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应用SELDI-TOF-MS筛检肝癌血清特异相关候选蛋白的研究
目的 筛查潜在的小分子量低丰度的HCC血清相关候选蛋白,为肝癌复杂病理机制的全面阐明、理想早期诊断标志物的发现提供新思路.方法 分别收集81例伴有HBV感染和肝硬化背景的HCC患者血清,43例慢性乙型肝炎和36例肝硬化患者血清,采用弱阳离子交换蛋白芯片(WCX2)介质结合SELDI-TOF-MS对患者血清蛋白谱进行检测,并通过Biomarker Wizard软件对生成的蛋白指纹峰分别进行差异归类比较,然后采用消减差异分析确定HCC特异相关候选蛋白.标本检测前,对芯片检测系统的重复性进行分析.结果 同一标本同一芯片内强度CV为17.46%,m/z平均CV为0.024%,不同芯片间强度CV为17.74%,m/z平均CV为0.024%.将信噪比大于5,且超过20%标本具有的蛋白峰认定为有意义峰,在2 000～30 000 m/z范围内,共有128个蛋白指纹峰被确认.HCC与肝硬化患者血清蛋白指纹峰的差异比较分析显示,87个差异蛋白指纹峰有统计学意义(P＜0.05),其中强度差异在2倍以上的蛋白指纹峰有45个,在HCC患者血清中2倍上调的15个,2倍下调的30个.从HCC与慢性乙型肝炎血清蛋白指纹峰的差异分析发现,差异有统计学意义的蛋白指纹峰52个(P＜0.05),其中强度相差2倍以上的蛋白指纹峰有9个,HCC患者血清中2倍上调的2个,2倍下调的7个.从肝硬化与慢性乙型肝炎患者血清蛋白指纹峰的差异比较分析发现,差异有统计学意义的蛋白指纹峰79个(P＜0.05),其中强度相差2倍以上的蛋白指纹峰有28个,在肝硬化患者血清中2倍上调的17个,慢性乙型肝炎患者血清中2倍上调的11个.经消减差异分析筛查,确定在HCC患者血清下调表达的5个公共差异蛋白(2 870、3 941、2 688、3 165、5 483 m/z)及在肝硬化和HCC血清均上调表达的2个公共差异蛋白(3 588、2 017 m/z),但蛋白2 017 m/z在HCC与健康人比较的本所前期工作中的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 由慢性乙型肝炎和肝硬化背景产生的非特异分泌蛋白的干扰,经消减分析被部分消除,获得的6个血清公共差异蛋白(2 870、3 941、2 688、3 165、5 483、3 588 m/z)在反映HCC病理特征方面具有明显的特异性,且有望成为HCC诊断中新的候选标志物.
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蛋白芯片技术筛选肝癌血清标志蛋白的初步研究
目的应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)从肝癌患者血清中筛选标志蛋白,找出佳的标志蛋白组合模式作为临床诊断指标.方法采用WCX2芯片及SELDI-TOF-MS技术对34例肝癌患者及34例健康对照组血清进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析.结果发现肝癌患者和健康对照组血清蛋白质指纹图谱之间有17个稳定的标志蛋白,其中有6个标志蛋白在肝癌患者血清中高表达,11个标志蛋白在肝癌患者血清中低表达.分析系统筛选出13 752Da及11 472Da标志蛋白建立起一个肝癌的诊断模型,对肝癌的诊断特异性为97.06%,敏感度为91.18%,及阳性预测率为96.88%.结论 SELDI-TOF-MS技术的特异性及敏感度远远高于目前所采用的某一单独的标志物的血清学诊断,其结果对进一步研究肝癌的蛋白质组学改变及其临床应用可能具有重要意义.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 肝肿瘤 血清学实验 -
MALDI-TOF MS技术在临床微生物诊断应用中的挑战
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术是临床微生物诊断中一项革命性创新技术,由于其快速、特异、操作简便等优势,现已迅速被临床实验室接受和认可.然而,MALDI-TOF MS技术在临床应用中仍然存在诸多的挑战,如样品制备还未做到优化;鉴定技术存在局限性;数据库质量的提高以及微生物种类的添加还在讨论中;抗菌药物敏感试验领域的应用还存在争议;非常见鉴定结果如何转化到临床治疗仍在探索中等.但是MALDI-TOF MS在临床微生物诊断应用中还有一些需改进之处.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 微生物学技术 临床实验室技术 -
