞0.05),且明显高于两种化学转染法对SGC7901/VCR细胞的转染效率(均P＜0.05).RT-PCR结果显示,电穿孔转染的SGC7901/VCR细胞中WTX mRNA表达量明显高于两种化学法转染的SGC7901/VCR细胞中的WTXmRNA表达量(均P＜0.05).结论:对于MDR胃癌细胞,电穿孔转染法不易受其细胞膜成分的影响,可以保持较好的转染效率.
关键词： 胃肿瘤 转染 电穿孔 多药耐药相关蛋白质类 -
吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2表达其化疗耐药的关系研究
目的:探讨吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2的表达及与其化疗耐药的关系.方法:吉西他滨不同浓度、不同时间作用胰腺癌SW1990细胞后,用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率,并计算吉西他滨不同作用时间的半数抑制浓度(IC50);根据IC50值选择合适浓度的吉西他滨,作用SW1990细胞24、48、72 h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并用Western blot和RT-PCR法检测ABCG2蛋白与mRNA的表达.结果:吉西他滨作用后,SW1990细胞增殖明显抑制,并呈浓度与时间依赖性,但IC50值呈时间依赖性增加(均P＜0.05);3.9 mg/mL吉西他滨作用24、48、72 h后,SW1990细胞总凋亡率逐渐增加,但晚期凋亡率呈降低趋势,ABCG2蛋白与mRNA的表达明显升高,并呈时间依赖性(均P＜0.05).结论:吉西他滨能抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖,但作用呈时间依赖性减弱,这可能与其诱导ABCG2上调表达有关.
关键词： 胰腺肿瘤 吉西他滨 多药耐药相关蛋白质类 抗药性 肿瘤 -
乳腺癌干细胞含量及其耐药相关蛋白表达的临床病理意义
目的:探讨乳腺癌中癌干细胞含量与临床病理参数的关系,以及P-糖蛋白(P-gp),谷胱甘肽S转移酶π(GST-π),肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶Ⅱ( TOPO-Ⅱ)在乳腺癌干细胞和分化细胞中的表达及其意义.方法:选取乳腺浸润性导管癌新鲜标本30例制备成单细胞悬液,通过免疫磁珠两步法从中分离出癌干细胞(CD44+/CD24-细胞)和分化细胞(CD24+和CD44-CD24-细胞)并计数,分析癌干细胞含量与乳腺癌患者临床病理参数的关系；应用免疫细胞化学方法检测以上两种细胞P-gp,GST-π,LRP和TOPO-Ⅱ的表达情况.结果:乳腺癌干细胞含量与患者的年龄、肿块大小、组织学分级及淋巴结转移均无明显关系(均P＞0.05).乳腺癌干细胞P-gp的阳性表达率明显高于分化细胞(73.3％ vs.40.0％),而TOPO-Ⅱ的阳性表达率明显低于分化细胞( 40.0％ vs.76.7％)(P＜0.05或P＜0.01)；GST-π和LRP的表达在两种细胞间无统计学差异(均P＞0.05).结论:乳腺癌干细胞含量与患者的临床病理参数无关,但乳腺癌干细胞中P-gp高表达与TOPO-Ⅱ低表达可能是导致乳腺癌化疗失败和复发的重要原因.
关键词： 乳腺肿瘤 肿瘤干细胞 多药耐药相关蛋白质类 -
多药耐药相关蛋白及谷胱甘肽-S-转移酶π与人肺癌多药耐药细胞系SPC-A1/TAX耐药性关系研究
目的 研究多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)与人肺腺癌多药耐药细胞系SPC-A1/TAX多药耐药性之间的关系.方法 采用S-P免疫组化法检测细胞MRP、GST-π的表达;采用MTS法分别检测并比较SPC-A1、SPC-A1/TAX细胞对6种不同化疗药物的敏感性.结果 耐药组MRP、GST-π表达均为阳性,亲本组MRP、GST-π表达均为阴性,耐药组与亲本组间差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);SPC-A1/TAX较SPC-A1除对原诱导药物TAX具有耐受性外,对其他5种抗肿瘤药物也表现出不同程度的耐药性.结论 MRP、GST-π在SPC-A1/TAX细胞系中表达与该人肺腺癌多药耐药细胞系的MDR具有相关性,是其MDR产生的可能机制.
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重复加热对肝癌HepG2细胞多药耐药相关蛋白表达的影响
目的 探讨多次加热后对残存的肝癌HepG2细胞的多药耐药相关蛋白(MRP) 基因/蛋白表达的影响.方法 HepG2细胞43℃加热,每次80 min,2次/d,10个循环后,MTT法分析其对阿霉素的敏感性,免疫组化法检测细胞MRP蛋白的表达,RT-PCR法检测细胞MRP mRNA的表达.结果 热处理后的HepG2细胞对阿霉素产生化疗耐受性升高,MRP 基因/蛋白的表达增强.结论 热处理后HepG2细胞对化疗药物的耐受性可能与其MRP 基因/蛋白的表达增强有关.
关键词： 肝肿瘤/病理学 高温 诱发 多药耐药相关蛋白质类 -
非小细胞肺癌COX-2的表达与多药耐药性关系的研究
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并探讨COX-2对多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响.方法:应用免疫组化技术检测62例非小细胞肺癌及10例正常肺组织中COX-2及MRP的表达.结果:正常肺组织未见COX-2及MRP的表达.NSCLC组织中COX-2的阳性表达率为61.3%(37/62),其阳性表达与NSCLC的组织学类型、肺癌组织不同临床分期、有无淋巴结转移、组织分化程度有关,与肺癌患者的性别无关.COX-2阳性组织中MRP的表达阳性率为89.2%(33/37),而COX-2阴性组织中MRP同时阴性率为68.0%(17/25),相关关系分析显示肺癌COX-2表达与多药耐药相关蛋白MRP表达呈显著正相关.结论:COX-2的表达参与NSCLC的发生及恶化进展,并可能调控MRP的表达.
关键词： 癌 非小细胞肺 环氧合酶2 多药耐药相关蛋白质类 -
补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及MRP表达的影响
目的:探讨补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌细胞耐药逆转作用及机制.方法:采用MTT及流式细胞术,分别观察补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌A549/DDP耐药细胞的细胞毒作用和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响.结果:补肾化瘀解毒方药物血清对肺癌耐药细胞有一定的杀伤作用,能增强顺铂(DDP)对肺癌敏感细胞和耐药细胞的杀伤作用,显著降低MRP的表达(P＜0.01),但对维拉帕米(VRP)的协同逆转作用不明显.结论:补肾化瘀解毒方药物血清具有增效和耐药逆转作用,其机制可能与其抑制肺癌耐药细胞MRP的表达有关.
关键词： 补肾化瘀解毒方 肺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 -
K562/AS2细胞株对三氧化二砷耐药机制的初步研究
目的:研究K562/AS2细胞株对三氧化二砷(ATO)耐药的机制.方法:采用MTT法检测细胞毒性.细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、细胞内柔红霉素(DNR)浓度采用流式细胞术检测.DNA聚合酶、拓扑异构酶Ⅱ(Topo Ⅱ)、多药耐药基因1(mdrl)、多药耐药相关蛋白1(MRPI)以及肺耐药相关蛋白基因(lrp)表达水平的检测采用RT-PCR法.结果:K562和K562/As2细胞表面P-gp任意荧光强度、K562/AS2细胞内DNR浓度均无显著差异(P>0.05).K562/AS2细胞株MRPl和TopoⅡ表达明显高于K562细胞(P<0.05),DNA多聚酶,mdrl和lrp表达与敏感细胞株K562细胞相同(P>0.05).结论:ATO耐药细胞K562/AS2高表达MRPI,并产生低倍数的多药耐药.K562/AS2细胞TopoⅡ基因表达增高,其意义有待进一步阐明.
关键词： 多药耐药相关蛋白质类 基因 MDR 砷 白血病 -
多药耐药基因在大肠癌组织中的表达及其体视学测定研究
目的:探讨两种多药耐药基因在大肠癌组织中的表达及对其肿瘤细胞进行体视学分析.方法:采用微波En Vision免疫组化法联合检测63例大肠癌患者癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达水平.运用图像分析系统在显微镜下测量肿瘤细胞的体视学参数,依据有关体视学公式计算出参数核的体密度(Vvn)、核的表面积密度(Svn)、核的平均体积(V)、核的平均表面积(S)、核的平均自由程(λ)、核的数密度(Nv)、核的平均曲度密度(Kv),比较这些参数在不同分化肿瘤中的差异.结果:P-gp和MRP在大肠癌组织中的阳性表达率分别为54%和30%.参数Vvn、Svn、V、S依高、中、低分化的顺序增加,Kv,Nv、λ依高、中、低分化的顺序减小,Vvn、Svn参数的比较差异有显著性(P＜0.05).结论:大肠癌组织表达多种耐药因子,各耐药因子间共表达具有明显相关性.所有的多药耐药因子表达均与大肠癌分化程度有密切关系,肿瘤细胞Vvn、Svn参数是肿瘤细胞分化的重要指标,且为临床形态学诊断提供了依据.