MALDI-TOF MS 指纹图谱技术在病原微生物分型中的应用前景
对同一种属病原微生物进行准确、快速、灵敏地分型对追踪分子溯源、明确传播途径、了解菌株和临床表现之间的关系、探索致病机制和指导临床用药等具有非常重要的意义。近年来基质辅助激光解吸／电离飞行时间质谱（ MALDI-TOF MS）以其快速、准确、重复性好、高通量等特点在微生物的鉴定、耐药性和毒力的监测中发挥越来越重要的作用。新的微生物分型方法MALDI-TOF MS指纹图谱分型法也随之诞生。该分型方法具有高通量、快速、易于标准化、费用低廉等特点，在病原微生物流行病学分析、医院感染控制、生物标志物研发等方面有广阔的应用前景。（中华检验医学杂志，2015，38：367-369）
关键词： 蛋白质组学 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 微生物学技术 -
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在临床微生物鉴定中的应用
为满足临床日益增长的微生物鉴定需要,在不断提高微生物鉴定仪器的机械化与自动化的同时,微生物学家也试图寻找新的分离鉴定方法以满足临床需求.虽然这种探求从未停止,但目前在世界各地临床微生物实验室,传统的鉴定方法仍占绝对主导地位.基于表型特征进行微生物鉴定的传统鉴定方法受外部条件影响较大,且需要较长的时间才能获得鉴定结果,不能满足临床诊断和治疗的需求.虽然基于特定基因序列(如16SrRNA)的分子生物学检测为临床微生物鉴定提供了一种灵敏、快速的鉴定手段,但技术复杂、费用高,不能满足临床微生物实验室常规鉴定需求.
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在细菌分型中的应用进展
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一种快速、准确、高通量的细菌鉴定技术,已经开始逐步应用于临床微生物实验室.然而,MALDI-TOF MS的应用远不止细菌鉴定,其在细菌分型方面同样具有广阔的前景.基于MALDI-TOF MS的分型方法具有简单、快速、成本低廉、高通量等特点,可以在医院感染控制和暴发流行时发挥快速筛选的作用.
关键词： 细菌分型技术 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 -
MALDI-TOF MS技术在快速鉴别肺炎链球菌与口腔/缓症链球菌中的应用
目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速鉴别肺炎链球菌与口腔/缓症链球菌.方法 收集2013年4月至2016年12月南京医科大学附属苏州医院和苏州大学附属儿童医院临床分离的110株肺炎链球菌和108株口腔/缓症链球菌,并选择肺炎链球菌ATCC49619作为质控菌株,以菌落形态、奥普托欣敏感性试验、胆汁溶菌试验及PCR法检测lytA、spn9802和recA等基因作为判定菌株鉴定结果的参考方法.应用MALDI-TOF MS对所有菌株进行鉴定.选取其中的143株细菌(73株肺炎链球菌和70株口腔/缓症链球菌)作为模型建立菌株,选取剩余的76株细菌(38株肺炎链球菌和38株口腔/缓症链球菌)作为模型验证菌株.采用ClinProTools软件对所有细菌的质谱图谱进行分组统计分析.结果 通过GA、SNN和QC算法得出的敏感度均大于95%,而特异度均为100%.3种算法显示,质荷比为3443、4990、6956和9949 m/z的质谱峰是用于区分肺炎链球菌与口腔/缓症链球菌为主要的特征性峰,其对应的曲线下面积(AUC)分别为0.884、1、0.999和0.972.峰统计图显示,肺炎链球菌组的3443、4990和9949 m/z峰的强度高于口腔/缓症链球菌组,而6956 m/z峰的强度低于口腔/缓症链球菌组.外部验证显示,除GA模型对肺炎链球菌组和口腔/缓症链球菌组的鉴定正确率分别为97.37%和100.0%,其余2种模型(SNN和QC)对两组细菌的鉴定正确率均为100.0%.结论 MALDI-TOF MS联合ClinProTools可快速准确地鉴别肺炎链球菌与口腔/缓症链球菌,具有高敏感度、高特异度等特点,可为临床诊断肺炎链球菌感染节约时间.