关键词： 肠肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 免疫组织化学 体视学 -
急性髓性白血病的多药耐药基因-1 C3435T基因多态性与P-gp表达的相关性研究
目的:研究急性髓性白血病(acute myeloid leukaemia,AML)患者的多药耐药基因(muhidmg resistance,MDR)-1 C3435T基因多态性和P-gp(permeability-glycoprotein)蛋白表达的相关性.方法:采用流式细胞仪测定P-gp表达水平,限制性内切酶多型性-聚合酶链反应测定MDR-1 C3435T多态性,并统计其相关性.结果:中国AML患者中MDR-1 3435基因座上的多态性有自己的分布特点,MDR-1 3435TT和低P-gP表达显著相关.结论:黄种人AML患者中MDR-1 3435基因座上的多态性有与白种人不同的分布特点,可能为不同种族的AML患者对相同的化疗药物有效率却不同的原因之一;MDR-1 3435TY有望预测AML患者化疗敏感程度较其他携带者高,可能可以作为良性预后因素之一.
关键词： 多药耐药相关蛋白质类 mdr-1 多态性 P-gp AML -
肾母细胞瘤的血管生成调节因子和多药耐药研究进展
肾母细胞瘤(Wilms tumor,WT)是小儿常见的恶性实体肿瘤,随着放疗、化疗和手术治疗水平的进步极大提高了WT的生存率,尽管如此,仍有部分患儿预后不佳,肿瘤复发、转移和化疗失败是主要原因.肿瘤的复发和转移,对化疗药物的不敏感与肿瘤的血管生成调节和多药耐药有关,该文总结了目前WT所研究的血管生成调节因子和多药耐药因子及其作用机制,为提高该症的治疗效果提供基础研究参考.
关键词： Wilms瘤 血管生成调节剂 多药耐药相关蛋白质类 预后 -
三阴性和非三阴性乳腺癌中耐药蛋白的差异表达及临床意义
目的：比较分析多种耐药基因相关蛋白在三阴性和非三阴性乳腺癌中的差异表达及临床意义。方法回顾性分析2008~2013年泸州医学院附属医院乳腺癌患者经手术切除乳腺标本93例，其中三阴性乳腺癌（三阴性乳腺癌组）33例，非三阴性乳腺癌（非三阴性乳腺癌组）60例，比较两组患者Pgp、TS、GST-π和TopoⅡ4种耐药基因相关蛋白及Ki-67的表达水平（增殖指数）。结果三阴性乳腺癌组GST-π的表达率高于非三阴性乳腺癌组，三阴性乳腺癌组TopoⅡ的表达率低于非三阴性乳腺癌组，差异均有统计学意义（P<0.05），而两组Pgp和TS的表达率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。三阴性乳腺癌组Ki-67的表达水平高于非三阴性乳腺癌组，差异有统计学意义（P<0.05）。三阴性乳腺癌组耐药基因共表达阳性率较非三阴性乳腺癌高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论三阴性乳腺癌对化疗药物更具耐药性，且可能与更高的增殖指数有一定相关性。
关键词： 乳腺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 三阴性乳腺癌 -
多药耐药相关蛋白、P53蛋白在乳腺癌中的表达
目的:探讨人乳腺癌组织中多药耐药相关蛋白(MRP)与P53蛋白的表达及关系.方法:采用免疫组化方法检测43例手术切除的乳腺癌标本中MRP与P53蛋白的表达,17例乳腺纤维腺瘤标本作为对照.结果:乳腺癌组织中MRP、P53蛋白的阳性率显著高于乳腺纤维腺瘤组(P＜0.05);MRP的表达水平与年龄、月经状况、肿瘤大小、有无淋巴结转移、病理类型及TNM分期无关(P＞0.05);P53蛋白的表达在有淋巴结转移时显著高于无淋巴结转移时,与年龄、月经状况、肿瘤大小、病理类型及TNM分期无关(P＞0.05);MRP的阳性表达率与P53蛋白表达高低呈正相关(r=0.396).结论:MRP表达程度不受乳腺癌病程发展的影响,P53蛋白与乳腺癌的发生、发展有关,对评估患者预后可能具有重要意义,P53蛋白对乳腺癌中MRP的表达可能起调控作用.