关键词： 肺炎链球菌 口腔链球菌 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 -
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在临床微生物鉴定中的应用
近年来,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)已从物理实验室走进临床微生物实验室,用于微生物的鉴定,正逐步取代由Pasteur和Koch建立的基于细菌表型的传统鉴定方法.许多欧洲微生物实验室目前正在使用MALDI-TOF-MS,大大提高了工作效率.鉴于美国食品药品管理局已经批准其用于体外诊断,MALDI-TOF-MS将很快在美国普及应用.这也将进一步推动了质谱技术在微生物药敏和流行学分型中的发展和应用.本文综述了MALDI-TOF-MS在临床微生物实验室的应用现状,并通过多中心临床试验结果,比较不同MALDI-TOF-MS仪器获得的诊断数据,重点阐述其在临床微生物领域的相关研究和应用.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 微生物学技术 -
MALDI-TOF MS在临床常见菌快速鉴定中的应用研究
目的 评价MALDI-TOF MS在临床常见细菌快速鉴定中的应用.方法 选择浙江大学医学院附属第二医院2008年12月至2009年8月分离自血液、痰液、分泌物和尿液的临床常见细菌和浙江省疾病预防与控制中心收集的沙门菌共426株.包括革兰阳性球菌76株和革兰阴性杆菌350株.采用Vitek系统将细菌鉴定到种,血清凝集试验对沙门菌和志贺菌进行血清分型.PCR扩增91株细菌的16S rDNA基因并测序,所得核苷酸序列与GenBank中的数据库进行比对,确定细菌种类.用MALDI-TOF MS对所有细菌进行快速鉴定,比较不同鉴定方法 之间的符合情况.结果 除沙门菌和志贺菌外的所有革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的Vitek和MALDI-TOF MS两者的鉴定结果 完全符合.23株沙门菌中只有2株肠炎沙门菌鼠伤寒血清型的3种鉴定方法 结果 相符,另有1株伤寒沙门菌、3株甲型副伤寒沙门菌、1株乙型副伤寒沙门菌、1株肠炎沙门菌和1株肠炎沙门菌病牛血清型的血清凝集结果 与16s rDNA基因测序结果 相符.Vitek及血清凝集试验鉴定为福氏志贺菌的4株菌16s rDNA基因测序和MALDI-TOF MS的鉴定结果 均为大肠埃希菌.结论 MALDI-TOF MS可快速、准确地对细菌进行鉴定,具有良好的重复性,但对沙门菌和志贺菌效果不佳.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 细菌学技术 -
应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定常见细菌和酵母菌
目的 应用MALDI-TOF MS鉴定临床常见病原菌.方法 复苏560株临床分离株,其中革兰阳性细菌(G+ )260株、革兰阴性细菌(G-)180株、酵母菌60株、肠道致病菌60株.MALDI-TOF MS鉴定结果与Vitek2 Compact全自动微生物鉴定系统比对,结果差异菌株采用16S rDNA测序验证.结果 MALDI-TOF MS与Vitek2 Compact鉴定结果比较,G+细菌鉴定符合率为94.6％( 246/260),G-细菌鉴定符合率为96.7％ (174/180),酵母菌鉴定符合率为95.0％ (57/60),肠道致病菌鉴定符合率为93.3％( 56/60).15株鉴定结果不符的菌株经16S rDNA测序确认,结果与Vitek2Compact和MALDI-TOF MS鉴定符合率分别为26.7％ (4/15)和66.7％( 10/15).结论 MALDI-TOF MS可用于常见病原微生物鉴定,其快速、低成本的特点具有推广价值.