关键词： 癌 乳腺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 蛋白质p53 -
结肠癌中多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白的表达
目的: 探讨结肠癌中多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)的表达及意义.方法: 采用免疫组化法检测51例结肠癌和32例癌旁相对正常结肠中MRP和LRP的表达情况.结果: 51例结肠癌中MRP的阳性率为41.18%(21/51),32例癌旁相对正常结肠中MRP的阳性率为18.75%(6/32),两组比较差异有显著性 (P<0.05).LRP的表达与结肠腺癌的分化程度相关,高分化腺癌的阳性率为90.00%(9/10),中分化腺癌的阳性率为79.66%(23/29),高于低分化腺癌20.00%(1/5)的阳性率, 差异有显著性(P<0.05).结肠癌中MRP与LRP的表达存在相关性(P<0.05).结论: 结肠癌中MRP和LRP均为高表达,两者均可能是结肠癌原发性多药耐药的重要机制,且两者可能有协同作用.临床上检测这2种蛋白的表达,有助于对化疗药物的选择.
关键词： 结肠肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 免疫组织化学 肺耐药蛋白 -
乳腺癌中LRP、GST-π的表达及临床意义
目的:探讨乳腺癌中LRP、GST-π的表达及临床意义,以期为选择化疗方案提供参考.方法:应用免疫组化SABC法,对80例乳腺癌的主要耐药指标LRP、GST-π进行检测.结果:乳腺癌中LRP表达率为80%(64/80)临床Ⅱ、Ⅲ期表达率显著高于Ⅰ期,GST-π表达率为65%(52/80),临床Ⅲ期表达率显著高于Ⅰ、Ⅱ期.LRP与GST-π间有明显相关性,说明它们对肿瘤耐药具有一定的协同性.结论:乳腺癌联合检测LRP、GST-π对化疗药物的选择具有指导作用,对预后的判断有参考价值.
关键词： 乳腺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 谷胱甘肽转移酶 @肺耐药蛋白 -
黄芩苷对白血病细胞耐药株逆转耐药效果及机制研究
目的:观察黄芩苷对白血病耐药株细胞的耐药逆转作用,并初步探讨其可能的机制.方法:MTT法检测阿霉素及黄芩苷对白血病亲本细胞及耐药株细胞的抑制率,通过计算阿霉素对耐药株细胞及亲本细胞的半数抑制浓度(IC50)评价耐药倍数,通过阿霉素与黄芩苷联用的IC50评价黄芩苷的逆转作用,流式细胞计数法检测黄芩苷作用后对耐药细胞内阿霉素药物蓄积的影响,RT-PCR检测黄芩苷对耐药细胞中多药耐药相关基因MDR1、MRP1以及LRP1表达的影响.结果:耐药细胞株的耐药倍数为17.384倍,黄芩苷10μg/ml和20μg/ml对白血病耐药株的逆转倍数分别为4.230和7.812,相对逆转率分别为0.81和0.93,黄芩苷作用后耐药株细胞内阿霉素蓄积明显增加,MDR1基因表达显著下降.结论:黄芩苷对白血病耐药细胞株具有显著的逆转作用,其机制可能与下调了细胞内的MDR1基因表达进而抑制P糖蛋白对阿霉素的泵出有关.
关键词： 黄芩苷 白血病 多药耐药相关蛋白质类 基因表达 -
抑制 P-糖蛋白表达逆转视网膜母细胞瘤多药耐药研究?