关键词： 细菌 酵母菌 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 -
用2-DE和MALDI-TOF-MS筛选多发性骨髓瘤患者骨髓上清液中标志物
目的 运用2-DE和MALDI-TOF-MS研究MM患者骨髓上清液中差异表达蛋白,以寻找对MM发病机制研究和诊断或鉴别诊断的特异性蛋白质标志物.方法 收集14例MM患者、5例其他血液系统恶性肿瘤患者及5名健康对照者骨髓上清液标本.除去标本中白蛋白和免疫球蛋白G(IgG)后,用2-DE分离3组骨髓上清液标本.用ImageMaster 2D platinum 5.0图像分析软件分析比较3组2-DE凝胶图像,以差异倍数在3倍以上的蛋白点作为候选差异表达蛋白.然后,用MALDI-TOF-MS对重复性较好的候选差异表达蛋白做PMF和二级质谱鉴定.将得到的肽片段质量进行NCBInr 数据库检索,以鉴定出相应的差异表达蛋白.结果 用图像分析软件对3组骨髓上清液2-DE凝胶进行分析比较,从MM组与健康对照组中筛选出47个差异蛋白点,从MM组与疾病对照组中筛选出58个差异蛋白点.从MM组选取41个差异点进行质谱分析并鉴定,发现MM组与其他2组相比,5种高表达蛋白为免疫球蛋白J链、κ轻链、λ轻链、前病毒遗传的Gag多聚蛋白和与半抗原结合的含成熟氧(末)端的催化抗体；3种低表达蛋白为血红蛋白、结合珠蛋白(Hp2)、锌-α2-糖蛋白.这些差异蛋白部分与MM的临床表现相关,部分与MM的发生发展及临床治疗相关.结论 应用2-DE和MALDI-TOF-MS技术从MM患者骨髓上清液标本中筛出与MM疾病相关的8种差异表达蛋白,为进一步研究MM发生发展机制,完善MM诊断、鉴别诊断指标提供了参考依据.
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尿蛋白标志物模型早期诊断糖尿病肾病的临床应用
目的 寻找基于蛋白质组学技术早期、快速诊断糖尿病肾病的尿蛋白标志物模型,并探讨其临床应用价值.方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(surface-enhanced laser dosorption-ionization time of flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术及Au芯片(proteinehip gold array)检测292例患者尿蛋白质谱,包括129例糖尿病肾病和163例对照者(61例糖尿病及102名健康体检者).获得的蛋白质谱数据用Biomaker Wizard 3.1软件筛选差异蛋白,通过生物标志模型软件(biomarker patterns software,BPS)建立决策树辨别分析模型,评价其临床诊断价值.对部分筛选的差异蛋白通过比对标准蛋白质谱数据,根据分子量大小进行初步鉴定.结果糖尿病肾病患者与对照者尿液中差异表达的蛋白质峰有40个,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-9.81～24.52,P均<0.05),通过BPS自动筛选66 916质荷比(m/z)蛋白建立的模型诊断糖尿病肾病敏感度为98.7%(78/79),特异度98.2%(111/113).对糖尿病和糖尿病肾病患者尿蛋白质谱图分析后得到24个差异蛋白质峰,其丰度值两组间比较差异均有统计学意义(t值为-6.95～14.45,P均<0.05),BPS筛选4 008、11 619、66 916 m/z蛋白建立模型区分糖尿病与糖尿病肾病的敏感度(129/129)和特异度(61/61)均为100%.通过比对标准蛋白质谱数据,糖尿病肾病患者尿差异蛋白中m/z11 619、23 529、66 916和79 378,可能为β_2-微球蛋白、α1-微球蛋白、白蛋白和转铁蛋白.结论 基于SELDI-TOF-MS及Au芯片技术检测尿蛋白质谱在鉴别蛋白尿来源、糖尿病肾病的早期快速诊断及肾脏损害评估具有重要应用价值.
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用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行血清蛋白质组学分析中样品稳定性研究
目的 探索利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF Ms)技术,进行血清样品中蛋白质组学研究的稳定性和重复性.方法 采用德国布鲁克公司Microflex型号质谱仪,应用线性模式,采集范围800～10 000 m/z,以样品前处理(MB-wcx)试剂盒预处理样品,CLNPROT(TM)系统的FlexAnalysis和ClinproTools软件进行数据分析.结果 本研究是在方法学已经建立的基础上,对样品稳定性进行研究.分别对随机选取的2例肿瘤患者和1名健康人群血清样本进行的平行实验结果分析表明,在本实验条件下,所测样品的质荷比(即m/z比值)漂移在实验误差允许范围内,其变异系数(CV值)分别为12.7%、13.1%和18.8%,能够明确区分疾病与健康样本;同时扩大样本量对30名健康人进行验证,其整体峰型和特征性峰保持一致,平均CV值为25.5%,说明其稳定性和重复性完伞满足临床医学实验窒分析要求.结论 在已优化的实验条件下,利用生物质谱技术可获得稳定的血清多肽谱,具有潜在辅助诊断疾病价值.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 蛋白质组学 参考值 -
质谱仪在真菌鉴定中的应用与评价
目的：探讨质谱仪在真菌感染中的应用，评价其鉴定真菌的能力。方法选取分离自我院住院患者的真菌菌株327株，用质谱仪进行快速鉴定，并与VITEK-2（酵母样真菌）和显微镜检查（丝状真菌）的鉴定结果进行比对，差异结果用分子生物学方法确认鉴定。结果依照质谱仪评分标准，227株酵母样真菌在种水平（>2.0）的鉴定率为90.31%，在属水平（>1.7）为98.68%；丝状真菌在种水平的鉴定率为74.00%，在属水平为94.00%。对临床常见的曲霉菌鉴定正确率可达96.74%。结论质谱仪在鉴定真菌的种属水平上都达到了令人满意的结果，尤其鉴定酵母菌和曲霉菌的能力更为突出，可作为临床实验室的常规检测方法。
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 真菌 感染 -
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在真菌快速鉴定中的应用
真菌是广泛分布于自然界的真核生物，对人类具有致病性的约300种。不同种真菌的生长特性、临床特点及耐药性不同。真菌生长缓慢，传统的培养鉴定方法所需时间较长，且日益多样化的真菌，使鉴定难度不断增加，这些均限制了临床的早期诊断和针对性治疗。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS）是一种新兴的诊断技术，可以通过直接检测生物标志物（蛋白）来鉴定病毒、细菌、分枝杆菌等，具有操作简便、快速、准确率高、成本低的特点。本文对MALDI-TOF MS在真菌鉴定中的应用进行综述，发现其对酵母样真菌的正确鉴定率可达到94%以上，丝状真菌正确鉴定率也可达到89%，可满足临床实验室鉴定真菌的需求。
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 真菌 感染 -
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在感染性疾病病原及耐药检测中的应用
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术作为蛋白质组学分析方法，具有高通量、高敏感度、操作简单、快速获得结果、可自建数据库等特点。该技术应用于感染性疾病病原鉴定及耐药检测，对临床感染患者的及时诊治意义重大。本文通过介绍该技术对菌种、无菌部位等各类标本的病原微生物进行快速鉴定及耐药检测的研究现状，探讨其面临的挑战和应用前景。
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 细菌学技术 传染病 -
龟分枝杆菌培养滤液蛋白质组生物质谱分析
目的 描述龟分枝杆菌蛋白质分泌活动,为其致病性及检测方法研究提供依据.方法 采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX2)捕获并应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDFTOF-MS)技术,检测11株龟分枝杆菌临床分离株及ATCC19977参考株培养7d的Middlebrook 7H9培养滤液蛋白和Middlebrook 7 H9培养液蛋白,描述性分析龟分枝杆菌培养滤液蛋白质组.结果 相对Middlebrook 7H9培养液,在11株龟分枝杆菌7d的Middlebrook 7 H9培养滤液检测到49～101种差异蛋白,相对分子质量为1101～3953,丰度水平为84～7238相对强度(用质谱峰面积计算).其中32种差异蛋白在11株中均有表达,相对分子质量为1108～3953,丰度水平为98～7231相对强度.结论 龟分枝杆菌在体外生长过程中可分泌多种小分子蛋白质,其特性和作用有待进一步研究.