目的：探讨应用 RNA 干扰(RNAi)技术逆转视网膜母细胞瘤多药耐药的可行性。方法：将设计合成的针对多药耐药基因 MDR1的特异性小分子干扰 RNA(siRNA),用脂质体转染具有 MDR1基因高表达的视网膜母细胞瘤耐药细胞株 SO-Rb50/VCR。用实时定量 RT-PCR 技术和 Westernblot 分别测定转染前后细胞 MDR1 mRNA 及 P-糖蛋白(P-gp)表达的变化；用 CCK-8法和 TUNEL 法检测转染前细胞株(VCR 组),转染后细胞(VCR+siRNA 组)对不同浓度长春新碱、依托泊苷和卡铂药物敏感性。结果：VCR+siRNA 组较 VCR 组比较,MDR1基因在 mRNA 水平和蛋白水平表达显著下降,差异具有统计学意义。随着长春新碱、依托泊苷浓度的升高 VCR+siR-NA 组较 VCR 组比较,细胞存活率显著降低,差异具有统计学意义。不同浓度的卡铂作用于 VCR组、CT 组和 VCR+siRNA 组细胞存活率、细胞凋亡率各组见未见显著性差异。随着长春新碱、依托泊苷浓度的升高,VCR+siRNA 组较 VCR 组比较,细胞凋亡率显著性升高,差异具有统计学意义。结论：在 SO-Rb50/VCR 细胞中,针对 MDR1合成的 siRNA 能够有效地抑制 MDR1 mRNA 和P-gp 的表达,并能恢复肿瘤细胞对长春新碱和依托泊苷的敏感性。应用 RNAi 技术,能够逆转 P-gp 引起的视网膜母细胞瘤多药耐药性。
关键词： RNA 干扰 视网膜母细胞瘤 多药耐药相关蛋白质类 P-糖蛋白 药物耐受性 -
烧伤患者鲍曼不动杆菌外排泵adeAB表达变化及其与细菌耐药的关系
目的 检测从烧伤患者分离的鲍曼不动杆菌外排泵基因簇adeAB的表达,分析其上游调节基因adeR和adeS的表达变化,探讨这些基因改变对细菌耐药的影响. 方法 选取2012年6月-2013年3月烧伤患者来源的鲍曼不动杆菌耐药菌株9株、敏感菌株9株,经16SrDNA测序进行菌种鉴定后,以其标准菌株ATCC1960为参照,采用实时定量PT-PCR技术分别检测外排泵基因adeA、adeB及上游调节基因adeR、adeS的mRNA相对表达量. 结果 (1)耐药菌株组adeA、adeB的表达量分别为3.71±0.95和76.16±8.75,均高于敏感菌株组的0.92±0.94和0.72 ±0.78(F值分别为38.71,663.65,P均＜0.05)；(2)耐药菌株组adeS、adeR的表达量分别为18.02 ±6.71和3.02 ±2.69,均高于敏感菌株组的1.64±1.51和0.76±0.61(F值分别为51.04,5.57,P均＜0.05). 结论 上游调节基因adeS、adeR表达变化导致外排泵基因簇adeAB表达增加,是烧伤患者鲍曼不动杆菌耐药的重要原因之一.而调节基因的这种变化可能与细菌通过adeS感应医院内环境条件,活化或钝化adeR,从而调控外排泵的表达有关.
关键词： 烧伤 多药耐药相关蛋白质类 基因 调节 鲍曼不动杆菌 -
复发及难治急性髓细胞白血病病人多药耐药基因检测及意义
目的 研究复发及难治急性髓细胞白血病(AML)病人多药耐药基因(mdr1)的表达及其与临床疗效的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测65例AML病人(其中初诊组38例,完全缓解组14例,复发难治组13例)、27例非白血病病人和健康人(包括健康人15例、缺铁性贫血病人10例、特发性血小板减少性紫癜病人2例)mdr1基因的表达水平,并分析其临床意义.结果 AML病人mdr1基因表达阳性率高于对照组,复发难治组mdr1基因表达阳性率高于初诊组和完全缓解组,临床耐药组mdr1基因表达阳性率显著高于非临床耐药组,CR率非临床耐药组显著高于临床耐药组,差异均有显著性(x2=8.334～49.630,P＜0.01).结论 mdr1基因阳性表达与AML病人临床耐药密切相关,是影响预后的重要因素,可作为检测临床耐药和判断预后的指标之一.
关键词： 白血病 髓样 多药耐药相关蛋白质类 抗药性 肿瘤 -
多药耐药相关蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达
目的 探讨多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)、拓扑异构酶(TOPO Ⅱ)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法,对80例乳腺浸润性导管癌的主要耐药指标P-gp、TOPO Ⅱ、GST-π、LRP进行检测,并分析其与临床病理特征之间的关系.结果 P-gp、TOPO Ⅱ、GST-π、LRP在乳腺浸润性导管癌的阳性表达率分别为40%、55%、65%、80%,P-gp、TOPO Ⅱ、GST-π、LRP在乳腺浸润性导管癌的表达无相关性.结论 联合检测LRP、GST-π、TOPO Ⅱ、LRP对乳癌化疗药物的选择具有指导作用,对预后的判断有参考价值.
关键词： 乳腺肿瘤 多药耐药相关蛋白质类 免疫组织化学