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结核病患者与健康人血清蛋白质谱的比较研究
目的 比较结核病患者与健康人血清蛋白质谱,寻找结核病相关特异血清蛋白质,以期发现新型结核病血清学诊断标志物.方法 应用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX)和表面增强激光解吸-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术对包括54例菌阳肺结核(菌阳组)、45例菌阴肺结核(菌阴组)、18例肺外结核(肺外组)共117例结核病患者(结核组)及62例健康对照者(对照组)进行了血清蛋白质谱检测,并应用ClinProTools分析软件进行分析,找出差异蛋白质.结果 菌阳组-对照组、菌阴组-对照组、肺外组-对照组和结核组-对照组间分别存在19、14、26和30个差异血清蛋白质,其中分别有11、9、15和15个蛋白质在患者血清中表达上调；相对分子质量分别为1060、1944、2081和3954的4个血清蛋白质为各患者组与对照组间共同存在的差异血清蛋白质,其中相对分子质量为1060的蛋白质在患者血清中表达下调.结论 结核病患者与健康人之间血清蛋白质谱存在差异,有望通过血清蛋白质谱的比较分析,寻找到结核病相关特异血清蛋白质而发现新型结核病血清学诊断标志物.但尚需大样本量、多对照系的进一步研究予以确证.
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表面增强激光解析电离飞行时间质谱法筛选肺癌患者血清和肺泡灌洗液中标志蛋白的研究
目的 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术筛选肺癌患者血清和BALF中的差异性表达蛋白,探讨是否可作为诊断肺癌的肿瘤标志物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术通过弱阳离子交换蛋白芯片(WCX-2芯片)分别检测35例肺癌和18例肺部良性病变患者血清和BALF中的蛋白质质谱图,用Biomarker Pattern软件分析肺癌的差异蛋白并初步建立诊断模型,通过盲筛进一步验证诊断模型.结果 在肺癌患者血清中发现5个高表达的蛋白质波峰,选用其中质荷比为5639的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断的敏感度为80%(28/35),特异度为78%(14/18).盲法验证的敏感度为85%(17/20),特异度为90%(9/10),粗符合率为87%(26/30),Youden指数为0.7.在肺癌患者BALF中发现8个高表达蛋白质波峰,选用其中质荷比为7976和11 809的差异蛋白波峰建立分类树模型,其诊断的敏感度为86%(30/35),特异度为72%(13/18).盲法验证的敏感度为90%(18/20),特异度为90%(9/1O),粗符合率为90%(27/30),Youden指数为0.8.平行试验结果显示两者联合应用时诊断肺癌的敏感度、准确率及特异度均为100%,具有互补作用.结论SELDI-TOF-MS技术可筛选出肺癌患者血清和BALF中差异性表达蛋白,作为一种肿瘤标志物,其诊断敏感度高,特异度好,尤其是BALF中差异性表达蛋白的测定可能具有较好的临床应用前景.
关键词： 光谱法 质量 基质辅助激光解吸电离 肺肿瘤 蛋白 -
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术直接鉴定血流感染病原菌的效果评价
目的：利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（ MALDI-TOF MS）技术建立血流感染病原菌快速、准确的鉴定方法。方法连续收集苏州大学附属第二医院检验科2015年1至7月血培养仪阳性报警血培养瓶266个，抽吸血培养瓶中血液至血清分离胶管，采用差速离心法富集细菌，利用MALDI-TOF MS对富集后的菌液进行快速鉴定，并与传统培养24～48 h后形成的菌落终鉴定结果进行比较。结果266个阳性血培养样本中，260个为单菌株血流感染，6个为混合菌感染。在260例单菌株所致血流感染中，菌株的属、种鉴定符合率分别为98．8％（257／260）和96．2％（250／260）。其中，140株革兰阴性菌属、种鉴定符合率分别为99．3％（139／140）和97．9％（137／140）；120株革兰阳性菌属、种鉴定符合率分别为98．3％（118／120）和94．2％（113／120）。6例混合菌感染未得到鉴定结果。结论本研究利用MALDI-TOF MS对差速离心富集后的菌液进行直接鉴定，有效缩短了检测时间，而且鉴定准确率高，为血流感染的快速诊断提供了有力的检测手段。
